猪链球菌核酸检测量值溯源研究及方法评估

针对病原微生物检测中急需解决的计量标准和量值溯源问题,建立猪链球菌核酸量值荧光定量PCR方法,研制猪链核酸检测标准物质,探索等效一致的核酸测量技术。方法根据已报告的DNA序列设计并合成种特异性16S rRNA引物,建立荧光定量PCR方法,摸索最佳上、下游引物配比浓度,利用已知核酸浓度的标准品作标准曲线并获得Ct值与样本...     

恙虫病两例报告

笔者报道的2例恙虫病，临床诊治的依据主要是体检和流行病学问询。患者病愈出院后，经当地疾病预防控制部门介入后采血做特异性抗体检测，证实为恙虫病。     

脑膜炎奈瑟菌基因分群方法建立与评价

目的 建立流脑实验室快速诊断及基因分群方法,进行群别分布研究及分群效率评估.方法 应用多重PCR进行同步核酸鉴定及基因分群.平板菌落计数法评估敏感性,基因序列分析确定特异性.结果 PCR敏感性为83个菌落形成单位(CFU)/反应;多重PCR分群效率(100%)优于血清凝集法(82.02%).差异有统计学意义.其中带菌者分离株基因分群效率为100%,血清凝集法为65.71%;对与血清凝集分群法结果不同的菌株进行基因测序,分析结果与PCR分群结果相符;分离株菌群分布为A群60.69%,B群24.69%,C群14.62%,未检出其他群别.结论 所建立的基因鉴定及分群方法敏感性和特异性均优于血清凝集法,分群效率优于血清凝集法.     

瑞典儿童对DTP的白喉抗毒素应答、免疫持久性及加强免疫的时间

本文根据两项瑞典百日咳疫苗试验的资料 ,对不同组分和批次疫苗及不同接种程序所诱生的白喉抗毒素水平及其消长动态进行比较。试验 是以白喉、破伤风类毒素 ( DT)为对照的疫苗效力试验 ,对象为 1 32 6名1 992年出生的儿童 ,采用 2、4、6月龄 ( 2 - 4 - 6 )程序进行基础免疫 ,所用疫苗分别为两种无细胞百日咳疫苗 DTP( DTPa2、DTPa5 ,其中数字代表所含百日咳杆菌抗原组分数 )和一种全细胞百日咳疫苗 DTP( DTPw- C) ,5岁时再用 DTPa5或 DT加强 1剂。试验 的对象为 1 993～ 1 994年出生的儿童 ,其中 30 6名于 2、4、6月龄 ( 2 - 4 …     

浙江省健康人群抗脑膜炎奈瑟菌抗体监测分析

目的:了解浙江省健康人群抗脑膜炎奈瑟菌抗体水平。方法:浙江省10个市对8个年龄组健康人群采集静脉血4584份,用酶联免疫吸附法测定A和C群Nm多糖抗体(IgG),抗体含量≥2μg/ml为保护水平。结果:4584份血清中,A群IgG抗体≥2μg/ml者3388份,保护率73.91%;C群IgG抗体≥2μg/ml者2322份,保护率50.65%。不同年龄组人群Nm多糖抗体水平差别有统计学意义(P均<0.01)。不同地区人群Nm多糖抗体水平差别也有统计学意义(P均<0.01)。结论:浙江省健康人群A群抗体处于75%的临界水平,C群抗体处于相对低水平。我省A群发生大流行的可能性不大;C群一旦有传染源传入易引起局部暴发流行。建议继续加强A+C群MPV的接种。     

浙江省首次间接免疫荧光法证实输入性登革热病例

登革热(DF，Dengue，fever)是一种全球性急性虫媒传染病，由登革热病毒(DV，Dengue，virus)引起。登革热流行于热带和亚热带60个国家及地区，以东南亚国家最为严重。我国自1978年广东省佛山登革热暴发以来，共发生13次流行。浙江省以前尚未证实有登革热病例。2003年，我们用间接免疫荧光法检测登革热抗体(以下简称IFAT)，发现了2例输入性病例，现报告如下。     

麻疹血凝抑制试验中猴血球冷冻保存的研究

目的:延长新鲜猴血球保存期,解决麻疹血凝抑制试验中猴血球来源紧张问题.方法:猴子静脉无菌采血后置阿氏液中,将阿氏液保存的猴血球经500 r/min离心10 min,弃上清收取浓缩猴血球,与等量血球冷冻保存液混合,室温缓慢搅拌15 min后,分装保存于液氮中.结果:将液氮冷冻保存9个月的猴血球与新鲜猴血球比较,其对麻疹血凝素的敏感性和麻疹血凝抑制抗体的测定结果没有统计学差异(u=0.0123.P>0.5).结论:用液氮冷冻猴血球获得成功,并能替代新鲜猴血球.     

浙江省2005～2007年健康人群白喉抗体水平监测分析

目的 了解浙江省健康人群白喉抗体状况.方法 2005～2007年在浙江省9个设区的市13个监测点,对2～4、6～8、13～15、25～39岁健康人群3 136人采集血清,采用间接血凝试验进行了白喉抗体水平监测.结果 4个年龄组的白喉抗体保护率分别为83.89%、72.82%、71.11%、47.04%,平均72.35%;抗体几何平均浓度为0.061 21U/ml.结论 浙江省健康人群已形成了较好的免疫屏障,预测近期不会出现白喉流行.     

浙江省9株猪链球菌2型分离株Cps2J全基因克隆与序列分析

目的了解浙江猪链球菌2型(SS2)分离株的分子基础及与国内外其他分离株的基因差异程度,确定Cps2J基因变异位点和频率,为该地区的猪链球菌防治提供科学依据。方法提取菌株DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增菌株Cps2J基因全片段,克隆入质粒载体,纯化后采用ABI自动测序仪测定序列,并同国内外其他分离株的基因进行比较。结果扩增出9株菌株的Cps2J基因的完整开放阅读框(ORF)都为999bp,编码333个氨基酸,9株菌株Cps2J片段核苷酸高度同源,同源性在99.7%～100%;与国内外其他的SS2核苷酸的同源性为98.8%～99.0%,与猪链球菌1型的同源性只有56.8%～57.0%。结论9株浙江省猪链球菌2型分离株Cps2J基因序列非常保守,这些不同来源的菌株可能有相同的起源。     

2007-2008年浙江省流感嗜血杆菌带菌调查及分型研究

目的了解浙江省5岁以下儿童鼻咽部流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza,Hi)的携带状况,探讨浙江省不同监测点Hi在各型中的分布、流行及变异情况。方法采集301份5岁以下健康幼儿咽拭子,将分离得到的43株Hi及28株患儿痰液分离的Hi,结合使用传统的生物分型、血清分型及近年发展的脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型方法Hi进行比较和分析。采用K-B法检测其中51株Hi对12种抗生素的敏感性。根据PFGE分型的结果,利用Bionumerics 软件分析各菌株之间的变异情况或同源性。结果从301名健康幼儿中共分离到43株Hi,其中2株为Hib血清型,携带率0.7%。其余41株均为不可分型流感嗜血杆菌（NTHi）,携带率13.6%。71株（43+28）Hi共检出7个生物型,以Ⅱ、Ⅲ两种生物型为主,分别占38.0%（27/71）和39.4%（28/71）。Hi对大多数抗生素较敏感（敏感率均高于89.7%）,以复方新诺明的耐药率最高（67.2%）。临床分离的Hi株青霉素酶产生率显著高于健康幼儿携带的Hi株。28株临床分离的Hi中检出2株BLNAR（-内酰胺酶阴性耐氨苄西林）株,检出率为7.1% (2/28)。51株菌共分为35个PFGE型,提示菌株之间变异程度大,同源性低。结论浙江省幼儿携带的Hi以不可分型为主,Hib携带率较低,这可能是侵袭性Hib疾病报告发病率低的原因。临床分离的Hi中, BLNAR株的检出率为7.1%,应该引起重视。