用mecA基因分析法鉴定金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌对苯甲异噁唑青霉素敏感性试验方法的比较

作者用 NCCLS推荐的琼脂稀释法、平板扩散法、琼脂筛选法 (包括拭子涂抹、点种 )检测了 99株葡萄球菌 [5 8株凝固酶阴性的葡萄球菌 (Co NS) ,41株金黄色葡萄球菌 (金葡 ) ]对苯甲异唑青霉素 (甲氧西林 )的耐药性 ,30株 (5 2 % ) Co NS和 17株 (42 % )金葡 mec A基因阳性。结果 　 mec A基因阳性的 Co NS最佳检测方法是 :用含 4% Na Cl的 MH培养基的琼脂稀释法 ,35℃孵育 48h和用含 4% Na Cl及甲氧西林 0 .6 mg/ L的 MH培养基的琼脂筛选法。琼脂稀释法 ,显示 mec A基因阳性的分离株 ,不论其分界点是 2 mg/ L还是 1mg/ L,都一样…     

三种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的比较

目的 比较苯唑西林纸片扩散法、微量琼脂稀释法(MIC)和聚合酶链反应(PCR)法检测甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的差异.方法 用上述3种方法同时检测86株临床分离的金黄色葡萄球菌.结果 3种方法同时检测出53株MRSA和33株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌,一致性为100%.结论 三种方法都适于临床实验室准确检测MRSA,尤其是纸片扩散法和MIC法可作为不同级别临床常规实验室确证MRSA检测方法.     

甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌对万古霉素药物敏感性试验的方法学比较

目的比较不同药敏试验方法测定万古霉素对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)抗菌活性的影响。方法收集2013年临床分离的61株MRSA,采用微量肉汤稀释法、琼脂稀释法和E试验法对MRSA进行万古霉素药敏试验的测定。根据CLSI 2014年版标准进行结果判断。采用SPSS软件对3种药敏试验所得万古霉素最低抑菌浓度(MIC)值进行分析。结果MRSA对万古霉素的敏感率均为100%,未见万古霉素不敏感株。微量肉汤稀释法和琼脂稀释法测定万古霉素对MRSA的MIC50和MIC90值均为1 mg/L,采用E试验法测定的MIC50和MIC90值均为1.5 mg/L。3种药敏试验得到的MIC几何平均值分别为1.01(微量肉汤稀释法)、0.96(琼脂稀释法)和1.30(E试验法)。结论 3种药敏方法检测MRSA对万古霉素的敏感性结果虽一致,但由于万古霉素MIC值的细小差异在临床疗效上有着显著差异,故实验室为临床提供万古霉素药敏试验结果时,需要明确指出采用的具体药敏试验测定方法。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的　评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)在临床的应用价值。方法　用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的 94株金黄色葡萄球菌 ,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果　mecA基因阳性的 77株金黄色葡萄球菌 ,头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论　头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致 ,是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。     

中草药对MRSA临床株的抑菌作用研究

[目的]研究中草药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床株的抑菌作用,探讨MRSA感染的治疗措施.[方法]按照美国临床实验室标准委员会(NOCLS)推荐的标准.采用苯唑西林-琼脂稀释法与聚合酶链式反应(PCR)检测mecA基因两种方法.鉴定MRSA临床株;将9种中草药制备成一定浓度的水煎液,用二倍微孔稀释法测定对MRSA临床株的最低抑茵浓度(MIC).[结果]经鉴定所用的临床分离株为MRSA菌株,且对苯唑西林高度耐药;9种中草药水煎液对MRSA临床株有不同程度的抑制或杀灭作用,其中黄芩、黄连、夏枯草、连翘4种中草药的抗茵效果较好.[结论]清热解毒中草药对MRSA临床株具有一定的抗菌作用.     

纸片法、ATB法与苯唑西林琼脂筛选法检测耐甲氧西林葡萄球菌的结果比较

目的了解我院耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的感染情况及其寻找适合医院检测MRS最简易、准确的方法.方法通过苯唑西林纸片法、半自动细菌分析系统(ATB)法、苯唑西林琼脂筛选法进行MRS检测以及比较其阳性检出率,并以苯唑西林琼脂筛选法为对照,分别比较纸片法、ATB法与它的符合率.结果 86株金黄色葡萄球菌(SA)中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占69.7%(60/86),114株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中,耐甲氧西林菌株(MRSCoN)占78.1%(89/114).结论以苯唑西林琼脂筛选法为对照,纸片法符合率97.9%,ATB仪器检测符合率为91.2%,仪器检测不及纸片法.     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的可靠性和临床实用性进行评估。方法 用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、mecA基因的检测结果进行比较。结果 mecA基因阳性的90株金黄色葡萄球菌头孢西丁纸片扩散法和胶乳凝集法的敏感性分别为100％和98．9％,特异性均为100％,苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法和琼脂稀释法的敏感性分别为97．8％、98．9％和97．8％,特异性均为100％。结论 头孢西丁纸片扩散法与mecA基因的检测结果高度一致,是筛选和确认MRSA的一种简便可靠的方法。     

苯唑西林MIC≥0.5ug/ml折点对凝固酶阴性葡萄球菌耐药性高估情况分析

目的：了解使用苯唑西林MIC（最低抑菌浓度）≥0.5ug/ml的折点判断部份凝固酶阴性葡萄球菌为耐甲氧西林葡萄球菌对此类葡萄球菌耐药性高估的情况。方法：对73株苯唑西林MIC法耐药的凝固酶阴性非表皮葡萄球菌同时用头孢西丁纸片法扩散法（K-B法）检测,分析结果。结果：9株表现为敏感（抑菌圈≥25mm）,占12%,其中6株苯唑西林MIC介于0.5-2ug/ml之间,3株苯唑西林MIC≥2ug/ml。头孢西丁敏感与耐药的两组菌对常用抗阳性球菌药物敏感性有明显差别。结论：对于苯唑西林MIC介于0.5-2ug/ml的凝固酶阴性的非表皮葡萄球菌,临床实验室应遵照美国临床和实验室标准化研究所（CLSI）指南,用头孢西丁K-B法或其它方法复核验证其耐药性,苯唑西林MIC≥2ug/ml的菌株,可直接报告为耐甲氧西林的葡萄球菌。     

三种检测甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌方法的比较

目的:比较苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林-高盐琼脂筛选试验和PBP2′乳胶凝集试验(PBP2′ latex agglutination test,LA)检测甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的差异。方法:用上述3种方法同时检测85株临床分离的金黄色葡萄球菌。结果:3种方法同时检测出38株MRSA和47株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌,一致性为100%。结论:LA法适于临床实验室快速准确检测MRSA。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的选择性培基

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)很易在医院和病人中传播,传统的检测方法是用非选择性培养基分离,挑取少数菌落进行检查,这样易漏检只有少量的MRSA 或混有对甲氧西林敏感菌株的标本。作者等用甲氧苯青霉素—甘露醇琼脂(OM-SA)选择鉴别培养基,其组成为酚红肉汤基础(16g),NaCl(60g),甘露醇(10g),琼脂(15g),甲氧苯青霉素(6mg),和多粘菌素B(10mg)。经对936份呼吸道标本进行检查,结果显示105株发酵甘露醇。经鉴定103株葡萄球菌中,29株为金黄色葡萄球菌。在此选择培养基上17株(59%)MR-SA 可在24小时内检出,28株(97%)在48小时内检出。凝固酶阴性葡萄球菌则需较长时间培养。作     

社区成年健康人群鼻咽部主要机会致病菌耐药性分析

目的分析南京部分社区成年健康人群鼻咽部5种主要机会致病菌(凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和肺炎克雷伯菌)的耐药情况。方法将2009年7月至2010年7月分离自社区成年健康人群鼻咽部的5种主要机会致病菌分别进行纸片扩散法药敏试验和琼脂稀释法。按CLSI 2010年标准判定结果,用WHONET 5.4软件进行数据分析。结果 1019例社区成年健康受检者鼻咽部标本中分离出凝固酶阴性葡萄球菌404株,其中甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)162株(占40.10%);金黄色葡萄球菌109株中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)19株(17.43%);两种葡萄球菌对青霉素均表现出高度耐药,对万古霉素100%敏感,MRSA和MRCNS对多种临床常用抗菌药物均显示高度耐药。肺炎克雷伯菌32株,除对阿莫西林/克拉维酸耐药率稍偏高(39.20%),对其他常用抗菌药物敏感性皆较高,ESBLs阳性率为25.00%。49株肺炎链球菌中大部分对红霉素、克林霉素和青霉素表现出较高的耐药率,分别为71.20%、76.90%和74.40%。流感嗜血杆菌74株,对复方新诺明耐药率最高,为44.4%,但对其他常用的抗菌药物敏感性均较高。结论南京部分社区健康成年人鼻咽部所携带的主要机会致病菌中,MRSA和MRCNS对多种临床常用抗菌药物均显示高度耐药,未发现对万古霉素耐药的葡萄球菌。肺炎链球菌对常用的红霉素、克林霉素和青霉素显示了高耐药。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)、甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)、流感嗜血杆菌和肺炎克雷伯菌对多数常用的抗菌药物敏感性均较高。加强细菌耐药监测,防止耐药菌在社区的扩散尤为重要。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRsA)在临床的应用价值。方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的94株金黄色葡萄球菌，并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果mecA基因阳性的77株金黄色葡萄球菌，头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致，是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。     

一种简单的筛选耐甲氧西林葡萄球菌方法

目的推荐美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)关于6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板(以下简称盐平板法)检测甲氧西林耐药葡萄球菌。方法使用NCCLS推荐的盐平板法检测华山医院临床分离的葡萄球菌共894株。结果(1)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)苯唑西林纸片法的检出率为84．2％(538／639)，盐平板法的检出率为86．4％(552／639)，而耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率2种方法分别为82．0(209／255)、90．6％(231／255)；(2)有14株纸片法测定为中介的金黄色葡萄球菌和22株纸片法检测为甲氧西林敏感(MS)的凝固酶阴性葡萄球菌，盐平板检测均为甲氧西林耐药(MR)，经聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因结果均为阳性，显示PCR检测与盐平板检测结果一致；(3)随机取上述纸片法和盐平板2种方法检测均为MS者9株、MR者15株，同时进行mecA基因的PCR检测，结果显示全部与盐平板法和苯唑西林纸片法检测结果符合。结论在临床微生物实验室应该采用NCCLS推荐的6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板对MRSA和MRCNS进行检测，以供临床诊断和选用抗生素。     

4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评估

目的:评价4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)方法的临床应用价值。方法:用mecA基因检测MRSA乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法对临床分离的160株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果:160株中有127株为MRSA,4种检测方法结果一致。结论:头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRSA的简便又准确的实验方法,并值得推广应用。     

全国多中心细菌耐药监测网中血流感染相关金黄色葡萄球菌的分子流行病学研究

目的首次研究全国多中心血流感染相关金黄色葡萄球菌(金葡菌)的分子流行病学特征。方法全国17省市34所医院共149株血流感染相关的金葡菌,分析杀白细胞毒素(pvl)基因,多位点序列分型(MLST)和spa分型(编码葡萄球菌A蛋白)及甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)琼脂稀释法的药敏结果。结果受试菌计有71株MRSA和78株甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)。pvl阳性株为11株,MRSA只占1株。MLST显示有23种不同的序列型(ST)结果,MRSA含6种ST分型,主要型别为ST239及ST5;MSSA有20种ST分型,但是各型别比例均不超过15%。spa分型共45种型别,MRSA含8种型别,优势型别为t030和t037;MSSA有38种型别,优势型别为t091和t189。MRSA对常用抗菌药物耐药率依次为环丙沙星91.18%,左氧氟沙星91.18%,红霉素76.47%,莫西沙星73.53%,克林霉素70.59%,利福平58.82%,甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑17.65%;对利奈唑胺、万古霉素、去甲万古霉素、替考拉宁、替加环素等药物均100%敏感。结论血流感染相关MRSA传播的优势型别为ST239-t037和ST239-t030,并对多种抗菌药物存在不同程度耐药,需加强细菌耐药性监测。     

两种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的K-B法应用评价

目的评价两种分别使用MH琼脂(头孢西丁)和高盐琼脂(苯唑西林)纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床应用价值。方法用头孢西丁纸片在MH琼脂平板上进行纸片扩散法(K-B法)检测临床分离的89株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法(K-B法)、mecA基因检测进行比较。结果在MH琼脂使用头孢西丁纸片检测MRSA优于高盐琼脂苯唑西林纸片扩散法,并与PCR检测mecA基因的方法高度一致。结论头孢西丁纸片扩散法是筛选和确认耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)一种简单、可靠的实验方法。     

纸片法、ATB法与苯唑西林琼脂筛选法检测耐甲氧西林葡萄球菌的结果比较

目的 了解我院耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的感染情况及其寻找适合医院检测MRS最简易、准确的方法。方法 通过苯唑西林纸片法、半自动细菌分析系统（ATB）法、苯唑西林琼脂筛选法进行MRS检测以及比较其阳性检出率，并以苯唑西林琼脂筛选法为对照，分别比较纸片法、ATB法与它的符合率。结果 86株金黄色葡萄球菌（SA）中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）占69.7%(60/86)，114株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）中，耐甲氧西林菌株（MRSCoN)占78.1%(89/114)。结论 以苯唑西林琼脂筛选法为对照，纸片法符合率97．9％，ATB仪器检测符合率为91．2％，仪器检测不及纸片法。     

一种简单的筛选耐甲氧西林葡萄球菌方法

目的　推荐美国国家临床实验室标准化委员会 (NCCLS)关于 6 μg/ml苯唑西林 +4%NaCl盐平板 (以下简称盐平板法 )检测甲氧西林耐药葡萄球菌。方法　使用NCCLS推荐的盐平板法检测华山医院临床分离的葡萄球菌共 894株。结果　 (1)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)苯唑西林纸片法的检出率为 84 .2 % (5 38/6 39) ,盐平板法的检出率为 86 .4 % (5 5 2 / 6 39) ,而耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)的检出率 2种方法分别为 82 .0 (2 0 9/ 2 5 5 )、90 .6 % (2 31/ 2 5 5 ) ;(2 )有 14株纸片法测定为中介的金黄色葡萄球菌和 2 2株纸片法检测为甲氧西林敏感 (MS)的凝固酶阴性葡萄球菌 ,盐平板检测均为甲氧西林耐药 (MR) ,经聚合酶链反应 (PCR)检测mecA基因结果均为阳性 ,显示PCR检测与盐平板检测结果一致 ;(3)随机取上述纸片法和盐平板 2种方法检测均为MS者 9株、MR者 15株 ,同时进行mecA基因的PCR检测 ,结果显示全部与盐平板法和苯唑西林纸片法检测结果符合。结论　在临床微生物实验室应该采用NCCLS推荐的 6 μg/ml苯唑西林 +4%NaCl盐平板对MRSA和MRCNS进行检测 ,以供临床诊断和选用抗生素。     

应用MRSA ID产色琼脂培养基等四种方法检测和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的比较MRSAID产色琼脂培养基及其他3种方法检测和鉴定甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）。方法选择临床118株葡萄球菌用（118株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌108株，凝固酶阴性葡萄球菌10株）细菌鉴定仪鉴定到种，用MRSAID琼脂筛选法、苯唑西林平板筛选法、头孢西丁纸片法比较MRSA的检测情况，同时检测金黄色葡萄球菌的mecA基因作为金标准，同时用大肠埃希菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌ATCC25923，铜绿假单胞菌ATCC27853和粪肠球菌ATCC29212做干扰试验。结果金黄色葡萄球菌用PCR检测其meeA基因，共检测到80株阳性菌株；用MRSAID琼脂筛选法符合率为100％，苯唑西林平板筛选法符合率为97．5％，头孢西丁纸片法符合率为100％；有1株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）和1株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）对MRSAID琼脂的显色有干扰，出现了浅绿色的细小菌落。用标准菌株做对照均没有生长。结论MRSAID琼脂平板可以对MRSA进行主动快速监测。     

大蒜素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性探讨

目的了解大蒜素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RSA)的体外抗菌活性。方法用CLS I/NCCLS介绍的方法检测了大蒜素和万古霉素对114株临床分离的MRSA的体外抗菌活性。结果大蒜素对MRSA的MIC50、MIC90和MBC分别为20.0,80.0和160.0μg/ml。结论大蒜素为一种对MRSA敏感的抗菌药物,可用于临床治疗由MRSA感染引起的多种疾病。