芒果苷对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡影响

目的探讨芒果苷对肌醇依赖酶1介导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡影响。方法健康雄性SD大鼠50只,随机分为对照组,糖尿病组,芒果苷低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),灌胃12周,糖尿病组与芒果苷组大鼠给予链脲佐菌素45 mg/kg建立糖尿病模型;测定大鼠血糖,心功能;用原位末端转移酶标记技术检测心肌细胞凋亡;免疫组织化学法检测肌醇依赖酶1(IRE1)、凋亡信号调节激酶1(ASK1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠血糖[(25.52±2.82)mmol/L]明显升高(P<0.01),左心室收缩压、左室内压最大上升和下降速率均明显降低,左室舒张末压明显升高(P<0.01),心肌细胞凋亡率[(25.63±1.41)%]增加(P<0.01),心肌细胞IRE1、ASK1、JNK蛋白表达明显增强(P<0.01);与糖尿病组比较,高剂量芒果苷组大鼠血糖[(12.04±1.86)mmol/L]降低,心肌细胞凋亡率[(13.22±1.71)%]下降(P<0.01),心功能明显改善,心肌细胞IRE1、ASKl、JNK蛋白表达均明显下调(P<0.01)。结论芒果苷可抑制糖尿病大鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与下调血糖、内质网应激中IRE1介导的JNK信号通路表达有关。     

骨形成蛋白-2通过JNK信号通路促进肝癌HepG2细胞凋亡

目的 观察骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对人肝癌HepG-2细胞凋亡的作用及其信号通路机制. 方法用流式细胞分析和细胞凋亡ELISA法检测HepG2细胞凋亡,用Western blot法检测丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)和磷脂酰肌醇3-激酶(P13K)下游效应因子Akt的激活,采用信号通路阻断剂预处理HepG2细胞观察BMP-2影响细胞凋亡的机制. 结果 BMP-2诱导HepG2细胞凋亡,呈时间和剂量依赖性;BMP-2激活HepG2细胞JNK激酶,但不能激活ERK1/2、p38及Akt;采用JNK信号通路抑制剂SP600125可阻断BMP-2对HepG-2细胞JNK的激活,并消除BMP-2对HepG-2细胞凋亡的作用. 结论 BMP-2通过JNK信号通路途径诱导HepG2肝癌细胞凋亡.     

尘肺患者肺泡巨噬细胞凋亡及其死亡信号调控机制研究

目的初步研究尘肺患者肺泡巨噬细胞(AM)的凋亡情况以及肿瘤坏死因子-α及其受体(TNF-α/TNFR)信号通路对AM凋亡的调控作用,为尘肺病的早期防治提供依据。方法选取30例尘肺患者为研究对象,收集其肺泡灌洗回收液,分离纯化AM,将实验分为5组,即未处理组、超氧化物歧化酶(SOD)组、TNF-α/TNFR组、抗-TNF-α组、半胱氨酰天冬氨酸特异蛋白(Caspase)-8抑制剂组。培养24h后,收获AM,分别用光学显微镜、透射电子显微镜、荧光共聚焦显微镜检测AM凋亡的情况。采用SAS8.2软件进行方差分析和2分析。结果光学显微镜、荧光共聚焦显微镜、透射电镜下均可见凋亡细胞染色质浓缩、边缘化、染色质分割成块状、核膜不完整和凋亡小体等典型的凋亡形态。SOD组、抗-TNF-α组、Caspase-8抑制剂组的AM凋亡指数均低于未处理组。结论尘肺患者AM存在一定程度的凋亡,表现为形态学的改变,凋亡程度与接尘性质有关,与尘肺期别、接尘工龄、脱尘年限无关。SOD复合酶、抗-TNF-α抗体、Caspase-8抑制剂可在信号通路的不同环节阻断信号转导,抑制AM凋亡的发生。     

肿瘤相关巨噬细胞通过JAK2/STAT3途径调控肝癌细胞凋亡的机制研究

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)通过JAK2/STAT3途径对肝癌细胞凋亡的影响。方法培养人单核巨噬细胞(THP1),加入佛波酯(PMA)及白介素4(IL-4)诱导分化为TAMs,RT-PCR检测TAMs表面分子标记物CD206和CD163的表达;TAMs与肝癌细胞(Hep G2、SMMC7721)在Transwell小室内共培养48h,通过western blot方法检测凋亡相关蛋白Caspase 3、抗凋亡蛋白Bcl-2、信号通路JAK2/STAT3以及p-STAT3的表达;加入JAK2/STAT3通路特异性阻断剂AG490进行阻断后,检测相关凋亡蛋白、抗凋亡蛋白表达情况以及JAK/STAT信号通路活化情况。结果人单核巨噬细胞(THP1)经PMA及IL-4分化诱导72h,RT-PCR检测其细胞表面CD206和CD163的表达显著增加(P0.05);肝癌细胞(Hep G2、SMMC7721)与TAMs共培养48h,Western Blot检测肿瘤细胞凋亡相关蛋白Caspase3、Bax表达明显降低,抗凋亡蛋白Bcl-2以及信号通路JAK2、STAT3、p-STAT3表达显著升高;AG490阻断JAK2/STAT3通路后,加AG490组肿瘤细胞p-STAT3表达降低,凋亡相关蛋白Caspase3、Bax的表达明显升高,抗凋亡相关蛋白Bcl-2的表达显著降低;结论肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)通过激活JAK2/STAT3信号途径调控肝癌细胞的凋亡。     

抑制TLR4/NF-κB通路逆转SiO2诱导的小鼠巨噬细胞炎症反应及M1促炎表型转化

[背景]二氧化硅(SiO2)粉尘可引起肺泡巨噬细胞中的炎症事件和细胞损伤,但具体作用机制不明.[目的]探究抑制TLR4/NF-κB信号通路在SiO2诱导的小鼠巨噬细胞炎症反应及巨噬细胞表型改变中的作用.[方法]16只6～8周龄的C57BL/6小鼠(雌雄各半)经50μL生理盐水或50μL 50 mg·mL?1的SiO2肺...     

钙对母鼠氟暴露致仔鼠海马神经细胞凋亡的影响及分子机制

目的探讨不同饲料钙水平对母鼠氟暴露致仔鼠海马神经细胞凋亡的影响及分子机制。方法选用SD大鼠100只,75只雌鼠随机分为对照组(Con)、高氟组(F)、低钙组(LCa)、高氟低钙组(F+LCa)和高氟高钙组(F+HCa),饲养3月后,雌雄鼠合笼交配产仔鼠,取14、28日龄仔鼠2批,以海马CA3区神经细胞凋亡及凋亡信号通路相关蛋白Bcl-2、Caspase12和JNK表达水平为观测指标。结果母鼠氟暴露后,28日龄雌雄海马细胞凋亡指数显著(P0.05)升高;14、28日龄雌雄仔鼠海马凋亡信号通路中Bcl-2蛋白表达均呈现极显著(P0.01)下调,而14日龄雄仔鼠和28日龄雌仔鼠的Caspase12、14和28日龄雌雄仔鼠JNK蛋白表达水平均呈极显著(P0.01)上调,14日龄雌仔鼠和28日龄雄仔鼠的Caspase12仅呈显著(P0.05)上调;饲料低钙加剧母鼠氟暴露后仔鼠海马神经细胞凋亡,Bcl-2蛋白表达水平进一步下降,Caspase12和JNK蛋白表达水平进一步上升;而饲料高钙能够缓解母鼠氟暴露致仔鼠海马神经细胞的凋亡,逆转上述3者的蛋白表达水平;所检测的上述3个凋亡相关蛋白中,只有Caspase12表达水平呈性别和日龄差异,饲料钙对母鼠氟暴露致14日龄雄仔鼠和28日龄雌仔鼠Caspase12表达水平变化分别较同一日龄另一性别仔鼠的影响更大。结论海马凋亡信号通路中Bcl-2、Caspase12和JNK蛋白表达水平的变化可能是钙对母鼠氟暴露致子代大鼠大脑神经细胞凋亡影响的分子机制之一。饲料钙对母鼠氟暴露致14、28日龄仔鼠海马凋亡信号通路Caspase12表达水平变化的影响呈一定的性别差异,其机制有待于进一步阐明。     

ERK及AP-1对二氧化硅上调人肺上皮细胞纤溶酶原激活物抑制因子-1表达的作用

目的 探讨细胞外信号调控激酶(ERK)/激活蛋白(AP-1)信号通路在二氧化硅诱导人肺上皮细胞(A549)纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)表达中的作用.方法 以人肺上皮细胞A549为研究对象,200 μg/ml二氧化硅刺激0-24h.干预实验采用姜黄素预处理以及c-Jun显性负性突变体(TAM67)瞬时转染阻断AP-1活性;PD98059预处理阻断ERK活性.以Western印迹检测ERK激酶活力、PAI-1蛋白表达,EMSA检测AP-I DNA结合活性.结果 (1)SiO2作用A549细胞4、8、16 h,AP-1DNA结合活性分别为对照的1.3、1.3、2.1倍,差异有统计学意义(P＜0.05);10、25、50μmol/L浓度姜黄素对二氧化硅诱导的PAI.1蛋白表达抑制率分别为20%、63%、65%,差异有统计学意义(P＜0.05);TAM-67对二氧化硅诱导的PAI.1蛋白表达的抑制率为59%,与二氧化硅刺激组比,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)二氧化硅作用A549细胞诱导ERK激酶活化;PD98059对二氧化硅诱导的PAI-1蛋白表达的抑制率为51%,与二氧化硅刺激组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)PD98059对二氧化硅诱导的AP-1 DNA结合活性的抑制率为73%,与二氧化硅刺激组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ERK/AP-1信号通路参与调控SiO2诱导的人肺上皮细胞PAl-1蛋白表达.     

JNK信号通路介导大鼠局灶性脑缺血再灌后海马神经元凋亡

[目的]研究局灶性脑缺血再灌(I/R)后c-Jun氨基端激酶(JNK)蛋白表达及其依赖的caspase途径激活情况,探讨此通路在海马神经元凋亡中可能的作用及机制.[方法]建立大鼠可逆性大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,采用免疫印迹法检测不同实验组中海马区p-c-jun及凋亡Caspase-3表达,TUNEL法原位检测CA1区凋亡锥体细胞.[结果]与假手术组比较.模型组p-e-jun蛋白平均灰度值显著增强,以3h、6h、12h差异有统计学意义(P＜0.05).模型组Caspase-3于再灌注后6h开始表达(P＜0.05),12h其条带密度达高峰(P＜0.05).I/R3h至24h海马区p-c-jun表达与caspase-3呈正相关(r=0.696,P＜0.01);caspasse-3与TUNEL星正相关(r=0.310,P＜0.001).[结论]大鼠I/R后JNK部分激活了Caspase依赖的促凋亡通路.     

Fas/FasL信号传导途径在启动尘肺中的作用机制

目的 探讨Fas/FasL信号传导途径在尘肺发生发展中的作用机制.方法 以中国煤炭工人北戴河疗养院无其他肺部疾病的0 接尘工人及溯、Ⅱ期尘肺患者为研究对象,将支气管肺泡灌洗液(BALF)中的肺泡巨噬细胞(AMs)分5组培养(分别在信号传导途径的不同环节进行抑制),即对照组(未抑制任何途径介导的细胞凋亡过程)、SOD组(在AMs凋亡过程上游保护AMs,抑制AMs细胞膜脂质过氧化过程从而抑制凋亡过程,观察SOD对凋亡细胞的保护作用)、Fas/FasL组(抑制三条传导途径中的另两条即TNFR/TNF-α、TRAILR/TRAIL途径,观察Fas/FasL信号传导途径介导的细胞凋亡情况)、FasL抑制组(同时抑制TNFR/TNF-α、TRAILR/TRAIL和Fas/FasL三条途径,观察Fas/FasL信号传导途径上游抑制后的细胞凋亡情况),caspase-8抑制组(同时抑制TNFR/TNF-α、TRAILR/TRAIL途径和Fas/FasL途径的下游蛋白caspase-8的活性,观察Fas/FasL信号传导途径下游抑制后的细胞凋亡情况).分别采用Western blot(WB)、琼脂糖凝胶电泳(ACE)和TDT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)方法检测肺泡巨噬细胞(AMs)的凋亡情况、DNA片段的改变、信号蛋白Fas、FasL、caspase-8、caspase-3的表达水平.结果 SOD组、FasL抑制组、caspase-8抑制剂组的凋亡指数均低于对照组,差异均有统计学意义.对照组的AMs出现凋亡细胞特征性"梯状带",SOD组未出现,FasL抑制组、caspase-8抑制剂组的DNA条带明显弱于对照组.SOD组的Fas、FasL、cmpase-8、caspase3蛋白的表达均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);FasL抑制组的caspase-8、caspase-3的表达低于Fas/FasL组与对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);caspase-8抑制组的caspase-3表达低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 尘肺的发生发展可能与Fas/FasL信号传导途径介导的AMs凋亡有关.     

胰高糖素样肽-1受体激动剂通过JNK信号通路促进肝星形细胞凋亡的机制研究

目的 探讨胰高糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1RA)通过JNK信号通路促进肝星形细胞(HSC)凋亡的机制.方法 体外培养人HSC并进行形态学鉴定,将HSC样本随机分成对照组(20份)、GLP-1RA组(20份)和JNK阻断组(20份).对照组HSC在常规培养基础上加入高糖(终浓度25 mmol/L),GLP-1RA组在对照组基础上加入GLP-1RA利拉鲁肽(终浓度10 mmol/L),JNK阻断组在GLP-1RA组基础上加入JNK信号通路阻断剂SP600125(终浓度20 μmol/L)进行培养;培养120 h后用流式细胞术检测各组的HSC凋亡情况.同时采用Western印迹法检测各组的p-JNK蛋白表达水平.结果 三组的平均凋亡率和平均p-JNK的表达水平差异均有统计学意义(F=19.412和66.451,P均＜0.01).GLP-1RA组的凋亡率和p-JNK蛋白表达水平分别为(30.61±4.07)％和(22.79±3.80)％,均高于对照组,差异均具有统计学意义(t=0.530和9.854,P均＜0.01);JNK阻断组的细胞凋亡率和p-JNK蛋白表达水平分别为(23.48±4.41)％和(10.66±4.15)％,均低于GLP-1RA组,差异有统计学意义(t=-5.428和-8.757,P均＜0.01).结论 JNK信号通路在GLP-1RA介导的HSC凋亡中起着关键作用,GLP-1RA可以通过JNK信号通路促成经高糖诱导活化的HSC发生凋亡.     

NF-kB、HB-EGF在人输卵管壶腹部黏膜表达

目的:探讨核因子kB(NF-kB)、肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)在人体正常、炎症、妊娠输卵管壶腹部黏膜表达及作用。方法:利用免疫组化法和图像分析技术检测NF-kB、HB-EGF在人输卵管黏膜的表达。结果:人体正常、炎症、妊娠输卵管壶腹部黏膜上皮细胞均有NF-kB和HB-EGF表达,炎症组和妊娠组NF-kB的表达与正常组比较均显著增强,差异有极显著性(P<0·01);HB-EGF的表达炎症组较正常组增强,差异有显著性((P<0·05),妊娠组较正常组显著增强,差异有极显著性(P<0·01)。结论NF-kB、HB-EGF表达于输卵管壶腹部黏膜,参与输卵管生理、病理过程。     

血浆TF、TFPI、D-D测定在AL患者中临床价值研究

目的探讨急性白血病（AL）患者血浆组织因子（TF）及组织因子途径抑制物（TFPI）、D-二聚体（D-D）的含量变化对其病情进展、疗效观察及预后的意义。方法检测44例AL患者初诊时及化疗1个疗程后第7 d血浆TF、TFPI及D-D的水平,并检测20例正常体检者和随访期间8例复发的AL患者血浆TF、TFPI及D-D的水平。所有患者平均随访180 d,观察随访期间病情变化。结果 AL组患者血浆TF、TFPI和D-二聚体水平明显高于正常组;缓解组患者血浆TF、TFPI水平均较初诊时明显下降（P〈0.01）且与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）,D-D水平比治疗前明显降低但仍高于正常组（P〈0.01）;D-D比初诊时明显降低但仍高于对照组（P〈0.01）。未缓解组患者治疗后与初诊时比较血浆TF、TFPI水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）且均明显高于正常对照组（P〈0.01）;复发时血浆TF、TFPI和D-D水平均明显升高,与初诊相比差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论动态观察白血病患者血浆TF、TFPI、D-D变化对AL患者判断病情、预测复发、指导治疗有重要意义。     

遗传因素与原发性高血压

为了探讨遗传因素与原发性高血压的关系，调查了３９个家系父母Ⅱ系Ⅲ级亲属及无血缘关系亲属１５岁以上成人共９３７人。结果表明：有血缘关系高血压患病率明显高于无血缘关系者，分别为３３．３９％和２２．１１％；不同亲属级别高血压患病率Ⅰ级＞Ⅱ级＞Ⅲ级＞一般人群；经Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析排除混杂因素后，遗传因素仍独立存在；以遗传因素为背景与其它几个重要危险因素相结合时，也均见到相加模型的增效作用；遗传与共同生活二因素经叉生分析，无论共同生活存在与否，遗传因素恒定存在。     

天津市胃癌的营养病因研究

<正> 天津市胃癌死亡率仅决于肺癌而居第二位。为研究胃癌发病与饮食、营养及其他因素的关系,我们进行了病例对照调查研究,结果如下:     

胎儿生长受限与胰岛素样生长因子及其结合蛋白关系的研究

目的探讨胎儿生长受限(FGR)与胰岛素样生长因子(IGF)和胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)的关系,为FGR的临床诊断和治疗提供理论依据和新思路。方法分别采集确诊FGR组和正常对照组孕妇羊水、静脉血和胎儿脐血标本,采用放射免疫方法测定标本中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFBP-3含量。结果与对照组比较,FGR组IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ含量在脐血、母血以及羊水标本中均明显下降,差异具有统计学意义(P<0.001),IGFBP-3含量在脐血和羊水中明显上升,差异有统计学意义(P<0.001),但在母血中无明显差异(P>0.05)。结论IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ和IGFBP-3参与FGR的发生和发展,测定其含量可以作为诊断FGR的指标之一。     

人神经生长因子cDNA的体外扩增

目的：提取人胎盘组织中RNA,以其中的mRNA为模板,扩增人βNGFcDNA,并测定核苷酸序列,为进一步克隆及表达βNGFcDNA奠定基础。方法：采用异硫氢酸胍法提取RNA,采用RT－PCR技术扩增人βNGFcDNA;Sanger双脱氧链终止法测定核苷酸序列。结果：从人胎盘组织中提取RNA,以其中的mRNA为模板,扩增出人βNGFcDNA,经琼脂糖凝胶电鉴定为目的片段,序列测定证实与实际序列相符。结论：以人胎盘组织中的mRNA为模板,运用RT－PCR技术扩增βNGFcDNA,扩增时在5′端以限制性内切酶酶切位点加以修饰,以便于βNGF基因的克隆及表达。     

核转录相关因子2信号通路对无机砷所致氧化应激损伤的拮抗作用研究进展

无机砷暴露能够诱导氧化应激和氧化损伤,而核转录相关因子2（Nrf2）则是抗氧化应答的关键转录因子,其调控的信号通路成为应对无机砷暴露的细胞防御反应中一个十分重要的信号通路。本文综述总结Nrf2信号通路的分子基础及其在无机砷暴露导致细胞氧化损伤中的拮抗作用,表明无机砷暴露能够诱导机体Nrf2信号通路的活化,而且Nrf2信号通路的诱导剂可以诱导拮抗砷毒性;但Nrf2信号通路在无机砷致／治癌中的潜在生物学意义尚待深入认识。     

遗传因素在缺血性脑血管病发病中的作用

目的探讨遗传因素在缺血性脑血管病发生中的作用。方法采用遗传流行病学配对病例—对照研究方法,收集157对先证者家系和对照家系一级亲属心脑血管病的患病情况,对有家族史的缺血性脑血管病患者的危险度进行定量评估并计算遗传度。结果36.94%的缺血性脑血管病患者具有家族史,无论男女有心脑血管病家族史的均明显高于对照组。缺血性脑血管病例的母亲心脑血管病患病率（28.66%）明显高于父亲的患病率（8.28%）（χ^2=21.66,P〈0.01）,缺血性脑血管病遗传度为（53.16±4.53）%。结论遗传因素是缺血性脑血管病发病的危险因素。     

白血病抑制因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的:测定白血病抑制因子(LIF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达,探讨其在妊娠高血压发病中的作用。方法:采用免疫组化技术-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法对在正常妊娠(正常妊娠组)、子痫前期(轻度子痫前期组和重度子痫前期组)孕妇胎盘组织中LIF的表达进行组织学定位和半定量分析。结果:3组孕妇胎盘组织中LIF均呈现阳性表达,阳性染色主要位于滋养细胞胞质中,胞核无明显着色。轻度子痫前期组和重度子痫前期组分别与正常妊娠组比较,胎盘组织的染色强度及范围显著减弱,差异有统计学意义(P<0.01),而轻度子痫前期组和重度子痫前期组的胎盘组织染色范围和强度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LIF对维持正常妊娠有一定的保护作用,LIF分泌或调控异常,影响了滋养细胞的浸润能力,导致病理妊娠,在胎盘组织中的低表达,参与了子痫前期发病机制。