被动血球凝集试验监测麻疹抗体的应用

<正> 目前测定麻疹抗体使用的血球凝集抑制试验(HI),具有特异性强,敏感性好的优点,但由于试验中必须采用猴血球,因而给推广应用造成困难。被动血球凝集试验(PHA)已广泛应用于微生物学及免疫学领域。但应用于麻疹抗体的测定时间不长,最近中国预防医学科学院微生物研究所研制成功了PHA测定麻疹抗体的方法,我们应用PHA测412份健康人麻疹抗体,将结果报告如下: 材料中国预防医学科学院微生物研究所提供PHA试验用麻疹抗原致敏血球,正常细胞致敏血球,20％醛化血球,麻疹阳性参考血清。     

ELISA与HI法检测麻疹抗体的比较

对人群的麻疹抗体水平监测,目前都采用血凝抑制法,此法虽简便快速,但许多地区因购买猴血球困难无法开展此项工作。本文通过对麻苗免疫前后和健康人群麻疹抗体的测定,比较酶联吸附法(ELISA)和血凝抑制法(HI)敏感性和特异性,结果表明ELISA法可以代替HI法进行麻疹的抗体水平监测。 1 材料与方法法 1.1 ELISA-IgG法 ELISA间接法,以OD值≥2.1的血清最高稀释度为其效价。麻疹人群抗体水平测定血清稀释度<1:200为阴     

鼠疫冻干血球保存时间对效价的影响

目的测定鼠疫冻干血球的保存年限对其效价的影响。方法鼠疫间接血凝试验试管法和反向间接血凝试验试管法。结果对1996～2001年不同年份生产的冻干F1抗原、抗体血球的凝集效价进行比较,结果发现冻干血球的效价随着保存时间的延长而下降。F1抗原血球可以保存3年,其效价滴度仍可达1∶4万以上。F1抗体血球低温保存3年,效价滴度在1∶5120～1∶10000。结论鼠疫F1抗原和抗体冷冻血球细胞能分别保存2年和4年。     

用冻干致敏血球间接血凝法诊断伤寒的研究

作者应用间接血凝试验诊断伤寒,经过3年多的调查研究,证实该法具有微量、快速、敏感性高、特异性强等优点,并有早期诊断价值。检测121例伤寒患者血清,阳性检出率高达98.35%(119/121),而肥达氏反应阳性检出率仅为79.34%(TO)。血球致敏冻干后,冰箱保存有效期可达一年以上,携带外出和邮寄,均无需冷藏,为推广应用提供了方便条件。     

猴血球低温冷冻保存的研究

本文报告了应用含20%二甲基亚砜的蔗糖、明胶液做介质冷冻保存猴血球的研究结果。这种冷冻保存液可保护猴血球在低温冻结条件下不发生细胞破裂;在解冻后,对麻疹血凝素的敏感性不降低:在麻疹血凝抑制试验中与未冻存的新鲜猴血球有相同的效果。冷冻保存液中可加防腐剂,这对猴血球的冷冻保存及血清学应用效果无影响。
由于冻存血球在解冻后仍能在普通冰箱(或冰壶)中至少可保存2周,使供应远距离单位成为可能。     

麻疹血凝抑制试验中猴血球冷冻保存的研究

目的:延长新鲜猴血球保存期,解决麻疹血凝抑制试验中猴血球来源紧张问题.方法:猴子静脉无菌采血后置阿氏液中,将阿氏液保存的猴血球经500 r/min离心10 min,弃上清收取浓缩猴血球,与等量血球冷冻保存液混合,室温缓慢搅拌15 min后,分装保存于液氮中.结果:将液氮冷冻保存9个月的猴血球与新鲜猴血球比较,其对麻疹血凝素的敏感性和麻疹血凝抑制抗体的测定结果没有统计学差异(u=0.0123.P>0.5).结论:用液氮冷冻猴血球获得成功,并能替代新鲜猴血球.     

改良间接血凝试验用于钩端螺旋体病诊断的初步研究

目的：对钩端螺旋体病常规HA法进行改进，探讨基层适用的临床诊断方法。方法：采用正常人血清吸收致敏血球，以封闭致敏血球对正常人血清凝集素反应位点，达到去除率非特异凝集的效果，并与常规HA与MA法作比较。结果：对28份确诊钩体病人及60份非钩体病人血清检测，结果两种HA法阳性符合率达91．3％，阴性符合率达93．3％（P＞0．05）；对28份钩体患者血清效价测定结果表明，两种HA平均滴度差异无显著性（P＞0．05）；对108份钩体疑似病人血清用3种方法比较，以MA为标准，常规HA敏感性为78．6％，特异性为91．3％；而改良HA敏感性为82．1％，特异性为96．3％，改良HA结果更接近MA。结论；用改良HA法检测钩体病准确性不亚于常规HA，方法简便可靠，一步完成，可作为基层无特殊设备条件下钩体病临床诊断之参考。     

新型乳胶凝集试验诊断日本血吸虫病的研究

利用适量血吸虫卵单克隆抗体致敏重氮基聚苯乙烯乳胶，制备出血吸虫卵单克隆抗体重氮乳胶诊断试验。实验室结果表明：重氮乳胶试剂敏感性高于相同抗体致敏传统聚苯乙烯乳胶制成的试剂。同一阳性标本经重氮乳胶试剂的检出效价明显高于传统乳胶试试的检测效价。重氮乳胶试剂具有良好的特异性和稳定性。实验室检测时间仅需３ｍｉｎ，是一种简便、快速、敏感和特异的方法。     

麻疹间接血凝试验与血凝抑制试验的应用比较

被动血球凝集试验(PHA)是一种快速、敏感的血清学方法,已广泛应用于微生物学及免疫学领域,1988年中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所与四川省卫生防疫站采用超声波处理未浓缩抗原致敏醛化绵羊血球建立麻疹被动血球凝集试验,并将其引入麻疹抗     

血吸虫抗体检测（间接红细胞凝集试验）试剂盒生产质量控制

间接红细胞凝集试验,自上世纪50年代用于诊断血吸虫病以来,国内外学者都进行了许多研究,证明本试验操作简便快速,器材简单,具有较高的敏感性和一定的特异性。特别是抗原纯化技术和冰冻干燥技术等的发展,在致敏血球的制备和保存方面有新的进展。一些单位研制开发血吸虫SEA/抗体检测（间接红细胞凝集试验）试剂盒,普遍用于流行病学调查及实验室血吸虫病的辅助诊断。并逐步走向商品化。为了使我们的试剂生产标准化、规范化,符合国家新的要求,     

2株副流感病毒株的分离与鉴定

目的 副流感病毒的分离、鉴定。方法 应用鸡胚和人胚肺成纤维细胞突变株分离病毒,用多株流感国际和国内代表株抗血清进行血凝抑制交互试验,用4类主要呼吸道病毒单克隆抗体间接免疫荧光法做特异性交叉反应鉴定。结果 分离株在鸡胚培养中有较高的血凝效价,但与流感病毒甲、流感病毒乙均不发生血抑反应,而与副流感病毒2型单克隆抗体发生较强免疫荧光反应,在人胚肺成纤维细胞突变株培养出现明显细胞融合病变。结论 分离虽具有高滴度血凝效价,但不是流感病毒,根据与副流感病毒2型单克隆抗体可以发生较强反应和在人胚肺成纤维细胞上的特征性细胞病变,确认为副流感病毒2型。     

抗黄曲霉毒素B1单抗制备及免疫学定量方法建立

目的本研究合成并鉴定了AFB1人工抗原,制备AFB1的单克隆抗体(AFB1mAb)。方法采用NHS法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成W人工抗原AFB1-BSA和AFB1-OVA,紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定;AFB1-BSA免疫BALB/C小鼠,通过间接ELISA和阻断ELISA法选择细胞融合备用鼠;用杂交瘤技术制备AFB1mAb,并对其效价、亲和力、敏感性、特异性、亚型进行鉴定;体内诱生腹水法大量制备单抗。结果 UV图谱和SDS-PAGE图表明结半抗原AFB1和载体BSA及OVA偶联成功;筛选出2H5-F6、2H5-C9、2H9-C3三株杂交瘤细胞;鉴定单抗亚型均为IgG1;细胞上清效价1∶2.0×102～1∶1.28×103,2H5-F6的腹水效价1∶1.28×106,AFB1mAb亲和常数Ka为2.65×1010 L/moL,对AFB1的IC50为2.58 ng/mL;与AFB2的交叉反应率为1.61%,与其他类药物无交叉反应。结论通过试验获得高效价、敏感、特异的AFB1mAb,可用于各种食品中AFB1残留的快速免疫学检测试验。     

南定病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的建立

目的 制备南定病毒(NDiV)标准血清,建立ELISA检测方法,为在人群中监测南定病毒感染状况提供方法。 方法 用南定病毒感染3周龄SPF级BALB/c小鼠,分别在0、7、14 d以腹腔注射的方式免疫SPF级6~8周龄BALB/c小鼠,免疫血清用IFA法进行鉴定;南定病毒感染C6/36细胞,制备ELISA抗原,确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度,建立南定病毒ELISA检测方法,进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。 结果 制备南定病毒免疫血清,以IFA测定血清效价为1:320,与呼吸道合胞病毒、腺病毒均无交叉反应;建立了ELISA检测方法,确立了各种试剂的最佳工作浓度,其中酶结合物最佳工作浓度为1:10 000,抗原为2.3 μg/ml,阳性参考血清为1:200;ELISA检测灵敏度为1:3 200。板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4.56%和5.17%,板间为3.38%和6.64%。稳定性实验相对偏差均小于20%。 结论 本研究制备的南定病毒免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清;建立的ELISA方法重复性、稳定性好,敏感性和特异性强,可用于南定病毒血清抗体检测。     

艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原及毒素检测试剂盒对艰难梭菌感染诊断价值的Meta分析

目的探讨艰难梭菌谷氨酸脱氢酶(GDH)抗原及毒素检测试剂盒(简称CD快速检测试剂盒)对艰难梭菌感染(CDI)的诊断价值。方法按照纳入和排除标准筛选文献,检索有关CD快速检测试剂盒诊断CDI的文献,采用诊断准确性研究的质量评价工具QUADAS进行质量评价,应用Meta DiSc 1.4软件进行Meta分析。结果共纳入8篇文献2 852例研究对象。纳入文献均为高质量文献,异质性检验显示无阈值效应,但存在其他原因导致的非阈值性异质性。采用随机效应模型进行Meta分析,结果显示,CD快速检测试剂盒GDH抗原检测诊断CDI的合并灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、诊断优势比及其95%CI分别为0.96(0.94,0.98)、0.96(0.95,0.97)、20.07(13.47,29.92)、0.04(0.03,0.07)、409.35(168.01,997.39);毒素检测诊断CDI分别为0.54(0.48,0.59)、1.00(0.99,1.00)、64.23(18.90,218.33)、0.48(0.37,0.62)、142.74(40.94,497.61)。试剂盒GDH抗原、毒素检测诊断CDI的受试者工作曲线下面积(AUCSROC)分别为0.9877、0.9529,Q*指数分别为0.9718、0.9228。结论 CD快速检测试剂盒抗原检测部分灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比及诊断优势比均较高,毒素检测部分虽灵敏度欠佳,但特异度较高,可作为缺乏专业设备条件的地区及医院CDI的初筛试剂盒。     

肾综合征出血热早期诊断与中药抗病毒的实验研究

目的 为肾综合征出血热病毒感染早期诊断和中药治疗提供实验依据。方祛 将肾综合征出血热病毒(HFRSV)接种于Vero—E6细胞，培养后制成高效价病毒抗原片。应用酶免疫组化技术进行检测。采用中草药板兰根制剂体外作用病毒，比较不同浓度板兰根抗病毒的效果，培养后进行观察。结果 酶免疫组化技术对流行性出血热能早期、快速、特异性地诊断。板兰根具有杀病毒作用。结论 实验证明该法具有早期诊断、快速简便、特异敏感等优点，尤其适用于基层医疗单位推广应用。一定浓度的板兰根在体外具有杀病毒作用。     

Conditions for the chemical and physical inactivation of the K. Fu. strain of the agent of Creutzfeldt-Jakob disease

The unusual resistance of the "unconventional viruses" to inactivation by the commonly used disinfectants has led to a high degree of apprehension regarding patients with any form of dementia. The rapid adaptation of a newly acquired isolate of the agent of Creutzfeldt-Jakob Disease (CJD) to mice made possible this large scale study of its heat and chemical stability. The agent showed a decrease in titer of approximately two logs following incubation at 80 degrees C for 30 minutes with no additional loss at 80 degrees C for up to 500 minutes. There was greater than a three log decrease in titer at 100 degrees C for 30 minutes and temperatures of 115 degrees and 130 degrees C completely inactivated the agent. Treatment with sodium hypochlorite at three concentrations (0.33 per cent, 0.66 per cent and 1.31 per cent) showed inactivation of greater than 99 per cent at each. Crude agent preparations were not inactivated by sodium dodecylsulfate at detergent to protein ratios up to 4:1. These results suggest that those hospital supplies which resist autoclaving may be adequately disinfected by autoclaving for at least 30 minutes. Treatment of surfaces with solutions of sodium hypochlorite (household bleach) at concentrations of 15 to 25 per cent is also effective. Detergent treatment of contaminated surfaces or materials is inadequate for proper decontamination.     

安徽省麻疹野毒株的首次分离和鉴定

为了监测安徽省现流行的麻疹野毒株,在1998、1999年的2起麻疹暴发中,用绒猴淋巴母细胞（B95a）分离到4株麻疹野病毒,通过血凝试验、血吸附试验、中和试验对分离到的麻疹病毒进行特性鉴定。该4株病毒无血凝和血球吸附活性,我国人类疫苗免疫后,血清能中和这4株病毒,但中和此野毒株的滴度低于中和疫苗株滴度的2倍。逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）和其产物的基因序列分析提示,该4株病毒属于麻疹病毒第八基因组（Hgroup）。继续监测我国各省麻疹流行株的基因和抗原变异,对我国强化麻疹控制及麻疹消除、消灭十分必要     

幽门螺杆菌粪便抗原检测的临床应用

目的：评价幽门螺杆菌粪便抗原（HpSA）检测诊断幽门螺杆菌感染的特异性和敏感性。方法：采用酶联免疫分析法检测150例反复腹痛或伴有恶心、呕吐等上消化道症状患儿的幽门螺杆菌粪便抗原,同时以^13C尿素呼气试验（13C-UBT）检查作对照,对HpSA酶联免疫法与^13C尿素呼气试验（13^C-UBT）检查的阳性结果进行比较。结果：150例患儿中,HpSA酶联免疫法阳性率30％,对照法阳性率为29．33％,两法阳性检测率比较差异无统计学意义,HpSA酶联免疫法与对照法比较其敏感度和特异度分别为84．09％和92．45％。结论：HpSA酶联免疫法是一种操作简便、安全、可靠的诊断幽门螺杆菌感染的方法,尤其适用于儿童幽门螺杆菌感染的普查。     

重组Calpain蛋白的免疫原性及其诊断上的应用研究

目的研究在大肠杆菌中表达的日本血吸虫Calpain蛋白的免疫原性及其在日本血吸虫诊断上的应用. 方法用重组Calpain蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA法测定特异性IgG抗体的动态变化及其IgG亚型(IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3)产生特征;同时用重组Calpain蛋白作为诊断抗原,粪检血吸虫病阳性患者血清作为一抗,肝吸虫阳性患者血清作为考核交叉反应血清. 结果重组Calpain抗原免疫小鼠后,产生了一个极高的抗Calpain特异性抗体,免疫4周后IgG类抗体达到高峰,与对照组鼠相比较,免疫鼠血清中IgG1, IgG2a, IgG2b特异性抗体也有显著性的上升; Calpain重组抗原血清诊断日本血吸虫和粪检的符合率为100%, 粪检阳性EPG低的个体抗Calpain抗体滴度高, EPG高的患者抗Calpain抗体滴度反而低, 与肝吸虫的交叉反应率为37%. 结论日本血吸虫Calpain是一个具有免疫原性的蛋白,能够激发宿主产生高水平的免疫球蛋白,能够敏感地测定日本血吸虫的感染, 说明Calpain可以发展成为日本血吸虫病的诊断抗原和日本血吸虫疫苗候选分子.     

甲基对硫磷人工抗原的合成及鉴定

为了合成甲基对硫磷人工抗原,用醋酸－锌粉－盐酸还原甲基对硫磷,制备氨基甲基对硫磷,重氮化法使氨基甲基对硫磷与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）及中国鲎血蓝蛋白（ＴＴＨ）偶合,合成人工抗原Ｍ１６０５－ＢＳＡ,Ｍ１６０５－ＴＴＨ。Ｍ１６０５－ＢＳＡ免疫新西兰兔１０周后,双向琼脂扩散试验和间接ＥＬＩＳＡ检测,证明得到了高价且具有较好特异性的多抗血清,成功地合成了甲基对硫磷人工抗原,为其免疫分析方法的建立提供了条件。