低剂量西罗莫司协同CD4~+CD25~+ T-reg诱导大鼠肝移植免疫耐受的实验研究

目的我们通过体外诱导、扩增并分选出CD4+CD25+T-reg回输入受体大鼠,并协同低剂量西罗莫司去诱导大鼠肝移植免疫耐受,研究探讨CD4+CD25+T-reg细胞亚群在移植免疫耐受过程中扮演的角色。方法将实验动物分为急性排斥组(DA→LEW)、免疫耐受组(LEW→DA)、低剂量西罗莫司(0.1 mg·kg-1·d-1)和CD4+CD25+T-reg协同作用组(实验组)。每组8只实验动物。各组肝移植大鼠的存活率比较,应用HE染色法观察移植肝术后7 d组织病理学变化,检测CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群在各组大鼠移植肝脏、外周血总单核细胞数中所占的百分比。RT-PCR检测术后7 d移植肝脏Foxp3 m RNA的表达水平。用ELISA检测血浆中细胞因子IL-10、TGF-β的水平。结果实验组对比排斥组,能够长期存活,获得免疫耐受(P<0.05)。实验组移植肝脏中CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群所占的比例明显高于排斥组(P<0.001),且在移植肝脏中,实验组Foxp3 m RNA表达含量明显增加(P<0.001)。实验组血浆中细胞因子IL-10、TGF-β的表达水平高于排斥组(P<0.001)。结论我们通过流式细胞分选技术将体外扩增诱导成熟的受体大鼠CD4+CD25+T-reg细胞分离收集,然后回输受体协同低剂量的西罗莫司能够成功地诱导了长期肝移植免疫耐受。从而为临床应用CD4+CD25+T-reg细胞抑制免疫排斥反应,诱导移植免疫耐受提供了一条新思路和理论实验依据。     

肝癌患者肝移植术前使用PD-1抑制剂对移植后排斥反应的影响

目的:观察肝癌患者肝移植术前使用PD-1抑制剂对肝移植术后排斥反应的影响。方法:选取2019年1月1日至2019年12月31日在复旦大学附属中山医院行肝移植且移植前接受过PD-1抑制剂治疗的肝癌患者,共12例。检测其术后早期他克莫司药物浓度,观察移植术后排斥反应发生情况。结果:术后第1周和第2周他克莫司浓度分别为(5.14±2.68) ng/mL和(8.41±5.73) ng/mL。16.7%(2/12)患者发生细胞性排斥。结论:肝移植术前使用PD-1抑制剂的肝癌患者,其移植术后排斥反应的发生率未见明显增加。     

他克莫司对难治性重症肌无力患者疗效以及调节性T细胞的影响

目的观察他克莫司对难治性全身型重症肌无力的临床疗效、安全性以及治疗前后调节性T细胞比例变化。方法选取2013-09—2015-05于辽宁省海城市中心医院由他克莫司治疗的难治性全身型重症肌无力患者23例,采用3 mg/d的他克莫司口服治疗,观察记录治疗前以及治疗后6个月每个月的MGFA以及MG-ADL评分,并检测治疗前和治疗后6个月外周血中CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞比例以及Foxp3的表达水平。结果患者MGFA以及MG-ADL评分等临床疗效指标接受他克莫司治疗后显著下降,并且随着治疗时间的延长,改善的效果越好。不良反应的发生率为43.5%(10/23),主要表现为血糖的升高、肾结石、感染、头痛头晕、听力下降和腹泻。他克莫司治疗可以显著提高外周血CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞比例以及Foxp3的表达水平。结论他克莫司对于难治性全身型重症肌无力的临床治疗具有一定的疗效,并且可能是通过增加调节性T细胞的比例的机制来发挥作用。     

供者凋亡细胞静脉输注在异种肝移植中所产生体液免疫机理

目的以贵州香猪为供者、中国猕猴为受体的异种肝移植模型,采用静脉输注异种异基因骨髓及凋亡细胞的方法预处理受体,研究凋亡细胞对异种肝脏移植免疫排斥反应的影响,探讨异种肝脏移植免疫耐受的机制。方法受者猕猴随机分为A、B、C组,A组为阴性对照组,n=6;B组为实验对照组,n=28,在接受RIC之后,再接受供者贵州香猪的异种异基因骨髓(BM)静脉输注;C组为实验组,n=36,在接受RIC之后,再接受供者贵州香猪的BM和凋亡细胞同时静脉输注。观察各组受体的生存期,检测受体术后外周血中ALT、TB含量、Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞和T细胞亚群上GITR的表达,检测受体术后第14天移植肝的病理变化和术后第14天受体脾脏CTL杀伤活性。结果C组肝移植术后经历短暂排斥反应,最终可获免疫耐受并长期存活,其外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞表达比例在术后第14天渐恢复正常,受体外周血中CD3+CD4+T细胞上GITR表达降低,CD3+CD8+T细胞上GITR表达增加,提高CTL的杀伤活性;B组受体在术后第17~2 1天死亡,与A、C组相比,外周血血清中ALT、TB含量明显升高,而Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞比例明显降低。结论供者凋亡细胞静脉输注在异种肝移植中所产生体液免疫耐受的机理,可能是通过诱导受体外周血中CD3+CD4+T细胞上GITR表达降低,CD3+CD8+T细胞上GITR表达增加,提高CTL的杀伤活性来实现的。     

外周血中调节性T细胞表达与肝细胞肝癌的临床联系及肝癌切除对其的影响

目的：探讨肝细胞肝癌（简称肝癌）患者外周血中调节性T细胞的表达状态、临床意义以及肝癌切除对其表达的影响。方法：利用流式细胞仪检测肝癌患者及健康对照者外周血中调节性T细胞群的表达频数，分析其与肝癌病理特征及肿瘤TNM分期的关系，并进一步观测肝癌切除前后外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞频数的动态变化。结果：肝癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋、CD4^＋Foxp3^＋、CD4^＋CD25^＋T细胞频数均较健康对照组显著增加。调节性T细胞群表达和肿瘤数目、血管侵犯及TNM分期均明显相关。肝癌切除术后第1天调节性T细胞频数较术前明显下降；术后1周时调节性T细胞表达出现最高峰。结论：肝癌患者调节性T细胞群表达增加；调节性T细胞可能主要在肝癌病程演进的较早阶段发挥作用；肝癌切除可能降低肿瘤相关性调节性T细胞的表达。     

肝移植受体免疫耐受的诱导及CD4^＋CD25^＋T细胞的重要作用

背景:解决肝移植排斥反应的惟一方法是诱导免疫耐受,而环孢素A对诱导鼠肝移植免疫耐受及T细胞都存在一定影响,可为各种免疫抑制剂的合理使用提供依据.目的:探讨环孢素A诱导肝移植后免疫耐受的可行性及方法,分析CD4+CD25+调节性T细胞在诱导耐受中的作用.设计、时间及地点:随机分组,动物实验观察,2007-01/2008-04在中山大学医学实验动物中心和深圳市第三人民医院肝病研究所完成.材料:健康LEW大鼠66只,BN大鼠78只,CD4、CD25抗体和Foxp3抗体(克隆号PCH101)由美国eBioscience公司生产,环孢素A针剂由北京诺华制药提供.方法:根据用药情况建立6组肝移植模型:同基因对照组:BN大鼠进行同种异体肝移植,移植后不用药.急性排斥组:LEW大鼠作为供体,BN大鼠作为受体,移植后不用药.环孢素A小、中、大剂量组:LEW大鼠作为供体,BN大鼠作为受体,移植后分别给予环孢素A1.0,1.5,2.0 mg/(kg·d),疗程均为5 d.环孢素A中剂量延期组:LEW大鼠作为供体,BN大鼠作为受体,移植后给予环孢素A1.5 mg/(kg·d),疗程7 d.除急性排斥组和环孢素A小剂量组各24只外,其他6只/组.主要观察指标:观察各组大鼠移植后生存时间及外周血变化,并检测急性排斥组和组肝、环孢素A小剂量组脾组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg的含量.结果:同基因对照组存活时间>100 d,而不发生排斥反应.环孢素A小、中、大剂量组存活时间分别为(51.5±2.4),(53.6±3.6).(23.2±2.1)d,环孢素A中剂量延期组和急性排斥组分别为(57.8±7.2),(20.6±3.2)d,除同基因对照组外,各组间差异均有统计性意义(F=114.82,P<0.01).各组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg的比例无明显差别及增加(P>0.05).环孢素A小剂量组肝组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg的含量明显增加,且高于急性排斥组(P<0.05).结论:小剂量环孢素A可以诱导免疫耐受,大剂量环孢素A突然停药会导致加速性排斥.CD4+CD25+Foxp3+Treg能促进移植肝受体的免疫耐受,但其增加只存在于移植的肝内,外周血、脾脏未见增加.     

肝移植后他克莫司血药浓度对外周血单个核细胞内HBVDNA的影响

背景:肝移植后他克莫司等免疫抑制剂的长期应用导致机体细胞免疫功能降低,并有可能影响机体对乙肝病毒的清除.目的:分析乙肝相关肝移植患者后不同浓度他克莫司对外周血单个核细胞中的HBVDNA含量的影响.方法:纳入乙肝相关终末期肝病肝移植受者23例,根据移植后12周清晨空腹他克莫司血药浓度,分为高浓度组(≥10 μg/L)9 例和低浓度组(<10 μg/L)14例,同时用荧光标记单克隆抗体结合流式细胞技术检测外周血T细胞亚群的百分比,用实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞内的HBV DNA.结果与结论:用多元线性回归分析外周血单个核细胞内的HBV DNA含量与CD8+CD152+呈正相关,与CD8+CD28+呈负相关.高血药浓度他克莫司的患者外周血单个核细胞内的HBV DNA高于低浓度组,其改变与反映细胞免疫功能的指标CD8+CD152+和CD8+CD28+的变化有关.     

西罗莫司对慢性移植肾肾病肾组织转化生长因子β1和血管内皮生长因子表达的影响(英文)

背景:西罗莫司对肾移植术后急性排斥反应的防治产生重要作用,同时,有研究发现它可抑制血管平滑肌细胞的增殖和迁徙,对慢性排斥反应以及慢性移植肾肾病产生防治作用,但具体的机制尚不清楚.目的:探讨西罗莫司对慢性移植肾肾病肾组织转化生长因子和血管内皮生长因子表达的影响.方法:选择原发性肾病首次尸肾移植者60例,随机分为两组:西罗莫司组和硫唑嘌呤组各30例,分别采用西罗莫司+环孢素A+激素,硫唑嘌呤+环孢素A+激素治疗,西罗莫司首次负荷剂量为6mg,2周内2mg/d,2周后改为1.0～2.0 mg/d,环孢素A为5.0～7.0 mg/d,硫唑嘌呤为50～100 mg/d,激素为15～0 mg/d.术后2年时,对移植肾进行活检.观察移植肾组织转化生长因子β1和血管内皮生长因子表达情况,并观察肝功能、血肌酐浓度、急性排斥反应发生率、人/肾存活率.结果与结论:随访2年,西罗莫司组于术后1,3,12个月的环孢素剂量明显低于硫唑嘌呤组,但是两组之间的血环孢素A的谷值浓度没有明显差异.硫唑嘌呤组中,转化生长因子β1表达主要分布于近曲小管,部分可见肾小球以及间质血管;大部分移植肾组织近曲小管呈阳性表达,线型分布于刷状缘,部分呈阳性表达.部分患者肾小球脏层上皮细胞呈节段性阳性表达.内皮细胞及系膜偶见阳性表达.西罗莫司组中,转化生长因子β1在近曲小管的表达则明显减弱,肾小球和间质血管无明显改变.硫唑嘌呤组中血管内皮生长因子表达主要见于肾小球脏层上皮细胞,部分病例也可见于内皮细胞及系膜细胞,间质血管呈阳性表达,主要分布于内皮层.西罗莫司组,肾小球、间质血管染色均明显减少.与硫唑嘌呤组比较,西罗莫司组人/肾存活率高、移植肾组织转化生长因子β1和血管内皮生长因子表达明显降低.结果表明,西罗莫司可降低移植肾组织转化生长因子β1和血管内皮生长因子表达,减缓慢性移植肾肾病的进展,延长移植肾存活时间.     

Genistein联合小剂量他克莫司在胰腺移植排斥反应中的作用

背景:有实验表明CXCR3拮抗剂Genistein可减轻胰腺移植大鼠的急性排斥反应。目的:观察Genistein联合小剂量他克莫司在胰腺移植抗排斥反应中的作用。方法:以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,建立胰腺移植模型,随机分成5组:对照组(未进行药物治疗)、大剂量他克莫司组、小剂量他克莫司组、Genistein组、Genistein+小剂量他克莫司组。术后第7天行病理学,肝肾功能,血清中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞、干扰素γ、白细胞介素2浓度检测。结果与结论:与对照组、小剂量他克莫司组、Genistein组比较,Genistein+小剂量他克莫司组移植胰腺组织损伤减轻,淋巴细胞浸润减少,急性排斥反应减轻,血清CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞明显减少,干扰素γ、白细胞介素2水平降低(P<0.05);并且避免了大剂量他克莫司对肝肾功能的损害。说明Genistein联合小剂量他克莫司能有效减轻胰腺移植急性排斥反应而不增加肝肾毒性。     

他克莫司处理供者树突状细胞在诱导大鼠同种心脏移植免疫耐受中的作用(英文)

背景:诱导供者特异性免疫耐受被认为是最终克服器官移植后排斥反应的有效途径,近年来关于未成熟树突状细胞在诱导免疫耐受中的重要作用日益受到关注。目的:观察他克莫司处理的供者未成熟树突状细胞对大鼠同种异体心脏移植免疫耐受的影响,分析未成熟树突状细胞诱导免疫耐受的作用途径。设计:随机对照动物实验。材料:实验于2006-04/2006-12在青岛大学医学院附属医院动物实验中心完成。以45只Wistar大鼠为供体,45只SD大鼠为受体,行颈部心脏移植45例次。按随机数字表法分为3组,每组15例次,进行不同的预处理。方法:对照组、未经他克莫司处理组及他克莫司处理组移植前7d分别经尾静脉注射生理盐水、供者未成熟树突状细胞和他克莫司处理的未成熟树突状细胞。分别测定移植后SD大鼠与Wistar大鼠及第3品系Lewis大鼠的单向混合淋巴细胞反应。主要观察指标:各组受体大鼠移植心脏存活时间、心肌病理及血清白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素10、γ-干扰素含量变化。结果:①未经他克莫司处理组大鼠的移植心脏存活时间较对照组明显延长(P<0.01),他克莫司处理组大鼠的移植心脏存活时间进一步延长(P<0.05)。②混合淋巴细胞培养结果显示为供者特异性。③各组大鼠血清白细胞介素2、γ-干扰素、白细胞介素4、白细胞介素10含量差异具有显著性意义(P<0.01)。代表Th1的白细胞介素2、γ-干扰素水平明显降低,代表Th2的白细胞介素4、白细胞介素10水平明显增高。结论:未成熟树突状细胞能够诱导同种异体大鼠心脏移植免疫耐受;他克莫司处理的未成熟树突状细胞能够加强这种免疫耐受,且这种耐受是供者特异性的。其可能主要通过调节T细胞免疫应答类型(Th1至Th2的免疫偏移)、诱导调节性T细胞和诱导T细胞失能等途径来参与免疫耐受的形成。     

胸腺五肽对大鼠肝癌免疫微环境中T细胞及其亚群的影响

目的探讨大鼠肝癌免疫微环境中T细胞及其亚群的改变;研究胸腺五肽(TP-5)对大鼠肝癌免疫微环境中T细胞及其亚群的影响。方法将60只健康雄性Wistar大鼠随机分成4组:正常对照组:建模和给药周期内一切操作均以等量生理盐水替代药物;模型对照组:建立肝癌模型后,给药期以生理盐水替代TP-5;给药Ⅰ组:建立肝癌模型后,给药期给TP-5,0.25 mg/次,1次/d;给药Ⅱ组:建成肝癌模型后,给药期给TP-5,0.5 mg/次,1次/d。流式细胞术检测肝组织中T细胞及其亚群的改变。结果模型组肝组织中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞的比例均高于相应的正常对照组(P<0.001),CD8+T细胞在模型组肝组织中的比例低于相应的正常对照组(P<0.001)。TP-5治疗后给药Ⅰ、Ⅱ组的CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+Treg细胞与模型对照组间有明显差异(P<0.05),且明显趋于正常(与正常对照组比P>0.05)。结论肝癌免疫微环境中CD3+T细胞、CD4+T细胞以及对免疫起抑制作用的CD4+CD25+Treg细胞比例增高,但在抗肿瘤反应中起主要作用的CD8+T细胞比例却明显下降,导致肝癌免疫微环境处于抑制状态;TP-5对大鼠肝癌免疫微环境有改善作用。     

MR imaging of hepatocellular carcinoma at 1.5 Tesla

The authors investigated the magnetic resonance appearance of hepatocellular carcinoma using a 1.5-Tesla magnet. Twenty-four patients with pathologically proven hepatocellular carcinoma had magnetic resonance imaging (MRI) studies, which were retrospectively reviewed. All patients were imaged with at least two of the following techniques: (1) T1-weighted (T1W), (2) T1-weighted with Gd-DTPA enhancement (T1W-E), (3) T2-weighted (T2W), (4) proton density (PD), and (5) gradient-recalled echoes (GRE). T1W images were equal to T2W images for tumor detection using a grading system. T1W images were slightly better than T2W images for the total number of lesions detected. The other pulsing techniques (PD, T1W-E, and GRE) detected fewer lesions. Eight cases of hepatocellular carcinoma (33%) had nonhomogeneous increased signal intensity on both T1W and T2W images. The authors conclude that T1W images are equal to T2W images for detection of hepatocellular carcinoma. The authors also conclude that 33% of hepatocellular carcinomas have an imaging pattern with increased signal intensity on both T1W and T2W images. This pattern is atypical for most other hepatic masses and hence can be used to suggest the mass is hepatocellular carcinoma.     

裸鼠皮下种植性肝癌模型的建立

背景:目前采用Huh7肝癌细胞在BALB/c裸小鼠皮下种植性成瘤的报道较多,但对其成瘤后稳定性的研究较少。目的:建立稳定的皮下种植性裸鼠肝癌模型。方法:取1.5×106个对数期细胞Huh7肝癌细胞,种植于裸鼠皮下。成瘤后从体质量、大体形态,肿瘤生长情况,反转录-聚合酶链式反应,苏木精-伊红染色及免疫组织化学多方面进行稳定性及病理学特征鉴定。结果与结论:肿瘤形成的潜伏期约12d,肿瘤成功率为92.8%。种植肿瘤组小鼠体质量较正常对照小鼠明显减轻,肿瘤生长迅速,甲胎蛋白基因及蛋白强阳性表达,细胞分裂明显。表明成功建立了稳定的裸鼠皮下种植性肝癌模型。     

经肝动脉化疗栓塞术联合微波消融对中晚期肝癌细胞免疫功能和预后的影响

目的探讨经肝动脉化疗栓塞术(TACE)联合微波消融(MVA)对中晚期肝癌细胞免疫功能和预后的影响。方法回顾性分析96例中晚期肝癌患者资料,其中55例行TACE联合MVA治疗(联合组),41例行单纯TACE治疗(对照组)。比较两组患者术后CD4+、CD8+T淋巴细胞、NK细胞水平和生存情况。结果与治疗前比较,对照组术后3种免疫指标无明显变化(均P0.05),而联合组术后CD4+T淋巴细胞和NK细胞比例逐渐上升,CD8+T淋巴细胞比例下降,其中治疗后1个月3种免疫指标较术前,差异有统计学意义(均P0.05)。联合组治疗后1月CD4+淋巴细胞和NK细胞比例高于对照组,CD8+淋巴细胞比例低于对照组,且差异均有统计学意义(均P0.05)。随访时间为5.5~43.6个月。联合组1年、2年、3年总生存率分别为83.6%、52.7%、9.1%;对照组1年、2年、3年总生存率分别为70.7%、14.6%、0。两组患者的总生存率比较,差异有统计学意义(P=0.001)。结论较单纯TACE治疗,TACE联合MVA治疗可以改善中晚期肝癌患者的细胞免疫功能和生存情况。     

Effects of microwave ablation on T-cell subsets and cytokines of patients with hepatocellular carcinoma

Objectives: To investigate the effects of microwave ablation on T-lymphocyte subsets and cytokines in patients with hepatocellular carcinoma.

Material and methods: Peripheral blood was collected from 45 patients with hepatocellular carcinoma treated by microwave ablation before treatment, one week and one month after treatment. T cells (CD3+, CD4+ and CD8+?cells), CD4+?CD25+?Tregs, and CD16+?CD56+?NK cells were analyzed by flow cytometry. Levels of cytokines (IL-2, IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL-4, IL-6, IL-8, and IL-10) were determined by a Luminex 200 analyzer.

Results: Compared with before treatment, CD3+ cells, CD4+ cells and IL-12 increased significantly at one month after the microwave ablation treatment, while IL-4, IL-10 decreased significantly.

Conclusions: Microwave ablation could relieve the suppression of immune function caused by tumors, promote the deviation of Th2/Th1, and improve immune dysfunction in patients with hepatocellular carcinoma.     

Diabetes mellitus and primary hepatocellular carcinoma

In view of the increasing incidence of primary hepatocellular carcinoma in western Europe and concern that this may in part be related to long-term use of drugs which cause hepatic microsomal enzyme induction, we undertook a comparison of long-term drug use in 105 patients with hepatocellular carcinoma and equal numbers of age and sex-matched patients with colorectal tumours and with fractures of femur. We found no patients with hepatocellular carcinoma who were long-term anticonvulsant users and only one who used oral contraceptives. However, we observed a four-fold excess of diabetic patients among the group with hepatocellular carcinoma. This association did not appear to be due to pre-existing haemochromatosis, alcoholic cirrhosis or viral hepatitis. The association was strongest in patients receiving drug treatment for diabetes, but the data, although suggestive, were insufficient to determine whether any specific anti-diabetic agent could be responsible. Further studies are required to elucidate the nature of this unexpected association. An association of this magnitude with diabetes mellitus could account at least in part for the increasing incidence of hepatocellular carcinoma in western Europe.     

超顺磁性氧化铁(SPIO)增强MRI对原发性肝癌的诊断价值

目的：检验SPIO增强MRI对原发性肝癌的定位，定量，定性诊断价值。方法：选取经螺旋CT增强，MR平扫，SPIO增强扫描检查且有手术或穿刺活检病理或DSA血管造影资料并经随访，实验室生化检查及临床资料证实为原性肝癌者20例。结果：SPIO增强T2MRI检出79个病灶，其中经手术，穿刺活检病理证实或DSA血管造影显示有肿瘤血管团和/或肿瘤染色的原发性肝癌病灶69个；另有10个为异常信号灶，SPIO增强MRI较CT增强及MR平扫病灶检出率分别增加66%和59%，病灶-肝脏对比噪声比增加52%（P=0.004)。结论：（1）SPIO增强T2WI病灶-肝脏对比噪声比显著增加；（2）病灶检出率明显高于MR平扫及螺旋CT增强影像；（3）结合MR平扫影像，SPIO增强MR影像对肝癌病灶的定位。定量及定性诊断有重要意义；（4）SPIO增强MR影像对肝脏良恶性肿瘤的鉴别诊断有重要意义。     

裸鼠皮下种植性肝癌模型的建立

背景：目前采用Huh7肝癌细胞在BALB/c裸小鼠皮下种植性成瘤的报道较多,但对其成瘤后稳定性的研究较少。目的：建立稳定的皮下种植性裸鼠肝癌模型。方法：取1.5×106个对数期细胞Huh7肝癌细胞,种植于裸鼠皮下。成瘤后从体质量、大体形态,肿瘤生长情况,反转录-聚合酶链式反应,苏木精-伊红染色及免疫组织化学多方面进行稳定性及病理学特征鉴定。结果与结论：肿瘤形成的潜伏期约12d,肿瘤成功率为92.8%。种植肿瘤组小鼠体质量较正常对照小鼠明显减轻,肿瘤生长迅速,甲胎蛋白基因及蛋白强阳性表达,细胞分裂明显。表明成功建立了稳定的裸鼠皮下种植性肝癌模型。     

Staging classifications for hepatocellular carcinoma

Evaluation and treatment of patients with hepatocellular carcinoma is dependent on accurate staging. Tumor-specific factors and the degree of underlying liver disease must be considered when evaluating patients with hepatocellular carcinoma. Clinical staging classification systems based on preinterventional data are predictive of survival and influence patient selection for various therapeutic modalities. Pathologic staging systems accurately assess prognosis and influence additional treatment post resection. The various staging systems for hepatocellular carcinoma are reviewed in detail. The benefits and limitations of these classification systems are discussed in this review. Considerable controversy remains over which classification system provides the optimum staging of hepatocellular carcinoma. The revised American Joint Committee on Cancer/International Union Against Cancer emphasizes the importance of major vascular and microvascular invasion as independent predictors of death and the negative impact of severe fibrosis/cirrhosis on survival following resection of hepatocellular carcinoma. As such, it is currently the most accurate staging system in this group of patients. Its applicability in those patients who are not candidates for resection is uncertain.     

miR-138在慢性乙型肝炎肝癌患者中的表达及其对外周血T细胞PD-1表达的影响

目的 探讨miR-138在慢性乙型肝炎肝癌患者(HCC)中的表达及其对外周血T细胞PD-1表达的影响。方法Real-time PCR检测HCC患者外周血和腹腔积液miR-138含量,ELISA检测HCC患者外周血和腹腔积液sPD-1含量,CD3免疫磁珠分选HCC患者外周血T淋巴细胞,流式细胞术和WesternSblot检测miR-138 mimic或miR-138 inhibitor转染后T细胞PD-1表达,双荧光素酶报告基因系统验证miR-138对PD-1基因3’-UTR区的靶向作用。 结果 HCC患者腹腔积液和外周血血清miR-138相对表达量,sPD-1含量和CD3₊T细胞中PD-1表达量均显著高于对照组(P<0.05)且miR-138相对表达量与sPD-1含量、CD3₊T细胞PD-1表达量均呈负相关(P<0.05)。miR-138在HCC患者T细胞中通过靶向作用PD-1基因3’-UTR区负向调节PD-1表达。结论 miR-138通过靶向作用PD-1参与了HBV相关HCC的发生发展过程。