山西省运城市2012年蚊媒病毒的分离鉴定

目的 了解山西省运城市蚊虫及蚊媒病毒的种类和分布。方法 2012年8月在山西省运城市临猗县和永济市采集蚊虫标本, 经鉴定分类和分批研磨后, 利用细胞(C6/36和BHK21)培养方法分离病毒, 对阳性分离物使用蚊媒病毒种属特异引物进行RT-PCR扩增鉴定。结果 采集4属7种10 455只蚊虫, 临猗县和永济市优势蚊种分别为淡色库蚊(91.96%)和三带喙库蚊(72.85%)。经鉴定分析, 从标本中分离到15株基因Ⅰ型乙型脑炎病毒(JEV)、4株库蚊黄病毒(CxFV)、3株淡色库蚊浓核病毒(CppDNV)和1株盖塔病毒(GETV)。结论 首次从山西省分离GETV和CxFV;三带喙库蚊仍是运城市优势蚊种, 目前当地自然循环的JEV仍以基因Ⅰ型为主。     

云南省弥勒县2009年蚊媒病毒分离和鉴定

目的了解云南省红河州弥勒县蚊虫中虫媒病毒的分布特点,为虫媒病毒病防治提供科学依据。方法 2009年7月在弥勒县采集蚊虫标本,用细胞培养法分离病毒,对病毒分离物进行分子生物学鉴定。结果从采集到的三带喙库蚊4400只和中华按蚊2200只中分离到9株阳性分离物,经分子生物学鉴定,7株分离物为流行性乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV),均分离自三带喙库蚊;2株分离物为淡色库蚊浓核病毒(CppDNV),分离自三带喙库蚊和中华按蚊。结论首次在红河州弥勒县分离到乙脑病毒,从病原学证实弥勒县是乙脑流行区。流行株同源性和分子遗传进化分析证实为基因Ⅰ型乙脑病毒,为滇东南地区首次分离。     

四川省东南部地区蚊、蠓及相关虫媒病毒调查研究

目的 了解四川省的蚊、蠓以及相关虫媒病毒种类及分布。方法 在自然界使用灯诱法采集吸血昆虫标本,形态学分类后分装,液氮保存备用。蚊虫、蠓虫研磨上清液接种BHK-21细胞和C6/36细胞进行病毒分离和病毒基因检测。使用BioEdit 7.0.5.3、MEGA 6.0等软件对病毒序列进行分子生物学特征分析。结果 2016-2017年在四川省东南部3个县的7个自然村共采集到3属4种蚊虫17 019只,蠓虫12 700只。三带喙库蚊占蚊虫采集总数的79.4%（13 519/17 019）,其次为骚扰阿蚊（11.1%,1 897/17 019）,致倦库蚊占采集蚊虫标本总数的5.5%（930/17 019）;中华按蚊最少（4.0%,673/17 019）。蚊虫标本接种组织细胞后,在合江县采集的三带喙库蚊标本获得3株可以稳定传代的病毒分离株,经分子生物学实验鉴定为基因Ⅰ型流行性乙型脑炎（乙脑）病毒,在合江县采集的7批蚊虫中检测到乙脑病毒基因阳性。蠓虫标本接种细胞后未获得病毒分离物,在合江县采集的4批蠓虫标本经分子生物学检测,显示阿卡斑病毒基因阳性。结论 三带喙库蚊是四川省东南部3县的优势蚊种,四川省东南部存在经蚊虫传播的乙脑病毒及以蠓虫为媒介的阿卡斑病毒。     

云南省东北等地区蚊虫及蚊媒病毒调查研究

目的了解滇东北等地区蚊虫及蚊传虫媒病毒分布特点,为虫媒病毒病防治提供科学依据。方法2009年在滇东北等地区的6个县采集蚊虫标本;蚊虫经分类鉴定后,用细胞培养法分离病毒,对病毒分离物进行分子生物学鉴定。结果共采集到4属（库蚊、按蚊、阿蚊、伊蚊）24种18562只蚊虫,其中三带喙库蚊、中华按蚊为主要蚊种,构成比分别为58．37％和28．45％;从蚊虫标本中分离到15株病毒,经分子生物学鉴定,其中2株（YN0911和YN0967）为基因I型流行性乙型脑炎（乙脑）病毒,均分离自三带喙库蚊;1株（YN0922）为版纳病毒,分离自中华按蚊;12株为淡色库蚊浓核病毒,其中9株分离自三带喙库蚊,3株分离自中华按蚊。结论三带喙库蚊和中华按蚊为调查地区的优势蚊种,并携带乙脯病毒、版纳病毒和淡仁．库蚊浓核病毒：滇东北地区首次分离到乙腩病毒。     

实时荧光RT-PCR法快速检测三带喙库蚊中的流行性乙型脑炎病毒

目的从四川省成都地区采集三带喙库蚊样品,快速检测蚊虫中的流行性乙型脑炎病毒(JEV),并确定JEV基因型别。方法采用实时荧光RT-PCR方法检测蚊体内的JEV。利用一步法RT-PCR试剂盒扩增阳性样品Pr M区段特异性核苷酸序列,测序后应用Clustal X1.83和Mega 5.0软件构建系统进化树,并进行基因分型和同源性分析。结果 2012年采集三带喙库蚊雌蚊10 656只,分为219份,检测出7份JEV阳性核酸样品,阳性率为3.2%。扩增Pr M区域特异性核苷酸序列674 bp,经鉴定均为基因Ⅰ型。与国内外部分GⅠ型的相关序列比较,核苷酸同源性为91.5%~100%,氨基酸同源性为94.9%~100%,其中与四川省SC09-X08株同源性最高。结论实时荧光RT-PCR法能快速检测三带喙库蚊中的JEV,成都地区存在基因Ⅰ型JEV流行。     

河南省新安县和息县2012年蚊传虫媒病毒调查

目的了解河南省部分地区蚊传虫媒病毒的种类分布及基因型别。方法于2012年5-8月在河南省洛阳市新安县和信阳市息县的居民住房、猪圈、牛棚及树林中采集蚊虫。使用细胞培养法分离病毒,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行种属特异扩增鉴定,并用Clustal X2.1、Meg Align、Genedoc 3.2和Mega v5.1生物信息学软件完成病毒核酸序列的分子生物学分析并进行基因分型。结果共采集蚊虫4属5种7149只,其中新安县以骚扰阿蚊居多(2055只,51.36%),息县以淡色库蚊(2964只,94.16%)为主。共分离获得5株病毒,直接接种BHK-21细胞无病变、C6/36细胞培养仅导致轻微病变,其C6/36细胞传代培养物转接BHK-21细胞后3 d可致细胞明显病变;序列分析表明这5株病毒均属基因Ⅰ型流行性乙型脑炎病毒(JEV),其中3株分离自淡色库蚊,2株来自三带喙库蚊。结论河南省部分地区依然存在JEV及其传播媒介,且目前当地自然界中循环的JEV仍以基因Ⅰ型为主。     

辽宁省部分地区2008年虫媒病毒分离鉴定

目的在辽宁省采集蚊虫标本进行病毒分离,了解虫媒病毒分布情况。方法2008年夏季在辽宁省丹东和锦州市采集蚊虫标本,利用C6/36和BHK-21等细胞分离病毒;对新分离病毒利用血清学、分子生物学和生物信息学方法进行鉴定。结果在辽宁省丹东和锦州市共采集蚊虫标本3属5种9296只,包括库蚊属的三带喙库蚊、淡色库蚊,伊蚊属的刺扰伊蚊、背点伊蚊和按蚊属的中华按蚊。从蚊虫标本中共得到4株病毒分离物,其中1株为乙型脑炎(乙脑)病毒(丹东市的三带喙库蚊),2株为版纳病毒(锦州市的中华按蚊),1株为辽宁病毒和版纳病毒混合(锦州市的中华按蚊)。新分离乙脑病毒属于基因Ⅰ型乙脑病毒,E基因编码病毒毒力和抗原表位的位点未发生改变。结论在辽宁省再次分离到乙脑病毒,并首次证明辽宁省存在辽宁病毒。     

四川省虫媒病毒调查研究

目的通过对四川省虫媒病毒调查,了解乙脑主要流行区蚊虫及其虫媒病毒的分布状况,为防制提供依据。方法 2006-2008年在调查点蚊虫孳生高峰期采集蚊虫标本,进行分类鉴定,并用BHK细胞分离病毒,连续3代观察细胞病变情况;收获细胞病变阳性分离物进行血清学和分子生物学鉴定;采用MEGA3.1生物学软件完成氨基酸序列和病毒进化树分析。结果三带喙库蚊和骚扰阿蚊为乙脑流行区优势种群,分离11株虫媒病毒,其中8株经IFA和RT-PCR鉴定为乙脑病毒(JEV),均属于基因Ⅰ型JEV。E基因区段核苷酸和氨基酸比较发现,8株病毒之间核苷酸和氨基酸同源性分别为98.1%～100.0%和99.7%～100.0%;与2004年四川分离株的核苷酸同源性在97.8%～99.6%,氨基酸同源性在99.3%～100.0%。另外3株病毒在BHK细胞上出现病变时间较JEV快,用20种不同种属的虫媒病毒免疫腹水IFA鉴定和相关的引物进行PCR扩增,结果均为阴性。结论在四川省乙脑流行区有5种蚊虫,其中三带喙库蚊和骚扰阿蚊为优势种群,乙脑病毒由三带喙库蚊携带,其E区核苷酸和氨基酸相对保守,有利于采取针对性防控措施。同时,分离出3株不能鉴定的虫媒病毒,提示为我国不常见种型或尚未发现的新毒种,其生物学特性和对人类的致病性有待进一步研究。     

云南省蚊虫分布特点及自然感染乙型脑炎病毒的研究

目的分析云南省蚊虫分布特点及其与流行性乙型脑炎（乙脑）等虫媒病毒的关系,为防制提供依据。方法在云南省农村居民区住房、畜圈和野外竹林等生境捕蚊。结果采获成年雌蚊10属88种158909只,以库蚊、按蚊和伊蚊属蚊虫数量最多,分别占56．66％、25．35％和13．88％。在捕蚊总数中,居民区夜间捕获成蚊7属63种132081只,其中三带喙库蚊的构成比最高（42．12％）;其次为中华按蚊（23．31％）;野外白天捕获成蚊5属48种26828只,白纹伊蚊构成比最高（31．89％）,其次为圆斑伊蚊（20．21％）。对8属29种3957批131538只雌性成蚊进行病毒分离,结果从5属17种蚊虫体内分离到乙脑病毒81株,以库蚊分离出的毒株最多（59株）,占72．84％;其次为按蚊8株（9．88％）和伊蚊9株（占11．11％）;曼蚊和阿蚊均为2株（各占2．47％）。分离到乙脑病毒最多的蚊种为三带喙库蚊（27株）,占分离毒株总数的33．33％。结论居民区夜间活动蚊虫群落的优势种为三带喙库蚊、中华按蚊、棕头库蚊、霜背库蚊、伪杂鳞库蚊和迷走按蚊;野外白天活动蚊虫群落的优势种为白纹伊蚊、伪白纹伊蚊、圆斑伊蚊、骚扰阿蚊和刺扰伊蚊。三带喙库蚊和白纹伊蚊分别是云南省乙脑和登革热的丰要传播媒介。     

云南省边境地区蚊虫自然感染乙型脑炎病毒的研究

目的：阐明蚊虫自然感染乙型脑炎病毒情况，评价各蚊种的媒介地位。方法：夜间在农村人房、畜圈，白天在野外竹林捕蚊，用细胞和小白鼠法分离病毒。结果：在云南省15个边界县市采获6属45种92748只雄蚊，从13种蚊虫体内分离出乙型脑炎病毒42株。其中从三带喙库蚊分离到15株，霜背库蚊5株，伪杂鳞库蚊、中华按蚊各4株，刺扰伊蚊3株，棕头库蚊、白纹伊蚊、窄翅伊蚊各2株，雪背库蚊、环带库蚊、迷走按蚊、阿萨姆伊蚊和常型曼蚊各1株。结论：三带喙库蚊是该地区本病的主要传播媒介，霜背库蚊、伪杂鳞库蚊、刺扰伊蚊和白纹伊蚊亦为重要媒介。具有夜间以库蚊为主，白天以伊蚊为主的传播特点。     

多重逆转录-聚合酶链反应检测麻疹风疹流行性腮腺炎病毒基因的研究

目的　探索麻疹、风疹、流行性腮腺炎 (腮腺炎 )病毒感染的快速诊断方法。方法　利用多重逆转录 聚合酶链反应 (MRT PCR)方法对麻疹、风疹、腮腺炎病毒的相关基因检测进行研究。结果　直接从麻疹疫苗沪1 91 株 ,风疹疫苗BRDⅡ株 ,腮腺炎疫苗S79株 ,冻干麻疹、腮腺炎、风疹联合减毒活疫苗及临床麻疹、风疹、腮腺炎患者的标本中 ,同时检测出麻疹、风疹、腮腺炎病毒 6 3 5bp、4 1 1bp、5 1 9bp的特异性核酸片段 ,MRT PCR 1次扩增灵敏度均可分别达到 1TCID50 。结论　该方法能特异、敏感地检测临床标本中麻疹、风疹、腮腺炎病毒 ,是快速诊断麻疹、风疹、腮腺炎病毒感染的理想方法     

Tickborne arbovirus surveillance in market livestock, Nairobi, Kenya

To identify tickborne viruses circulating in Kenya and the surrounding region, we conducted surveillance at abattoirs in Nairobi, Kenya. Species of ticks collected included Rhipicephalus pulchellus (56%), Amblyomma gemma (14%), R. appendiculatus (8%), A. variegatum (6%), and others. A total of 56 virus isolates were obtained, 26 from A. gemma, 17 from R. pulchellus, 6 from A. variegatum, and 7 from other species. Virus isolates included Dugbe virus (DUGV), an unknown virus related to DUGV, Thogoto, Bhanja, Kadam, Dhori, Barur, and foot-and-mouth disease (FMDV) viruses. This is the first report of Dhori virus isolation in East Africa and the first known isolation of FMDV associated with tick collection. Our results demonstrate the potential for tickborne dissemination of endemic and emergent viruses and the relevance of A. gemma in the maintenance of tickborne viruses in this region.     

Seroprevalence of Antibodies against Chikungunya,Dengue, and Rift Valley Fever Viruses after Febrile Illness Outbreak,Madagascar

In October 2009, two–3 months after an outbreak of a febrile disease with joint pain on the eastern coast of Madagascar, we assessed serologic markers for chikungunya virus (CHIKV), dengue virus (DENV), and Rift Valley fever virus (RVFV) in 1,244 pregnant women at 6 locations. In 2 eastern coast towns, IgG seroprevalence against CHIKV was 45% and 23%; IgM seroprevalence was 28% and 5%. IgG seroprevalence against DENV was 17% and 11%. No anti-DENV IgM was detected. At 4 locations, 450–1,300 m high, IgG seroprevalence against CHIKV was 0%–3%, suggesting CHIKV had not spread to higher inland-altitudes. Four women had IgG against RVFV, probably antibodies from a 2008 epidemic. Most (78%) women from coastal locations with CHIKV-specific IgG reported joint pain and stiffness; 21% reported no symptoms. CHIKV infection was significantly associated with high bodyweight. The outbreak was an isolated CHIKV epidemic without relevant DENV co-transmission.     

Surveillance for West Nile, dengue, and chikungunya virus infections, Veneto Region, Italy, 2010

In 2010, in Veneto Region, Italy, surveillance of summer fevers was conducted to promptly identify autochthonous cases of West Nile fever and increase detection of imported dengue and chikungunya in travelers. Surveillance highlighted the need to modify case definitions, train physicians, and when a case is identified, implement vector control measures.     

海南省2017-2018年虫媒病毒的分离与鉴定

目的了解海南省虫媒病毒种类及分布变化。方法于2017-2018年在海南省野外采集吸血昆虫标本,所有吸血昆虫标本实验室处理后用BHK-21细胞和C6/36细胞进行病毒分离,同时使用RT-PCR平行检测吸血昆虫标本中虫媒病毒基因。结果共采集到4属(库蚊、阿蚊、伊蚊、按蚊)15062只蚊虫和11360只蠓虫。采集的蚊虫中三带喙库蚊居多,占蚊虫采集总数92.88%(13990/15062)。经组织培养细胞共获得4株病毒分离物,其中3株乙型脑炎(乙脑)病毒、1株盖塔病毒,在5批三带喙库蚊标本中检测到乙脑病毒基因阳性。遗传进化分析结果显示这3株乙脑病毒和5批PCR筛检阳性的标本均属于基因1型乙脑病毒。当地乙脑病毒的最低感染率为0.57‰(8/13990)。在5批蠓虫标本中检测阿卡斑病毒基因阳性,当地阿卡斑病毒的最低感染率为0.44‰(5/11360)。基于病毒S基因和M基因序列的系统进化分析显示这5株阿卡斑病毒处于单独进化分支形成独特的地理分布特征。结论继1980年代以来,从海南省的蚊虫标本中再次分离到乙脑病毒和盖塔病毒、蠓虫标本中检测到阿卡斑病毒。应加强乙脑病毒、盖塔病毒和阿卡斑病毒对人畜动物感染状况及疾病负担的监测,以减少对当地公共卫生健康的危害。     

400例MSM行为特征及HIV、HAV、HCV、HEV、梅毒感染状况的横断面调查

目的 了解云南省玉溪市MSM人群的行为特征及HIV、HAV、HCV、HEV、梅毒感染状况,为开展有针对性的健康教育和行为干预提供依据。方法 2018年4 - 7月在玉溪市采用横断面调查,滚雪球抽样方法,共纳入400例MSM,开展行为学问卷调查,采集血液样本进行HIV、HAV、HCV、HEV和梅毒抗体检测。 结果 400例MSM中98.25%对艾滋病基本知识知晓。318例最近6个月与男性发生过肛交性行为,88.68%都坚持每次使用安全套,最近1次肛交时96.86%使用了安全套。84例最近6个月与异性发生性行为,94.05%都坚持每次使用安全套,最近1次与异性发生性行为时98.81%使用了安全套。HIV、HAV、HCV、HEV、梅毒感染率分别为3.00%（95%CI:1.33～4.67）、1.25%（95%CI:0.16～2.34）、0.25%（95%CI:0.00～0.74）、1.00%（95%CI:0.03～1.98）、4.75%（95%CI:2.67～6.83）。结论 MSM人群不仅是HIV、HCV、梅毒的高危人群,HAV、HEV也高发,需针对该人群推广接种HAV、HEV疫苗。     

Prevalence of HIV,syphilis, hepatitis B,and hepatitis C among entrants to Maryland correctional facilities

Although high prevalence of hepatitis C virus (HCV) in correctional institutions has been established, data are sparse regarding the comorbidities of hepatitis B virus (HBV), HCV, and human immunodeficiency virus (HIV), all of which may complicate the management of HCV. This study sought to estimate the prevalence and correlates associated with HCV prevalence among entrants into the Maryland Division of Correction and the Baltimore City Detention Center. Participants included all newly incarcerated entrants between January 28 and March 28, 2002. Excess sera with identifiers removed from samples drawn for routine syphilis testing were assayed for antibodies to HIV and HCV and for HBV surface antigen and surface and total core antibodies. Separately, all HIV-positive specimens were tested using the serological testing algorithm for recent HIV seroconversion. Of the 1,081 immates and 2,833 detainees, reactive syphilis serology was noted in 0.6% of the combined population; HIV seroprevalence was 6.6%; HCV prevalence was 29.7%; and 25.2% of detainees and prisoners had antigen or core or surface antibodies to HBV. A multivariate analysis of predictors of HCV positivity indicated that detainees, women, whites, older age groups, those who were HIV seropositive, and individuals with past or present infection with HBV were significantly more likely to be positive for HCV. These data indicate that hepatitis C remains an important public health concern among entrants to jail and prison and is complicated with coinfections that need to be addressed for effective treatment.     

Outbreak of dengue and Chikungunya fevers, Toamasina, Madagascar, 2006

An outbreak of dengue-like syndrome occurred in Toamasina from January through March 2006. Dengue type l or chikungunya viruses were detected in 38 of 55 patients sampled. Aedes albopictus was the only potential vector collected. Of 4,242 randomly selected representative residents interviewed retrospectively, 67.5% reported a dengue-like syndrome during this period.