丙硫氧嘧啶致甲状腺增生的量效关系初探

[目的]研究丙硫氧嘧啶(propylthiouracil,PTU)致甲状腺增生的量效关系,为以PTU为模型药物的甲状腺激素干扰物体内短期甄别方法体系的建立提供实验室依据。[方法]SD大鼠100只,雌雄各半,随机分为1个对照组和4个实验组。对照组用玉米油灌胃;实验组用不同剂量的PTU的玉米油溶液灌胃。于实验期11d麻醉后股动脉放血处死动物,甲状腺组织称重后进行组织病理学观察。[结果]在PTU剂量为5mg/(kg·d)的实验组,雌雄鼠甲状腺脏器系数均高于对照组(P﹤0.05);组织学观察发现随着PTU剂量增加,甲状腺增生程度有所加重;组织学观察到的最小有作用剂量分别比脏器系数提前3和2个剂量组。[结论]选择甲状腺增生的组织学早期改变为实验观察敏感性终点,建立以PTU为模型药物的甲状腺激素干扰物体内短期甄别方法体系是可行的。     

农药叶枯宁对大鼠血清甲状腺素水平影响的时效关系

[目的 ]研究甲状腺素干扰物叶枯宁对大鼠血清游离T4(FT4)和促甲状腺激素 (TSH)水平的影响及其时效关系 ,为建立甲状腺素干扰物甄别方法体系的体内方法提供实验依据。 [方法 ]叶枯宁二甲亚砜溶液灌胃染毒 ,剂量为 5 0mg/kg ,分别设 5、6、10、2 0d实验组及溶剂对照组 ,在染毒期满后处死动物 ,取血清测FT4和TSH ,同时观察甲状腺组织学改变。 [结果 ]与对照相比 ,5d组出现显著的FT4降低并伴TSH升高 (P <0 0 5 ) ,6d及以后组则未见差异 ;组织学观察到 5d、6d组甲状腺滤泡上皮增生 ,10d组出现实心芽 ,2 0d组出现实心继发滤泡。 [结论 ]叶枯宁对大鼠血清FT4和TSH水平的影响发生在 5d之内 ,并可继发引起甲状腺增生。本实验为建立甲状腺素干扰物的初筛方法奠定了基础     

丙硫氧嘧啶干扰甲状腺功能的亚急性毒性研究

[目的]研究丙硫氧嘧啶(Propylthiouracil, PTU)干扰甲状腺功能的亚急性毒性状况,为PTU致甲状腺肿的组织发生学研究提供实验室基础数据.[方法]SD大鼠150只,随机分为15组,包括3、6、9、12、15、18、21d的试验组和同期对照组,对照组用玉米油灌胃,试验组用PTU的玉米油溶液灌胃,于每个实验期结束的d2麻醉后股动脉放血处死动物,取甲状腺、肝、肾、脾、胸腺,称重后进行组织病理学观察.[结果]试验组血清风TT、TT4浓度先降低再进入平缓期,TSH浓度是先升高再进入平缓期,甲状腺绝对重量和脏器系数均持续升高,和对照组相比.6d时差异有统计学意义(P<0.05).[结论]PTU 5mg/(kg. day)的剂量染毒大鼠21d,除干扰甲状腺功能,未见其他毒性反应,甲状腺在持续增生,功能尚未代偿.因此用该方法研究甲状腺的组织发生学是可行的.     

甲状腺激素干扰物二巯基敌枯双生物作用的实验研究I观察指标的探讨

目的 :研究二巯基敌枯双所致甲状腺的形态改变 ,探讨二巯基敌枯双是否属甲状腺激素干扰物。方法 :Wistar大鼠 60只 ,随机分为正常对照组和实验组。正常对照组给予溶剂二甲基亚砜 ,实验组给予二巯基敌枯双二甲基亚砜溶液 ,剂量为 5 0 mg/kg体重。于实验组的给药第 5 d、第 10 d和第 2 0 d,分别放血处死两组动物。测定血清中 T4,TSH的浓度 ;取动物甲状腺称重 ,常规 HE染色 ,光镜下观察。结果 :各时间点实验组血清 T4,TSH的浓度和对照组相比无显著变化 (P>0 .0 5 ) ;实验组动物的甲状腺脏器系数显著高于对照组 ,(P<0 .0 5 ) ;组织学观察到实验组在第 5 d甲状腺滤泡上皮增生 ,有的滤泡出现局灶性增生斑块 ,第 10 d复层化的甲状腺滤泡上皮细胞继续增生 ,并向间质突出 ,形成实心芽 ,第 2 0 d实心芽向继发滤泡分化 ,出现了滤泡腔。结论 :二巯基敌枯双引起甲状腺增生 ,提示具有甲状腺激素干扰物的可能性     

二巯基敌枯双生物作用的实验研究Ⅲ:时效关系的探讨

目的 :研究甲状腺激素干扰物二巯基敌枯双所致甲状腺的形态、血清 T4 和 TSH改变 ,探讨二巯基敌枯双生物作用的时效关系。方法 :Wistar大鼠 78只 ,随机分为正常对照组和实验组。正常对照组给予溶剂二甲基亚砜 ,实验组给予二巯基敌枯双的二甲基亚砜溶液 ,剂量为 5 0 mg/ kg体重。于实验组的给药第 1d、第 3d和第 5 d,分别放血处死两组动物。测定血清中 T4 ,TSH的浓度 ;取动物甲状腺称重 ,同时光镜下观察其形态学的变化。结果 :第 3d和第 5 d实验组血浆 TSH的浓度和对照组相比 ,显著增高 (P<0 .0 5 ) ,第 5 d实验组动物的甲状腺脏器系数显著高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,组织学观察到该组甲状腺滤泡上皮局灶增生成增生斑。第 3d实验组甲状腺脏器系数与对照组比较尽管无差异 ,但组织学观察到该组甲状腺滤泡上皮已增生成复层。结论 :TSH、甲状腺的脏器系数和甲状腺的组织学观察在本实验中呈现明显的时间效应关系 ,而且最早出现生物学指标变化的时间是实验第 3d。     

二巯基敌枯双生物作用的实验研究 Ⅱ：组织化学观察

目的：研究甲状腺激素干扰物二巯基敌枯双所致甲状腺组织化学的改变，并探讨所致甲状腺增生的最佳取材时间和敏感指标。方法：Wistar大鼠60只，随机分成正常对照组和实验组，每组各30只。正常对照组给予溶剂二甲基亚砜，实验组给予二巯基敌枯双的二甲基亚砜溶液，剂量为50mg/kg体重。于实验组的给药第5d、第10d和第20d，分别放血处死两组动物。用酶组织化学方法观察甲状腺琥珀酸脱氢醇(SDH)、甲状腺过氧化酶酶活性的变化(TPO)；用免疫酶法测定核增殖抗原(PCNA)在甲状腺中的阳性表达。结果：实验组各期甲状腺滤泡上皮内SDH和TPO酶活性明显增高(P＜0．05)，实验组的各期PCNA表达阳性细胞数也明显高于同期对照组(P＜0．05)。结论：甲状腺激素干扰物二巯基敌枯双所致甲状腺滤泡上皮内SDH和TPO酶活性增高是TSH刺激的结果，其最佳取材时间应是5d以前，而敏感指标应该是核增殖抗原(PC-NA）。     

甲状腺素干扰物对甲状腺滤泡细胞分泌甲状腺球蛋白功能的影响

目的了解几种典型甲状腺素干扰物对甲状腺滤泡(FRTL-5)细胞分泌甲状腺球蛋白功能的影响,探讨其干扰甲状腺素水平的细胞学机制及建立甲状腺素干扰物甄别方法的可行性。方法将大鼠FRTL-5细胞体外培养后接种于24孔培养板,每孔细胞数2×105个,待细胞贴壁后分别加入受试物丙硫氧嘧啶、叶枯宁[N,N-甲撑-双(2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑)]、磺胺二甲嘧啶和杀草强,各设1组溶剂对照,置CO2孵箱培养48h后,每孔取1ml培养液,用放射免疫法测定甲状腺球蛋白的浓度。结果4个实验组的甲状腺球蛋白浓度与对照组相比均降低,差异有显著性(P<0.05),且可能存在剂量-效应关系。结论降低甲状腺细胞合成或分泌甲状腺球蛋白可能是这4种甲状腺素干扰物的作用机制之一。FRTL-5细胞分泌甲状腺球蛋白的功能是一个相对灵敏的指标,与其他体内体外实验结合可用于甲状腺素干扰物的一阶段甄别(初筛)方法。     

氯丹对大鼠甲状腺结构和功能影响的量效关系研究

[目的]研究氯丹对大鼠甲状腺结构和功能影响的量效关系研究。[方法]21日龄SD大鼠40只,经7d适应性饲养后,将大鼠随机分为溶剂对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。每组10只,雌雄各半。低、中、高剂量组的剂量分别为5mg/kg、15mg/kg、30mg/kg,配成相应的玉米油溶液,按0.5%体重灌胃,对照组用同样体积的玉米油灌胃。染毒10d后观察其血清学、组织病理学、组织化学指标和甲状腺滤泡细胞超微结构改变。[结果]随着氯丹染毒剂量的增加,血清FT4、FT3浓度呈逐渐降低的趋势,而TSH浓度则随染毒剂量的增加呈逐渐升高的趋势;甲状腺组织增生的程度随氯丹染毒剂量增加也有明显的加重;PCNA阳性细胞数在实验组明显高于对照组,且随着染毒剂量的增加而增加;各实验组的TPO、SDH酶活性明显升高,表现为显色加深;电镜观察可见实验组的甲状腺滤泡细胞胞浆内有大量明显扩张呈囊状的粗面内质网,胞核、胞膜和线粒体未见损伤。[结论]在一定剂量条件下,氯丹可干扰甲状腺结构和功能,并存在着剂量效应关系。     

丙硫氧嘧啶致甲状腺组织增生的时效关系研究

目的初步建立以染毒(PTU)为模型的甲状腺激素干扰物体内短期甄别实验系统。方法PTU(5mg/kgbw)灌胃染毒,分别设丙硫氧嘧啶染毒3、6、9、12天实验组及溶剂对照组,每组10只大鼠,在染毒期满后处死动物,取血清,用全自动化学发光法测量TT3,TT4和TSH,同时观察甲状腺组织病理改变,PAS染色观察胶质的改变,免疫组化法和Western-blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果与对照组相比,染毒3天组,TT3开始出现显著的降低(P<0.05),6、9、12天组,TT3、TT4浓度均显著降低,并伴TSH浓度显著升高(P<0.05)。甲状腺脏器系数在6、9、12天组均显著高于对照组(P<0.05)。组织学观察发现3天组甲状腺滤泡上皮复层化;6天组弥漫性增生,大量增生斑、实心芽形成(P<0.05);9天组纤维母细胞和毛细血管内皮细胞大量增生,大量实心继发滤泡形成;12天组有大量的空心继发滤泡形成。PAS染色显示,3、6、9天组的甲状腺滤泡胶质染色弱阳性,12天组甲状腺滤泡胶质染色阴性。免疫组织化学检测的PCNA标记指数和Western-blot检测的PCNA/β-actin的相对值随时间变化的规律完全一致,即3天组开始显著增加(P<0.05);而6天组达到高峰(P<0.05);9天组开始减少(P<0.05);12天组与对照组相比则差异无显著性。结论初步确定甲状腺激素干扰物体内短期甄别实验实验观察终点为增生斑和实心芽,以及IHC检测的PCNA标记指数,最佳实验期为6天。     

叶枯唑原药对大鼠的亚慢性经口毒性研究

[目的]研究叶枯唑原药对大鼠的主要亚慢性毒性作用,确定最大无作用剂量及毒作用靶器官.[方法]按照GB15670-1995<农药登记毒理学试验方法>中大鼠亚慢性经口毒性试验方法进行,设0,7.0,27.9,111.7,447.0mg/kg5个剂量组.[结果]与对照组相比,高剂量组(447.0mg/kg)体重增长明显减慢(P<0.01);脏器系数检查显示低、中、高剂量组甲状腺脏体比均较对照组高(P<0.01);组织病理学检查见低、中、高剂量组大鼠甲状腺不同程度的增生,且呈现良好的剂量-反应关系.[结论]大鼠经口染毒叶枯唑原药90d的最大无作用剂量雌雄鼠均为7.0mg/kg,甲状腺为叶枯唑毒作用的靶器官.