叉头框蛋白A2对肿瘤细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化的影响

目的探讨叉头框蛋白A2(FOXA2)对肿瘤细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化的影响。方法选取河南大学淮河医院2019年6月至2021年10月收治的64例卵巢癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用蛋白质免疫印迹分析肿瘤和癌旁组织中FOXA2蛋白表达水平。采用转染试剂转染对照质粒和FOXA2过表达质粒至人卵巢癌细胞SKOV3, 分别为对照组和观察组。采用划痕实验、Transwell和蛋白质印迹法(Western blot)分析对照组和观察组细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化能力。采用体外移植瘤实验分析两组细胞的迁移能力。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析FOXA2靶基因表达。组间数据比较采用t检验。结果癌旁组织FOXA2蛋白表达水平(1.13±0.24)明显高于卵巢癌组织FOXA2蛋白表达水平(0.47±0.14), 差异有统计学意义(t=18.640, P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(83.67±9.95)%]明显高于观察组细胞划痕愈合率[(56.60±7.06)%], 差异有统计学意义(t=5.452, P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(150.83±18.35)...     

TWIST2通过调控FGF21介导的AMPK/mTOR通路诱导卵巢癌细胞氧化应激和凋亡

目的探究TWIST2对卵巢癌细胞氧化应激和凋亡的作用及相关机制。方法收集2018年6月至2019年10月在山东省妇幼保健院进行治疗的30例卵巢癌患者的癌组织和癌旁组织,将pcDNA3.1-TWIST2质粒(TWIST2组)和pcDNA3.1阴性对照质粒(阴性对照组)分别转染卵巢癌细胞(SK-OV-3和HO-8910),未转染质粒组为空白对照组。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹(Western blot)实验检测组织和细胞中TWIST2 mRNA和蛋白质的表达量;细胞计数试剂盒CCK-8检测TWIST2组、阴性对照组和空白对照组的细胞活力;Western blot实验检测3组的凋亡相关蛋白caspase-3、Bax和Bcl-2,AMPK/mTOR通路相关蛋白FGF21、p-AMPK和p-mTOR的蛋白表达水平;试剂盒检测3组活性氧(ROS)基因、ATP的水平和超氧化物歧化酶(SOD)的酶活性。通过检测不同处理组的细胞凋亡率和ROS水平,研究TWIST2与FGF21的相互作用。结果TWIST2在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中的表达量显著低于癌旁组织和正常卵巢上皮细胞的表达量(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组相比,TWIST2组的细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著提高(P<0.05);ROS的水平显著升高,SOD酶活力、ATP水平、NAD~+/NADH水平显著降低(P<0.05)。TWIST2可以抑制FGF21、p-AMPK、p-mTOR蛋白的表达(P<0.05);在TWIST2组中加入FGF21或AMPK激动剂时,p-AMPK、p-mTOR蛋白表达水平显著升高,卵巢癌细胞的凋亡率和ROS水平显著降低(P<0.05),TWIST2与FGF21的表达量呈负相关(r=-0.6254,P<0.01)。结论TWIST2能够促进卵巢癌细胞氧化应激和凋亡,其作用机制是通过调控FGF21介导的AMPK/mTOR通路来实现的。     

软组织静脉畸形侵袭行为与RhoC表达的相关性

目的 探讨软组织静脉畸形侵袭性与RhoC表达的相关性.方法 收集侵袭性静脉畸形组织、非侵袭性静脉畸形组织及正常皮下组织,采用Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测RhoC蛋白及mRNA的表达.培养静脉畸形内皮细胞(VM-EC),小干扰RNA (siRNA)转染后检测细胞侵袭行为.结果 RhoC在侵袭组表达高于其他两组(P＜0.05),蛋白相对表达量分别为0.383±0.055、0.529±0.134、0.939±0.051,mRNA相对表达量为0.117 ±0.029、0.378±0.130、0.704 ±0.152.RNA干扰后,VM-EC侵袭能力和成血管能力均下降(P＜0.05),干扰前后穿透Matrigel胶的细胞数分别为56 ±6和20 ±4,形成完整血管环数分别为17 ±2和7±2.结论 RhoC是静脉畸形侵袭性发展中的重要蛋白,调控RhoC表达可影响其侵袭性进展.     

CUGBP1在结直肠癌组织中的表达及对细胞增殖和侵袭力的影响

目的 :探讨CUG连接蛋白1(CUGBP1)在结直肠癌组织中的表达,以及特异性沉默结直肠癌SW620细胞中CUGBP1基因表达对细胞增殖和侵袭力的影响。方法:选取2015年3月—2017年12月择期行手术治疗的结直肠癌患者107例,免疫组化法检测结直肠癌和癌旁组织中CUGBP1蛋白表达,培养人结直肠癌SW620细胞,分为干扰序列组、阴性对照组和对照组,实时荧光定量PCR技术检测细胞中CUGBP1基因,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞侵袭力。结果:结直肠癌组织中CUGBP1蛋白阳性表达率77.57%,高于癌旁组织的38.32%,差异有统计学意义(χ2=33.826,P=0.000);结直肠癌组织中CUGBP1蛋白表达与分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P0.05);干扰序列组细胞中CUGBP1 m RNA相对表达量低于阴性对照组和对照组,差异有统计学意义(P0.05);干扰序列组细胞24h、48h、72h和96h时吸光度A值低于阴性对照组和对照组,差异有统计学意义(P0.05);干扰序列组侵袭细胞数少于阴性对照组和对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:CUGBP1蛋白在结直肠癌组织中呈高表达,特异性沉默结直肠癌SW620细胞中CUGBP1基因表达可有效抑制细胞增殖和侵袭力。     

N-myc下游调节基因家族成员3在胃癌细胞增殖和侵袭中的作用

目的探讨N-myc下游调节基因家族成员3(NDRG3)对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法实验分NDRG3敲减组和对照组,AGS-NDRG3小发夹状RNA(shRNA)组采用shRNA技术干扰AGS细胞中NDRG3表达,同时设置AGS-Vector对照组转染空白对照病毒;通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测两组细胞中NDRG3 mRNA和蛋白表达以检查AGS-NDRG3 shRNA组中NDRG3敲减效果,利用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell实验分别检测两组细胞中细胞增殖和侵袭能力,利用流式细胞仪分析两组细胞中细胞周期分布情况,并通过Western blot检测敲减两组细胞中细胞核增殖抗原(Ki-67)和p53蛋白表达水平,组间比较采用单因素方差分析。结果AGS-NDRG3 shRNA组NDRG3 mRNA和蛋白表达水平均显著低于对照组(NDRG3 mRNA,0.220±0.035比1.020±0.078,t=14.713,P<0.01;NDRG3蛋白,0.140±0.018比0.820±0.025,t=7.892,P<0.01),差异均有统计学意义。CCK-8实验结果显示,在培养24、48、72 h后,AGS-NDRG3 shRNA组细胞的增殖水平(0.388±0.025、0.576±0.044、0.873±0.051)明显低于对照组(0.457±0.033、0.674±0.047、1.125±0.062),差异均有统计学意义(t=4.983、5.852、8.082,P<0.01);Transwell迁移实验结果表明,AGS-NDRG3 shRNA组侵袭穿过Transwell小室膜的细胞数[(474.5±27.6)个]明显低于对照组[(1127.0±48.8)个],差异有统计学意义(t=12.380,P<0.01);细胞周期分析显示,敲减NDRG3表达的AGS细胞周期阻滞于S期,其S期占49.33%,对照组S期占30.29%(t=4.634,P<0.01),差异均有统计学意义;Western blot检测结果显示,敲减NDRG3表达后AGS细胞中Ki-67蛋白表达低于对照组(0.380±0.021比0.860±0.036,t=5.163,P<0.01)、野生型p53蛋白表达高于对照组(0.720±0.018比0.160±0.013,t=11.354,P<0.01),差异均有统计学意义。结论NDRG3可能通过调控p53通路促进AGS细胞增殖及侵袭能力。     

微小RNA-142-3p靶向CD133对肝癌细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响

目的观察微小RNA(miR)-142-3p靶向CD133对肝癌细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响。方法选取郑州大学第二附属医院2017年6月至2019年12月手术切除的肝癌组织和对应的癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌旁组织和肿瘤组织miR-142-3p表达水平。采用慢病毒在MHCC97H肝癌细胞建立miR-142-3p过表达和对照细胞系(miR-142-3p组和对照组),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU染色分析两组细胞增殖;采用Transwell分析两组细胞侵袭;采用软琼脂克隆形成实验分析两组细胞干细胞特性;生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-142-3p靶基因;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组增殖、侵袭和干细胞标志物细胞核增殖抗原(Ki-67)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、CD133和Nanog蛋白表达水平,组间比较采用t检验。结果miR-142-3p组细胞miR-142-3p表达水平(0.41±0.12)显著低于癌旁组织miR-142-3p表达水平(1.06±0.25),差异有统计学意义(t=3.081,P<0.05)。miR-142-3p组细胞吸光度(A)值(1.63±0.20)低于对照组细胞A值(2.13±0.22),差异有统计学意义(t=2.918,P<0.05)。miR-142-3p组细胞EdU染色阳性率[(30.48±5.12)%]低于对照组细胞EdU染色阳性率[(87.89±7.28)%],差异有统计学意义(t=3.409,P<0.05)。miR-142-3p组细胞Ki-67蛋白表达水平(0.50±0.13)低于对照组细胞Ki-67表达水平(1.15±0.14),差异有统计学意义(t=2.319,P<0.05)。miR-142-3p组细胞侵袭数量[(67.59±6.01)个]低于对照组细胞侵袭数量[(121.35±6.12)个],差异有统计学意义(t=3.409,P<0.05)。miR-142-3p组细胞MMP-9蛋白表达水平(0.48±0.18)低于对照组细胞MMP-9蛋白表达水平(1.57±0.15),差异有统计学意义(t=2.917,P<0.05)。miR-142-3p组细胞克隆形成率[(31.44±4.51)%]低于对照组细胞克隆形成率[(57.68±7.19)%],差异有统计学意义(t=5.103,P<0.05)。miR-142-3p组细胞Nanog蛋白表达水平(0.51±0.14)低于对照组细胞Nanog蛋白表达水平(1.36±0.17),差异有统计学意义(t=2.514,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示CD133是miR-142-3p的靶基因。miR-142-3p组细胞CD133蛋白表达水平(0.43±0.11)低于对照组细胞CD133蛋白表达水平(1.15±0.13),差异有统计学意义(t=2.514,P<0.05)。结论miR-142-3p通过靶向调控CD133表达水平调节着肝癌细胞增殖、迁移和干细胞特性。     

上调基因-4对结肠癌细胞增殖的影响

目的 探讨上调基因-4(URG-4)对结肠癌细胞增殖的影响.方法 筛选高表达URG-4的结肠癌细胞.构建URG-4基因siRNA的逆转录病毒载体及阴性对照,经PT67细胞包装后,获得可表达人URG-4基因siRNA逆转录病毒及阴性对照.RT-PCR和Western blot法检测MKN45、SW480、LoVo、HCT116、HT29细胞中URG-4 mRNA和蛋白表达水平,筛选稳定转染细胞株.分别使用重组病毒(干扰组)、原始病毒(阴性对照组)和等量PBS(空白对照组)转染结肠癌LoVo细胞.MTT法检测各组结肠癌LoVo细胞生长情况.计量资料比较采用单因素方差分析和t检验.结果 测序结果证实表达siRNA的逆转录病毒成功构建.URG-4 mRNA在MKN45、SW480、LoVo、HCT116和HT29细胞中的相对表达量分别为0.58±0.02、0.63 +0.03、0.81±0.01、1.01±0.02和0.91±0.04;URG-4蛋白相对表达量分别为0.73±0.02、0.85士0.03、1.42 +0.01、0.80 +0.03和0.80+0.04.结肠癌LoVo细胞高表达URG-4.干扰组中URG-4 mRNA表达为0.55±0.03,显著低于阴性对照组的1.15±0.02和空白对照组的1.15±0.01(t=-5.179,-9.285,P＜0.05).干扰组URG-4 mRNA的抑制率为52.6％.干扰组中URG-4蛋白表达为0.82 +0.05,显著低于阴性对照组的1.46士0.07和空白对照组的1.54 ±0.04(t=-4.239,-3.704,P＜0.05).干扰组URG-4蛋白的抑制率为43.6％.各组结肠癌LoVo细胞呈指数生长.与阴性对照组比较,第3～6天干扰组细胞增殖受到明显抑制,差异有统计学意义(t=-6.436,-6.045,-6.434,-4.285,P＜0.05).结论 干扰URG-4表达能够抑制LoVo细胞的生长.     

伴侣蛋白CCT6A参与结肠癌细胞迁移及侵袭的作用研究

目的:研究伴侣蛋白CCT6A在结肠癌细胞株迁移和侵袭过程中的作用。方法:培养9株结肠癌细胞,抽取总RNA和蛋白。采用实时定量PCR和Western印迹法筛选CCT6A高表达的细胞株。设计购买3种siRNA片段,转染高表达CCT6A的结肠癌细胞株,利用实时定量PCR和Western印迹法验证干扰效果。选择干扰效果最优的RNA干扰片段,通过Transwell实验来评估转染后结肠癌细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:SW1116细胞株中的CCT6A在mRNA及蛋白水平都呈现高表达;3种干扰片段转染SW1116细胞后,CCT6A表达量均有不同程度下降,其中以片段2的干扰效果最优。在迁移实验中,CCT6A干扰组穿膜细胞数为(6±2)个,低于阴性对照组(23±12)个和空白对照组(21±11)个;在侵袭实验中,CCT6A干扰组穿膜细胞数为(9±2)个,低于阴性对照组(40±12)个和空白对照组(43±10)个;上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:下调CCT6A的表达能显著抑制结肠肿瘤细胞的迁移、侵袭能力,提示CCT6A可能在结肠癌浸润和转移中起到一定作用。     

小干扰RNA沉默Kruppel样转录因子8对胃癌细胞增殖及侵袭能力的影响

目的 观察小干扰RNA (siRNA)沉默Kruppel样转录因子8(KLF8)基因对胃癌细胞MKN-28增殖及侵袭能力的影响.方法 构建针对KLF8的小干扰RNA(si-KLF8),应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Westem blot技术检测转染后胃癌细胞中KLF8 mRNA和蛋白的表达,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测转染24、48、72 h的细胞增殖能力的变化,应用Transwell小室实验检测转染48 h后胃癌细胞侵袭能力的变化.结果 si-KLF8和阴性对照siRNA (si-CTRL)成功转染至胃癌细胞;si-KLF8组KLF8 mRNA和蛋白的表达量明显低于阴性对照组和正常对照组(P＜0.05);si-KLF8组增殖能力下降,24、48、72 h的吸光度值分别为0.125±0.003、0.193±0.005、0.223±0.005、0.267 ±0.003、0.315±0.006,穿膜细胞数为(42.0±3.6)个,均明显低于阴性对照组和正常对照组(P＜0.05);阴性对照组和正常对照组比较,上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 si-KLF8可抑制人胃癌细胞的增殖和侵袭能力,提示KLF8在胃癌的发生发展过程中发挥着重要的作用.     

特异性蛋白1对肿瘤细胞增殖和转移的影响及其机制

目的探讨特异性蛋白1(Sp1)对肿瘤细胞增殖和转移的影响及其机制。方法选取2019年6月至2022年6月郑州大学第一附属医院收治的74例卵巢癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用蛋白质印迹法(Western blot)分析癌旁组织和肿瘤组织的表达水平。采用SP1短发卡RNA(shRNA)慢病毒感染SK-OV-3细胞, 建立SP KD1组和对照组细胞, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU染色分析两组细胞的增殖能力;采用划痕实验和Transwell实验分析两组细胞的迁移和侵袭能力, 采用蛋白质免疫印迹分析两组细胞上皮间质转化水平。组间资料比较采用t检验。结果癌旁组织中SP1蛋白表达水平(1.03±0.22)明显低于卵巢癌组织(1.93±0.39), 差异有统计学意义(t=17.570, P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(1.98±0.09)明显高于SP KD1组(1.27±0.14), 差异有统计学意义(t=10.310, P<0.05)。对照组细胞EdU阳性率[(84.17±4.07)%]明显高于SP KD1组[(65.67±5.57)%], 差异有统计学意义(t...     

VEGF与MMP-9在卵巢癌组织中的表达及与淋巴结浸润转移的相关性研究

目的探讨VEGF与MMP-9在卵巢癌组织中的表达,进一步探讨二者与淋巴结浸润转移的相关性与作用机制。方法采用免疫组织化学方法检测34例卵巢癌组织中VEGF、MMP-9的表达,并运用统计学方法对二者与卵巢癌的临床病理特征的关系进行对比分析。同期选择正常卵巢组织30例、卵巢良性肿瘤30例作对照。结果 VEGF、MMP-9在卵巢癌组织中阳性表达显著高于正常组织（P〈0.05）,VEGF、MMP-9的阳性表达与年龄、组织分化类型无相关性（P〉0.05）;VEGF、MMP-9在有淋巴结转移组织中的表达显著高于无淋巴结转移组织（P〈0.05）;VEGF和MMP-9在FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ的组织中阳性表达显著高于Ⅰ~Ⅱ期组织（P〈0.05）。VEGF表达和MMP-9在卵巢组织中表达呈正相关（r=0.625,P〈0.05）。结论 VEGF、MMP-9均参与卵巢癌的发生和发展,二者高表达使肿瘤组织转移性和侵袭性显著增加。     

长链非编码RNA X染色体失活特异转录物调控微小RNA-335对胃癌的增殖和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异转录物(XIST)对胃癌细胞增殖、迁移的影响及其作用机制。方法收集2018年1月至2019年12月来自宜昌市中心人民医院的胃癌患者42例,采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测XIST在胃癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织中表达,分析XIST表达与患者临床病理参数的相关性。采用qPCR检测XIST在胃癌细胞系中的表达,通过转染小干扰RNA(si-XIST)敲低XIST在胃癌细胞SGC-7901和AGS中的表达,分别将胃癌细胞分为si-XIST组和si-NC组,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的增殖活性,细胞划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶验证XIST与微小RNA(miR)-335的靶向关系。组间比较采用t检验。结果XIST在胃癌组织中相对表达量为1.86±0.24,显著高于癌旁正常组织的0.98±0.11,差异有统计学意义(P<0.05),同样,胃癌细胞系中XIST的相对表达显著上调(P<0.05),差异有统计学意义。组织样本中XIST的表达与患者的TNM分期和淋巴结转移明显相关(P<0.05),差异有统计学意义,敲低XIST表达可显著降低胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,XIST可负向调控miR-335的表达。结论lncRNA XIST可负向调控miR-335的表达,从而抑制胃癌的增殖、迁移和侵袭能力。     

HER-2在结肠癌中表达及临床意义的实验研究

目的:探讨HER-2在结肠癌中的表达情况及体外抗HER-2治疗对结肠癌细胞生物学活性的影响。方法:培养5株结肠癌细胞,RT-PCR法检测各株细胞中HER-2中表达情况,将曲妥珠单抗(赫塞汀)作用于HER-2高表达株HT-29细胞,MTT、凋亡实验、侵袭实验分别检测抗HER-2治疗对结肠癌细胞生物学活性的影响。结果:HER-2在部分结肠癌患者中高表达,且与肿瘤的浸润程度、是否有淋巴结转移及肿瘤TNM分期有关;Kaplan-Meier生存分析表明,HER-2高表达影响患者总体生存率,多因素分析表明TNM分期、HER-2表达是影响结肠癌患者预后的独立影响因素;HER-2在各结肠癌细胞中有不同程度的表达,抗HER-2药物能抑制肿瘤细胞生长,促进其凋亡并降低其侵袭性。结论:HER-2在少部分结肠癌患者中有高表达,HER-2检测及抗HER-2治疗可能改善患者的预后。     

FOXN2在前列腺癌组织的表达及对前列腺癌细胞生物学的影响

探讨双头框蛋白N2（FOXN2）在前列腺癌（PCa）组织中的表达以及对PCa细胞生物学的影响。方法 选取宜宾市第二人民医院50例接受手术治疗的PCa患者的标本及癌旁组织,通过RT-qPCR实验和Western blot实验分别检测PCa组织和癌旁组织中的FOXN2 mRNA及蛋白的表达水平,并分析PCa组织中FOXN2与患者临床病理特征的相关性。通过RT-qPCR实验检测正常前列腺细胞RWPE-1、PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中FOXN2 mRNA的表达水平。选取PC-3细胞为研究对象,分为FOXN2过表达组、空载体对照组以及对照组,分别通过MTT实验、流式细胞实验、Transwell实验以及Western blot实验检测各组细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭情况以及相关蛋白Bax、CyclinD1、MMP-2的表达量。结果 与癌旁组织相比,FOXN2的mRNA和蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,与TCGA数据库中结果一致。FOXN2低表达与PCa患者淋巴转移、TNM分期以及Gleason评分有关（P=0.003、0.005、0.002）。与人正常前列腺细胞RWPE-1相比,FOXN2在PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中均呈现低表达（P<0.05）,其中PC-3细胞中表达量最低。与对照组和空载体对照组相比,FOXN2过表达组的PC-3细胞在作用24 、48 、72 h后增殖能力显著下降（F=290.400、57.735、113.014,P<0.05）,CyclinD1蛋白表达水平显著下降（P<0.05）;PC-3细胞的凋亡率显著升高（P<0.05）,Bax蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;PC-3细胞的迁移和侵袭能力显著下降（P<0.05）,MMP-2蛋白表达水平显著下降（P<0.05）。结论 FOXN2在PCa组织及细胞中低表达,过表达FOXN2可抑制PCa细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。     

促肝细胞再生磷酸酶-3基因在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的检测促肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)mRNA在结直肠癌(CRC)中的表达,探讨其与CRC发生发展以及侵袭转移的关系。方法半定量PCR测定46例CRC组织及其对应正常黏膜、6例结直肠腺瘤(CRA)及其对应正常黏膜以及18例淋巴结和肝转移灶中PRL-3mRNA相对表达水平,并分析其表达水平与临床病理学指标的关系。单链多态性分析法(PCR-SSCP)检测基因突变情况。结果46例CRC中PRL-3基因表达量较相应正常黏膜组织高,差异有统计学意义(1.6±0.7比0.4±0.1,P<0.01);6例结直肠腺瘤组织与对应的正常黏膜中PRL-3mRNA表达量差异无统计学意义(0.6±0.3比0.5±0.2,P>0.05);12例淋巴结转移灶和6例肝转移灶PRL-3基因表达量分别为2.1±0.8和3.3±1.0,显著高于原发癌肿、正常黏膜、阴性淋巴结组织中的表达(P<0.01)。PRL-3基因表达水平与CRCDukes分期、浸润深度、淋巴结和远处转移有关(P<0.05),与性别、肿瘤大小、分化程度无关(P>0.05)。PCR-SSCP分析发现,6例肝转移灶中有1例出现异常泳动条带。结论PRL-3基因在CRC的发生发展和侵袭转移中起重要作用,其作用可能是通过基因表达上调和基因突变共同实现的。     

血管内皮生长因子-C和生存素在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）-C和生存素（sunrivin）蛋白表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学SP法检测97例原发性胃癌组织、癌旁组织及20例正常胃黏膜组织中VEGF-C和survivin蛋白的表达，并分析其与临床病理特征和预后的关系。结果 胃癌组织VEGF-C和survivin蛋白表达阳性率分别为66．0％和57．2％，显著高于癌旁组织和正常胃组织（P〈0．05）；VEGF-C蛋白表达与肿瘤分化程度、肿瘤部位、肿瘤直径、静脉侵犯及远处转移等无关，但与淋巴结转移、淋巴管侵犯、浆膜面受累和肿瘤TNM分期等密切相关；survivin蛋白表达与肿瘤分化程度、肿瘤部位、肿瘤直径、静脉侵犯等无关，但与浆膜面受累、淋巴管侵犯、淋巴结转移、远处转移和肿瘤TNM分期等密切相关；VEGF-C和survivin阳性表达组术后生存率明显低于阴性组；VEGF-C和survivin在胃癌组织中阳性表达呈正相关。结论 VEGF-C及survivin蛋白的阳性表达可作为胃癌预后不良的参考指标。     

MTUS2-AS2在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MTUS2-AS2在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测63例膀胱癌组织和癌旁组织、膀胱癌细胞系(BIU-87、J82、T24、5637)和正常膀胱上皮细胞系SV-HUC-1中的MTUS2-AS2表达。以MTUS2-AS2表达最低的J82细胞进行研究,分为对照组(转染载有无意义序列的对照质粒)和实验组(转染载有MTUS2-AS2表达序列的质粒)。qRT-PCR检测转染效率。MTS法和Transwell侵袭实验检测J82细胞的增殖和侵袭能力。qRT-PCR检测J82细胞中趋化素样因子超家族成员5(CMTM5)mRNA的表达,Western blot检测两组细胞中CMTM5、PI3K-AKT信号通路蛋白的表达。结果膀胱癌组织MTUS2-AS2的表达低于癌旁组织(P<0.01),膀胱癌细胞系MTUS2-AS2的表达明显低于正常膀胱上皮细胞(P<0.05),J82细胞中MTUS2-AS2的表达最少(P<0.01)。与对照组相比,实验组J82细胞中MTUS2-AS2的表达明显增加(P<0.01)。与对照组相比,实验组J82细胞增殖活力明显降低(P<0.05),细胞侵袭能力明显降低(P<0.01)。与对照组相比,实验组J82细胞中CMTM5 mRNA和蛋白表达增加(P<0.01),PI3K-AKT信号通路蛋白表达降低(P<0.05)。结论 MTUS2-AS2在膀胱癌组织和细胞系中呈低表达,MTUS2-AS2可通过上调CMTM5基因的表达,抑制J82细胞的增殖和侵袭能力。     

miR-362-3p的表达及其靶基因与胆囊癌恶性特征的关系

目的:探讨miR-362-3p在胆囊癌中的表达及功能。方法:用qRT-PCR检测手术切除的44例胆囊癌患者手术标本中miR-362-3p的表达,并分析其表达与胆囊癌临床病理特征及预后的关系。miR-362-3p模拟物转染胆囊癌细胞后,分别用MTT法、细胞划痕试验及Transwell侵袭试验观察细胞增殖、迁移及侵袭的改变。通过生物信息学方法及双荧光素酶报告基因试验分析miR-362-3p的靶基因,并采用补救试验验证。结果:miR-362-3p在胆囊癌组织的表达明显低于相应癌旁组织(P0.05)。miR-362-3p的低表达与肿瘤TNM分期、淋巴结转移及远处转移明显有关(均P0.05)。低表达miR-362-3p患者总体生存率较高表达miR-362-3p患者明显降低(P0.05)。转染miR-362-3p模拟物后,胆囊癌细胞的增殖,迁移及侵袭能力明显减弱(均P0.05)。Nemo样激酶(NLK)被确定为miR-362-3p的潜在靶基因,转染NLK过表达载体后,miR-362-3p模拟物对胆囊癌细胞的上述作用被明显逆转(均P0.05)。结论:miR-362-3p在胆囊癌中表达下调,下调的miR-362-3p减少了对靶基因NLK的抑制,从而促进了胆囊癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

SIAH2和骨桥蛋白在肿瘤组织的表达及临床意义

目的探讨在卵巢上皮性癌组织中SIAH2和骨桥蛋白(OPN)的表达水平以及临床意义。方法收集2015年6月至2020年7月惠州市中心人民医院(广东医科大学惠州临床医学院)以及广东医科大学附属医院卵巢良性肿瘤组织标本40例以及卵巢上皮性癌组织标本65例,应用免疫组织化学方法检测各组织中的SIAH2和OPN的表达,结合临床资料采用χ²检验。结果SIAH2在卵巢上皮性癌组织中的表达率明显高于卵巢良性肿瘤组织中的表达率[70.77%(46/65)比7.50%(3/40),χ²=39.826,P<0.01],OPN在卵巢上皮性癌组织中的表达率明显高于卵巢良性肿瘤组织中的表达率[64.62%(42/65)比10.00%(4/40),χ²=30.004,P<0.01];SIAH2表达水平与卵巢上皮性癌国际妇产科联合会分期(FIGO)、淋巴结转移明显相关(分别为χ²=4.918、5.168,P<0.05);OPN表达水平与卵巢上皮性癌组织学分化程度、FIGO分期、淋巴结转移明显相关(分别为χ²=9.432、4.250、5.478,P<0.05)。结论卵巢上皮性癌组织中SIAH2和OPN呈高表达,检测SIAH2和OPN的表达在评估卵巢上皮性癌患者病情方面具有一定的临床意义。     

肿瘤转移相关基因Ezrin在胃癌中的表达及意义

目的 探讨细胞骨架蛋白Ezrin在胃癌中的表达及其意义。方法 采用免疫组织化学方法（免疫组化法）检测组织芯片上90例胃癌组织及12例正常胃组织标本中Ezrin的表达，结合胃癌的临床病理特点进行分析。同时应用Western印记检测胃癌细胞株的Ezrin的表达，体外侵袭试验验证其侵袭能力。结果 90例胃癌组织中Ezrin的阳性表达率为93．3％，而12例正常组织Ezrin表达均阴性，两者比较P〈0.05，差异有统计学意义。同时，Ezrin阳性率与胃癌患者有无区域淋巴结转移相关（P〈0．05）。胃癌MKN-45细胞株中Ezrin的表达（171．72）明显高于其他4个细胞株（47.44～132．51）；同时，MKN-45细胞的侵袭能力（220．21）也强于其他4株胃癌细胞（89．23～210．35）。结论 胃癌组织中的Ezrin阳性表达显著高于正常胃组织，并与胃癌的转移相关。