妊娠大鼠低铅暴露对子代海马GFAP表达影响

目的观察母体孕期低水平铅暴露对子代大鼠海马组织胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）和mRNA表达的影响，探讨铅影响学习记忆的分子机制。方法孕鼠随机分为4组，自怀孕1d起分别给予蒸馏水、125，250，500mg／L醋酸铅饮水，直到仔鼠出生。分别在仔鼠出生后1，21，60d，采用免疫组化和原位杂交方法观察海马CA1区GFAP蛋白和mRNA表达的变化。结果各染铅组仔鼠1，21d时海马CA1区GFAP蛋白和mRNA阳性细胞数显著高于对照组（P〈0．05），而60d时未见明显差异。结论妊娠期母体低水平铅暴露可以使仔鼠海马CA1区GFAP蛋白和mRNA表达增加，这可能是铅影响学习记忆的分子机制之一。     

孕哺期壬基酚暴露对雄性仔鼠肾上腺TNF-α、IL-1β表达的影响

目的观察母鼠在孕期和哺乳期壬基酚(NP)暴露对雄性仔鼠肾上腺TNF-α和IL-1β表达水平的影响及血清中激素水平的变化。方法根据妊娠时间将32只孕鼠随机分为对照组及低、中、高剂量暴露组;消化道暴露,暴露剂量分别为0、25、50、100 mg/(kg·d);暴露时间为受孕第6 d到出生后21 d(仔鼠哺乳结束)。免疫组织化学法检测仔鼠出生后21、60 d肾上腺TNF-α和IL-1β表达;放免法检测血清中激素水平的变化,并分析上述变化与NP暴露之间的关系。结果与对照组比较,低、中、高剂量组21、60 d TNF-α和IL-1β光密度增高(F=4265.850;96.191及428.759;1519.815,P<0.05),随给药剂量和给药时间的增加,21、60 d时的光密度增高,与NP暴露剂量呈正相关。血清睾酮水平随NP暴露剂量增加而降低,雌二醇水平随NP暴露剂量的增加而增加。结论 NP孕期暴露使仔鼠肾上腺炎性介质TNF-α和IL-1β表达增加,炎症性反应可能是NP引起仔鼠肾上腺损伤的机制,而肾上腺的损伤可能导致肾上腺功能异常并进而影响仔鼠的血清激素水平。     

出生前后电磁波暴露对大鼠海马组织神经胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨出生前后暴露于1800 MHz电磁波对大鼠海马组织神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响。方法出生前暴露指孕期暴露，32只SD孕鼠用完全随机方法分为对照组、低功率出生前暴露组和高功率出生前暴露组，暴露组分别用0.5和1.0mW/cm2的1800 MHz连续射频电磁波对孕鼠进行21 d全身暴露（12h/d）后，测定受暴露动物产出的仔鼠海马组织GFAP的表达。出生后暴露为32只4周龄SD大鼠用完全随机方法分为对照组、高功率暴露组和低功率暴露组，暴露组暴露剂量及方式与出生前暴露相同。暴露完成后测定仔鼠海马组织GFAP的表达，并比较相应两组之间仔鼠海马组织GFAP阳性表达产物平均光密度（MOD）值。结果出生前低功率暴露组仔鼠海马组织GFAP表达下调；出生后低、高功率暴露组SD大鼠GFAP的表达与对照组比较差异均无统计学意义。结论孕期暴露大鼠海马组织GFAP对模拟移动电话的低功率电磁波（0.5 mW/cm2）更为敏感，孕期高功率（1.0 mW/cm2）和出生后低、高功率电磁波暴露对大鼠海马组织GFAP表达均无影响。     

孕期低水平铅暴露对子代大鼠海马神经生长相关蛋白表达的影响

目的 观察孕鼠低水平铅暴露后子代大鼠海马组织神经生长相关蛋白(GAP-43)及其mRNA表达的变化,探讨铅对学习记忆影响的分子机制.方法 孕鼠随机分为对照组及低(125 mg/L)、中(250 mg/L)、高(500 mg/L)3个不同剂量染铅组,每组8只.各组母鼠自受孕1 d起分别给予蒸馏水、125、250、500 mg/L醋酸铅饮水,直到仔鼠出生.分别在仔鼠出生后1、21,60 d取大脑海马组织,氢化物-原子吸收光谱法测定仔鼠海马铅含量,免疫组化和原位杂交方法检测海马CA1区GAP-43蛋白及其mRNA表达的变化.结果 出生后1、21 d时低、中、高剂量染铅组海马铅含量分别为(1.64±0.32)、(2.33±0.42)、(3.28±0.58)μg/L和(0.94±0.18)、(1.27±0.26)、(1.79±0.42) μg/L,与对照组相比,铅含量明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).出生后1 d各剂量染铅组和出生后21 d中、高剂量染铅组CA1区GAP-43蛋白和mRNA表达的积分吸光度均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),而在60 d时未见明显改变.结论 孕鼠低水平铅暴露后,可以降低子代海马GAP-43蛋白及其mRNA的表达,这可能是铅影响学习记忆的分子机制之一.     

围产期暴露壬基酚对仔鼠肝脏增殖细胞核抗原表达的影响

目的观察母鼠孕期和哺乳期暴露于壬基酚(NP)对子代肝脏增殖细胞核抗原(PCNA)的影响。方法试验分为2组:包括NP染毒组(NP 200 mg/kg·bw)和对照组(花生油)。母鼠受孕第6 d到仔鼠出生后21 d灌胃染毒壬基酚,60 d后剖杀仔鼠,检测肝脏PCNA的表达,并检测肝脏功能(包括血总蛋白TP、白蛋白ALB、前白蛋白PA、球蛋白GLB)。结果与对照组比较,NP暴露组60 d PCNA阳性细胞数明显增多(P0.01),积分光密度增高(P0.01)。经检测仔鼠的TP、ALB(P0.05)与对照组差异有统计学意义,而PA、GLB(P=0.194、0.644)与对照组相比较差异无统计学意义。结论 NP暴露使仔鼠肝脏组织PCNA的表达增加,即处于增殖状态的细胞增多,并且可能对肝脏功能产生一定影响,提示NP对肝脏具有损伤作用。     

发育期铅暴露对大鼠海马GDNF蛋白表达影响

目的观察孕鼠低水平铅暴露对仔鼠海马胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响。方法母鼠孕哺期分别给予双蒸水,0.05%,0.20%,醋酸铅水溶液,断乳后仔鼠给予与其母鼠相同饮用水;采用蛋白印迹法观察出生后1,3,7,14,21,28 d仔鼠海马GDNF表达变化;石墨炉原子吸收光谱法测定出生后28 d仔鼠血铅、海马铅含量;水迷宫实验观察出生后56 d仔鼠学习记忆能力变化。结果 0.05%及0.20%醋酸铅组仔鼠寻找平台时间[(16.43±2.89),(24.85±4.44)s]与对照组比较[(9.01±1.60)s],明显增加(P0.01),呈剂量效应关系;0.20%醋酸铅组仔鼠海马1,3,7,28 d GDNF表达分别为(0.61±0.018),(0.71±0.026),(0.70±0.03),(0.62±0.033),与对照组(0.74±0.048),(0.86±0.016),(0.97±0.023),(0.88±0.03)比较呈下降趋势(P0.05,P0.01),且存在剂量依赖性和时间表达差异。结论孕鼠低水平铅暴露致仔鼠海马GDNF表达减少可能是铅影响学习记忆的分子机制之一。     

孕期低水平铅暴露对子代大鼠海马肾母细胞瘤过度表达基因的影响

目的 观察孕鼠低水平铅暴露对子代大鼠海马组织肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)蛋白及mRNA表达的影响,探讨铅影响学习记忆的分子机制.方法 孕鼠随机分为对照组及低剂量(125 mg/L)、中剂量(250 mg/L)、高剂量(500 mg/L)3个染铅组,每组8只.母鼠自受孕1d起分别给予蒸馏水和不同剂量的醋酸铅饮水,直到仔鼠出生.分别在胚胎18 d及仔鼠出生后1、21、60 d时,采用氢化物-原子吸收光谱法测定仔鼠血铅、海马铅含量,免疫组化和原位杂交方法 检测海马NOV蛋白及mRNA的变化.结果 低、中、高剂量染铅组胚胎18d及仔鼠出生后1、21 d时,血铅[(312.46±43.55)、(419.35±62.25)、(541.45±47.90)μg/L、海马铅[(2.10±0.18)、(2.58±0.12)、(3.41±0.23)μg/L]明显高于对照组[分别为(214.31±40.77)、(0.76±0.13)μg/L伽,差异有统计学意义(P<0.05),至60 d龄时,染铅组仔鼠血铅、海马铅含量与对照组无明显差异.免疫组化结果 显示,中、高剂量染铅组在仔鼠出生后1、21 d时,NOV蛋白表达量明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),60 d龄时无明显差异.原位杂交结果 显示,各染铅组在胚胎18 d及仔鼠出生后1、21 d时,NOV mRNA表达量明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),60d龄时,仅高剂量组NOV mRNA表达量(0.0355±0.0100)与对照组(0.0900±0.0200)的差异有统计学意义(P<0.01).结论 孕期低水平铅暴露可使子代海马组织中NOV蛋白及其mRNA表达降低,这可能是铅影响学习记忆能力的分子机制之一.     

出生后早期接触功夫菊酯对仔鼠大脑突触蛋白表达的影响

目的 观察出生后早期功夫菊酯(LCT)染毒对ICR仔鼠不同脑区突触蛋白表达的影响.方法 健康清洁级ICR小鼠按2∶4(雄∶雌)合笼受孕,出生小鼠每窝随机分为5组,分别为0.1、1.0和10.0 mg/kg LCT染毒组及溶剂对照组(0.01%二甲亚砜)和生理盐水对照组,每组雌雄各4只,仔鼠出生当天为出生后第0天(PND 0),PND5开始灌胃染毒,隔天1次,连续5次,PND14取材.蛋白质印迹法检测皮层、海马、纹状体突触蛋白的表达.结果 与溶剂对照组比较,各染毒组雄性仔鼠和10.0mg/kg组雌性仔鼠海马组织及1.0、10.0 mg/kg组雄性仔鼠和10.0 mg/kg组雌性仔鼠皮层胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),且有剂量相关性(雄性:r海马=0.986,r皮层=0.945;雌性:r诲马=0.993,r皮层=0.969,P＜0.05);仔鼠各脑区的β微管蛋白Ⅲ型(Tuj)表达无明显改变;10.0 mg/kg组雄性仔鼠和各染毒组雌性仔鼠的海马及10.0 mg/kg组雌性仔鼠皮层生长相关蛋白43(GAP-43)表达升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),且有剂量相关性(雄性:r海马=0.882;雌性:r海马=0.997,r皮层=0.99,P＜0.05);仔鼠各脑区的突触蛋白Ⅰ(Synapsin Ⅰ)表达无明显改变.10.0 mg/kg组雄性仔鼠海马、纹状体及雌性仔鼠皮层组织,各染毒组雌性仔鼠海马组织及1.0、10.0 mg/kg组纹状体组织突触后致密蛋白95(PSD95)表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05),PSD95表达与染毒剂量呈依赖性下降(雄性:r海马=-0.991;雌性:r纹状体=-0.996,r皮层=-0.995,P＜0.05).结论 出生后早期接触LCT,对仔鼠大脑突触蛋白的表达均有一定的影响;提示LCT可能影响仔鼠大脑突触联系的构建.

Abstract：

Objective To evaluate the influence on the synaptic protein expression in different brain regions of ICR mice after lambda-cyhalothrin (LCT) exposure during postnatal period. Methods Two male and 4 female healthy ICR mice were put in one cage. It was set as pregnancy if vaginal plug was founded.Offspring were divided into 5 groups randomly, and exposed to LCT (0.01% DMSO solution) at the doses of 0.1, 1.0 and 10.0 mg/kg by intragastric rout every other day from postnatal days (PND) 5 to PND13, control animals were treated with normal saline or DMSO by the same route. The brains were removed from pups on PND14, the synaptic protein expression levels in cortex, hippocampus and striatum were measured by western blot. Results GFAP levels of cortex and hippocampus in the LCT exposure group increased with doses, as compared with control group (P＜0.05), while Tuj protein expression did not change significantly in the various brain regions of ICR mice. GAP-43 protein expression levels in the LCT exposed mouse hippocampus and in female ICR mouse cortex increased with doses. as compared with control group (P＜0.05). Presynaptic protein (Synapsin Ⅰ) expression levels did not change obviously in various brain regions. However, postsynaptic density protein 95 (PSD95) expression levels of the hippocampus and striatum in male offspring of 10.0 mg/kg LCT group, of cortex of female LCT groups, and of female offspring in all exposure groups, of striatum, in 1.0 or 10.0 mg/kg LCT exposure groups significantly decreased (P＜0.05). Conclusions Early postnatal exposure to LCT affects synaptic protein expression. These effects may ultimately affect the construction of synaptic connections.     

生命早期PM_(2.5)暴露对大鼠海马突触可塑性及Wnt/β-连环蛋白通路的影响

目的探讨生命早期PM_(2.5)暴露对大鼠仔鼠海马突触可塑性发育及Wnt/β-连环蛋白通路的影响。方法选择36只健康7周龄SPF级SD大鼠,雌雄2∶1交配,孕鼠随机分为对照组、低剂量PM_(2.5)组、高剂量PM_(2.5)组,每组8只。采用细颗粒物实时染毒系统给予孕鼠PM_(2.5)暴露,低、高浓度分别约为2014—2017年唐山市区年均PM_(2.5)浓度的2倍和4倍。母鼠从孕0日开始实时暴露浓缩的PM_(2.5),至仔鼠出生后21天(postnatal day 21,PND21),断乳后仔鼠继续暴露至PND42。PND21和PND42仔鼠进行Morris水迷宫及新物体识别实验。Western blot法测定仔鼠海马突触后致密物(postsynaptic density-95,PSD-95)、突触素(synaptophysin,SYN)、生长相关蛋白(growth associated protein-43, GAP-43)、糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、β-连环蛋白表达水平及GSK-3β和β-连环蛋白的磷酸化水平(p-GSK-3β、p-β-连环蛋白)。结果与对照组相比,PM_(2.5)暴露组PND21和PND42仔鼠学习记忆能力明显下降,且随着PM_(2.5)暴露剂量的增加,下降趋势更为明显。与对照组相比,PM_(2.5)暴露组PND0仔鼠海马组织SYN、GAP-43、PSD-95蛋白表达水平均降低(P0.05),PND21和PND42仔鼠的SYN蛋白表达水平降低,仅高剂量组PSD-95蛋白表达水平下降(P0.05),低剂量组PND42仔鼠GAP-43蛋白表达水平降低(P0.05)。与低剂量组相比,高剂量组PND0、PND21仔鼠的GAP-43和PND0、PND42仔鼠的PSD-95蛋白表达水平均降低(P0.05)。与对照组相比,PM_(2.5)暴露组PND0、PND21和PND42仔鼠海马p-GSK-3β蛋白表达水平降低(P0.05),且随着PM_(2.5)暴露剂量的升高,变化趋势更为明显;其中高剂量组PND0和PND42仔鼠海马p-β-连环蛋白表达水平明显增多(P0.05)。与对照组相比,高剂量组PND21仔鼠p-β-连环蛋白表达水平均明显降低(P0.05)。结论生命早期PM_(2.5)暴露可损伤大鼠仔鼠海马突触可塑性发育,降低仔鼠海马组织Wnt/β-连环蛋白通路中β-连环蛋白及p-GSK-3β的蛋白表达水平。     

生后早期镧暴露对大鼠海马基质金属蛋白酶–9表达影响

目的探讨出生后镧暴露对大鼠海马基质金属蛋白酶–9(MMP–9)蛋白和mRNA表达水平影响。方法将Wistar孕鼠随机分为对照组和低、中、高剂量染镧组,自孕鼠分娩至仔鼠断乳后1个月通过自由饮水染镧。采用Western blot法检测仔鼠海马MMP–2和MMP–9蛋白表达,Real-Time PCR法检测仔鼠海马MMP–2/9和Timp–2/1mRNA表达。结果与对照组比较,中、高剂量染镧组仔鼠海马MMP–9蛋白表达水平[分别为(0.172±0.017)、(0.236±0.022)]、mRNA表达水平[分别为(1.267±0.102)、(1.456±0.081)]均显著升高(P<0.05)。与对照组比较,高剂量染镧组仔鼠海马Timp-1 mRNA表达水平(0.784±0.034)显著降低(P<0.05)。结论镧可上调仔鼠海马MMP–9蛋白和mRNA表达,下调Timp–1 mRNA表达,诱导MMP–9活化进而降解紧密连接蛋白,致使血脑屏障破坏。     

剖宫产仔鼠行为认知能力与nNOS表达变化

目的探讨剖宫产出生仔鼠行为认知能力和脑型一氧化氮合酶(neural nitric oxide synthase,nNOS)表达变化。方法妊娠大鼠随机分为2组:阴道产和剖宫产组;剖宫产组于孕21 d剖宫取仔鼠。对生后30和115 d的仔鼠先行Morris水迷宫行为学测试,并分别于出生7、30和115 d后处死仔鼠,免疫组化检测额叶皮质、海马和纹状体中nNOS表达。结果行为学测试:出生115 d成年鼠的逃避潜伏期阴道产组为(19.36±10.51)s,低于剖宫产组的(30.51±14.11)s(P<0.05);免疫组化结果显示:出生30 d幼鼠额叶皮质的nNOS阳性细胞剖宫产组(3.60±2.07)高于阴道产组(1.20±0.45)(P<0.05),海马中剖宫产组(5.80±1.79)明显高于阴道产组(1.20±0.45)(P<0.001),纹状体中阴道产组(0)明显少于剖宫产组(21.4±9.13)(P<0.001);出生115 d成年鼠海马中的nNOS阳性细胞阴道产组(2.00±0.71)低于剖宫产组(3.80±1.48)(P<0.05)。结论剖宫产仔鼠幼年皮质、纹状体nNOS表达上调在成年后恢复正常,但在海马中则持续到成年后,并引起行为认知能力异常,提示剖宫产对仔鼠海马区造成影响可能更持久,并使与海马相关的空间记忆和学习能力受到损害。     

孕哺期铅暴露对雄性子代大鼠海马组织中沉默信息调节因子表达的影响

目的探讨大鼠孕期及哺乳期铅暴露对雄性仔鼠海马组织中沉默信息调节因子(silent information regulator1,SIRT1)表达的影响。方法将12只健康SPF级雌性SD孕鼠随机分为3组,分别为对照组(去离子水)、低剂量铅暴露组(0.5 g/L乙酸铅)和高剂量铅暴露组(2.0 g/L乙酸铅),每组4只。采取自由饮水的方式进行染毒,自妊娠第1天开始至仔鼠21 d断乳为止。在仔鼠断乳后,采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)检测6只雄性仔鼠全血和海马组织中铅的含量,采用RT-PCR检测6只雄性仔鼠海马组织SIRT1 mRNA水平的变化,采用Western blot和免疫荧光组织化学法检测6只雄性仔鼠海马组织SIRT1蛋白水平的变化。结果孕哺期不同剂量铅暴露后,雄性仔鼠血铅和海马组织中铅含量均高于对照组,海马中SIRT1 mRNA和蛋白水平的表达均低于对照组,且高剂量铅暴露组仔鼠海马中SIRT1mRNA和蛋白水平低于低剂量组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论孕哺期铅暴露可下调仔鼠海马中SIRT1基因表达,从而可能影响海马神经元功能及仔鼠学习记忆能力。     

母婴分离对大鼠成年后海马星形胶质细胞的影响

[目的]研究生后早期长期反复母婴分离对子代大鼠成年后海马星形胶质胶质细胞的影响.[方法]新生大鼠分为母婴分离组和对照组,每组分别有雄性和雌性大鼠各10只.母婴分离组大鼠于生后第2 d至生后第14 d每日与母鼠分离3 h,对照组大鼠不受干扰.各组大鼠于生后第60 d处死.采用免疫组化方法分析各组大鼠背侧和腹侧海马星形胶质细胞标记物(GFAP和S100β)的表达.[结果]双因素方差分析显示:与对照组相比,母婴分离组雄性大鼠成年后腹侧海马GFAP和S100β染色阳性细胞数显著减少(P＜0.05);背侧海马星形胶质细胞中GFAP和S100β平均光密度明显下降(P＜0.001).[结论]母婴分离可使子代雄性大鼠成年后腹侧海马星形胶质细胞数量减少,背侧海马星形胶质细胞中GFAP和S100β含量下降.     

纳米铅和常规铅暴露对仔鼠海马及皮质氧化损伤的比较研究

目的比较纳米铅和常规铅暴露对生长发育期仔鼠海马及皮质的氧化损伤作用。方法将30只健康妊娠SPF级SD大鼠随机分为3组,分别为对照(生理盐水)组、纳米铅(10 mg/kg)组和常规铅(100 mg/kg)组,每组10只。采用经口灌胃方式进行染毒,自母鼠妊娠至仔鼠断乳(PND21)。记录仔鼠的出牙时间、睁眼时间、翻正反射时间、爬行时间、张耳时间、断崖回避时间,采用Morris水迷宫对PND21仔鼠进行学习记忆能力测试,分别于PND1、PND21检测仔鼠海马和皮质中的铅、活性氧(ROS)、蛋白质糖基化终产物(AGEs)含量和抑制羟自由基能力。结果与对照组比较,纳米铅及常规铅暴露后仔鼠翻正反射时间、爬行时间及张耳时间延长,学习记忆能力降低;皮质、海马中铅、ROS和AGEs含量增高,而抑制羟自由基能力降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与常规铅组比较,纳米铅组PND21仔鼠皮质和海马中ROS水平均升高,PND1时纳米铅组仔鼠海马抑制羟自由基能力下降,纳米铅暴露组PND21仔鼠海马和皮质中AGEs含量增高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论纳米铅和常规铅染毒可导致仔鼠生长发育期迟缓及皮质、海马的氧化应激,且随着染毒时间延长,纳米铅暴露致仔鼠皮质和海马氧化损伤程度高于常规铅暴露,这可能与纳米材料的特性有关。     

铅对仔鼠学习记忆及海马中CTGF表达影响

目的 探讨母体铅染毒对其仔鼠学习记忆海马组织中结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达的影响,为进一步研究铅的神经毒作用机制提供科学依据.方法 采用自由饮水的方式于母鼠孕哺期染毒,染毒剂量为0.3,1,3 g/L,每组10只,用石墨炉原子吸收光谱仪测定仔鼠出生后7,14,21 d时血液和海马组织中铅含量.用RT-PCR和免疫组化方法 分别测定21 d不同剂量组仔鼠海马组织中CTGF mRNA和蛋白的表达.结果 各剂量染铅组血染、海马组织中铅含量与对照组比较,明显升高(P均<0.05),血液和海马组织的铅含量随着日龄的变化有一定的规律性;迷宫实验中,对照组、0.3,1,3 g/L组平均潜伏期分别为(39.13±6.12)(43.22±9.86),(50.85±12.35),(50.85±12.35)s,与对照组比较,0.3 g/L组差异无统计学意义(P>0.05),与1,3 g/L剂量组比较差异有统计学意义(P<0.05);在对照组、0.3,1,3 g/L组仔鼠海马组织中,CTGF mRNA的相对表达量分别为(0.354±0.603),(0.945±0.522),(1.223±0.279),(1.612±0.136);CTGF蛋白表达的灰度值分别为(126.10±32.11),(186.31±36.17),(220.94±31.27),(286.21±31.24);与对照组比,0.3,1,3 g/L组海马中(CTGFmRNA和蛋白表达明显升高(P均>0.05).结论 孕哺期母体铅暴露可使铅在仔鼠体内人蓄积,引起仔鼠学习记忆力功能损害;铅所引起的神经毒性可能通过铅诱导CTGF mRNA和蛋白的高表达,造成神经系统的损害.     

母鼠孕中期暴露壬基酚对子代大鼠海马组织形态的影响

目的探讨母鼠孕中期暴露壬基酚(NP)对子代大鼠海马组织结构的影响。方法性成熟大鼠按雌雄2∶1合笼饲养交配,再将交配成功的28只母鼠随机分成4组:对照组和低、中、高剂量组,从孕期第9天到第15天空腹灌胃NP,剂量分别为0、50、100、200mg/(kg·d)。剖杀60d龄仔鼠,取海马组织制片,HE染色、尼氏染色及在电子显微镜下观察海马区神经元组织结构的改变,图像处理系统测定海马区尼氏体积分吸光度值(IA)。结果与对照组比较,低剂量组皮质区神经元出现固缩;中、高剂量组海马尼氏体的IA均明显降低(P0.05),高剂量海马区神经元固缩为三角形或多角形,核深染;中、高剂量组神经元细胞均匀化改变,内质网多,细胞普遍水肿,周围组织水肿。结论母鼠孕中期暴露100mg/(kg·d)的NP可致仔鼠海马组织神经元的组织形态构发生改变。     

铅暴露对不同发育阶段仔鼠海马中谷氨酰胺合成酶活力及蛋白表达的影响

目的探讨铅暴露对不同发育阶段仔鼠海马中谷氨酰胺合成酶(GS)活力及蛋白表达的影响。方法将24只孕鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组及0.5、1.0、2.0 g/L铅暴露组,每组6只。采用自由饮水方式进行染毒,母鼠从妊娠第1天至仔鼠断乳(出生后21 d左右);仔鼠从断乳后至出生后(PND)40 d。分别在PND10、20和40 d,测定仔鼠脑组织中铅含量、海马组织中GS活力及其蛋白表达。结果随着铅暴露浓度的升高,仔鼠脑组织中的铅含量呈上升趋势,海马组织中GS活力及其蛋白表达呈下降趋势。结论饮水铅暴露可通过抑制不同发育阶段仔鼠海马中GS蛋白的表达,导致海马中GS活力下降。     

铅对仔鼠海马蛋白激酶C和钙调蛋白基因表达与学习记忆的影响

目的 观察慢性铅染毒对仔鼠海马蛋白激酶C(PKC)、钙调蛋白(CaM)mRNA表达的影响,探讨铅神经毒性的分子机制.方法 孕鼠随机分为对照组、0.2%醋酸铅染毒组和1.0%醋酸铅染毒组,从妊娠第0天开始通过自由饮水染毒.幼鼠出生后,先通过哺乳接触铅,断乳后则自行饮用与其母鼠相同的饮用水.出生后8 d内行悬崖回避试验,50 d行跳台试验,随后处死仔鼠,原子吸收光谱法测定脑铅含量,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法观察各组仔鼠海马PKC、CaM的mRNA表达情况.结果 同一发育时期的染铅组仔鼠脑铅含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);同一剂量染铅组出生后50 d仔鼠脑铅含量明显高于生后8 d,差异有统计学意义(P＜0.01).染铅组仔鼠悬崖回避试验完成率和跳台学习成绩明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).不同发育时期的1.0%醋酸铅染毒组仔鼠海马的PKC、CaM的mRNA表达下降(分别为0.53±0.04、0.59±0.02和0.65±0.01、0.62±0.01),与相应的对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 慢性铅染毒可使仔鼠海马PKC、CaM的mRNA表达降低,这可能是铅致仔鼠学习记忆功能损害的分子机制之一.     

慢性应激抑郁模型大鼠胶质纤维酸性蛋白和c-fos基因水平变化

目的 探讨孤养和慢性不可预知的温和应激(CUMS)对抑郁模型大鼠海马星形胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和c-fos基因表述的影响.方法 选取无特定病原体(SPF)级雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组和模型组,应用孤养和CUMS建立抑郁模型,刺激时间8周,免疫组化法检测海马GFAP和c-fos基因的表达.结果 模型组大鼠海马区GFAP表达增强,阳性细胞数增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);而c-fos随着应激时间的延长,表达减弱.结论 孤养和CUMS可诱发抑郁,通过神经胶质细胞内GFAP和c-fos表达的变化,进而影响机体的行为及学习认知功能.     

亚急性砷暴露对小鼠海马区胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨亚急性砷暴露对小鼠海马各区星形胶质细胞的影响。方法将昆明种小鼠随机分为对照组及低、中和高剂量染毒组。以自由饮水方式饮含砷水,对照组小鼠饮蒸馏水。染毒8周后,心脏灌流固定,取大脑,进行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色,分析砷对小鼠海马各区GFAP表达情况,判断其对星形胶质细胞的影响。结果雌鼠海马CA1、CA3和DG区的GFAP积分光密度(IOD)值均先升高而后下降;在海马CA1和DG区,低剂量组的IOD值最高,并显著高于对照组,而高剂量组的IOD值则显著低于对照组;但在海马CA3区,低、中剂量组的IOD值均显著高于对照组,以中剂量组的IOD值最高,而高剂量组则显著低于对照组。雄鼠海马CA1和DG区GFAP的IOD值也先升高而后下降,中剂量组的IOD值最高,并显著高于对照组;但在海马CA3区,IOD值随染砷剂量的增加不断增高,高剂量组的IOD值最高,并显著高于对照组。结论低水平砷暴露可使小鼠海马星形胶质细胞活化,而高水平砷暴露会损伤海马星形胶质细胞;雌鼠海马星形胶质细胞对砷作用比雄鼠敏感;而无论雌、雄鼠,其海马CA1和DG区星形胶质细胞对砷的作用比CA3区敏感。 更多还原