氯化镧对大鼠大脑皮质即早基因表达的影响

目的 研究大鼠生长发育期氯化镧(lanthanum chloride,LaCl3)暴露对大鼠大脑学习记忆能力和皮质即刻早期基因c-jun、egr1和Arc表达的影响.方法 将40只Wistar孕鼠随机分为饮用0.25%、0.5%、1.0%LaCl3蒸馏水溶液的3个染毒组和饮用蒸馏水的对照组.染毒组仔鼠断乳后继续分别自行...     

UVC照射V79细胞后培养液对旁观者细胞影响

目的 探讨ultraviolet C诱导的旁观者效应的可能机制.方法 用辐射强度为9mJ/cm2 UVC照射V 79细胞20 s,分别在第4、8、12h取靶细胞辐照条件培养基(ICM)培养正常细胞24h.四甲基偶氮唑盐法测定细胞存活率;观察染色体畸变;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 随着ICM时段的往后推移,细胞的存活率逐渐上升,4、8、12h时段ICM培养的细胞存活率分别为(61.5±3.9)％、(78.8±3.3)％、(84.2±4.1)％,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);染色体畸变率下降,4、8、12 h时段染色体畸变率分别为12.33％、8.67％、5.67％;细胞凋亡率逐渐降低,4、8、12h时段细胞凋亡率分别为(20.78±2.38)％、(13.45 +1.99)％、(10.51±1.53)％,与对照组(3.04±0.39)％比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 用照射剂量为180mJ/cm2 UVC处理靶细胞后的ICM能够诱导出明显旁观者效应,其表现为细胞凋亡.     

妊娠期至生长发育期氯化镧暴露致仔鼠学习记忆能力的损伤及对海马ERK/CREB信号转导通路的抑制作用

目的 探讨氯化镧暴露对仔鼠学习记忆能力的损伤作用及对ERK/CREB信号转导通路的抑制作用.方法 将60只雌性Wistar大鼠随机分为对照(饮用蒸馏水)组和低(0.25％)、中(0.5％)、高(1％)浓度氯化镧染毒组.从雌鼠受孕第0天起通过自由饮水染毒至仔鼠断乳,仔鼠断乳后通过自由饮用与原剂量相同的氯化镧水溶液染毒至断乳后1个月.采用Morris水迷宫试验测定仔鼠的学习记忆能力,采用western blot法测定仔鼠海马p-ERK1/2和p-CREB蛋白的表达水平.结果 在定位航行试验和空间探索试验中,与对照组比较,不同浓度氯化镧染毒组仔鼠的逃避潜伏期和游泳距离均延长,在目标象限停留时间均缩短,差异有统计学意义(P＜0.05);且均具有剂量-反应关系(P＜0.05).与对照组比较,不同浓度氯化镧染毒组仔鼠海马中p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达水平均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着氯化镧染毒浓度的升高,仔鼠海马中p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达水平均呈下降趋势.结论 氯化镧可造成仔鼠的学习记忆损伤,其对于ERK/CREB信号转导通路的抑制可能是相关作用机制之一.     

ERCC2/XPD单核苷酸多态与苯并芘体外诱导DNA加合物损伤的关联性研究

目的评价环境致癌因子苯并芘(B[a]P)所致DNA损伤修复与ERCC2/XPD单核苷酸多态(SNP)的关联。方法收集282例辽宁地区汉族健康人群外周血8ml,常规提取淋巴细胞及DNA,采用Taqman实时定量PCR检测ERCC2/XPDLys751Gln(rs13181),Asp312Asn(rs1799793)和Arg156Arg(rs238406)的基因型;体外培养淋巴细胞,应用B[a]P及S9活化系统,诱导BPDE-DNA加合物的形成;高效液相色谱法检测BPDE-DNA加合物含量;分析BPDE-DNA加合物水平与ERCC2/XPD SNP位点的关联。结果携带ERCC2/XPD Arg156Arg位点AA基因型个体BPDE-DNA加合物水平显著高于CC基因型携带者;50～70岁和≥70岁年龄组人群的加合物水平高于≤30岁年龄组(P<0.05);多元线性回归分析同样显示,ERCC2/XPD Arg156Arg位点SNP及年龄对BPDE-DNA加合物含量的影响有统计学意义(P<0.05)。结论 ERCC2/XPD Arg156Arg位点A等位基因可能与BPDE-DNA加合物的DNA修复能力降低相关联,可能会增加肿瘤易感风险。     

镧对子代大鼠学习记忆能力、海马神经细胞钙稳态及ERK蛋白表达的影响

雌性Wistar大鼠随机分为4组,对照组饮用蒸馏水,3个染毒组分别饮用不同浓度的氯化镧(2.5 g/L,5 g/L,10 g/L)水溶液,从雌鼠受孕起至子鼠断乳后1个月连续染镧。采用Morris水迷宫检测子代大鼠学习记忆能力,Fura-2/AM探针法检测海马神经细胞内游离Ca2+浓度,Western blot法检测海马组织ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达水平。结果表明,随氯化镧染毒剂量的增加,子代大鼠寻找平台的潜伏期和游泳距离增加(P<0.05),在目标象限的停留时间减少(P<0.05),神经细胞内游离Ca2+水平升高(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平下降(P<0.05)。提示氯化镧染毒可以造成子代大鼠学习记忆能力下降,其原因可能与其导致神经细胞内钙稳态失衡及p-EPK1/2蛋白表达水平下降有关。 更多还原     

镧对星形胶质细胞增殖能力和细胞内钙浓度的影响

目的 观察氯化镧(LaCl3)对原代培养大鼠星形胶质细胞(astrocyte,AST)增殖能力和细胞内游离钙离子浓度的影响.方法 AST经0.25、0.5、1.0和2.0 mmol/L LaCl3染毒24 h和48 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞染LaCl3后增殖能力的变化;采用Fura-2/AM为荧光指示剂,F-4500型荧光双波长分光光度计测定细胞内游离钙离子浓度.结果 细胞染毒24 h和48 h后,0.25、0.5、1.0和2.0 mmol/L LaCl3剂量组的细胞存活率分别为86.24%和82.99%,82.26%和79.14%,52.32%和49.97%及38.04%和35.15%,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01);染毒24 h在倒置相差显微镜下观察,与对照组比较,1.0 mmol/L组细胞数量明显减少,胞体呈长梭形,胞突增粗,呈树枝状;2.0 mmol/L组上述改变加重,并可见大量脱壁细胞;在染毒24 h后,0.25、0.5、1.0mmol/L LaCl3剂量组细胞内Ca2+浓度分别为(134.41±0.83)、(163.31±3.97)、(224.84±5.51)nmol/L,显著高于对照组[(129.45±1.09)nmol/L](P＜0.05).结论 LaCl3体外染毒可降低AST的增殖能力,其机制可能与其所致的细胞内Ca2+浓度超载有关.     

镧对大鼠大脑皮质兴奋性氨基酸和钙稳态的影响

目的 观察镧对大鼠学习记忆的影响,并从大脑皮质兴奋性氨基酸水平和钙稳态的角度探讨镧影响学习记忆的机制.方法 将40只雌性Wistar大鼠随机分为对照组和低、中、高剂量LaCl_3(0.25%,0.50%,1.0%)染毒组,每组10只.LaCl_3,染毒组仔鼠在出生至断乳后1个啁期间染镧,然后进行跳台测试,并测定大脑皮质中兴奋性氨基酸含量、细胞内钙离子浓度以及尼氏体表达水平.结果 跳台测试结果表明,LaCl_3,染毒组仔鼠的学习记忆能力明显低于对照水平,具有一定的剂量.效应关系;低、中剂量LaCl_3染毒组大脑皮质谷氨酸含量和细胞内Ca~(2+)浓度明显高于对照组,高剂量LaCl_3染毒组大脑皮质谷氨酸、天冬氨酸含量和细胞内Ca~(2+)浓度显著高于对照组和低、中剂量LaCl_3,染毒组.此外,低剂量LaCl_3染毒组大脑皮质神经细胞中尼氏体表达水平明显低于对照组,中和高剂量LaCl_3,染毒组大脑皮质神经细胞中尼氏体表达水平进一步降低.结论 本实验结果表明镧可能是通过使兴奋性氨基酸水平异常升高和钙稳态失衡的机制引起大脑皮质神经细胞损伤,造成学习记忆能力低下.     

卫生毒理学PBL教学方式与预防医学专业学生能力培养的研究

目的 在卫生毒理学理论课和实验课教学中应用以问题为基础的学习(problem-based learning,PBL)方式,评价PBL教学方式的实施效果,探讨卫生毒理学PBL教学方式是否有利于提高预防医学专业学生的多方面能力.方法 中国医科大学预防医学专业2个班级随机确定为PBL方式组和传统方式组.通过课程考试和调查问卷研究PBL方式的应用效果及对学生多方面能力培养的影响. 结果 PBL方式组课程考试分数、优秀率以及对教学方式的满意率均显著高于传统方式组.PBL方式组对"拓宽视野、强化知识记忆、增加学习兴趣、提升自主学习能力、提升独立思索能力、提升语意表述能力、提升创新能力、提升综合研究能力、提升处理问题能力、提升协作交流能力"方面的认可率也显著高于传统方式组. 结论 PBL教学方式能有效提高卫生毒理学教学质量和效果,有利于预防医学专业学生拓宽知识面、强化知识记忆、增加学习兴趣,促进预防医学专业学生多方面能力的培养.     

氯化镧对原代大鼠星形胶质细胞凋亡和细胞周期的影响

目的研究不同浓度的氯化镧对原代大鼠星形胶质细胞凋亡和细胞周期的影响,探讨氯化镧所致神经损伤的机制。方法取新生大鼠大脑皮质进行原代星形胶质细胞分离和培养。在纯化及鉴定细胞后,用0,0.25,0.5,1.0 mmol/L氯化镧(LaC l3)处理24 h后,应用MTT法检测细胞活力,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放,应用倒置相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪法检测细胞凋亡和细胞周期。结果随着LaC l3暴露浓度的增加,细胞活力明显降低,LDH释放明显增加,细胞形态出现不同程度的损伤,细胞凋亡率从0.72%上升至11.6%(P<0.05),G1期细胞指数从78.35%上升至92.11%(P<0.05),S期细胞指数从6.19%下降至1.53%(P<0.05),G2期细胞指数从15%下降至7.09%(P<0.05),均呈现剂量-效应关系。结论氯化镧可诱发原代大鼠星形胶质细胞凋亡,改变细胞周期,从而产生神经毒性。 更多还原