人胎盘抗凝蛋白变体抗凝与抗血栓形成的效应与作用时间及剂量的关系

背景肝素作为最常用的抗凝药物已广泛用于临床,但其存在明显的出血副作用,与纤维蛋白结合的凝血酶活性作用有限,并发血小板减少症等不良反应.将水蛭素C端结构域与人胎盘抗凝蛋白连接在一起构建抗凝蛋白人胎盘抗凝蛋白变体,比较其抗凝抗栓作用与肝素的差异. 目的观察抗凝蛋白质人胎盘抗凝蛋白变体抗凝和抑制动脉血栓形成的作用的量效与时效关系,并了解该药的安全性. 设计完全随机分组设计,对照实验. 单位一所市级医院心脏科. 材料实验于2000-07/2001-04在江苏省人民医院动物实验室完成.选用纯种雄性新西兰白兔32只,随机将白兔分成4组人胎盘抗凝蛋白变体大剂量组、人胎盘抗凝蛋白变体小剂量组、普通肝素组和生理盐水组,每组8只.方法肝素和人胎盘抗凝蛋白变体都用生理盐水稀释.①人胎盘抗凝蛋白变体大剂量组人胎盘抗凝蛋白变体0.7 mg/kg静脉推注,继以0.35 mg/(kg·h)维持静脉滴注2 h;人胎盘抗凝蛋白变体小剂量组人胎盘抗凝蛋白变体0.3 mg/kg静脉推注,继以0.15 mg/(kg·h)维持静脉滴注2 h;普通肝素组肝素75 IU/kg静脉推注后,以37.5 IU/(kg·h)维持静脉滴注2 h;生理盐水组采用与药物组相同体积的生理盐水和给药方法.②分别在用药前,用药后15和30及60min及停药后2 h从股静脉采血测血常规、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间.③用药后15 min用球囊剥脱股动脉内皮并监测股动脉远端的血压,记录脉压为0即血栓完全闭塞血管的时间.最后剪取球囊损伤的股动脉,剥离血管测量所形成血栓的长度、血栓的湿质量和干质量.④人胎盘抗凝蛋白变体毒副作用观察实验过程中监测动物的血压、心率、呼吸等生命体征,并将部分动物实验后,行腹部解剖,观察内脏出血的情况,检测血白细胞数目. 主要观察指标①人胎盘抗凝蛋白变体对凝血系统和血栓形成的影响.②人胎盘抗凝蛋白变体毒副作用. 结果白兔32只均进入结果分析.①抗凝效应活化部分凝血活酶时间值人胎盘抗凝蛋白变体大小剂量组在用药后15 min时最长[(136.86±39.46),(122.90±4.19)s],明显长于生理盐水组,短于普通肝素组[(95.14±24.64),(180.00±0.00)s,P＜0.05,0.01].用药后30 min,人胎盘抗凝蛋白变体大剂量组仍保持其抗凝疗效,明显长于生理盐水组[(124.61±40.19),(85.57±27.67)s],人胎盘抗凝蛋白变体小剂量组明显短于普通肝素组[(112.94±43.17),(179.39±1.83)s,P＜0.05].用药后60 min,人胎盘抗凝蛋白变体大小剂量组明显短于普通肝素组(P＜0.05).停药后2 h虽长于生理盐水组,但差异不明显(P＞0.05).凝血酶时间用药后15和30及60 min普通肝素组明显长于人胎盘抗凝蛋白变体大小剂量组(P＜0.05).②对动脉血栓形成的影响血栓湿重人胎盘抗凝蛋白变体组明显小于普通肝素组(P＜0.05).血栓干质量人胎盘抗凝蛋白变体大小剂量组明显小于普通肝素组,人胎盘抗凝蛋白变体大剂量组明显小于人胎盘抗凝蛋白变体小剂量组(P＜0.05).血栓长度人胎盘抗凝蛋白变体小剂量组明显小于生理盐水组(P＜0.05),人胎盘抗凝蛋白变体大剂量组明显小于普通肝素组(P＜0.05).完全闭塞时间人胎盘抗凝蛋白变体大小剂量组明显高于生理盐水组(P＜0.05).③人胎盘抗凝蛋白变体的毒副作用人胎盘抗凝蛋白变体大小剂量组白兔表现近似于其他两组,血液动力学的无明显改变,无内脏出血的情况. 结论人胎盘抗凝蛋白变体是一种安全有效的抗凝和抗栓制剂,人胎盘抗凝蛋白变体有明显的抗凝血作用,在用药后15 min抗凝作用最强,但与肝素相比,抗凝作用较弱,用药60min后抗凝作用变得很弱;人胎盘抗凝蛋白变体抗血栓形成作用强于肝素,所形成血栓的大小明显小于肝素作用后,而且呈剂量依赖性关系,大剂量人胎盘抗凝蛋白变体的抗栓作用明显强于小剂量组.     

慢性应激性疲劳小鼠行为和神经内分泌改变与怡欣乐口服液的干预作用

背景：由于慢性疲劳综合征是慢性病，患者难以坚持长时间服用中药汤剂，因此需要不断积累针对慢性疲劳综合征的专方治疗经验。怡欣乐口服液是在滋阴补肾，填精怡神原则下，选用西洋参、冬虫夏草、龟胶、山萸肉等药物，采用现代制药技术研制而成的中药复方制剂。目的：建立慢性应激性疲劳动物模型，观察怡欣乐口服液对大鼠行为和神经内分泌的影响。设计：随机对照实验。单位：广州军区广州总医院医学实验科，广东省广州市番禺区石磐人民医院妇产科。材料：实验于2003—08／12在广州军区总医院实验中心完成．选取昆明种小鼠60只，随机分为5组，即正常组、模型组、复方阿胶浆组、怡欣乐小剂量组、怡欣乐大剂量组，12只／组。怡欣乐L1服液（广州军区总医院医学实验科研制，每1mL相当于生药1g，批号030618）。复方阿胶浆（山东东阿阿胶股份有限公司生产，批号030425）、水迷宫（由中国医学科学院药物研究所提供，型号ZG3008）。方法：全部动物置于室温（20&;#177;2）℃清洁级动物室中，5只／笼，自由进食饮水，适应1～2d后开始造模。除正常对照组外，其余4组每犬分别在不同时间于（10&;#177;1）℃冷水中游泳，每次持续时问为6．0～9．5min，同时复方阿胶浆组给予复方阿胶浆50g／（kg&;#183;d），怡欣乐小剂量组给予怡欣乐口服液25g／（kg&;#183;d），怡欣乐大剂虽组给予怡欣乐口服液50g／（kg&;#183;d），正常组及模型组给予生理盐水0．5ml／次，2次州，共9d。造模完成后，各组进行自发活动（开阔法测定正中格停留’时问、穿格次数、警起或修饰时间、紧起或修饰次数）和力竭游泳时间测定然后各组小鼠颈动脉取血，麻醉后断头处死，无菌条件下迅速取出下肾上腺组织，收集标本。血清中单胺类神经递质通过高效液相色谱系统和睦电化学检测器检测，肾上腺维生素C含量采用2，4-二硝基苯肼比色法测定。主要观察指标：各组小鼠治疗后自发活动、力竭游泳时间、肾上腺维生素C含量、血清单胺类递质及其代谢产物含贳的变化．结果：实验纳入60只小鼠全部进入结果分析。①各组小鼠治疗后正中格停留时间变化：与正常对照组比较，模型组明显延长[（6．64&;#177;3．73），（13．80&;#177;6．70）s，P〈0．01]；与模型组比较，复方阿胶浆组、怡欣乐小、大剂量组均显著缩短[（13．80&;#177;6．70），（5．12&;#177;2．62），（4．51&;#177;1.43），（3.34&;#177;2．01）s，P〈0．05，P〈0．05，P〈0．01]；怡欣乐小、大剂镀组明显短于复方阿胶浆组（P〈0．05，P〈0．01）．②各组小鼠冷水应激后力竭游泳时间比较：与正常对照组比较，模型组明显缩短[（176．44&;#177;38．02），（145．01&;#177;59．51）min，P〈0．01]；与模型组比较，复方阿胶浆组、怡欣乐小、大剂量组均显著延长[（145．01&;#177;59．51），（172．73&;#177;71．59），（181．91&;#177;38．60）．（186．59&;#177;50．81）min，P〈0．05，P〈0．05，P〈0．01]；怡欣乐小、大剂最组明显长于复方阿胶浆组（P〈0．05，P〈0．01）。③各组小鼠冷水应激后肾卜腺维生素C含量比较：与正常对照组比较，模犁组明显降低[（3951&;#177;280），（3546&;#177;408）μg／g，P〈0．01]：与模型组比较，复方阿胶浆组、怡欣乐小、大剂量组均显著延长[（3546&;#177;408），（3978&;#177;288），（4068&;#177;672），（4248&;#177;704）μg／g，P〈0．05，P〈0．05，P〈0．01]；怡欣乐大剂量组明显长于复方阿胶浆组（P〈0．05）。④各组小鼠冷水应激后血清单胺类递质及其代谢产物含量比较：与正常对照组比较，模型组肾上腺素及多巴胺均明显升高[（175&;#177;56），（258&;#177;97）；（1804&;#177;889），（4049&;#177;1443）nmol／L，P均〈0．01]，5-羟吲哚乙酸下降]（129．05&;#177;34．19），（11778&;#177;42．86）nmol／L．P〈0．05]；与模型组比较，复方阿胶浆组、怡欣乐小、大剂甚组肾上腺素及多巴胺均明显下降[（258&;#177;97），（256&;#177;135），（230&;#177;113），（198&;#177;88）nmol／L，P〈0．05，P〈0．01；（4049&;#177;1443），（3702&;#177;1266），（2630&;#177;939），（1903&;#177;658）nmol／L，P〈0．05，P〈0．01，P〈0．011．5-羟吲哚乙酸均明显升高[（117．78&;#177;42．86），（138．57&;#177;50.43）．（155．07&;#177;35.31），（236．21&;#177;49．82）nmol／L，P〈0．05，P〈0．05，P〈0．01]：怡欣乐小、大剂舒组肾上腺素及多巴胺均明显低于复方阿胶浆组（P〈0．05，P〈0．01），且怡欣乐大剂量组5-羟吲哚乙酸显著高于复方阿胶浆组（P〈0．01），结论：怡欣乐口服液可增加疲劳模型小鼠的自发活动、力竭游泳时间及肾上腺素含量，调节血清中单胺类递质系统的失衡，起到抗疲劳、抗应激和调节神经内分泌功能的效应。     

柴胡、黄芩组方合剂对糖尿病肾病大鼠尿蛋白、脂质代谢的影响

目的：观察柴胡、黄芩组方合剂对糖尿病肾病大鼠尿蛋白、脂质代谢的影响。 方法：实验于2003—06／12在解放军第一军医大学中医系完成。将32只Wistar大鼠随机分为模型对照组、大剂量药物治疗组、中剂量药物治疗组和小剂量药物治疗组。每组8只。用链脲佐菌素腹腔注射法诱导大鼠制备糖尿病肾病模型，模型对照组用生理盐水灌胃，小剂量药物治疗组用1．8g／kg柴胡、黄芩组方合剂灌胃，大、中剂量组用药剂量分别是小剂量药物的4倍和2倍。治疗他周后检测大鼠血糖、24h尿蛋白、24h尿白蛋白排泄率、胆固醇、三酰甘油、商密度脂蛋白胆困醇、低密度脂蛋白胆固醇的含量变化。柴胡、黄芩组方合剂为广州一方制药厂生产的，小四五颗粒主要成份：柴胡、黄芩、半夏、人参．白术等。 结果：32只大鼠纳入结果分析。①小、中．大剂量药物治疗组24h尿蛋白定量分别为（56．20&;#177;11．30，44．22&;#177;10．68，39．22&;#177;18．44）mg／24h，模型对照组为（64．74&;#177;16．34）m∥24h，中剂量和大剂量药物治疗组的24h尿蛋白定量比模型对照组低（P均〈．05），小剂量药物治疗组与大剂垣药物治疗组之间差异有显著性意义（P〈0．05）。②各剂晕组24h尿白蛋白定量分别为（0．27&;#177;0．43，1．07&;#177;0．26，1．08&;#177;0．29）mg／24h，均显著低于糖尿病模型对照组（1．84&;#177;0．74）mg／24h（P均〈0．05），各剂苗组之间差异不明显。③各剂量组和模型对照组胆固醇含奄分别为（1．48&;#177;0．15，1．21&;#177;0．12，1．13&;#177;0．12，1．19&;#177;0．11）mmol／L。三酰甘油分别为（1．10&;#177;0．27，0．74&;#177;0．17，0．65&;#177;0．13，0．70&;#177;0．12）mmol／l。，各剂量组均显著低于对照组（P〈0．05），但各剂量组间比较差异不显著。 结论：柴胡、黄芩组方合剂可以降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白、白蛋白排泄．对其脂质代谢也具有调节作用。     

重组人促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后脂质过氧化的影响

目的：观察重组人促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后脂质过氧化和超微结构改变的影响。 方法：实验于2004-05／08在吉林大学第二医院中心实验室完成。选择健康成年SD大鼠27只，采用改良Allen’s法制作脊髓损伤模型。27只SD大鼠随机数字表法分为3组：治疗组（H=9）：造模后立刻给予重组人促红细胞生成素腹腔内注射（5000U／kg）1次；生理盐水对照组（n=9）：造模后立刻给予等量生理盐水腹腔内注射1次。正常组（n=9）：不作任何处置。采用硫代巴比妥酸法检测脊髓损伤后2，24，48h丙二醛含量变化，使用透射电镜技术评估脊髓损伤后各时相点的超微结构评分。 结果：纳入大鼠27只，均进入结果分析。①生理盐水对照组和治疗组伤区丙二醛含量随伤后时间的增加呈不断升高的趋势，生理盐水对照组伤后2，24，48h伤区丙二醛含量较正常组明显增加，差异有显著性意义[分别为（92．45&;#177;6．22），（65．62&;#177;2．22）nmol／g；（112．56&;#177;6．68），（68．20&;#177;1．84）nmol／g；（142，38&;#177;7．24），（66．40&;#177;2．04）nmol／g，P〈0．05]。治疗组伤后2，24，48h丙二醛含量较生理盐水对照组明显降低[分别为（68．54&;#177;5．88），（92．45&;#177;6．22）nmol／g；（75．24&;#177;6．28），（112．56&;#177;6．68）nmol／g．P〈0．05；（88．34&;#177;8．52）．（142．38&;#177;7．24）nmol／g，P〈0．01]。②生理盐水对照组的超微结构评分随伤后时间的增加呈不断升高的趋势，而治疗组的超微结构评分随伤后时间的增加则变化不大，相对稳定。治疗组伤后2，24，48h的超微结构评分均较生理盐水对照组明显降低，差异有显著性意义[分别为（1.28&;#177;0．45），（3．84&;#177;0．25）分；（1．38&;#177;0．28），（4．24&;#177;0，38）分；（1．42&;#177;0．36），（4．98&;#177;0．52）分，P〈0．05]。 结论：重组人促红细胞生成素能够明显降低脊髓损伤后丙二醛含量，减轻脊髓损伤后的脂质过氧化，显著降低脊髓损伤后的超微结构评分，明显减轻脊髓损伤后的超微结构改变，有效地保护脊髓组织，具有明显的神经保护作用.     

竹荪托盖液对辐射损伤大鼠免疫功能的修复作用

目的：竹荪是含有锌、铜、铁、硒等具有免疫增强作用的微量元素的菌体，探讨竹荪托盖液对辐射损伤大鼠免疫功能的修复作用，并观察剂效关系。方法：实验于2003—09／11在泸州医学院附属医院传染与免疫实验室完成。选择雄性健康SD大鼠60只，随机分为5组，竹荪托盖液大剂量组12只、竹荪托盖液中剂量组12只、竹荪托盖液小剂量组12只、贞芪口服液组12只、空白对照组12只，以 ^60Co-γ射线300 cGy（55cGy／min 3668）一次性全身照射造成大鼠辐射损伤。照射后第2天开始对辐射损伤大鼠进行灌喂试验（竹荪托盖液大剂量组8g,1 mL／d，竹荪托盖液中剂量组4g,0．5mL／d，竹荪托盖液小剂量组2g,0．25mL／d，贞芪口服液组15g，1mL／d），30d后断颈处死实验大鼠，采血作免疫指标检测。解剖取胸腺、脾脏作指数测定。结果：5组60只动物均进入结果分析。①胸腺指数、脾脏指数计量分析结果：竹荪托盖液各组胸腺、脾脏明显增大（竹荪托盖液大剂量组、竹荪托盖液中剂量组、竹荪托盖液小剂量组胸腺指数分别为0．009&;#177;0．065，0．008&;#177;0．079，0．008&;#177;0．053；脾脏指数分别为0．027&;#177;0．032，0．024&;#177;0．051，0．024&;#177;0．042）呈现剂量效应关系，胸腺指数、脾脏指数竹荪托盖液大剂量组与空白对照组（0．008&;#177;0．027，0．023&;#177;0．039）比较差异显著（X^2=9．95&;#215;10^-4，P〈0．01），竹荪托盖液大剂量组与贞芪口服液组（0.008&;#177;0．061，0．024&;#177;0．042）比较差异显著（X^2=8．60&;#215;10^-4，P〈0．01）。②各组免疫指标分析结果：竹荪托盖液大剂量组免疫球蛋白IgG，IgA，IgM分别为（2．18&;#177;0．19），（0.33&;#177;0．13），（0．77&;#177;0．18）g／L，竹荪托盖液大剂量组与贞芪口服液组[（2．48&;#177;0．17），（0．26&;#177;0．04），（0．47&;#177;0．16）g／L]比较差异显著（P〈0．05，P〈0．01），竹荪托盖液大剂量组与空白对照组[（2．56&;#177;0．33），（0．25&;#177;0．02），（0．40&;#177;0．10）g／L]比较差异显著（P〈0．05，P〈0．01）。竹荪托盖液大剂量组CD4^＋，CD8^＋分别为（43．48&;#177;1．33）％，（27．2&;#177;0．42）％，竹荪托盖液大剂量组与贞芪口服液组[（40．27&;#177;2．85）％，（31．33&;#177;1．01）％]比较差异显著（P〈0．05），竹荪托盖液大剂量组与空白对照组[（39．97&;#177;2．95）％，（29．08&;#177;1．80）％]比较差异显著（P〈0．05）。各组间比较P〈0．05，白细胞介素2竹荪托盖液大剂量组为（33．14&;#177;2．23）ng／L，竹荪托盖液大剂量组与贞芪口服液组[（30．14&;#177;2．21）ng／L]比较差异显著（P〈0．05），竹荪托盖液大剂量组与空白对照组[（29．73&;#177;1．45）ng／L]比较差异显著（P〈0．01）。自然杀伤细胞明显表现竹荪托盖液大剂量组CD16，CD57最高，分别为（23.00&;#177;2．04）％，（21．42&;#177;3．60）％，竹荪托盖液大剂量组与贞芪口服液组[（17．33&;#177;9．02）％，（17．33&;#177;9．77）％]比差异显著（P〈0．01，P〈0．05），竹荪托盖液大剂量组与空白对照组[（13．67&;#177;4．14）％，（14．00&;#177;1．41）%]比差异显著（P〈0．01）。结论：①竹荪托盖液能增加辐射损伤大鼠胸腺指数、脾脏指数，且呈剂量效应关系。②改善血清体液免疫及细胞免疫指标，提高T细胞生长因子的指数，其胸腺、脾脏指数增加与免疫功能增强有关。③竹荪托盖液大剂量组各项指标表现出的作用均为最佳，优于贞芪口服液组和空白对照组。     

重组人红细胞生成素对大鼠急性心肌梗死区域及缺血区毛细血管密度的影响

目的：应用重组人红细胞生成素治疗大鼠急性心肌梗死，观察其对心肌梗死区域细胞凋亡以及缺血区毛细血管密度变化和心功能的影响。方法：实验于2004-06／2005—06在南京大学模式动物研究所完成。选取健康雄性Wistar大鼠16只，随机分为急性心肌梗死组、重组人红细胞生成素组，8只／组。①两组大鼠均结扎左冠前降支建立急性心肌梗死模型，局部心肌变紫色、室壁膨出为模型成功标志。②重组人红细胞生成素组围手术期每天腹腔注射重组人红细胞生成素3000IU／kg，共3d（即手术前1d、手术当天、手术后1d），在术后第14，15，16天以同等剂量再连续注射3d。急性心肌梗死组术后各时间点给予等量生理盐水。③左冠状动脉前降支结扎术后3周末测定缺血区毛细血管密度、Bcl-2和Bax的水平，2d及3周末采用二维超声心动图检查两组大鼠心腔结构及心功能。结果：实验选取大鼠16只，全部进入结果分析。④两组术后3周末毛细血管密度测量结果：与急性心肌梗死组比较，重组人红细胞生成素组毛细血管密度明显增加[（10．4&;#177;1．5），（6．3&;#177;0．7）个／视野，P〈0．05]。②两组术后3周末心肌组织Bcl．2和Bax蛋白的表达：与急性心肌梗死组比较，重组人红细胞生成素组Bax表达明显减弱[（0．1465&;#177;0．0138），（0．1248&;#177;0．0098）A，P〈0．05]，而Bcl-2表达则明显增强[（0．1030&;#177;0．0056）．（0．1163&;#177;0．0050）A，P〈0．05]。③两组术后3周末心功能各项指标的变化：与急性心肌梗死组比较，重组人红细胞生成素组左室舒张末期内径、左室收缩末期内径均显著降低[（6．25&;#177;0．32），（5．51&;#177;0．35）mm；（4．22&;#177;0．21），（3．45&;#177;0．24）mm；P均〈0．05]，左室射血分数明显升高[（69．08&;#177;2．23）％，（75．24&;#177;3．64）％，P〈0．05]。结论：重组人红细胞生成素能减少缺血区心肌细胞凋亡及促进缺血区毛细血管的生成，从而改善和提高心肌梗死大鼠的心脏功能。     

孤束核微量注射一氧化氮合酶抑制剂对应激性大鼠胃黏膜损伤的影响

目的：观察孤束核微量注射选择性诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍和非选择性一氧化氮合酶抑制剂N^G硝基-L-精氨酸甲酯对应激大鼠胃黏膜损伤的影响。方法：实验于2005—09／12在咸宁学院医学院生理教研室完成。①选用70只雄性SD大鼠，2-3月龄。按随机抽签法将大鼠分为5组：正常对照组、模型组、氨基胍组、精氨酸甲酯组、生理盐水组，每组14只。正常对照组正常饲养。模型组大鼠造成应激性溃疡模型：禁食24h，禁水2h后，乙醚轻度麻醉，四肢及头部束缚于木板上，待大鼠清醒后，将木板垂直浸入23℃水中，水面平胸骨剑突处，浸水6h。生理盐水组、氨基胍组、精氨酸甲酯组大鼠于浸水应激前30min通过脑立体定位仪分别进行孤束核微量注射生理盐水0．2μL，氨基胍2μg（0．2μL），N^G硝基-L-精氨酸甲酯2μg（0．2μL），2种药品均为Sigma公司产品。②大鼠浸水6h后，应用LDF-3型激光多普勒血流仪测量胃黏膜血流量，参照Guth标准计算胃溃疡指数（数值越大，损伤越严重）．以精密pH试纸和NaOH溶液滴定法分别测定胃液pH、胃液量及胃液酸度。⑧组间计量资料差异比较采用t检验。结果：大鼠70只均进入结果分析。①胃溃疡指数：氨基胍组明显低于生理盐水组和模型组[（21．1&;#177;4．2），（34．9&;#177;5．1），（35．2&;#177;4．7）分，P〈0．011；精氨酸甲酯组与生理盐水组和模型组比较，差异不明显（P〉0．05）。②胃黏膜血流量：模型组和生理盐水组明显低于正常对照组和氨基胍组[（158．2&;#177;39．4），（161．7&;#177;38．6），（312．6&;#177;34．5），（251．3&;#177;39．1）mV，P〈0．011；精氨酸甲酯组高于模型组和生理盐水组，但差异不明显（P〉0．05）。③胃液量和胃液酸度：模型组和生理盐水组明显多于或高于正常对照组和氨基胍组（P〈0．05-0．01），精氨酸甲酯组与模型组和生理盐水组相近（P〉0．05）。④pH值：模型组和生理盐水组明显低于正常对照组和氨基胍组（1．24&;#177;0．27，1．32&;#177;0．28，2．34&;#177;0．23，2．25&;#177;0．25,P〈0．05-0．01），精氨酸甲酯组与模型组和生理盐水组相近（P〉0．05）。结论：孤束核微量注射一氧化氮合酶抑制剂对应激大鼠胃黏膜损伤有保护作用，氨基胍的作用效果优于NL硝基-L-精氨酸甲酯。     

玉米幼芽提取物对D-半乳糖致果蝇脂质过氧化反应的拮抗作用

目的：观察玉米幼芽提取物对D-半乳糖引起果蝇脂质过氧化的拮抗作用。方法：实验于2005-10／2006-04在西北农林科技大学动物生理学实验室完成。收集8h内羽化未交配的雌雄果蝇成虫共9600只，雌雄各半，随机分为6组：①正常对照组，饲喂普通培养基。②模型组，以65g/L D-半乳糖替代普通培养基中的蔗糖。③玉米幼芽提取物20，40，80μg／g组，在造模同时分别添加20，40，80μg/g的玉米幼芽提取物。④维生素C组（阳性对照组），在造模的同时添加800μg／g维生素C。每组1600只，雌雄各半。分别在实验第10，20，30，40天每组随机抽取雌雄果蝇各200只，黄嘌呤氧化酶法测定果蝇体内总超氧化物歧化酶活性，TBA法测定丙二醛含量。结果：①总超氧化物歧化酶活性：实验30d时模型组低于正常对照组[雌：（6．15&;#177;0.16），（6．69&;#177;0．22）mkat／g；雄：（6.04&;#177;0.19）．（6．45&;#177;0．13）mkat／g，P均〈0．05]；实验40d时雌雄模型组均低于正常对照组（P〈0．01），玉米幼芽提取物20，40，80μg／g组均高于模型组[雌：（6．27&;#177;0.18），（6．50&;#177;0．08），（6．52&;#177;0，13），（5.83&;#177;0.11）mkat／g；雄：（6．30&;#177;0．10），（6．33&;#177;0．16），（6．37&;#177;0．11），（5．99&;#177;0．12）mkat／g，P均〈0．05或0．011，维生素C组与玉米幼芽提取物各剂量组比较差异不显著（P〉0．05）。②丙二醛含量：实验30d时模型组高于正常对照组[雌：（0．71&;#177;0．07），（0．54&;#177;0．10）μmol／g；雄：（0．76&;#177;0．06），（0．58&;#177;0．08）μmol／g，P均〈0．05]；实验40d时雌雄模型组均低于正常对照组（P〈0．05），玉米幼芽提取物40，80μg／g组低于模型组[雌：（0．65&;#177;0.11），（0．59&;#177;0．12），（0．89&;#177;0．08）μmol／g；雄：（0．80&;#177;0．070），（0．60&;#177;0，08）．（0．97&;#177;0．12）μmol／g，P〈0．05或0．01）。维生素C组雄蝇40d时高于玉米幼芽提取物80μg／g组（P〈0．05）。结论：玉米幼芽提取物可拮抗D-半乳糖引起的果蝇脂质过氧化反应。     

豆粉对糖尿病大鼠血糖血脂的调节作用

目的：观察具有降糖、降脂作用的鹰嘴豆对糖尿病大鼠血糖及血脂的影响。方法：实验于2003-10／12在新疆医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室完成。32只糖尿病大鼠依据血糖水平随机分为4组：模型组、鹰嘴豆精粉高、中、低剂量组，每组8只；另取健康大鼠8只设为对照组。对照组给予普通饲料，模型组给予高脂饲料，其它3组分别给予含有不同剂量鹰嘴豆精粉饲料，下午5时喂饲1次／d，记录每日进食量及饮水量，每周称量体质量、测定空腹血糖1次，4周末于空腹12h后眼眶取血测定各项血脂指标及胰岛素，并在麻醉状态下处死大鼠称量肝、脾、胸腺重量。结果：纳入40只大鼠均进入结果分析。①血糖比较：应用鹰嘴豆精粉1周后，低剂量组明显低于模型组[（15．15&;#177;6．86，19．73&;#177;5．51）mmol／L，（P〈0．01）]；应用鹰嘴豆精粉2周后，高剂量组明显低于模型组[（15．81&;#177;4．57，23．78&;#177;4．34）mmol／L，（P〈0．01）]。②三酰甘油含量：高剂量组明显低于模型组[（6．29&;#177;3．84，15．18&;#177;3．06），（P〈0．01）]；中剂量组明显高于正常组[（5．86&;#177;4．67，0．39&;#177;0．23），（P〈0．01）]。③高密度脂蛋白含量：中剂量组明显低于模型组[（2．01&;#177;1．08，8．43&;#177;4．26）mmol／L，（P〈0．01）]；高剂量组明显低于模型组[（2．53&;#177;1．16，8.43&;#177;4．26）mmol／L，（P〈0．01）]。④肝质量：中剂量组明显高于正常组[（9．54&;#177;1．69，6．92&;#177;1．37）g，（P〈0．05）]。结论：鹰嘴豆精粉可降低糖尿病大鼠血糖和血清三酰甘油的水平，对血清总胆固醇的含量未见明显影响，而有降低血清高密度脂蛋白胆固醇的趋势，这种特殊现象有待进一步认识与验证。     

人胎盘抗凝蛋白变体的抗凝与抗栓作用

探索新型抗凝蛋白质--人胎盘抗凝蛋白变体(annexin V derivative,AND)抗凝和抑制动脉血栓形成的作用.方法比较实验组动物和对照组动物在用药前,用药后15,30,60 min及停药2 h活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原(Fg)含量.用药15 min后用球囊剥脱股动脉内皮并监测股动脉远端的血压,记录脉压为0的时间即血栓完全闭塞血管的时间.最后剪取球囊损伤的股动脉,测量所形成血栓的长度、血栓的湿重和干重.结果抗凝指标用药组在用药后15 min时,其APTT值最长,且APTT值明显长于生理盐水组(P＜0.05),短于肝素组(P＜0.01),肝素组的APTT、TT值明显长于其他3组,PT值各组间差异无统计学意义;对Fg的影响大剂量用药组似乎可以降低Fg的血浆含量;血栓质量无论是湿重还是干重AND组都明显轻于对照组(P＜0.001),大剂量AND组血栓干重显著轻于小剂量组(P＜0.05);小剂量AND组血栓的长度明显短于生理盐水组(P＜0.05),但和肝素组相比,差异无统计学意义(P=0.485),大剂量AND组明显短于生理盐水组(P＜0.01)和肝素组(P＜0.05);脉压为0的时间AND组显著长于对照组(P＜0.05)和肝素组相比,差异无统计学意义.结论AND是一种安全有效的抗凝和抗栓剂,其抗凝作用在用药后15 min时最强.AND抗凝作用弱于普通肝素,但抗栓能力强于普通肝素,在临床治疗血栓性疾病有应用前景.     

黄芪干预缺血缺氧性脑损伤幼鼠脑组织一氧化氦及丙二醛含量的变化

背景：幼鼠脑缺氧缺血后，脑组织水肿加重，脑组织中一氧化氮及丙二醛水平增高。黄芪具有增强免疫、耐缺氧以及改善心肌缺血再灌注损伤等药理作用。目的：观察黄芪对缺血缺氧性脑损伤幼鼠脑组织一氧化氮及丙二醛含量的影响。设计：随机对照实验。单位：河北医科大学第二医院儿科，河北医科大学中医药研究院内科，河北医科大学病理生理教研室。材料：实验于2004-02／04在河北医科大学病理生理学教研室完成。选取新生7d龄SD大鼠40只，随机分为正常对照组、造模组、黄芪低剂量组、黄芪高剂量组，10只／组。黄芪注射液每10mL相当于生药20g（由成都地奥九泓制药厂生产，批号：0005028，河北医科大学中医药研究院医院提供）。方法：除正常对照组外，其余各组新生大鼠在清醒局麻状态下，行右侧颈总动脉结扎术建立缺氧缺血性脑损伤幼鼠模型。正常对照组给予生理盐水0．1mL腹腔内注射；造模组每天腹腔注射质量浓度为9g／L的盐水0．1mL；黄芪低剂量组与黄芪高剂量组每天分别腹腔注射黄芪注射液0．1，0．5ml／次。各组于注射后即刻、第2，4天测头部血流量后断头取脑，进行脑组织含水量、一氧化氮及丙二醛含量的测定。主要观察指标：①各组脑组织含水量。②各组头部血流量、一氧化氮及丙二醛含量测定结果。结果：实验纳入40只大鼠全部进入结果分析。①各组脑组织含水量：与正常对照组比较，造模组在造模即刻明显增加[（87．316&;#177;0．275），（88．259&;#177;0．297）％，P〈0．05]，第2天仍未恢复正常水平[（86．973&;#177;0．265），（88．173&;#177;0．445）％，P〈0．05]；与造模组比较，黄芪高剂量组第2天明显降低[（88．173&;#177;0.445），（86．542&;#177;0．141）％，P〈0．05]。②各组头部血流量测定结果：与正常对照组比较，造模组在造模即刻明显降低[（231．88&;#177;13．33），（139．54&;#177;10．58）mV，P〈0．051，至第4天仍未恢复正常水平[（234．57&;#177;14．38），（145．38&;#177;13．33）mV，P〈0．05]；与造模组第4天比较，黄芪低、高剂量组均明显增加[（145．38&;#177;13．33），（288．45&;#177;12．89），（313．82&;#177;21．74）mV，P〈0．01]。③各组头部一氧化氮及丙二醛含量测定结果：造模组在造模即刻均明显高于正常对照组[（26．55&;#177;5．23），（19．67&;#177;7．17）μmol／L，P〈0．05；（7．88&;#177;2．55），（4．22&;#177;0．12）μmol／L，P〈0．01]，第4天均显著高于正常对照组[（48．65&;#177;17．06），（18．65&;#177;2.12）μmol／L，P〈0．01；（5．29&;#177;0．68），（4．06&;#177;0．39）μmol／L，P〈0．05]；与造模组比较，黄芪低、高剂量组第4天均明显降低[（48．65&;#177;17．06），（23．77&;#177;12．79），（24．67&;#177;11．54）μmol／L，P〈0．01；（5．29&;#177;0．68），（4．51&;#177;9．30），（3.68&;#177;0．39）μmol/L，P〈0．01]。结论：黄芪可明显消除缺氧缺血性幼鼠脑组织水肿，增加其脑组织血流量。通过降低一氧化氮及减少自由基损伤代谢产物丙二醛的含量，从而发挥抑制脂质过氧化损伤的作用。     

叶酸对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的：观察长期补充叶酸对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响并分析其作用机制. 方法：实验于2004—05／10在泰山医学院机能实验室完成。选择SPF级5周龄雄性Wistar大鼠62只，51只大鼠采用膳食诱导加小剂量链脲佐菌素制备2型糖尿病大鼠模型，并设立普通饲料饲养的大鼠11只为正常对照组。将2型糖尿病模型造模成功的37只大鼠随机数字表法分为模型对照组（12只）、小剂量叶酸组（12只）和大剂量叶酸组（13只）。补充叶酸11周后，剪尾采血分别检测血清一氧化氮（硝酸还原酶法）、超氧化物歧化酶（黄嘌呤氧化酶法）及丙二醛（硫代巴比妥酸法）水平；取心肌标本，采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的地高辛标记的duTP缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡，采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素复合物法检测心肌组织Bcl-2，Bax和Fas蛋白表达。 结果：纳入动物62只，造模成功37只，48只进入结果分析。①补充叶酸11周后，小剂量叶酸组及大剂量叶酸组大鼠血清一氧化氮水平较模型对照组有明显增高[分别为（28．77土6．71），（29．62土6．55），（22．95土5．22）μnol／L，P均〈0．05]，血清超氧化物歧化酶水平亦较模型对照组有明显增高[分别为（6．15土0．64），（5．97土0．56），（5．27&;#177;0．94）nkat／L，P〈0．01，0．05]，而血清丙二醛水平较模型对照组明显降低[分别为（11．24&;#177;3．52），（10．97&;#177;4．59），（18．95&;#177;4．59）nmol／L，P均〈0．01]。（2）模型对照组、小剂量叶酸组及大剂量叶酸组大鼠心肌细胞凋亡率均较正常对照组明显增加[分别为（8．28&;#177;1．06）％。（4．25&;#177;0．63）％，（2．27&;#177;0．86）％，（0．72&;#177;0．37）％，P均〈0．01]，小剂量叶酸组及大剂量叶酸组大鼠心肌细胞凋亡率均较模型对照组明显降低（P均〈0．01），大剂量叶酸组大鼠心肌细胞凋亡率又较小剂量叶酸组进一步降低（P〈0．05）。（3）模型对照组、小剂量叶酸组及大剂量叶酸组大鼠心肌细胞Bcl-2蛋白阳性表达的平均吸光度值（A）均较正常对照组明显增加（分别为230．15&;#177;4．50，236．24&;#177;7．75，241．58&;#177;5．83，224．51&;#177;3．01，P〈0．05或P〈0．01），小剂量叶酸组及大剂量叶酸组大鼠心肌细胞Bcl-2蛋白阳性表达的平均吸光度值均较模型对照组明显增加（分别为P〈0．05和P〈0．01），大剂量叶酸组大鼠心肌细胞Bel-2蛋白阳性表达的平均吸光度值又较小剂量叶酸组进一步增加（P〈0．05）；模型对照组、小剂量叶酸组及大剂量叶酸组大鼠心肌细胞Bax，Fas蛋白阳性表达的平均吸光度值均较正常对照组明显增加（分别为234．76&;#177;5．66,226．73&;#177;7．24,220．16&;#177;5．44，214．38&;#177;5．23；247．25&;#177;6．29，239．09土6．10，233-43&;#177;7-41，226．29&;#177;4．70，P〈0．01或P〈0．05），但小剂量叶酸组及大剂量叶酸组大鼠心肌细胞Bax蛋白阳性表达的平均吸光度值均较模型对照组明显降低（P均〈0．01），大剂量叶酸组大鼠心肌细胞Bax蛋白阳性表达的平均吸光度值又较小剂量叶酸组进一步降低（P〈0．05）。 结论：长期补充叶酸对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡具有明显预防作用，它可明显上调心肌细胞凋亡抑制基因Bcl-2的蛋白表达并下调凋亡刺激基因Bax和Fas的蛋白表达；叶酸可能通过增加机体一氧化氮合成从而提高血清一氧化氮活性和提高机体抗氧化能力来预防2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的发生。     

山莨菪碱对乙醇诱导脑损伤大鼠海马胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的：探讨山莨菪碱对乙醇诱导大鼠脑损伤模型大鼠学习记忆障碍的改善作用及对海马结构的神经胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白变化的保护作用。方法：实验于2004-10／2005-06在解放军总医院老年医学研究所病理生理室完成。选择约2月龄SD雄性大鼠72只，随机分成生理盐水组、乙醇组、山莨菪碱＋生理盐水组、山莨菪碱＋乙醇组，每组18只。以无水乙醇溶液腹腔注射（13mL／kg，1次／d，连续8d）诱导大鼠脑损伤。山莨菪碱＋生理盐水组、山莨菪碱＋乙醇组腹腔注射山莨菪碱3mL／kg，1次／d，连续8d。生理盐水组腹腔注射生理盐水13mL／kg，1次／d，连续8d。分别在大鼠给药的第1，3，5，7天称量体质量，观察4组大鼠的体质量变化。采用Morris水迷宫测试大鼠1min内在4个象限找到平台的时间、流动路程和速度等各项指标。采用免疫组化技术并结合图像分析系统，测定海马CA1，CA3．DG区胶质纤维酸性蛋白表达阳性的胶质细胞的计数和平均面积百分比，以定量分析乙醇对海马及齿状回结构和功能的影响及山莨菪碱的作用。结果：实验过程中生理盐水组1只大鼠和乙醇组2只大鼠死亡、山莨菪碱＋生理盐水组、山莨菪碱＋乙醇组无脱失。4组大鼠进入结果分析数量分别为17、16、18、18只。①乙醇组在Morris水迷宫中寻找平台的潜伏期时间、流动路程明显长于较生理盐水组、山莨菪碱＋生理盐水组、山莨菪碱＋乙醇组，差异有显著性[（26．14&;#177;．21．68）S，（14.48&;#177;13．63）S，（16．22&;#177;14．89）S，（18．49&;#177;16．21）S．P〈0．05]；[（367．19&;#177;334．31）cm，（229．87&;#177;236．13）cm，（260．22&;#177;269．68）cm，（298．52&;#177;272．88）cm,P〈0．05]。②胶质纤维酸性蛋白表达阳性的神经胶质细胞计数：乙醇组在海马CA1、CA3区均高于生理盐水组、山莨菪碱＋生理盐水组、山莨菪碱＋乙醇组，差异有显著性[（22．83&;#177;2．41）。（18．39&;#177;3．38），（19．39&;#177;2．91），（19．03&;#177;3．19），P〈0．05]；[（25．97&;#177;2．50），（22．17&;#177;3．31），（21．67&;#177;2．33），（23．40&;#177;2．85），P〈0．05]；③胶质纤维酸性蛋白表达阳性的神经胶质细胞平均面积百分比：乙醇组在海马CA1、CA3区均高于生理盐水组、山莨菪碱＋生理盐水组、山莨菪碱＋乙醇组，差异有显著性[（6．26&;#177;0．20）％，（4．12&;#177;0．20）％，（4．11&;#177;0．19）％、（4．14&;#177;0．20％）P〈0．05]；[（6．37&;#177;0．18）％，（4．03&;#177;0．17）％，（4．06&;#177;0．13）％，（4．10&;#177;0．12）％，P〈0．05]。而在DG区乙醇组与其余3组无差别（P〉0．05）。④大鼠体质量的改变：乙醇组的体质量增长速率明显低于生理盐水组，并在第5天后呈下降趋势；山莨菪碱＋乙醇组的体质量增长也较生理盐水和山莨菪碱＋生理盐水组低，但仍为上升趋势。结论：腹腔注射乙醇能损害大鼠海马CA1、CA3区，而DG区无明显变化。山莨菪碱可通过阻断钙离子内流、抗氧化和清除自由基等作用对乙醇诱导脑的损伤起到保护作用。     

人参皂甙Rg3与三氧化二砷联合应用对裸鼠肝癌移植瘤模型的协同效应

目的：观察人参皂甙Rg3联合三氧化二砷对裸鼠肝癌移植瘤模型的作用。方法：实验于2005-04／12在广州医学院动物实验室进行。取24只雄性裸鼠（BALB／C-nu／nu），将体外培养人肝癌Bel-7402细胞株种植于左前上肢腋窝皮下，然后单纯随机分为4组（n=6）：①人参皂甙Rg3组：自接种肝癌细胞株第3天起，灌胃给予10m/kg人参皂甙Rg3，隔日1次，灌胃20次。②三氧化二砷组：自接种肝癌细胞株第3天起。腹腔内注射三氧化二砷40μg／d，1次／d，连续28d。⑧联合用药组：同时用人参皂甙Rg3灌胃和三氧化二砷腹腔注射，用药量和时间同上2组。④对照组：等量生理盐水灌胃，方法同人参皂甙Rg3组。停药1周后分别观察裸鼠的生存质量（包括精神状态、活动状况、对刺激的反应、体质量下降幅度、食欲和尿、便6项指标），测定瘤质量，计算肿瘤抑制率，计数肿瘤内微血管密度。结果：①治疗方案结束时，联合用药组6只裸鼠均存活，人参皂甙R船组和三氧化二砷组有5只存活，对照组只有4只存活。人参皂甙Rg3组和联合用药组荷瘤裸鼠生存质量较高。②人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组平均瘤质量明显轻于对照组[（0．83&;#177;0．22），（0．68&;#177;0．16），（0．56&;#177;0．11），（1．52&;#177;0．60）g，P〈0．05]，但前3组之间差异不显著（P〉0．05）。③人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组肿瘤抑制率分别为45．1％，55.3％，63．1％，3组比较差异不显著。④人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组肿瘤内微血管密度明显低于对照组[（12．71&;#177;2．75），（18．00&;#177;2．24），（10．00&;#177;2．92），（27．00&;#177;2．94）个／200倍视野，P〈0．05]，人参皂甙Rg3组和联合用药组微血管密度值低于三氧化二砷组（P〈0．05），但2组间比较差异不显著（P〉0．05）。结论：人参皂甙R船能明显抑制肿瘤新生血管形成，与三氧化二砷联合应用具有协同作用，能明显抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长，改善荷瘤裸鼠生存质量。     

艾溃灵合剂抗炎效应的动物实验

目的：艾溃灵合剂为临床用于口腔溃疡疗效确切的中药制剂，采用动物实验，观察其抗炎效应。方法：实验于2005—02／10在河南中医学院动物实验中心完成。艾溃灵合剂主要由黄连、连翘、黄芪、生地、车前草、甘草等药组成。（旦）将50只昆明小鼠按随机数字表分为5组：大、中、小剂量艾溃灵合剂组（20，10，5g原生药／mL），口炎清颗粒组（3.3g成品）及同体积的生理盐水组，每组10只。灌服1次／d，连续给药3d，于最后1次给药后1h，每鼠右耳涂二甲苯，脱颈椎处死小鼠，剪下双耳，用打孔器打下双耳耳片，迅速用电子天平称质量，并计算肿胀度。肿胀度=右耳质量一左耳质量。②将40只wistar大鼠按随机数字表分为5组：大、中、小剂量的艾溃灵合剂组（20，10，5g原生药／mL），口炎清颗粒组（3．3g成品）及同体积的生理盐水组，每组8只。灌服给药1次／d，连续给药3d，于最后1次给药后30min，于每鼠左、右后足跖皮下注射新配制的10％新鲜鸡蛋清液，分别于给蛋清后30min、60min、120min、240min、360min在足跖测定仪再次测大鼠左右后足跖体积，并计算足跖肿胀率。足跖肿胀率=给药后不同时间足跖体积-同侧正常跖体积/同侧正常足跖体积,结果：90只大小鼠均进入结果分析。①与生理盐水组相比，大、中、小剂量艾溃灵合剂组和口炎清颗粒组均可显著抑制小鼠耳壳二甲苯致肿，使耳壳肿胀度显著降低[（7．0&;#177;1．6），（2．3&;#177;1．5），（3．5&;#177;1．5），（4．7&;#177;1．4），（3．6&;#177;1．5）mg，P〈0．01]。②与生理盐水组比，大、小剂量艾溃灵合剂组在给药后30～360min均可显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀[生理盐水组：0．73&;#177;0．12，0．67&;#177;0．12，0．54&;#177;0．12，0．40&;#177;0．14，0．23&;#177;0．12；大剂量艾溃灵合剂组：0．56&;#177;0．11，0．49&;#177;0．09，0．36&;#177;0．10，0．27&;#177;0．13，0．07&;#177;0．07；小剂量艾溃灵合剂组：0．63&;#177;0．13，0．54&;#177;0．14，0．44&;#177;0．13，0．27&;#177;0．15，0．12&;#177;0．13，P〈0.01，P〈0.05），中剂量艾溃灵合剂组在给药后30min、120min、240min可明显抑制大鼠蛋清性足跖肿胀，在给药后60min和360min可显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀[生理盐水组：0．73&;#177;0．12，0．54&;#177;0．12，0．40&;#177;0．14，0．67&;#177;0．12，0．23&;#177;0．12；中剂量艾溃灵合剂组：0．59&;#177;0．16，0．43&;#177;0．16，0．27&;#177;0．13，0．52&;#177;0．13，0．11&;#177;0．11，P〈0．05，P〈0．01），口炎清颗粒组在给药后30～360min均可明显抑制大鼠蛋清性足跖肿胀[生理盐水组：0．73&;#177;0．12，0．67&;#177;0．12，0．54&;#177;0．12，0-40&;#177;0．14，0-23&;#177;0．12；口炎清颗粒组：0．64&;#177;0．07，0．56&;#177;0．11，0．43&;#177;0．10，0．30&;#177;0．08，0．12&;#177;0．10，P〈0．05]。结论：艾溃灵合剂可显著抑制小鼠耳壳二甲苯致肿，显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀，具有明显的抗炎作用。     

艾溃灵合剂促进模型豚鼠口腔溃疡恢复的效果评估

目的：观察具有清热泻火，解毒化瘀，益气养阴功效的艾溃灵合剂治疗口腔溃疡的特点。 方法：实验于2005—02／10在河南中医学院动物实验中心完成。以苯酚灼烧豚鼠面颊造口腔溃疡模型为实验对象，将动物按照随机数字表法分为6组，即艾溃灵合剂20，10，5g／kg剂量组（黄芪、生地、白花蛇舌草、连翘、甘草等药物组成），口炎清颗粒剂组（33．3g／kg，天冬、麦冬、玄参、金银花、甘草等药物组成），模型组及空白组，每组10只。除空白对照组外，其余5组造口腔溃疡模型，每日涂抹及灌胃给药．涂艾溃灵合剂各剂量组给药浓度分别为1，0．5，0．25g／mL，涂量为0．5mL，灌服20mL／kg；口炎清颗粒剂组给药浓度为0．167g／mL，涂量为0．5mL。灌服10mL／kg；模型组涂抹生理盐水0．5mL，灌服生理盐水10mL／kg；空白组不予处理。每天给药1次．连续用药5天，于第1，3，5天用数码照像头摄下豚鼠口腔溃疡情况，于最后1次用药后2h．取下口腔溃疡局部，作病理切片，观察溃疡局部充血水肿程度以及溃疡模型组织形态。 结果：豚鼠60只均进入结果分析。①用药第3天，艾溃灵合剂20，10．5g／kg剂量组，口炎清颗粒组与模型组比较，均可使溃疡面积显著减少[（11．8&;#177;3．2），（8．9&;#177;6．6）．（13．4&;#177;4．7），（13．0&;#177;5．8），（20．30&;#177;4．6）mm^2；P〈0．01]。第5天，艾溃灵合剂20g／kg剂量组溃疡面积与模型组比较，差异有非常显著性意义[（3．9&;#177;5．6），（12．2&;#177;6．2）mm^2；P〈0．01]，艾溃灵合剂10,5g／kg剂量组，口炎清颗粒组溃疡面积与模型组比较，差异有显著性意义[（6．1&;#177;3．0），（7．0&;#177;3．6），（6．3&;#177;3.3）mm^2；P〈0．05]。②用药第3天，艾溃灵合剂20，10g/kg剂量组和口炎清颗粒组均可显著减轻口腔溃疡程度（P〈0．01）；用药第5天，20g／kg剂量艾溃灵合剂组可显著减轻口腔溃疡程度（P〈0．01），艾溃灵合剂10g／h剂量组和口炎清组可明显减轻口腔溃疡程度（P〈0．05），艾溃灵合剂20g／kg剂量组口腔溃疡程度较口炎清组减轻（P〈0．05）。③艾溃灵合剂20，10g／kg剂量组和口炎清颗粒组口腔溃疡组织病理变化显著减轻（P〈0．01），艾溃灵合剂5g／kg剂量组仅有减轻口腔溃疡病理变化的趋势。 结论：艾溃灵合剂可显著减轻豚鼠口腔溃疡症状，明显促进豚鼠口腔溃疡的恢复。20g／kg艾溃灵合剂效果优于口炎清颗粒。     

桃红四物汤对激素性股骨头缺血坏死模型兔血管内皮生长因子表达和血液流变学的影响

目的：观察桃红四物汤对激素性股骨头缺血坏死模型兔血管内皮生长因子的表达和血液流变学的影响，进一步阐明活血化瘀法防治激素性股骨头缺血坏死的作用机制。 方法：实验于2005—09／2006—01在福建中医学院中心实验室完成。选择健康成年新西兰大白兔20只，按随机数字表法分为4组，正常对照组，模型对照组、生理盐水对照组、治疗组，每组5只。采用激素注射造模，模型对照组、生理盐水对照组、治疗组兔臀肌注射醋酸氢化泼尼松7.5mg／（kg&;#183;只），2次／周；正常对照组兔注射等量生理盐水。所有动物肌注青霉索16万U和链霉素15万U预防感染，2次／周。治疗组给予桃红四物汤（出自清&;#183;吴谦等所著的《医宗金鉴》，原方组成为桃仁、红花、当归、生地黄、赤芍、川芎）7mL／kg灌胃，1次／d；生理盐水对照组给予等量生理盐水灌胃。6周后正常对照组和模型对照组麻醉后各处死5只，13周后生理盐水对照组、治疗组麻醉后各处死5只，分别进行股骨头组织病理学观察及血管内皮生长因子表达和血液流变学指标的测定。 结果：纳入大白兔20只，均进入结果分析。①股骨头组织病理学观察：模型对照组空缺骨陷窝数高于正常对照组，差异有非常显著性意义[分别为（27．50&;#177;5．40）％，（14．50&;#177;1．72）％，P〈0．001]。治疗组兔股骨头软骨、骨小梁、骨细胞及髓腔组织等均接近正常，空缺骨陷窝数基本恢复到正常对照组水平（P〉0．05），治疗组空缺骨陷窝数低于模型对照组，差异有非常显著性意义[分别为（15．80&;#177;2．83）％，（27．50&;#177;5．40）％，P〈0．001]；生理盐水对照组与模型对照组病理情形相似，其空缺骨陷窝数明显高于正常对照组和治疗组，差异有非常显著性意义[分别为（28．70&;#177;7．26）％，（14．50&;#177;1．72）％，（15．80&;#177;2．83）％，P〈0．001]。②血管内皮生长因子的表达：模型对照组血管内皮生长因子灰度指数（A）低于正常对照组，即表达增强，差异有显著性意义（分别为90.39&;#177;4．31．97.58&;#177;0.56，P〈0．01）；治疗组与正常对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）；生理盐水对照组血管内皮生长因子灰度指数（A）高于正常对照组，表达减弱，差异有非常显著性意义（分别为133．53&;#177;4．96，97．58&;#177;0．56，P〈0．001）；治疗组血管内皮生长因子灰度指数（A）低于生理盐水对照组，表达增强，差异有非常显著性意义（分别为97．55&;#177;0．74，133．53&;#177;4．96，P〈0．001）；生理盐水对照组血管内皮生长因子灰度指数（A）高于模型对照组，表达减弱，差异有非常显著性意义（分别为133．53&;#177;4．96，90．39&;#177;4．31，P〈0．001]。③血液流变学指标：模型对照组、治疗组和生理盐水对照组全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度高于正常对照组，差异有显著性意义[分别为（3．35&;#177;0．05），（3．14&;#177;0．02），（3．50&;#177;0．07），（2．76&;#177;0．22）mPa&;#183;s；（7．11&;#177;0．40），（5．77&;#177;0．24），（7．48&;#177;0．17），（5．49&;#177;0．48）mPa&;#183;s；（1．70&;#177;0．05），（1．57&;#177;0．06），（1．72&;#177;0．03），（1．48&;#177;0．03）mPa&;#183;s，P〈0．001，0．01，0.05]；治疗组全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度低于模型对照组和生理盐水对照组，差异有非常显著性意义（P〈0．001，0．01）。各组间红细胞压积比较，差异均无显著性意义（P〉0．05）。生理盐水对照组红细胞聚集指数高于正常对照组，差异有显著性意义（分别为0．54&;#177;0．04，0．46&;#177;0．04，P〈0．01]；治疗组红细胞聚集指数低于模型对照组和生理盐水对照组，差异有显著性意义（分别为0．43&;#177;0．04，0．50&;#177;0．05，0．54&;#177;0．04，P〈0．05，0．01）。 结论：血液流变学异常是激素性股骨头缺血坏死的重要原因之一，活血化瘀中药可对抗激素的作用，间接地促进血管内皮生长因子的表达，可以有效地改善股骨头微循环障碍。     

幼年慢性癫痫模型大鼠情感行为及空间记忆改变以及吡拉西坦的干预作用

目的：观察幼年慢性癫痫模型大鼠情感行为及空间记忆改变，以及吡拉西坦的干预效应。方法：实验于2004-07／12在河北医科大学及河北师范大学生命科学学院完成。选用Wistar幼年大鼠50只。肌注马桑内脂注射液复制大鼠慢性癫痫大发作模型。每间隔3d重复肌注1次，经30次注射后，对其中点燃的动物改为14d肌注1次。造模3个月时点燃动物分为造模组、吡拉西坦低剂量组、吡拉西坦高剂量组、苯妥英钠加吡拉西坦组各10只。各组于造模3个月后开始连续灌胃，1次／d。吡拉西坦各组灌服吡拉西坦混悬液，分别为0．024mg／（g&;#183;d），0．048mg／（g&;#183;d）；苯妥英钠加吡拉西坦组灌服苯妥英钠0．06mg／（g&;#183;d）及吡拉西坦混悬液0．048mg／（g&;#183;d）。用药1个月后进行相关指标检测。10只正常对照非造模组大鼠在造模开始时同期喂养并灌服等容积生理盐水。观察马桑内脂所致幼年大鼠慢性癫痫模型，达到点燃标准时动物情感行为的变化，以旷场活动性和拒俘反应性表示。观察空间学习和记忆能力的改变，以发现平台时间及搜索距离表示。结果：50只大鼠均纳入分析结果。情感行为观察结果：①旷场活动性比较：吡拉西坦组低、高剂量组以及苯妥英钠加吡拉西坦组明显高于造模组[（5．2&;#177;1．2），（7．8&;#177;2．3），（8．4&;#177;2．6），（3．1&;#177;1．3）min，P〈0．05或P〈0．01]。②拒俘反应性：吡拉西坦高剂量组以及苯妥英钠加吡拉西坦组明显低于造模组[（2．07&;#177;0．38），（2．31&;#177;0．35），（3．91&;#177;0．98）min，P〈0．05]。空间学习记忆能力观察：①搜索时间比较：吡拉西坦高、低剂量组、苯妥英纳加吡拉西坦组在相应组次比造模组有不同程度的减少，而各个处理组内随训练次数增加平均搜索时间逐渐减少[其中第1次分别为（45&;#177;9），（51&;#177;8）．（44&;#177;9），（63&;#177;11）s；第3次分别为（42&;#177;7），（49&;#177;9），（42&;#177;7），（57&;#177;8）s；第6次分别为（34&;#177;8），（42&;#177;8），（35&;#177;6），（49&;#177;9）s，P〈0．05或P〈0．01]。②搜索距离比较：吡拉西坦高、低剂量组、苯妥英纳加吡拉西坦组平均搜索距离在相应组次比造模组有不同程度的减少。各个处理组内随训练次数增加平均搜索距离逐渐减少[其中第1次分别为（510&;#177;89），（670&;#177;58），（586&;#177;91），（793&;#177;74）cm；第3次分别为（455&;#177;56），（602&;#177;77），（521&;#177;84），（690&;#177;67）cm；第6次分别为（385&;#177;48），（487&;#177;68），（392&;#177;79），（550&;#177;54）cm，P〈0．05或P〈0．01]。结论：慢性癫痫大鼠学习和记忆能力明显降低，吡拉西坦对该模型大鼠学习和记忆能力降低有一定的预防和治疗作用。     

天年饮干预亚急性衰老大鼠模型的性腺功能

背景：随着机体衰老性腺功能逐渐降低，中国传统医学认为精气虚弱是导致机体衰老的主要原因。目的：观察中药天年饮对亚急性衰老大鼠血清睾酮含量、睾丸组织超氧化物歧化酶的活性及睾丸生精细胞凋亡的影响。设计：随机对照实验。单位：承德医学院人体解剖学教研室。材料：实验于2003-04／07在承德医学院基础医学研究所进行。选择成年雄性SD大鼠40只，随机分为4组，每组10只。模型组、用药组、对照组采用D-半乳糖连续腹腔注射200mg／（kg&;#183;d）制备亚急性衰老动物模型，1次／d，共40d，模型组大鼠于造模成功后不再作任何处理。用药组大鼠于造模成功后每天用天年饮灌胃（天年饮由灸何首乌、怀牛膝、肉从蓉、茯苓、丹参、淫羊藿6味中药组成，经熬制后含生药1．5g/mL），1次／d，共30d；对照组大鼠在造模成功后每天灌胃同等剂量的生理盐水，时间同用药组大鼠。方法：各组大鼠血清中睾酮的含量采用酶联免疫吸附方法检测，睾丸组织中超氧化物歧化酶的活性采用黄嘌呤氧化酶法检测，睾丸生精细胞的凋亡情况采用免疫组化法观察。主要观察指标：①各组大鼠血清中睾酮的含量。②睾丸组织中超氧化物歧化酶的活性。③睾丸生精细胞的凋亡情况。结果：40只大鼠均进入结果分析。④血清中睾酮的含量：模型组大鼠血清睾酮含量低于正常组[（0．52&;#177;0．15）μg／L，（1．26&;#177;0．32）μg／L，（t=3．004，P〈0．05）]，用药组高于模型组[（1．16&;#177;0．32）μg／L，（0．52&;#177;0．15）μg／L，（t=2．321，P〈0．05）]。②睾丸组织超氧化物歧化酶的活性：模型组明显低于正常组[（107．22&;#177;9．33）kNU／g,（147．73&;#177;11．9）kNU／g,（t=13．339，P〈0.01）]，用药组明显高于模型组[（141．05&;#177;14．57）kNU／g,（107．22&;#177;9．33）kNU／g,（t=9．970，P〈0.01）]。③生精细胞的凋亡情况：模型组凋亡生精小管百分率、凋亡阳性细胞率均明显高于正常组[（53．95&;#177;2．02）％比（34．21&;#177;2．10）％，（8．67&;#177;0．80）％比（3．86&;#177;0．52）％，（X^2=7．9，P〈0．01，X^2=5．01，P〈0．05）]；用药组明显低于模刑组[（35．33&;#177;2．18）％比（53．95&;#177;2．02）％，（4．68&;#177;0．74）％比（8．67&;#177;0．80）％，（r=7．02，P〈0．01，r=3．96，P〈0．05）]。结论：衰老模型睾丸生精细胞凋亡增多，经天年饮灌胃后可以使凋白细胞阳性率明显下降，说明天年饮可以清除体内过多的氧自由基，减少凋亡发生，改善动物模型的生精功能。     

山茛菪碱对家兔全脑缺血再灌注后脑线粒体损伤的保护作用

背景：山莨菪碱是从茄科唐古特莨菪中提取的一种生物碱，是一种良好的细胞保护剂。而线粒体功能变化是反映细胞损伤的最敏感指标之一。目的：观察山莨菪碱对家兔全脑缺血再灌流后脑线粒体损伤的影响，探讨山莨菪碱的脑保护作用。设计：完全随机对照实验。单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院。材料：实验于2002—09／12在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成。选择30只健康家兔，随机分为假手术组、缺血再灌流组、山莨菪碱组，每组10只。方法：采用“结扎双侧椎动脉和夹闭双侧颈总动脉＋体循环低血压”建立全脑缺血再灌流模型，缺血20min，再灌流2h。山莨菪碱组于再灌流前lmin由股静脉给予山莨菪碱，剂量为10mg／kg，并以5mg／h速度维持治疗2h。缺血再灌流组再灌流期间给予等量生理盐水治疗；假手术组只接受手术，但不结扎和夹闭血管。①采用氧化电极法测定脑线粒体呼吸功能，包括呼吸控制率，磷氧比，氧化磷酸化效率。②采用氧电极法测定脑线粒体内还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶，琥珀酸氧化酶，细胞色素C氧化酶活性。⑧采用原子吸收光谱法测定脑线粒体钙含量。④采用改良八木国夫法测定脑线粒体丙二醛含量。主要观察指标：①各组家兔大脑皮质线粒体呼吸功能、呼吸链氧化酶活性变化。②各组家兔大脑皮质线粒体内钙和丙二醛含量。结果：30只家兔均进入结果分析。①各组家兔大脑皮质线粒体呼吸控制率、磷氧比、氧化磷酸化效率：缺血再灌流组和山莨菪碱组低于假手术组[烟酰胺腺嘌呤二核苷酸链：呼吸控制率：2．34&;#177;0．18，3．58&;#177;0．29，4．07&;#177;0．38。P〈0．05～0．0l；磷氧比：1．77&;#177;0．10，2．23&;#177;0．14，2．41&;#177;0．17，P〈0．05-0.01；氧化磷酸化效率：（5.27&;#177;0．78），（8．03&;#177;1．30），（9．63&;#177;1．50）μkat／g，P〈0．05-0.01；黄素腺嘌呤二核苷酸链：呼吸控制率：1.47&;#177;0．23，2.53&;#177;0．28，2．84&;#177;0．36，P〈0．05～0．01；磷氧比：0．88&;#177;0．09，1．58&;#177;0．11，1．73&;#177;0．17，P〈0．05-0．01；氧化磷酸化效率：（6．05&;#177;1．13），（7．47&;#177;1.40），（8．62&;#177;1．60）μkat／g，P〈0．05～0．011，山莨菪碱组明显高于缺血再灌注组（P〈0．01）。②各组家免大脑皮质还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素C氧化酶活性：缺血再灌流组和山莨菪碱组低于假手术组[还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶：（2．62&;#177;0．35），（4．55&;#177;0．48），（5．07&;#177;0．60）μkat／g；琥珀酸氧化酶：（1．48&;#177;0．17），（1．83&;#177;0．22），（2．10&;#177;0．28）μkat／g；细胞色素C氧化酶：（5．03&;#177;1．12），（7．62&;#177;1．23），（9．00&;#177;1．53）μkat／g，（P〈0．05～0．01）]，山莨菪碱组明显高于缺血再灌注组（P〈0．01）。③各组大鼠脑线粒体钙和丙二醛含量：缺血再灌流组和山莨菪碱组高于假手术组[钙：（2．36&;#177;0．23），（1．39&;#177;0．17），（1．22&;#177;0．12）mg／g；丙二醛：[（36．38&;#177;10．42），（22．69&;#177;9．56），（19．74&;#177;7．26）μmol／g，（P〈0．05-0．01）]。山莨菪碱组低于缺血再灌流组（P〈0．01）。结论：山茛菪碱可通过钙拮抗、抑制脂质过氧化、稳定线粒体膜，减轻线粒体结构损伤，并促进缺血再灌流后线粒体呼吸功能、呼吸链酶活性的恢复，从线粒体水平发挥脑保护作用。