人脂肪来源的成体干细胞体外向软骨细胞诱导分化的研究

目的研究人脂肪来源的成体干细胞（ADSC）体外能否向软骨细胞成功分化，探讨其作为组织工程软骨种子细胞的可行性。方法自成人皮下取少量脂肪组织，经机械剪切及Ⅰ型胶原酶消化后获取成体干细胞，体外培养扩增；流式细胞仪鉴定细胞表型；第5代细胞采取离心管中微块法培养，培养液中加入转化生长因子（hTGF-β2）等诱导剂诱导其向软骨细胞分化；诱导14d的细胞团经消化后获得单细胞悬液，接种于玻片上行形态学观察，甲苯胺兰、免疫组织化学染色及逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）用以鉴定软骨细胞表型。结果从人体皮下脂肪组织中可成功分离到ADSC，细胞可于体外大量扩增；第5代细胞大多数表达CD29、CD90，而CD14、CD45抗原表达阴性；RT—PCR结果提示诱导后的细胞可表达黏多糖（GAG）及Ⅱ型胶原，诱导后的细胞块分离成单个细胞后可见其形态较诱导前发生明显变化，甲苯胺兰染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阳性。对照组未加诱导因子的细胞则未能观察到上述变化。结论成人皮下脂肪组织中可分离到大量ADSC；ADSC可在体外成功诱导向软骨细胞分化；ADSC有望作为组织工程软骨构建中的种子细胞。     

间充质干细胞在组织工程膀胱中的研究进展

【摘要】 组织工程膀胱为泌尿系统的结构和功能重建提供了技术支持，种子细胞的选择为该领域的关键问题。间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）具有极强的体外扩增与多向分化潜能，为一种具有前景的种子细胞来源。本文就MSC在组织工程膀胱中的最新研究进展作一综述。 〖HT5”H〗〓〓【关键词】〓〖HT5”SS〗膀胱；组织工程；间质干细胞     

脂肪间充质干细胞在组织工程中的研究进展

组织工程的兴起和迅猛发展为组织或器官缺损的修复重建带来了新的治疗途径，并已逐渐成为目前最有前景的生理性修复技术。应用组织工程的方法再造组织与器官所用的各类细胞称为种子细胞。种子细胞研究的目的在于获取足够数量的接种细胞．防止细胞老化并同时保持细胞增殖、合成基质等生物功能。理想组织工程种子细胞应具备①取材容易，对机体损伤小；②增殖能力强；③在诱导因子作用下具有定向分化能力；     

骨髓间充质干细胞及其在椎间盘组织工程中应用的研究进展

随着组织工程和细胞治疗学的兴起，寻找满足要求和易于操作的种子细胞和靶细胞已成为其中的关键环节。干细胞因具有高度的自我更新能力和多向分化潜能，已成为组织工程中首选的种子细胞。骨髓间充质干细胞（bonemesenchymal stem cells．BMSCs）是一群存在于骨髓中的非造血干细胞，其作为组织工程的种子细胞具有诸多优势：     

骨髓基质干细胞成骨的研究进展

组织工程技术是目前解决大块骨与软骨组织缺损修复难题最有前景的手段之一，种子细胞是组织工程学中的重要环节。骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）是一类具有多向分化潜能的组织干细胞，在体内外适当的诱导环境下可以分化为骨、软骨、脂肪、肌肉、神经、肌腱及韧带等多种组织细胞。该细胞群来源充足，取材方便，增殖能力强，     

成体干细胞的分化潜能及在修复重建中的应用前景

目的 探讨成体干细胞（AS细胞）的分化潜能性及在临床修复重建中应用的可能。方法 检索医学和生物医学文献数据库中关于AS细胞研究的相关报道，并对AS细胞的最新研究进展作简要总结。结果 AS细胞存在于成体的各种组织中，具有自我更新能力和分化潜能性；部分成体干细胞，如骨髓皮肤、肝及脂肪等组织中的AS细胞，具有多向分化潜能，可向无关组织类型的成熟细胞横向分化；AS细胞是组织更新与修复的起源细胞，且与肿瘤的发生和衰老密切相关。结论 AS细胞具有多向分化潜能，在创伤修复等再生医学中有广阔的应用前景。     

体外构建组织工程软骨种子细胞的研究进展

体外构建组织工程软骨的首要问题是种子细胞的来源,目前获得种子细胞的可能途径主要有以下几种:(1)培养扩增自体获得的软骨细胞;(2)同种异体软骨细胞;(3)骨髓基质干细胞及其他组织来源干细胞;(4)胚胎干细胞;(5)基因修饰细胞。本文就当前体外构建组织工程软骨的种子细胞研究进展综述如下:1自体软骨细胞自体软骨细胞可由关节软骨、骺板软骨、软骨膜、肋软骨和耳软骨等分离培养获得。软骨细胞是构成透明关节软骨的唯一细胞成分,是终末分化细胞,具有高度特异性。软骨细胞的主要功能是维持软骨基质成分的稳定。新分离的关节软骨细胞在最初的数天…     

骨髓间充质干细胞定向肝细胞样分化的研究

目的探讨骨髓间充质干细胞定向肝细胞样分化的诱导条件，为肝组织工程提供新的种子细胞来源。方法分离小鼠骨髓间充质干细胞，在特定肝细胞培养液中用肝细胞生长因子(HGF)和表皮细胞生长因子(EGF)定向诱导。在倒置显微镜下观察细胞形态。应用免疫荧光法鉴定细胞性质。结果骨髓间充质干细胞经HGF和EGF诱导7d后变为肝细胞样圆形；2周后免疫荧光染色可见分化后细胞表达肝细胞标志物CK18和白蛋白。结论骨髓间充质干细胞在特定条件诱导下可以向肝细胞方向分化。有可能作为肝组织工程的种子细胞来源。     

骨髓经羟乙基淀粉(HES)处理后分离和培养MSCs的初步探讨

种子细胞、支架材料和生长因子是组织工程的三大要素,而寻找合适的种子细胞是成功的重要因素[1]。骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs),因其具有多向分化潜能,如形成骨、软骨、肌组织、皮肤等,成为最具代表性的种子细胞[2,3]。目前,国内外已分离培养出人,小鼠,大鼠,兔等的骨髓MSCs,并诱导分化出多种组织[4],但由于它在骨髓内含量极少,只占0.01%～0.001%,而组织工程需要短期内有大量的种子细胞再生组织,故需进行体外培养、分化和扩增[5]。本实验对骨髓MSCs的两种分离方法进行比较,以期获得更好的方法。1材料与方法1.1材料动…     

干细胞作为软骨组织工程种子细胞的研究进展

种子细胞是目前软骨组织工程研究的重点之一。目前，报道的软骨组织工程种子细胞主要包括：自体软骨细胞、异体软骨细胞、基因修饰的永生化软骨细胞及各种来源的干细胞。自体软骨细胞来源有限，且体外培养传代会发生“去分化（dedifferentiation）”现象，丧失增殖和分泌基质的能力，这严重限制了其作为种子细胞的应用；异体软骨细胞免疫源性尚不能完全克服；基因修饰的永生化软骨细胞其相应技术尚未成熟，且如何控制其表型稳定及其潜在的致癌性仍需进一步研究。     

成年山羊皮肤干细胞体外克隆与诱导分化

目的 探索山羊皮肤干细胞的分离方法与培养体系，为进一步研究皮肤干细胞增殖分化的分子机制订下基础。方法 从成年关中奶山羊耳尖获取皮肤，用组织块培养法分离皮肤干细胞，碱性磷酸酶(ALP)染色及体外分化实验鉴定，用条件培养基与细胞因子相结合行皮肤干细胞的体外诱导分化。结果 山羊耳尖皮肤分离得到类干细胞集落并传5代，细胞集落具有典型鸟巢状结构，ALP染色阳性，体外分化能形成类胚体。在细胞因子(IGF—1)及条件培养基的诱导下，所分离获取的皮肤干细胞能分化形成类毛囊，类星形胶质细胞及类成骨细胞。结论 用组织块培养法可以获得多能性皮肤干细胞；在体外培养条件下不仅能进行定向分化，还能进行横向分化。     

转基因骨髓间充质干细胞在软骨组织工程中的研究与应用

软骨组织工程学是用工程学和生命科学的原理和方法、依靠支架材料承载被分离的软骨细胞或其前体细胞并植入宿主体内、支架材料在宿主体内逐渐降解并释放细胞、从而形成新的有功能的软骨组织产品的技术。但目前存在的自身不足为：细胞因子的量控、种子细胞易老化、增值缓慢；细胞的定向分化、细胞与生物材料的亲和性以及动物组织基因人源化等。     

诱导兔骨髓间充质干细胞成为内皮细胞

[目的] 研究骨髓间充质干细胞（mensenchymal stemcells，MSCs）向内皮细胞分化的可行性。[方法] 密度梯度离心法分离兔骨髓间充质干细胞行体外培养和连续传代，获得较纯的MSCs。采用第2代的MSCs，以血管内皮细胞生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）进行体外诱导，倒置相差显微镜下观察细胞形态变化，免疫荧光方法鉴定内皮细胞，并通过透射电镜观察内皮细胞特异性WP小体。[结果] 分化后的细胞在光镜下具有内皮细胞的形态学特征；免疫荧光染色证实实验组诱导后的细胞为内皮细胞。透射电镜显示诱导后细胞内出现内皮细胞特异性WP小体。【结论] 成体中的MSCs在一定诱导条件下可以表现内皮细胞样特征，是组织工程血管化理想的种子细胞。     

骨髓间充质干细胞及其临床应用

间充质干细胞（MSCs）是广泛存在于人体各组织中的一种成体干细胞，其中骨髓中含量最为丰富。MSCs具有多向分化潜能，不但可以分化为多种中胚层来源的细胞，如成骨细胞和成软骨细胞等，还可以分化为其他胚层来源的细胞，如神经细胞和肾脏细胞等。由于MSCs来源广泛、易于分离培养、能长期存活、不易引起免疫排斥和易于基因转染等特点，使其成为细胞治疗和基因治疗的种子细胞，具有广泛的科研和临床应用价值。     

干细胞在组织工程膀胱修复中的应用

利用干细胞进行膀胱缺损修复是近年来组织工程膀胱研究的一项热点.干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,是组织工程膀胱修复的理想种子细胞.本文分别就利用胚胎干细胞和成体干细胞作为种子细胞,进行膀胱缺损组织工程修复进行综述.     

脂肪源性干细胞研究进展

现代组织工程学是近几年迅猛发展的新学科,将对组织器官的修复与替代治疗产生划时代意义.组织工程技术大致由四大要素组成:自体种子细胞的获得;种子细胞的生长与分化;种有细胞的载体移入体内;移植物与受区整合,组织形成.其中组织细胞的获得、培养与分化是此工程的前提和基础.目前多应用自体或异体成熟细胞如软骨细胞、脂肪细胞为种子细胞,但由于其体外扩增能力弱,难以获得足够的数量,且取材对供区造成的损失也较重.     

真皮成纤维细胞多向分化潜能的研究进展

真皮成纤维细胞起源于胚胎中胚层间质细胞,是构成体内疏松结缔组织的主要细胞成分.以往认为,真皮成纤维细胞在机体发育过程中是分化完全的终末细胞,不具备多向分化潜能,只能作为真皮组织的种子细胞.近年来研究发现,真皮成纤维细胞能够表达间充质干细胞相关标志物,具有多向分化潜能,在特定条件下能够向骨、脂肪、软骨、肌腱、神经以及胰岛等多胚层组织器官分化,可能成为组织器官构建的种子细胞来源.现将真皮成纤维细胞的多向分化潜能研究现状进行综述.     

脂肪间充质干细胞成神经元诱导分化研究进展

增加具有完整功能的种子细胞数目及提高其定向分化能力一直是组织工程研究的重要课题。脂肪间充质干细胞(ADSC)诸多优点在成体干细胞研究中备受青睐,有望成为组织工程种子细胞的新成员。该文就神经组织工程中ADSC生物学特性、获取与培养、成神经元分化能力及其与生物支架的相容性等方面的研究进展,作一综述。     

脂肪组织来源干细胞定向分化脂肪组织的体内外实验研究

目的 分离和培养脂肪组织来源干细胞（ASCs），鉴定其是否具有干细胞表面标志，研究携带GFP基因的ASCs向脂肪组织的体外定向诱导分化能力，同时判断种子细胞ASCs与Ⅰ型胶原支架混合培养后在体内构建组织工程化脂肪组织的可能性。方法 取GFP小鼠腹股沟部脂肪组织，使用酶消化法进行原代培养，流式细胞仪鉴定其表面干细胞标志，细胞传至第3代后使用脂肪分化培养基诱导2周，观察细胞形态及功能变化。将诱导分化后的细胞与支架材料混合培养后12h，将支架材料移植到裸鼠背部皮下，观察新生组织情况，并对新生组织使用HE及油红O染色进行鉴定。结果 原代培养的ASC形态类似于成纤维细胞，具有很强的增殖能力，能持续稳定表达表面干细胞标志。在脂肪分化培养基的作用下，胞浆内脂滴不断聚集，逐渐演变为成熟的脂肪细胞，油红O染色阳性。体内实验中在裸鼠皮下发现了0．5ml的新生组织块，常规病理及油红O染色均证实其为成熟脂肪组织块。结论 脂肪组织来源的干细胞ASC能在体外定向诱导分化为成熟脂肪细胞，且ASC能作用种子细胞与Ⅰ型胶原支架在体内成功构建脂肪组织。     

骨髓干细胞向上皮细胞分化的研究进展

骨髓于细胞具有多向分化潜能,可以向肺、肝、皮肤等组织的上皮细胞分化,因此在细胞移植治疗、基因治疗和组织工程种子细胞方面具有潜在的应用价值。文中对骨髓干细胞向上皮细胞分化的研究现状和分化机制的讨论进行介绍,并分析存在的问题和今后的临床应用前景。