C反应蛋白激活单核细胞核因子-κB 及辛伐他汀干预

目的观察C反应蛋白(CRP)刺激人外周血单核细胞核因子-κB(NF-κB)活化及白细胞介素-6(IL-6)表达,予辛伐他汀干预,探讨CRP/NF-κB在动脉粥样硬化(AS)致病机制中的作用和辛伐他汀的抗AS效应.方法密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,免疫细胞化学观察CRP致单核细胞NF-κB p65活化的时间效应,ELISA法观察IL-6产生的时间-浓度效应,其峰值分别与辛伐他汀抑制剂组比较.结果CRP刺激单核细胞NF-κB活化呈时间依赖性,高峰在2 h,单核细胞表达IL-6呈时间与浓度依赖性,在24 h达高峰.辛伐他汀(1×10-8mol/L～1×10-6mol/L)呈剂量依赖性抑制NF-κB活化与IL-6表达.结论CRP激活正常人单核细胞NF-B信号途径,并诱导单核细胞产生IL-6,辛伐他汀抑制单核细胞NF-κB活性与IL-6表达,提示CRP/NF-κB信号途径在促进AS发病机制中起重要作用,辛伐他汀抑制NF-κB有可能减轻或抑制AS进展.     

C反应蛋白和脂多糖致单核细胞核因子-κB活化的时间效应

目的：观察C反应蛋白（CRP）和脂多糖（LPS）刺激人外周血单核细胞核因子-kB（NF—kB）活化及白细胞介素-6（IL-6）表达，探讨CRP／NF—kB在动脉粥样硬化（AS）致病机制中的作用。方法：密度梯度离心法分离人外周血单核细胞，免疫细胞化学观察CRP和LPS致单核细胞NF—kB p65活化的时间效应，ELISA法观察IL-6产生的时间效应。结果：CRP和LPS刺激单核细胞NF—kB活化呈时间依赖性，开始活化的时间在刺激后30min，高峰分别在2h与1h；CRP和LPS刺激单核细胞合成IL-6呈时间依赖性，开始合成的时间分别在刺激后4h与2h，高峰在24h，其合成出现在核因子-kB活化后。结论：CRP和LPS激活单核细胞NF—kB信号途径，并诱导IL-6产生。     

缬沙坦对CRP诱导的单核细胞IL-6合成的影响

目的通过研究缬沙坦对C反应蛋白(CRP)诱导的正常人外周血单核细胞合成白细胞介素6 (IL-6)的影响,观察缬沙坦的抗炎作用.方法采用密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,应用酶联免疫吸附试验分别观察CRP刺激单核细胞产生IL-6的时间及剂量效应,其峰值与缬沙坦抑制剂组比较.结果CRP刺激单核细胞IL-6合成呈时间依赖性和剂量依赖性,20 mg/L CRP诱导IL-6合成开始的时间是4 h,在24 h达高峰,其峰值是(904±77) ng/L.仅高浓度缬沙坦(10-3 mol/L)能抑制20 mg/L CRP诱导的单核细胞IL-6合成.结论缬沙坦并不适用于抗细胞因子治疗.     

地塞米松对人外周血单核细胞核因子-κB活化和肿瘤坏死因子-α释放的影响

目的探讨地塞米松(dexamethasone,DXM)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人外周血单核细胞核因子(nuclear factor kappaB,NF-κB)活化和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)产生的影响。方法收集人外周血单核细胞接种于培养板后,分生理盐水对照组、LPS组、LPS DXM1μmol/L组、LPS DXM10μmol/L组。LPS诱导0、0.5、2、6、12、16h后留取细胞及细胞培养上清。采用免疫细胞化学染色法检测细胞NF-κBp65阳性表达率,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中TNF-α的含量。结果LPS诱导0.5h后NF-κB表达开始增加,2h达高峰。2h时TNF-α合成开始增加,6h达高峰。在2、6、12h时,LPS DXM1μmol/L组和10μmol/L组TNF-α含量均比LPS组各相应时间点低(P<0.05或0.01)。在0.5、2、6h时LPS DXM1μmol/L组NF-κB阳性表达率和在2、6h时LPS DXM10μmol/L组NF-κB阳性表达率均比LPS组低(P<0.05或0.01)。LPS DXM1μmol/L和10μmol/L组NF-κB阳性表达率和TNF-α含量在各时间点差异均无统计学意义。结论LPS在体外诱导人外周血单核细胞NF-κB的活化和TNF-α的产生;DXM通过抑制NF-κB的活化和TNF-α的释放而发挥抗炎作用,并且这种抑制效应可能不随剂量的增加而增强。     

PKC／MAPK／NF—κB信号通路在低氧诱导大鼠单核细胞表达IL-1β中的作用

目的 研究PKC/MAPK/NF-κB信号通路在低氧诱导大鼠外周血单核细胞(peripheral blood monouclear cells, PBMCs)白细胞介素-1β(IL-1β)表达中的作用,探讨低氧与全身炎症反应综合征(SIRS)的关系,为进一步研究老年多器官功能障碍综合征(MODSE)的肺启动机制奠定基础.方法 采用明胶法分离大鼠外周血单核细胞,分为低氧组和Chelerythrine 低氧组.Chelerythrine 低氧组于低氧前予10 μmol/L Chelerythrine预处理.然后两组细胞均于低氧条件下(3% O2, 5% CO2, 92% N2)培养0、1、3、6、9、12、24 h后,收集细胞及培养液上清,分别采用PKC、MAPK活性检测试剂盒、电泳迁移分析法(EMSA)、逆转录PCR(RT-PCR)检测PKC、MAPK、NF-κB活性及IL-1β表达量.结果 低氧1～9 h,PKC、MAPK活性,NF-κB结合活性及IL-1β表达量显著高于正常对照组(P<0.01).低氧后1～24 h,PKC、MAPK活性、NF-κB结合活性与IL-1β mRNA表达水平间呈显著正相关(P<0.01～0.05).10 μmol/L Chelerythrine可显著抑制低氧诱导的PKC、MAPK、NF-κB活性升高和IL-1β表达.结论 低氧可显著增强大鼠外周血单核细胞的PKC、MAPK活性及NF-κB结合活性,并可诱导其产生大量的促炎症因子IL-1β,这些变化可能与急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory dysfunction, ARDS)时血浆中大量促炎症因子持续存在密切相关.     

小白菊内酯通过NF-κB信号通路对LPS诱导的气道上皮细胞IL-8分泌水平影响的研究

目的探究小白菊内酯(PTL)对脂多糖(LPS)诱导的气道上皮细胞IL-8的分泌水平影响以及具体的作用机制。方法 CCK8法检测0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml的LPS对气道上皮细胞的毒性作用,RT-q PCR和Western blot检测不同浓度LPS对IL-8表达水平的影响。添加0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L PTL后,CCK8法检测细胞活性变化; RT-q PCR和Western blot检测白介素8(IL-8)表达水平的变化; Western blot检测PTL对NF-κB p65和IκBα蛋白表达水平的影响。结果 LPS呈时间和浓度依赖性抑制气道上皮细胞活性; LPS呈时间依赖性促进IL-8表达水平;添加LPS能够使IκB表达下调,NF-κB p65表达上调。添加适当浓度的PTL能够缓解LPS对细胞的毒性影响,使IL-8表达下调,具有浓度依赖性;并且促使IκB下调,NF-κB p65上调。结论小白菊内酯能够通过NF-κB信号通路抑制气道上皮细胞炎症因子IL-8的分泌水平。     

辛伐他汀对血管紧张素Ⅱ刺激人单核细胞分泌白细胞介素6的影响

目的观察辛伐他汀对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的人单核细胞分泌白细胞介素6（IL-6）的影响,探讨辛伐他汀抗动脉粥样硬化（AS）可能的机制。方法培养人单核细胞型淋巴瘤（THP-1）细胞株,设空白对照组、AngⅡ刺激组、辛伐他汀低、中、高3个浓度组。辛伐他汀3组分别为辛伐他汀0．1、1、10μmol／L及对照组加入AngⅡ1μmol／L后孵育24小时,用免疫荧光法观察核因子KB（NF-κB）活化情况,SYBR Gteen I染料法实时荧光定量采用2^-△△Ct相对值观察IL-6基因表达水平。结果辛伐他汀3组均能够抑制核因子亚基p65由胞质转移至核内,辛伐他汀组均降低IL-6的表达,各组IL-6表达值为：空白组1．00±0．02,AngⅡ刺激组1．71±0．06,辛伐他汀高浓度组0．43±0．01,辛伐他汀中浓度组0．56±0．01。辛伐他汀低浓度组0．64±0．02,与空白组比较差异有统计学意义（P〈0．001）。结论实时荧光定量检测结果显示辛伐他汀可减少AngⅡ引起的IL-6表达,辛伐他汀通过影响NF-κB的表达来影响IL-6的分泌,可能是辛伐他汀抗AS的机制。     

胆红素对新生儿脐血单核细胞NF-κB表达的影响

目的 探讨胆红素对新生儿脐血单核细胞(CBMC)核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 选择10例健康足月新生儿作为研究对象,收集脐血,采用明胶/自体血浆贴壁法(gelatin/plasma coatedflasks)分离CBMC.经含有不同浓度胆红素的牛血清白蛋白溶液孵育1 h,再给予脂多糖(LPS)刺激培养细胞,收集单核细胞.采用间接免疫荧光法,观察CBMC NF-κB的活化水平.结果 LPS可促进CBMC NF-κB的活化,而胆红素对其有抑制作用,6 mg/dl浓度的胆红素单独即可抑制CBMC NF-κB的活化.先经不同浓度(2.5 mg/dl、6 ms/dl、9 mg/dl、12.9 mg/dl、18mg/dl)胆红素孵育,CBMC NF-κB的活化受到不同程度的抑制;再接受LPS刺激,低浓度(2.5 mg/d和6 mg/dl)胆红素孵育后的CBMC NF-κB的活化可以恢复,高浓度(12.9 mg/dl和18 mg/dl)胆红素孵育后的CBMC NF-kB的活化仍然受抑制,当胆红素浓度由12.9 mg/dl上升至18 mg/dl时,CBMC NF-κB的活化受抑制程度的差异,没有统计学意义.随着胆红素浓度的升高,这种抑制作用越明显.结论 胆红素可以通过抑制CBMC NF-κB的活性影响单核细胞的免疫功能.     

罗格列酮对冠心病患者巨噬细胞表达核因子-κB和金属蛋白酶-9的影响

目的 探讨罗格列酮(Ros)干预在调节冠心病患者外周血单核细胞源性巨噬细胞(MDMs)表达核因子-κB(NF-κB)、金属蛋白酶-9(MMP-19)中的作用及可能机制.方法 本研究为临床病例对照研究.于2007年3月至4月间,从湘雅二医院心内科行冠脉造影患者中,选取急性冠脉综合征患者48例(ACS组)、稳定型心绞痛(SA)患者20例(对照组)为研究对象,排除脑血管意外、急性感染和创伤、肝肾功能不全、肿瘤等患者.提取外周血单个核细胞,用巨噬细胞集落刺激因子刺激,转化为MDMs;随机分亚组后,分别用0μmol/L1μmol/L,10 μmol/L,20 μmol浓度Ros干预48h;RT-PCR检测各亚组MDMs表达过氧化物酶增殖体激活受体-γ([PPAR-γ)和MMP-9 mRNA,免疫组化法检测NF-κB P65表达强度.用ANOVA检验比较组间及亚组内MDMs在表达PPAR-γ,MMP-9,NF-κB P65的差异.结果 干预前,ACS组MDMs表达PPAR-γmRNA水平低于对照组,表达NF-κB P65及MMP-9mRNA水平高于对照组;Ros干预后,ACS组及对照组PPAR-γmRNA表达明显上调,ACS组PPAR-γ的表达量与Ros浓度呈正变关系;MMP-9 mRNA表达下调,在ACs组其下调程度与Ros浓度呈反变关系;两组NF-κB P65表达量均呈现非剂量依赖性降低.结论 ACS患者外周血MDMs的PPAR-γRNA表达被抑制、NF-γB活性及MMP-9 mRNA表达增强.Ros干预可通过增加PPAR-γ的表达,从而抑制NF-κB活性和MMP-9的表达.     

单核细胞趋化蛋白-1和核因子-κB与糖尿病视网膜病变的关系

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血单核细胞趋化蛋白-1(McP-1)和单核细胞中核因子-κB(NF-κB)水平的表达及与糖尿病视网膜病变(DR)的关系.方法 52例T2DM患者根据眼底检查结果 分为无视网膜病变组(B组,n=36)和有视网膜病变组(C组,n=16).采用流式细胞仪计数法分析外周血单核细胞MCP-1和NF-κB水平并与健康查体者(A组,20例)进行比较.结果 (1)与A组比较,B组和c组外周血单核细胞MCP-1和NF-κB水平均显著增高(均P<0.01);与B组比较,C组外周血单核细胞MCP-1和NF-κB水平进一步明显增高(均P<0.01).(2)相关性分析:单核细胞NF-κB表达与MCP-1表达呈显著正相关(r=0.949,P<0.01);单核细胞NF-κB与HbA1c、TG、尿酸(UA)、尿白蛋白排泄率(UAER)均呈正相关(r值分别为0.533、0.305、0.295、0.682,均P<0.05).结论 T2DM患者外周血单核细胞上MCP-1和单核细胞中NF-κB水平表达增强,尤其是DR患者,提示MCP-1和NF-κB可能参与DR的发生发展.     

Survivin和NF—κB蛋白在大肠黏膜癌变过程中的表达及意义

目的研究凋亡抑制蛋白Survivin和核转录因子（NF—κB）在大肠黏膜癌变过程中的表达,初步探讨两者在大肠癌发生、发展中的作用及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测67例大肠腺癌、51例大肠腺瘤（包括26例低度异型增生和25例高度异型增生）和22例正常大肠黏膜组织中Survivin和NF—κB的表达。结果Survivin和NF—κB在大肠黏膜癌变过程中的表达率逐渐升高,Survivin在大肠正常黏膜、低度异型增生腺瘤、高度异型增生腺瘤、大肠癌中阳性表达率分别为9．1％（2／22）、23．1％（6／26）、52．0％（13／25）和58．2％（39／67）;NF—κB在大肠正常黏膜、低度异型增生腺瘤、高度异型增生腺瘤、大肠癌中阳性表达率分别为13．6％（3／22）、26．9％（7／26）、64．0％（16／25）和67．2％（45／67）。Survivn、NF—κB的表达与大肠癌的侵袭深度和淋巴结转移及Dukes分期有关,与性别、年龄无关;Survivn、NF—κB在大肠癌中的表达具有相关性（Х^2=6．363,P=0．012）。结论Survivn、NF—κB在大肠黏膜癌变过程及大肠癌的浸润、转移中起重要作用,两者共同促进了大肠癌的发生、发展。     

灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠肝脏细胞凋亡及核转录因子NF—κB／P65表达的影响

目的观察灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠肝脏细胞凋亡及核转录因子NF-κB表达的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分成3组：对照组,糖尿病组,灵芝组。吉姆萨染色法检测肝脏细胞凋亡率,免疫组化法检测核因子-κB转录（NF—κB）蛋白表达的变化。结果细胞凋亡率和NF—κB表达水平均明显高于对照组和灵芝组（P均〈0．05）。结论灵芝孢子粉对糖尿病大鼠肝脏组织具有保护作用,可抑制肝脏细胞凋亡,可能与其减轻氧化应激、减少糖尿病肝脏过度表达NF—κB有关。     

Correlates of endothelial function and their relationship with inflammation in patients with familial hypercholesterolaemia

Atherosclerosis is characterized by a low-grade systemic inflammatory response and endothelial dysfunction. The aim of the present study was to investigate a possible relationship between systemic markers of inflammation, serum markers of endothelial activation and endothelium-dependent vasodilatation in a group of high-risk patients, and to evaluate the effects of intervention with high doses of simvastatin on these parameters. In patients with heterozygous familial hypercholesterolaemia, without atherosclerotic events, flow-mediated vasodilatation (FMD) of the brachial artery was measured after a wash-out period for lipid-lowering drugs (baseline) and after 6 weeks of treatment with simvastatin 80 mg daily. Levels of C-reactive protein (CRP), soluble intercellular cell-adhesion molecule (s-ICAM) and soluble E-selectin (s-E-selectin) were determined at baseline and again after 6 weeks and 12 months of therapy. A total of 35 subjects participated in the study (mean age 42 years; 60% male). When divided into tertiles according to FMD (<3.9%, 3.9-9.0% and >9.0%), no differences in levels of CRP, s-ICAM-1 and/or s-E-selectin were detected between the groups. Moreover, no changes in FMD, levels of CRP or levels of s-ICAM-1 and/or s-E-selectin were found during treatment with simvastatin. We conclude that endothelial function, as reflected by FMD, does not seem to be related to markers of inflammation in familial hypercholesterolaemia subjects at high risk of, but without clinically overt signs of, atherosclerosis. Moreover, aggressive lipid-lowering therapy with simvastatin does not result in improved endothelial function or in a reduction of markers of inflammation in these patients.     

重症急性胰腺炎大鼠IL-8 IL-10及NF-κB的表达

目的 通过观察重症急性胰腺炎（SAP）大鼠白介素-8（IL-8）、白介素-10（IL-10）及胰腺NF-κB的表达，探讨重症急性胰腺炎的发生发展机制。方法将40只大鼠随机分为正常对照组（假手术组）、模型组（重症急性胰腺炎组），每组20只，造模后24h测定血淀粉酶、IL-8及IL-10，切取相同部位的胰腺组织观察组织病理学改变，进行NF—κB的免疫组织化学染色。结果模型组大鼠血清淀粉酶、IL-8及IL-10的浓度均显著高于对照组，模型组NF-κB免疫组化染色较对照组显著增强。结论IL-8、IL-10及NF—κB在重症急性胰腺炎的发生发展中起重要作用，重症急性胰腺炎的早期即有胰腺组织NF—κB的活化。     

辛伐他汀治疗老年冠心病的疗效及安全性临床研究

目的：不同剂量他汀类药对老年冠心病患者血脂及血清C-反应蛋白（CRP）浓度的影响。方法：将65例老年稳定性冠心病伴高脂血症患者随机分为低剂量治疗组（n=37）和高剂量治疗组（n=28），低剂量治疗组口服辛伐他汀20mg／d，高剂量治疗组口服辛伐他汀40mg／d；疗程均为6周。结果：疗程结束后两组血脂指标（TC、TGL、DL—C）及CRP均较治疗前降低（P〈0．05），两组间结果差异无显著性意义（P〉0．05）。两组均无不良反应发生。结论：他汀类药对老年冠心病患者也具有良好的降脂效应，且能有效降低患者的CRP，安全性亦好。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注伤后神经元IκB及NF-κB表达研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后早期神经元IκB及核因子κB（NF-κB）的动态变化。方法 采用大脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组化法检测IκB、NF-κB的动态表达,并与假手术组对照。结果 与假手术对照组相比,脑缺血再灌注后,随着再灌注时间的延长,IκB阳性细胞数逐渐减少（P〈0.01）,NF-κB蛋白阳性细胞逐渐增加（P〈0.01）。结论 脑缺血区缺血再灌注损伤可导致IκB降解,引起NF-κB的激活,进一步导致自由基大量产生,加重了细胞内DNA的损伤,从而促进损伤区的神经元凋亡。     

基于TLR4/NF-κB通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果

目的研究基于Toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果。 方法将60只大鼠随机分为正常组10只、其余50只大鼠建立动脉粥样硬化模型作为动脉粥样硬化组,喂养4周后每组随机抽样2只,取主动脉经HE染色光镜观察,以发现动脉粥样硬化斑块为建模成功,建模成功后将动脉粥样硬化组剩余48只大鼠分为模型组（9只）、辛伐他汀组（9只）、益气活血组（10只）、清热解毒组（10只）、益气活血清热解毒中药组（10只）5个亚组。建模成功后益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组分别给予药液9 ml/（kg·d）体重灌胃,辛伐他汀片组给予辛伐他汀药液5 ml/（kg·d）体重灌胃,正常组和模型组给予生理盐水9 ml/（kg·d）,以上各组均连续灌胃8周。对比分析各组的血脂指标甘油三脂（TG）、血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、超敏C反应蛋白（Hs-CRP）、白介素-6（IL-6）水平及TLR4/NF-κB通路蛋白表达量。 结果与正常组相比,模型组、辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平升高,HDL-C水平降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比,辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平降低,HDL-C水平升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组相比,益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平降低,HDL-C水平升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与模型组相比,益气活血清热解毒中药组TLR4、NF-κB表达量降低（P=0.001）。 结论益气活血清热解毒方可起到调节动脉粥样硬化大鼠血脂、缓解炎症症状的作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路有关。     

核转录因子κB与肌细胞的生长和运动

以往核转录因子κB的研究多限于免疫细胞,而近年来,核转录因子κB在肌细胞的研究方面备受关注.核转录因子KB的靶基因编码不同的功能蛋白,藉此,核转录因子κB既能诱发炎症加剧、蛋白降解、组织损伤,也能促进细胞生长和维持.核转录因子κB阻断剂的阻断作用与其氧化性无关.运动会激活核转录因子κB,此时,核转录因子κB的作用可能与其在病理性条件下的作用不同,是促进细胞生长发育的.文章总结并分析核转录因子κB对细胞生长的作用,及运动介导下骨骼肌中核转录因子κB的变化趋势和影响,为肌肉康复及运动适应性变化的研究提供依据.     

氯吡格雷加用较大剂量辛伐他汀对不稳型心绞痛患者早期预后影响

目的：观察氯吡格雷加用较大剂量辛伐他汀对不稳定型心绞痛的早期预后影响。方法：79例不稳定型心绞痛患者随机双盲对照分组治疗，强化治疗组加用氯吡格雷和较大剂量辛伐他汀，观察治疗后炎性标志物C反应蛋白(CRP)及纤维蛋白原(FIB)的变化、临床疗效和药物不良反应。结果：强化治疗组的CRP及FIB明显降低，心肌缺血改善，其他心脏恶性事件下降；两组比较差异显著。结论：在常规治疗的基础上，加用氯吡格雷和较大剂量辛伐他汀可降低致炎因子浓度，抑制血小板活化，促进斑块稳定，减少心脏恶性事件发生；药物使用安全可靠。