促红细胞生成素对肾缺血再灌注氧化应激损伤的影响

目的：探讨重组人促红细胞生成素对肾缺血再灌注损伤的作用及机制。 方法：实验于2005—07／2006-01在泸州医学院中心实验室和病理生理实验室完成。选择雄性Wistar大鼠54只，建立右肾切除，左肾肾动脉夹闭45min后再灌注的动物模型，将54只大鼠随机数字表法分为左肾未缺血再灌注组18只，切除右肾，不夹闭左肾动脉。重组人促红细胞生成素干预组18只，在再灌注开始前5min静脉注射重组人促红细胞生成素（3000U／kg）。肾缺血再灌注损伤组18只，在再灌注开始前5min注射等量的生理盐水。各组再灌注达1，6，24h时间点检测肾功能（血肌酐，尿素氮），并观察肾组织中丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性和组织形态学改变。 结果：纳入动物54只，均进入结果分析。①重组人促红细胞生成素干预组肾组织中丙二醛含量与肾缺血再灌注损伤组相比显著降低、超氧化物歧化酶活性显著升高[以再灌注6h为例，分别为（0．93&;#177;0.09），（1．19&;#177;0．08）μmol/g，（1919．55&;#177;126．52），（1338．10&;#177;5．50）μkat以，P〈0．05]。②重组人促红细胞生成素干预组血肌酐、尿素氮含量与肾缺血再灌注损伤组相比降低[以再灌注6h为例，分别为（87．53&;#177;1．22），（121．63&;#177;21．17）μmol/L，（252．06&;#177;4．59），（369．14&;#177;18．38）mg／L，P〈0．05]。③重组人促红细胞生成素干预组肾脏病变与肾缺血再灌注组比较明显减轻，肾小管上皮细胞轻度水肿，基底膜多完整，肾小管腔内见少量管型。 结论：重组人促红细胞生成素能减轻肾缺血再灌注损伤，其机制可能是抗氧自由基损伤．提高内源性抗氧化能力。     

促红细胞生成素预处理对肢体缺血再灌注损伤的影响

目的：观察促红细胞生成素预处理对骨骼肌缺血再灌注损伤的影响。 方法：实验于2004—08／2005—01在解放军第二五二医院中心实验室完成。①采用大鼠右后肢缺血再灌注模型，将30只实验大鼠随机分为3组，每组10只。假手术组：仅显露股血管鞘，不做缺血再灌注，经腹腔注射同体积生理盐水；对照组：经腹腔注射同体积生理盐水，持续缺血4h．再灌注1h。促红细胞生成素预处理组（预处理组）：经腹腔注射5000u／kg人重组促红细胞生成素，24h后持续缺血4h，再灌注1h。②测定各组血清磷酸激酶，乳酸脱氢酶丙二醛和腓肠肌^99Tc^m亚甲基二磷酸钠吸收量变化。③电镜观察腓肠肌超微结构变化。 结果：30只大鼠全部进入结果分析。①对照组和预处理组血清磷酸激酶[（121．627&;#177;18．112），（84．417&;#177;14．594）μkat／L]、乳酸脱氢酶[（20．065&;#177;4．676），（13．354&;#177;5．229）μkat/L]明显高于假手术组[（50．247&;#177;16．066），（7．732&;#177;1．256）μkat／L1（P〈0．05）；对照组和预处理组丙二醛[（10．36&;#177;2．65），（6．55．&;#177;2．19）nmol／L]及^99Tc^m亚甲基二磷酸钠吸收量[（16．69&;#177;3．14），（11．66&;#177;3．87）％／（g&;#183;min）]均明显高于假手术组[（3．54&;#177;1．89）nmol／L，（9．12&;#177;1．96）％／（g&;#183;min）（P〈0．05）]。②预处理组各指标与对照组相比显著降低（P〈0．05）。 结论：促红细胞生成素对肢体骨骼肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

重组人红细胞生成素对肿瘤患者贫血症状及其睡眠质量的影响

目的观察较大剂量重组人红细胞生成素治疗肿瘤化疗相关贫血患者血红蛋白以及对伴发失眠症状和睡眠质量的影响。方法四川大学华西医院肿瘤化学治疗科2003—02／2004—09恶性实体瘤患者60例。随机分为治疗组和对照组各30例，治疗组给予重组人红细胞生成素注射液10000U，3次／周，皮下注射，连续用药4周，同时加用铁剂力斐能100mg口服，3次／d。对照组单用铁剂。观察重组人红细胞生成素注射液对血红蛋白水平及睡眠质量的影响。在患者治疗前及治疗1个月后评定。结果进人结果分析60例。①血红蛋白水平的组间比较：治疗组平均提高22．7g／L，而对照组下降9．5g／L（P〈0．001）。②患者睡眠质量的变化组内比较：治疗组治疗后人睡、睡眠维持、睡眠自评、午休时间、睡眠总时间、睡眠时间比、梦记忆情况低于治疗前[治疗后：（0．85&;#177;0．33），（0．30&;#177;0．06），（0．60&;#177;0．10），（1．10&;#177;0．31），（0．80&;#177;0．22），（0．85&;#177;0．23），（0．65&;#177;0．09）分；治疗前：（1．16&;#177;0．40），（0．41&;#177;0．05），（0．81&;#177;0．17），（1．23&;#177;0．28），（0．94&;#177;0．25），（0．89&;#177;0．25），（0．71&;#177;0．13）分，P〈0．01]。结论较大剂量重组人红细胞生成素注射液治疗肿瘤化疗诱发贫血可提高患者血红蛋白水平，改善伴随的失眠现象并提高睡眠质量。     

重组人红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后神经细胞及其因子凋亡的影响

背景：在脊髓损伤中，除了创伤造成的直接损伤外，脊髓局部还将发生一系列的继发性病理改变。有研究显示重组人红细胞生成素能抑制细胞凋亡和炎症反应，具有神经保护作用。目的：通过观察大鼠脊髓损伤段神经细胞凋亡及相关因子的表达，探讨重组人红细胞生成素对脊髓损伤的保护作用。设计：随机对照实验。单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院骨外科实验室和同济医学院病理科。对象：实验于2003-09／2004-05在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨外科实验室和同济医学院病理科进行。雌性成年SD大鼠30只，随机分成4组，①空白组6只，只暴露脊髓，不损伤。②损伤组8只，脊髓损伤，不用药物。③治疗A组8只，脊髓损伤，仅用重组人红细胞生成素。④治疗B组8只，脊髓损伤，联合应用重组人红细胞生成素和β-七叶皂甙钠。方法：①动物模型制作：24只大鼠应用改良的Allen方法致脊髓中度损伤。②给药：治疗A组于术后1，3，5，8，11d应用重组人红细胞生成素300U／（kg&;#183;d）。治疗B组应用重组人红细胞生成素剂量时间同治疗A组，β-七叶皂甙钠0．1mg／kg，1次／d，连用11d。空白组及损伤组尾静脉推注等容量生理盐水。③神经功能判断：在造模后1和12d分别由同一个实验者进行功能评分记录。行为观察：参照改良的Gale神经功能行为分析法评估，0分为严重障碍，6分为正常。斜板试验：观察大鼠抓握能力决定斜板角度的大小，反映神经功能恢复情况。④组织学检查：大鼠术后12d处死。取损伤段脊髓标本切片做苏木精-伊红染色。⑤神经细胞凋亡因子bcl-2，bax，fas检测：取标本做免疫组织化学染色，计数显微镜高倍视野内染色呈棕色的阳性细胞，计算阳性率。⑥凋亡神经细胞检测：采用原位末端标记法计算凋亡指数（凋亡细胞核数／总细胞核数）。各指标检测结果进行组内和组间比较。主要观察指标：①神经功能行为学评分及斜板实验结果。②损伤段脊髓组织学观察结果。③神经细胞凋亡因子检测结果。④凋亡神经细胞检测结果。结果：①神经功能行为学评分及斜板实验结果：1和12d空白组无显著差异。损伤组12d斜板角度显著大于1d时（P〈0．05）。治疗A和B组12d行为评分及斜板角度值均显著大于1d时（P〈0．05），且显著大于损伤组P〈0．05）。②损伤段脊髓组织学观察结果：损伤组损伤段变细，脊髓内有大部分坏死和大量胶质细胞增生；治疗A，B组大多数神经组织正常，治疗B组组织结构优于A组。③神经细胞凋亡因子检测结果：损伤组bax，fas凋亡阳性细胞明显多于治疗A，B组[损伤组（25．75&;#177;3．37）％和（41．37&;#177;2．83）％，治疗A组（19．87&;#177;3．56）和（26．00&;#177;3．29）％，治疗B组（12．00&;#177;2．97）和（17．50&;#177;2．20）％，P〈0．05]；bcl-2显著低于治疗A，B组[（9．75&;#177;1．83）％，（14．63&;#177;2．83）％，（21．63&;#177;5．34）％，P〈0．05]。④凋亡神经细胞检测结果：损伤组细胞凋亡指数明显高于治疗A，B组（50．75&;#177;5．39，34．75&;#177;3．01，24．00&;#177;3．46，P〈0．05）。结论：细胞凋亡是脊髓损伤后神经元死亡的一种重要方式。重组人红细胞生成素能抑制脊髓神经细胞凋亡，对损伤脊髓的神经功能具有保护作用。     

促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡的影响

目的：观察给予外源性重组人红细胞生成素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经细胞凋亡的影响。 方法：实验于2005—03／06在解放军第四军医大学病理实验室进行。①取新生7dSD大鼠72只，随机分为3组（n=24），假手术组、模型组和促红细胞生成素组，各组又分为造模后6，24，48，72h组4个亚组，每组6只大鼠。②促红细胞生成素组和模型组大鼠结扎右颈动脉，手术后即刻分别腹腔内注射重组人红细胞生成素注射液（10U／g）及同体积生理盐水，手术后2h两组大鼠吸人体积分数为0．08氧气和体积分数为0.92氮气的混合气体2h，建立缺氧缺血脑损伤新生鼠模型及促红细胞生成素治疗模型。假手术组分离动脉不结扎，不缺氧。③各组大鼠在造模后相应时间点断头处死，采用TUNEL法检测大脑海马区神经细胞凋亡情况。 结果：经补充后72只进入结果分析。①模型组6h右侧海马CA1区出现凋亡细胞[（19．10&;#177;5．90）个]，24h显著增高，48h达高峰[（65．70&;#177;8．33）个]后逐渐下降，但72h仍高于假手术组[（28．70&;#177;5．74），（0．60&;#177;0．84）个，F=71．587，P〈0．01]。②促红细胞生成素组各个时间点CA1区的凋亡细胞数均少于模型组（P〈0．01），尤其在24h最明显[（28．20&;#177;7．77），（60．30&;#177;7．75）个，t=-9．251，P〈0．01]。 结论：外源性重组人红细胞生成素能抑制缺氧缺血性脑损伤后的神经细胞凋亡，对脑组织确有保护作用。     

重组人红细胞生成素对大鼠急性心肌梗死区域及缺血区毛细血管密度的影响

目的:应用重组人红细胞生成素治疗大鼠急性心肌梗死,观察其对心肌梗死区域细胞凋亡以及缺血区毛细血管密度变化和心功能的影响。方法:实验于2004-06/2005-06在南京大学模式动物研究所完成。选取健康雄性Wistar大鼠16只,随机分为急性心肌梗死组、重组人红细胞生成素组,8只/组。①两组大鼠均结扎左冠前降支建立急性心肌梗死模型,局部心肌变紫色、室壁膨出为模型成功标志。②重组人红细胞生成素组围手术期每天腹腔注射重组人红细胞生成素3000IU/kg,共3d(即手术前1d、手术当天、手术后1d),在术后第14,15,16天以同等剂量再连续注射3d。急性心肌梗死组术后各时间点给予等量生理盐水。③左冠状动脉前降支结扎术后3周末测定缺血区毛细血管密度、Bcl-2和Bax的水平,2d及3周末采用二维超声心动图检查两组大鼠心腔结构及心功能。结果:实验选取大鼠16只,全部进入结果分析。①两组术后3周末毛细血管密度测量结果:与急性心肌梗死组比较,重组人红细胞生成素组毛细血管密度明显增加犤(10.4±1.5),(6.3±0.7)个/视野,P<0.05犦。②两组术后3周末心肌组织Bcl-2和Bax蛋白的表达:与急性心肌梗死组比较,重组人红细胞生成素组Bax表达明显减弱犤(0.1465±0.0138),(0.1248±0.0098)A,P<0.05犦,而Bcl-2表达则明显增强犤(0.1030±0.0056),(0.1163±0.0050)A,P<0.05犦。③两组术后3周末心功能各项指标的变化:与急性心肌梗死组比较,重组人红细胞生成素组左室舒张末期内径、左室收缩末期内径均显著降低犤(6.25±0.32),(5.51±0.35)mm;(4.22±0.21),(3.45±0.24)mm;P均<0.05犦,左室射血分数明显升高犤(69.08±2.23)%,(75.24±3.64)%,P<0.05犦。结论:重组人红细胞生成素能减少缺血区心肌细胞凋亡及促进缺血区毛细血管的生成,从而改善和提高心肌梗死大鼠的心脏功能。     

川芎嗪在骨骼肌缺血再灌注损伤中的作用

目的：观察川芎嗪对兔缺血再灌注骨骼肌相关生化指标含量的影响以及超微结构的改变，探讨川芎嗪对骨骼肌缺血再灌注损伤的作用。 方法：实验于2004-06／2004—08在潍坊医学院显微解剖学实验室完成。取清洁级成年新西兰白兔30只，建立后肢骨骼肌缺血再灌注损伤模型。实验随机分为对照组、缺血再灌注组和川芎嗪组，每组10只。缺血后4h，川芎嗪组自耳缘静脉注射盐酸川芎嗪注射液（含川芎嗪20g/L，山东潍坊制药厂有限公司生产，批号：030618）5mg／kg，对照组及缺血再灌注组注射等量生理盐水。注射完毕后立即撤去血管夹和橡皮带以恢复供血，再灌注后2h3组分别自术侧股静脉采集血样3mL，制备血清，测定天冬氨酸氮基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、丙二醛和超氧化物歧化酶含量；取术侧胫前肌，常规制备超薄切片，行电镜观察。 结果：30只动物均进入结果分析。①缺血再灌注组血清天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、丙二醛含量明显高于对照组[（142．2&;#177;8．1）。（27．3&;#177;3．5）U／L；（318&;#177;35）（153&;#177;21）U／L；（3141&;#177;271），（1783&;#177;289）U／L；（5．86&;#177;0．59），（3．77&;#177;0．43）μmol／L；t=47．237-8．856，P〈0．01]，川芎嗪组与对照组比较除天冬氨酸氨基转移酶外均无明显升高[（59．7&;#177;3．3）U／L,t=13．320，P〈0．01]。②缺血再灌注组超氧化物歧化酶活性明显低于对照组[（325．51&;#177;30．62），（443．49&;#177;38．13）NU／mL,t=8．404，P〈0．01]，川芎嗪组与对照组比较无明显降低[（422．37&;#177;23．77），（443．49&;#177;38．13）NU／mL,t=1．504，P〉0．05]。③电镜下观察可见缺血再灌注组显示线粒体空泡样变，嵴断裂，毛细血管内皮细胞微绒毛减少，三联体异常，双侧终池宽大，横小管粗细不等；川芎嗪组三联体完整，糖原颗粒较多，毛细血管内皮细胞内有吞饮小泡，内皮细胞可见轻微损伤，肌纤维基本正常。 结论：川芎嗪可减轻缺血再灌注对骨骼肌造成的损伤，对缺血再灌注骨骼肌具有保护作用。     

重组人促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后脂质过氧化的影响

目的：观察重组人促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后脂质过氧化和超微结构改变的影响。 方法：实验于2004-05／08在吉林大学第二医院中心实验室完成。选择健康成年SD大鼠27只，采用改良Allen’s法制作脊髓损伤模型。27只SD大鼠随机数字表法分为3组：治疗组（H=9）：造模后立刻给予重组人促红细胞生成素腹腔内注射（5000U／kg）1次；生理盐水对照组（n=9）：造模后立刻给予等量生理盐水腹腔内注射1次。正常组（n=9）：不作任何处置。采用硫代巴比妥酸法检测脊髓损伤后2，24，48h丙二醛含量变化，使用透射电镜技术评估脊髓损伤后各时相点的超微结构评分。 结果：纳入大鼠27只，均进入结果分析。①生理盐水对照组和治疗组伤区丙二醛含量随伤后时间的增加呈不断升高的趋势，生理盐水对照组伤后2，24，48h伤区丙二醛含量较正常组明显增加，差异有显著性意义[分别为（92．45&;#177;6．22），（65．62&;#177;2．22）nmol／g；（112．56&;#177;6．68），（68．20&;#177;1．84）nmol／g；（142，38&;#177;7．24），（66．40&;#177;2．04）nmol／g，P〈0．05]。治疗组伤后2，24，48h丙二醛含量较生理盐水对照组明显降低[分别为（68．54&;#177;5．88），（92．45&;#177;6．22）nmol／g；（75．24&;#177;6．28），（112．56&;#177;6．68）nmol／g．P〈0．05；（88．34&;#177;8．52）．（142．38&;#177;7．24）nmol／g，P〈0．01]。②生理盐水对照组的超微结构评分随伤后时间的增加呈不断升高的趋势，而治疗组的超微结构评分随伤后时间的增加则变化不大，相对稳定。治疗组伤后2，24，48h的超微结构评分均较生理盐水对照组明显降低，差异有显著性意义[分别为（1.28&;#177;0．45），（3．84&;#177;0．25）分；（1．38&;#177;0．28），（4．24&;#177;0，38）分；（1．42&;#177;0．36），（4．98&;#177;0．52）分，P〈0．05]。 结论：重组人促红细胞生成素能够明显降低脊髓损伤后丙二醛含量，减轻脊髓损伤后的脂质过氧化，显著降低脊髓损伤后的超微结构评分，明显减轻脊髓损伤后的超微结构改变，有效地保护脊髓组织，具有明显的神经保护作用.     

电针对高血压大鼠脑缺血后再灌注不同时间点脑细胞损伤的干预作用

目的：观察电针督脉经“大椎”、“百会”二穴对高血压大鼠脑缺血再灌注不同时间点行为学评分、脑含水量、脑细胞超微结构的变化。方法：实验于2004-08／2005-08在广东省中医院中心实验室完成。将140只SD大鼠先用环形银夹狭窄双侧肾动脉，制成易卒中型肾血管性高血压大鼠，再用线栓法制成一侧大脑中动脉闭塞脑缺血再灌注模型，采用随机数字表法分为假手术组、电针组和模型组，分别观察缺血2h后再灌注1d，7d．14d大鼠行为学评分、脑含水量、脑细胞超微结构的变化。结果：140只SD大鼠，进入结果分析126只，假手术组18只，电针组54只和模型组54只。①脑缺血再灌注1，7d后，电针组大鼠行为学评分明显小于模型组（1．44&;#177;0．62，1．87&;#177;0．73；0．60&;#177;0．50，0．97&;#177;0．50，P〈0．05），再灌注14d电针组行为学评分与模型组比较。差异无显著性（0．20&;#177;0．41．0．27&;#177;0．46，P〉0．05）。②脑缺血再灌注1，7d后，电针组和模型组大鼠脑含水量明显高于假手术组[（80．72&;#177;1．37）％，（83．63&;#177;1．33）％，（77．58&;#177;1．30）％；（79．43&;#177;1．25）％，（81．65&;#177;1．65）％，（77．58&;#177;1．30）％，P〈0．001]，模型组大鼠脑含水量比电针组升高更明显（P〈0．001）；再灌注14d后，电针组和模型组大鼠脑含水量下降[（78．66&;#177;1．30）％，（78．86&;#177;1．10）％]，与假手术组比较差异无显著性（P〉0．05）。③缺血再灌注1d和7d后，电针组大鼠脑梗死体积百分率明显小于模型组，差异具有显著性[（14．34&;#177;1．31）％，（18．84&;#177;1．41）％；（6．07&;#177;1．72）％，（8．86&;#177;1．18）％，P〈0．01]。缺血再灌注14d，电针组与模型组间脑梗死体积百分率差异无显著性[（5．77&;#177;1．07）％，（7．04&;#177;1．65）％，P〉0．05]。④再灌注1，7d后，电针组神经细胞的超微结构损害较模型组轻；再灌注14d后，电针组脑细胞的超微结构损害仍比模型组轻。结论：高血压大鼠脑缺血再灌注早期电针督脉经“大椎”，“百会”二穴可改善其神经行为学表现，减轻脑水肿，缩小脑梗死范围，减轻脑细胞超微结构损害。     

低氧诱导小鼠胎肝间质细胞表达红细胞生成素

目的：观察低氧培养条件下小鼠胎肝问质细胞中红细胞生成素的表达。方法：实验于2004—10／2005—01在暨南大学医学院血液病研究所完成。取孕14．5d小鼠胚胎肝细胞进行贴壁培养及传代，生长至次融合状态的第5代细胞在体积分数为0．95的N2和体积分数为0．05的CO2混合气条件下培养，分为培养0（对照组），2，4，8，16，32h组，在相应时间下应用半定量反转录-聚合酶链反应和Western blot技术检测其红细胞生成素基因表达。结果：①在常氧压下培养的胎肝间质细胞中，红细胞生成素mRNA及其蛋白水平均较低。②低氧培养则可显著提高胎肝间质细胞红细胞生成素基因的mRNA及其蛋白水平。红细胞生成素mRNA在低氧培养4h时即显著增高，8h时达到高峰水平，聚合酶链反应产物红细胞生成素与β—actin信号比从对照组（4．92&;#177;2．31）％增加到（26．69&;#177;7．94）％，差异有显著性意义（P〈0．01）。红细胞生成素蛋白在低氧培养4h时显著增高，16h时达到高峰水平，Western检测红细胞生成素与β—actin信号从对照组（3．57&;#177;2．34）％增加到（19．81&;#177;6．56）％，差异有显著性意义（P〈0．01）。结论：低氧预处理可诱导胎肝间质细胞表达红细胞生成素，提示低氧预处理小鼠胎肝间质细胞在组织缺血损伤中的潜在治疗作用，如治疗脑缺血和心肌缺血等疾病。     

Legionellosis in Ul'ianovsk region

The increasingly frequent introduction of new infectious diseases poses the problem of their prophylaxis, prevention of secondary distribution and establishment. Current epidemiologic situation is characterized by the occurrence of rare infections including legionellosis. Data on the prevalence of this disease in Ulyanovsk region are presented for the period from 2008 to the first half of 2009. The patients were infected during their Hajj pilgrimage to Saudi Arabia. The clinical picture resembles that of Pontiak fever and manifestations are indistinguishable from those of acute respiratory infection.     

Pineal region brain tumors

Pineal region brain tumors occur in and around the pineal gland, a small cone-shaped structure in the posterior portion of the diencephalon. Pineal tumors can be divided into four basic categories: 1) germ cell tumors, 2) pineal tumors, 3) supporting cell tumors, and 4) cysts, or non-malignant conditions. Germinomas, one type of germ cell tumors, are the most common type of pineal region tumor. In overall incidence, pineal region tumors are relatively uncommon; however, because these tumors are mainly diagnosed in childhood and young adulthood, the incidence in that age group has been reported as high as nine percent. Pathophysiology and signs and symptoms are discussed as well as medical treatment and nursing care. The case study is a presentation of a 22-year-old male with a pineal region tumor.