B(A)04血型鉴定及家系分析

正确鉴定红细胞血型是保证安全有效输血的重要前提。ABO血型是其中最重要的血型系统,通常采用血清学方法正反定型鉴定,但在某些特殊情况下,如红细胞被致敏,同种抗体干扰,ABO亚型等导致血清学正反定型不符合时,可采用基因分型技术和遗传规律分析作为正确判断血型的辅助手段。本实验室已建立稳定的聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-     

A201亚型患者输注A型血致配血不合1例

正确鉴定红细胞血型是保证安全有效输血的重要前提。ABO血型是其中最重要的血型系统,通常采用血清学方法正反定型鉴定。但在某些特殊情况下,如红细胞被致敏,同种抗体干扰,ABO亚型等导致血清学正反定型不符合时,可辅助采用基因分型技术正确判断血型,为临床安全输血提供保障。本实验室接收1例交叉配血不合患者血样经血清学检     

红细胞血型基因分型技术在疑难配血中的应用

目的应用红细胞血型基因分型技术辅助鉴定1例引起交叉配血不合的抗体。方法采用血清学方法鉴定ABO和Rh血型、红细胞血型抗体鉴定及交叉配血,采用基因分型方法鉴定Kidd血型。结果该患者血清中抗体为抗-Jk~b抗体,效价为4,Kidd血型为Jk~(a+b–)型。结论通过红细胞血型基因型检测,该患者交叉配血不相合是由抗-Jk~b抗体引起。     

基因分型在建立谱红细胞中的应用

目的PCR-SSP技术筛选建立用于鉴定红细胞抗体的谱红细胞。方法采用基因分型方法对17例红细胞的Rh、MN、Kell、Duffy、Kidd、Diego、Lutheran、Yt、Scianna、Dombrock、Colton、LW、GIL、Chido/Rogers、Gerbich、Cromer、Knops、Indina和OK等19个血型系统的67个等位基因作基因分型,并与血清学定型结果相比较。结果血清学方法鉴定的17例O型红细胞的6个血型系统,与基因分型结果比较,除1例细胞的N抗原有所差异外,其余完全一致。结论红细胞血型基因分型作为一项辅助技术,有助提高谱红细胞定型的准确性,而且可以鉴定血清学方法无法检测的血型系统。     

急性白血病致Rh血型系统D抗原减弱1例

目的对1例Rh血型系统D抗原血清学检测呈现混合视野凝集的患者进行基因分型,以明确患者的Rh D表型,确定血型后给予Rh D同型红细胞输注,探讨实验室检测方法和输血方案的选择。方法分别采用血型血清学和基因检测试剂盒对患者Rh血型系统D抗原进行检测,血型确认后多次输血观察输血后反应。结果患者Rh D抗原检测,微柱凝胶卡式初检及确认试验均为双群表现,IgM抗-D试管法为1+混合视野凝集,基因分型确认为正常D抗原,多次输注Rh D阳性红细胞,无抗-D产生。结论白血病常引起红细胞血型抗原减弱,当血清学试验不能确认时可进一步进行基因分型鉴定,一旦血型确认,可以输注同型血液。     

基因分型结合血清学方法鉴定ABO血型亚型

目的准确鉴定红细胞ABO亚型。方法采用血清学方法鉴定12例ABO血型正反定型不符标本,结合PCR-SSP基因定型方法作检测鉴定,并对其中9例作基因测序确定基因型。结果 ABO基因分型结果与血型血清检测结果一致率为66.67%(8/12);其余不相符的4例:2例为B(A),1例为Cis AB,1例为新基因(新基因血型血清学结果不确定,PCR-SSP结果为A1/O02,测序结果为A102/O02型)。结论 ABO血型基因分型技术结合血清学定型可用于ABO亚型鉴定及ABO血型的正确定型。     

肿瘤患者疑难血型鉴定和基因分型的相关探讨

血液病和恶性肿瘤的部分患者,尤其是白血病和多发性骨髓瘤患者,常因病情及治疗导致ABO血型正反定型不符,表现为ABO血型的抗原或抗体减弱。本研究分析正反定型不一致的原因,进行正确的红细胞分型和基因分型,对12份肿瘤患者正反定型不一致血液样本进行的血型血清学试验和吸收放散试验。对存在疑问的标本进行PCR扩增第6、7外显子和5-7内含子,对外显子序列进行基因测序。结果表明,9例标本通过血型血清学、吸收放散定型,6例为A型,2例为O型,1例为B型;3例血型血清学和吸收放散无法鉴定其血型的标本,经测序分别定型为O46,B108和A102型,其中有2例因为PCR扩增效果差或者测序结果矛盾,未能给出ABO基因型。结论：对ABO血型正反定型不一致无法定型的肿瘤患者的血液样本,可以采用血型血清血方法、基因分型及吸收放散的方法正确鉴定ABO血型,以保证输血的安全性和有效性。     

ABO基因定型在疑难血型鉴定中的应用

Landsteiner1 90 0年发现的 ABO血型 ,是目前最具临床意义的血型系统。常规使用的定型技术是采用单克隆或多克隆抗体与红细胞凝集试验进行测定 ,疑难者再附加吸收放散试验、唾液定型等试验项目 ,但由于血型血清学技术的局限性 ,致使一些疑难标本难以及时、准确判定。作者参考国外文献 [1] ,建立了稳定的 PCR ABO基因分型技术 [2 ] ,在实际工作中解决了一些疑难血型鉴定病例 ,现报告如下。材料与方法1　血型血清学试验　按照文献[3 ] 操作。抗 - A、抗 -A1、抗 - B由卫生部长春生物制品研究所制备 ,抗 -H、抗球蛋白试剂由上海输血研究…     

高通量MLPA基因分型技术在1个Del表型家系基因鉴定中的应用

目的 对1个Del表型家系作基因鉴定.方法 运用血型血清学方法对先证者及其家系的3名成员作RhD及相关血型抗原鉴定;提取先证者及其父母和妹妹的静脉血DNA.运用高通量红细胞血型基因的多重连接依赖探针扩增技术(MLPA)对先证者及其他成员血型基因作定性及定量分型;用PCR产物直接测序方法对发现的变异作确认.结果 血型血清学检测:先证者为Del表型,其他3名家系成员为正常的RhD阳性个体.MLPA基因分型:先证者有2条包含1227G＞A突变位点的RHD等位基因,而3名家系成员有1条包含1227G＞A突变位点的RHD等位基因及1条正常的RHD等位基因.结论 高通量红细胞血型基因分型的MLPA技术能够对Del表型作明确的基因鉴定,有助于节约宝贵的RhD阴性血液.     

中国汉族人群ABO血型系统基因分型研究与应用

目的研究中国汉族人群ABO基因多态性,并将基因分型技术用于解决临床输注中血型血清学难题.方法快速盐析法提取外周血中的DNA,采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)基因方法对ABO血型定型,并且在吸收放散试验、唾液血型物质凝集抑制等血清学试验基础上,用PCR-SSP法扩增疑难ABO血型的等位基因.结果在中国汉族符合Hardy-Weinberg平衡的随机群体(260人)中,检出O1、B、A101(A267c)和A102/103(A467r)四种等位基因,其基因频率分别为0.5827、0.1846、0.0096、0.2231.在疑难血型鉴定中6份血清学定为A2的标本中,只有2例基因分型确定为A201O1,其余均为A102/A103O1型,在一家系疑难血型鉴定中,兄弟三人均为类孟买型,ABO基因分型分别为A102B、A102B、A102O1.结论ABO RCR-SSP基因分型是一种方便、快速、可靠的技术,与血型血清学相比有着显著优势.研究发现中国汉族人群A2等位基因构成与国际报道的基因构成存在差异.     

ABO血型正反定型不一致原因分析及对策探讨

目的探讨ABO血型定型中正反定型不一致的原因和解决方法。方法对正反定型不一致血液标本进行不同的血型血清学试验,对存在疑问的标本进行基因分型、测序,分析正反定型不一致的原因,进行正确的红细胞分型。结果共检查ABO血型正反定型不一致标本45例,其中冷自身抗体5例、亚型11例、抗体缺失及减少7例、抗原性减弱10例、因输血或妊娠发生同种抗体5例,自身免疫性贫血7例。对其中9例血型血清学难鉴定标本和亚型标本进行PCR扩增,测序,确定其基因型。结论对ABO血型正反定型不一致无法定型的血液标本,可以采用基因分型及其他辅助手段正确鉴定ABO血型,以保证输血安全性和有效性。     

红细胞血型基因结构

目前被国际输血协会(ISBT)命名的红细胞血型系统有29个,包括将近300个血型抗原,40多个遗传座位和824个等位基因(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)。血型基因分型技术日益完善,除了P血型系统外,其它血型基因均已被克隆,积累了大量有关血型基因结构和多态性资料,为此ISBT已召开过2次血型分子基因分型专题讨论会[1]。在可预期的未来,血型血清学分型是否可能被基因分型逐步取代,已成为当前血型研究领域的热门话题[2]。为进一步促进中国在DNA水平上的血型研究和应用,笔者参考了大量资料,特别撰写了本文,重点介绍血型系统的基因结构、多态性及携…     

Bx亚型1例血清学与分子生物学分析

正输血是现代医疗中重要的救治手段之一,正确的血型鉴定在输血工作中有极其重要的意义。ABO血型有多个亚型~[1-2]。若血清学显示ABO血型正反定型不符及抗原性减弱,很容易造成忽视和漏检,给临床血型鉴定、交叉配血及器官移植等带来极大的困扰,给临床输血带来危险。最近我们在临床送检样本中发现了1例正反定型不符的样本,并对其进一步做血清学以及基因测序分析,最终确定为Bx亚型,现报告如下。     

筛选试剂红细胞的血型基因分型方法建立和应用

目的建立重要的红细胞血型的基因分型技术用于筛选抗原谱合理的试剂红细胞。方法首先建立检测红细胞血型系统Rh CE、Kidd、MNS、Duffy、Diego、Lutheran、Colton、Lutheran和Kell等的聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分型技术;对于无法获得相关血型试剂的Diego和Colton血型系统,采用测序方法验证该技术检测血型的准确性,其他6个血型系统则用血清学方法验证该技术检测血型的准确性;最后应用该方法对82名O型固定献血者的8个血型系统做基因分型。结果血型基因PCR-SSP分型技术的结果,与血清学和测序检测结果比较,完全一致。所建立的血型基因分型技术对82名O型献血者8种红细胞血型检测,筛选出13位可能适合提供试剂红细胞的献血者。结论成功建立了分型准确、方便、经济的红细胞血型基因PCR-SSP技术,用于从大量献血者中筛选出抗原谱合理的试剂红细胞。     

3例类孟买血型鉴定及分析

目的鉴定并分析类孟买型的特点。方法运用血型血清学吸收放散与唾液血型物质抑制等试验方法与基因分型,对3名类孟买型献血者血型鉴定。结果3名献血者血型均为Ⅲ型类孟买血型,经典血清学方法结果与基因分型结果一致,交叉配血试验37℃抗球蛋白介质中与红细胞反应强度为w+~1+。结论类孟买型人若需要输血应考虑到抗-A、抗-B、抗-H的实际情况,选择在37℃反应最弱的ABO同型去白红细胞输注。     

类孟买血型鉴定与输血策略研究

目的 研究类孟买血型的鉴定方法、血清学特点和输血策略。方法 对先证者及其四妹采用凝胶微柱法和试管法正反定型,吸收放散试验证实红细胞上弱表达的ABO抗原,测定唾液中的ABH物质,筛查血清中不规则抗体,应用PCR-SSP技术进行ABO基因和FUT1基因分型,并扩增ABO基因的第6、第7外显子和FUT1编码区序列后对PCR产物进行直接测序分析。采用血清学方法为先证者筛选适宜输注的红细胞。结果 先证者和其四妹血清学鉴定为Bm~h和Om~h,血清中有抗-H,ABO基因分型结果为BO2、0102,FUT1基因分型结果均为h1h1型。先证者ABO基因测序结果为B101/002,FUT1基因测序结果为第547-552位AG 2碱基缺失的纯合突变。结论 血型血清学联合分子生物学方法可准确鉴定类孟买血型;类孟买血型个体输血时应采取特殊输血策略,以避免输血不良反应的发生。     

简易ABO基因定型试剂盒的建立简

近年来，ABO基因分型技术克服了血型血清学方法的限制，为临床解决了一些疑难血型鉴定问题，已作为一种独立简便的分型方法，得到广泛应用。在输血和器官移植中，ABO系统是最重要的人类同种抗原。在临床方面，由于疑似遗传的弱亚型或其他变异亚型、获得性A或B血型、在疾病或妊娠中暂时出现的A或B抗原表达减弱、大量或反复输血、在胎儿期早期发生的祖细胞交换或正处在干细胞移植期而造成的嵌合体和极少数的与ABO相关的新生儿溶血病等原因，     

A×B亚型1例报道

目的通过对1例A×B亚型的鉴定,说明血型鉴定中正反定型及ABO亚型对输血的重要性。方法按照试剂所提供的操作方法进行血型血清学检测,进行ABO血型正反定型,抗人球蛋白检测。结果血清学试验表明,被检者的红细胞与A抗体发生凝集,与B抗体不发生凝集,与抗-AB发生凝集,被检者的血清与A1型红细胞、B型红细胞、O型红细胞不发生凝集,初步判定为A×B亚型。结论 ABO亚型是ABO抗原以外的抗原性较弱的亚型或变异,主要是由糖基转移酶基因突变或单碱基因缺失等原因导致A抗原或B抗原表达减弱,是导致正反定型不符,血型误判及配血不合的主要原因,给血型鉴定及患者输血带来困难。在临床工作中,应重视ABO血型亚型的存在,提高输血安全性。     

聚合酶链式反应-特异性序列引物基因定型在新生儿溶血病ABO血型定型中的应用

目的研究聚合酶链式反应-特异性序列引物(PCR-SSP)基因定型在新生儿溶血病(CHDN)ABO血型定型中的应用。方法收集20例来自广东省肇庆市第一人民医院新生儿溶血病(HDN)的样本,对这些样本进行ABO血型鉴定等一系列血型血清学方法进行检测,然后用PCR-SSP基因定型技术进行样本的基因分型。结果与其血型的血清学分型结果进行比较,新生儿溶血病ABO血型的定型是新生儿输血的必要保障,而PCR-SSP基因分型较血型血清学方法更快捷、准确。结论 PCR-SSP基因正型技术将不再局限于疑难血型的鉴定中,并会越来越多地应用于HDN的鉴定中。     

ABO亚型B(A)04鉴定及家系调查

目的对罕见的ABO亚型标本进行ABO血型鉴定及家系调查分析。方法采用血型血清学方法对家系标本进行ABO血型鉴定,同时采用PCR-SSP方法检测红细胞ABO血型基因及ABO cisAB与B(A)血型基因分型,并分析血型遗传规律。结果该家系调查发现2例血清学结果正反定型结果不符,均为血清学结果为正定型AB型,反定型B型,ABO基因型为B(A)04/O2型。结论对ABO血型血清学正反定型不符的标本,可以用家系调查和分子生物学方法进行辅助验证,并能阐述ABO血型弱表达现象的分子基础。