沉默circ_0000745通过靶向 miR-296-5p对结直肠癌细胞增殖及转移的影响

摘要:目的 探讨circ_0000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制。方法 收集2013年3月 ~2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量 PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌组 织、癌旁组织中circ_0000745与 miR-296-5p表达,分析circ_0000745与 miR-296-5p表达与结直肠癌患者预后的关系。 将人结直肠癌细胞 HCT-116分为si-NC组、si-circ_0000745组、miR-NC组、miR-296-5p过表达组、si-circ_0000745+anti-miR-NC组、si-circ_0000745+anti-miR-296-5p组;采用 CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测各组细 胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;采用双荧光素酶报告实验检测circ_0000745与 miR-296-5p的靶向关系;采用 Western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达量。结果 与癌旁组织比较,结直肠癌组 织中circ_0000745的表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05);随访5年,65例患者中死亡9例,存活56 例,与存活患者相比,死亡患者的circ_0000745明显增高(P<0.05),miR-296-5p明显降低(P<0.05)。与 HT-29细胞 相比,HCT-116细胞的circ_0000745mRNA 表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05),选择 HCT-116细 胞进行下一步研究。与si-NC组比较,si-circ_0000745组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵 袭细胞数减少(均P<0.05);circ_0000745可靶向调控 miR-296-5p的表达;与 miR-NC组比较,miR-296-5p过表达组细 胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均 P<0.05);与si-circ_0000745+anti-miRNC组比较,si-circ_0000745+anti-miR-296-5p组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞克隆形成数、迁移及侵袭 细胞数增多(均P<0.05)。结论 结直肠癌组织中circ_0000745呈高表达,miR-296-5p呈低表达,高表达circ_0000745 及低表达 miR-296-5p可用于评估结直肠癌患者预后,circ_0000745通过靶向 miR-296-5p促进结直肠癌细胞增殖及转 移,沉默circ_0000745可为结直肠癌治疗提供新思路。     

大组织切片研究直肠癌在直肠系膜内及环周切缘的播散

目的　研究直肠癌在直肠系膜内及环周切缘的播散转移规律 ,为合理施行直肠癌手术提供病理学证据。方法　对 6 2例直肠癌患者行全直肠系膜切除术 (TME) ,手术标本制作直肠及全层系膜大组织切片 ,HE染色 ,显微镜观察。结果　 期病例中 ,直肠系膜外带 (左、后、右三区 )癌灶占 4 3.2 4 %。直肠侧壁肿瘤 ,系膜同侧癌灶多于对侧 (P<0 .0 5 )。远端直肠系膜内癌播散距原发灶 1～ 3.5 cm,均为 TNM 、 期患者 ,发生率为 12 .9% (8/6 2 )。肿瘤环周切缘癌浸润 (CMI)与肿瘤分化及 TNM分期相关 ,直肠不同部位 CMI发生率无明显差别 (P>0 .0 5 )。结论利用大组织切片技术 ,能够全面观察直肠、直肠系膜及其癌灶分布。系膜外带及肿瘤同侧系膜内癌灶分布较多。手术应完整切除肿瘤远端 4 cm直肠及其周围系膜。 TME减少了癌残留及环周切缘癌浸润可能 ,应作为直肠癌手术的基本原则     

抗病毒药物在儿科的应用分析

目的:了解抗病毒药物在该院儿科的使用情况,为临床合理使用抗病毒药物应用提供参考。方法:回顾性调查分析该院2005年度儿科2466例感染性疾病的抗病毒药物使用情况。结果:2466例感染性疾病中,抗病毒药物使用率为86.66%,单联、二联、三联使用率分别为53.77%、41.46%、4.77%,与抗生素联合使用率为95.09%。其中注射用利巴韦林使用率最高,占56.73%。结论:该院儿科临床使用抗病毒药物与抗生素联合使用率较高,抗病毒药物的联合使用基本合理。     

促肝细胞再生磷酸酶-3基因在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的检测促肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)mRNA在结直肠癌(CRC)中的表达,探讨其与CRC发生发展以及侵袭转移的关系。方法半定量PCR测定46例CRC组织及其对应正常黏膜、6例结直肠腺瘤(CRA)及其对应正常黏膜以及18例淋巴结和肝转移灶中PRL-3mRNA相对表达水平,并分析其表达水平与临床病理学指标的关系。单链多态性分析法(PCR-SSCP)检测基因突变情况。结果46例CRC中PRL-3基因表达量较相应正常黏膜组织高,差异有统计学意义(1.6±0.7比0.4±0.1,P<0.01);6例结直肠腺瘤组织与对应的正常黏膜中PRL-3mRNA表达量差异无统计学意义(0.6±0.3比0.5±0.2,P>0.05);12例淋巴结转移灶和6例肝转移灶PRL-3基因表达量分别为2.1±0.8和3.3±1.0,显著高于原发癌肿、正常黏膜、阴性淋巴结组织中的表达(P<0.01)。PRL-3基因表达水平与CRCDukes分期、浸润深度、淋巴结和远处转移有关(P<0.05),与性别、肿瘤大小、分化程度无关(P>0.05)。PCR-SSCP分析发现,6例肝转移灶中有1例出现异常泳动条带。结论PRL-3基因在CRC的发生发展和侵袭转移中起重要作用,其作用可能是通过基因表达上调和基因突变共同实现的。     

肺炎支原体肺炎患儿肺通气功能的改变

目的观察肺炎支原体肺炎患儿肺功能的改变。方法 24例肺炎均经胸片和肺炎支原体IgM抗体检测确诊为肺炎支原体肺炎,在肺炎的急性期检测肺功能,分析其变化,并与健康对照组24例进行比较。结果肺炎支原体肺炎患儿急性期肺通气功能指标FVC、FEV1、PEF、FEF25-75均明显低于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,而恢复期各项指标均明显改善,与急性期比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论肺炎支原体肺炎患儿会发生肺通气功能障碍,易导致支气管哮喘,应定期随访,早期干预;肺通气功能测定对指导临床治疗及预后有重要作用。     

直肠癌大组织切片系膜九分区法病理学研究

目的　探索直肠癌全直肠系膜切除术 (TME)的必要性和选择性全直肠系膜切除术(STME)的最佳切除范围。方法　以 31例直肠癌TME手术标本为对象 ,纵向由远及近以 5mm的间距连续取材 ,常规固定包埋 ,大组织切片机以 2 .5cm的间隔连续切片 ,HE染色 ,光学显微镜观察结果。将直肠系膜等分为内、中、外三个带 ,每带按左、右、后三个方向分为三个区 ,直肠癌在直肠系膜内的转移灶分别定位于上述九个区。结果　直肠系膜外带内癌转移 1 4例 (4 5 .2 % ) ,全部为低位直肠癌 ;远端直肠系膜 (DMR)内癌转移 2例 (6 .5 % ) ,均在原发灶下缘以远 3.0cm以内 ;环周切缘癌浸润 2例 (6 .5 % )。结论　低位直肠癌根治手术时 ,完整地切除直肠系膜非常必要 ;远端直肠系膜的切除应达到肿瘤下缘以远 4cm。     

合并糖尿病消化道肿瘤患者术后早期肠内营养支持的护理研究

目的:探讨消化道肿瘤合并糖尿病患者在术后早期肠内营养过程中的护理方法。方法:37例消化道肿瘤合并糖尿病患者术后24h经鼻空肠营养管重力滴入肠内营养糖尿病专用制剂,检测治疗前后各项营养、生化及免疫指标变化。通过一系列相关护理措施,监测和控制血糖,预防并发症的发生。结果:在输注肠内营养过程中患者无1例发生严重并发症,仅有5例出现腹胀腹泻症状,2例出现咽喉炎,均对症治疗后缓解。81.08%患者血糖稳定,控制在(7.8±1.1)mmol/L范围内。治疗后血清白蛋白、前清蛋白、转铁蛋白等营养指标水平显著增高(P0.05),体重、血红蛋白、丙氨酸氨基转移酶、总胆红素无明显改变,IgG、IgA、IgM免疫指标水平比术前有明显升高(P0.01)。结论:对消化道肿瘤合并糖尿病患者术后早期应用糖尿病专用制剂是营养支持的有效手段。治疗期间应采取科学有效的护理方法,加强基础护理,监测血糖变化,预防糖尿病和手术相关并发症的发生。     

减重手术—袖状胃切除术

距幽门2 cm开始紧贴胃大弯壁用超声刀离断大网膜，同时充分游离胃后壁与胰腺之间粘连，直至胃底，显露出左侧膈肌脚及食道左侧。经口置入36 F粗胃管，沿胃小弯直至到达胃窦处，距幽门4～6 cm开始用成钉高度较高的内镜下直线切割闭合器进行袖状胃裁剪，然后换用为钉腿高度较低的内镜下直线闭合器切割，切割线距离胃管边缘1 cm，在胃底部离食道左侧缘1～2 cm处离断胃底。用倒刺缝合线连续浆肌层缝合加固胃切缘，可将大网膜一并缝合在胃切缘。移除胃管，清理腹腔，扩大主操作孔，取出切除的胃组织，在左侧膈肌脚放置引流管，用不可吸收线全层缝合10 mm及12 mm戳卡孔。     

小儿大叶性肺炎33例临床特征分析

目的了解小儿大叶性肺炎的临床特点。方法回顾分析33例小儿大叶性肺炎病例的临床资料。结果 33例小儿大叶性肺炎临床常见症状,其中仅发热2例（6.1%）,咳嗽4例（12.1%）,发热并咳嗽27例（81.8%）,胸痛11例（33.3%）,黏痰21例（63.6%）,皮疹8例（24.2%）;胸片全部可以见到节段或大叶分布的大片状密度增高影,肺炎支原体抗体阳性（MP-IgM）25例（75.7%）,痰涂片革兰氏阳性球菌5例（15.1%）。结论小儿大叶性肺炎临床特点不典型,要重视不典型小儿大叶性肺炎的诊断。