一种简单的筛选耐甲氧西林葡萄球菌方法

目的推荐美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)关于6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板(以下简称盐平板法)检测甲氧西林耐药葡萄球菌。方法使用NCCLS推荐的盐平板法检测华山医院临床分离的葡萄球菌共894株。结果(1)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)苯唑西林纸片法的检出率为84．2％(538／639)，盐平板法的检出率为86．4％(552／639)，而耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率2种方法分别为82．0(209／255)、90．6％(231／255)；(2)有14株纸片法测定为中介的金黄色葡萄球菌和22株纸片法检测为甲氧西林敏感(MS)的凝固酶阴性葡萄球菌，盐平板检测均为甲氧西林耐药(MR)，经聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因结果均为阳性，显示PCR检测与盐平板检测结果一致；(3)随机取上述纸片法和盐平板2种方法检测均为MS者9株、MR者15株，同时进行mecA基因的PCR检测，结果显示全部与盐平板法和苯唑西林纸片法检测结果符合。结论在临床微生物实验室应该采用NCCLS推荐的6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板对MRSA和MRCNS进行检测，以供临床诊断和选用抗生素。     

373株不动杆菌的药物敏感性试验

目的了解我院临床分离不动杆菌属对15种抗菌药物的耐药性,为耐药菌感染的抗菌药物选择提供依据。方法收集我院2005年7月至2006年6月所有不动杆菌临床分离株,采用琼脂稀释法测定15种抗菌药物对该菌的最低抑菌浓度。结果本研究共包括373株不动杆菌,其中鲍曼不动杆菌352株,洛菲不动杆菌21株。药敏结果显示,鲍曼不动杆菌对多黏菌素B最为敏感,细菌耐药率仅为2.6%;其次对头孢哌酮-舒巴坦、美罗培南和亚胺培南,耐药率约为15%;对左氧氟沙星、哌拉西林-三唑巴坦、头孢吡肟、氨苄西林-舒巴坦和哌拉西林的耐药率为37.5%~59.9%;对环丙沙星、阿米卡星、头孢噻肟、头孢他啶、复方磺胺甲噁唑和庆大霉素的耐药率均大于60%。与鲍曼不动杆菌相比,除多黏菌素B外,洛菲不动杆菌对上述药物的耐药率明显较低,对多数抗菌药物的耐药率在30%以下。结论不动杆菌属是医院感染的重要病原菌,耐药率高,部分菌株呈多重耐药,治疗用药应参考药敏试验结果。     

40例成人牙周炎患者龈沟液分离厌氧菌分布及其对药物敏感性

目的 了解成人牙周炎患者龈沟液厌氧菌分布及其对临床常用抗菌药物的敏感性。方法 2020年12月—2021年5月收集来自复旦大学附属华山医院、上海市静安区牙病防治所和上海市嘉定区牙病防治所共计40例成人牙周炎患者的龈沟液进行厌氧菌培养和分离，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行菌种鉴定；琼脂稀释法测定存活细菌对阿莫西林等12种抗菌药物的体外敏感性。结果 共培养分离到厌氧菌192株，检出率前五位的细菌依次为中间普氏菌、变黑普氏菌、具核梭杆菌、黄褐二氧化碳嗜纤维菌以及黏性放线菌。96株存活厌氧菌对阿莫西林-克拉维酸及美罗培南均敏感。除普氏菌属（敏感率61.3%）外，其余分离菌对阿莫西林亦多呈敏感。普氏菌属及韦荣球菌属对甲硝唑全部敏感，而放线菌属和颗粒链球菌属则对甲硝唑近100%耐药。除了韦荣球菌属外，其他分离菌对多西环素和莫西沙星均敏感。结论 牙周炎患者龈沟液分离厌氧菌以普氏菌属、梭杆菌属和二氧化碳嗜纤维菌属多见；对阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、多西环素和甲硝唑多呈敏感。     

24种抗菌药对临床分离葡萄球菌的体外抗菌活性

目的 :比较 2 4种抗菌药对临床分离葡萄球菌的体外抗菌活性。方法 :受试药物为 2 4种抗菌药 ,受试菌为临床分离的2 71株金葡菌和 135株凝固酶阴性葡萄球菌。琼脂稀释法测定抗菌药对细菌的最低抑菌浓度。结果 :万古霉素、替考拉宁和利福平对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌 (MRSA)具有高度抗菌活性 ,抑菌率分别为 10 0 %、99.2 %和 95 .4% ;其他抗菌药的抑菌率低于 5 0 %。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌 (MSSA)对青霉素的敏感率仅 17.1% ,对四环素、克林霉素以及红霉素的敏感率为 70 %左右 ,对大多数 β内酰胺类抗生素的敏感率 >90 %。耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)对万古霉素、替考拉宁和利福平的敏感率分别为 10 0 %、99.2 %和 94.9%。甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌 (MSCNS)对绝大多数受试药物的敏感率 >90 % ,青霉素的抑菌率低于 5 0 %。结论 :万古霉素等糖肽类抗生素为甲氧西林耐药葡萄球菌 (MRS)感染的可靠选用药物 ,重症感染者尚应联合利福平、磷霉素等抗菌药 ,不宜选用 β内酰胺类抗生素 ;由MSS所致感染则可根据药敏选用糖肽类以外的各类抗菌药。     

头孢米诺的体外抗菌作用研究

目的评价头孢米诺对近期临床分离的肠杆菌科细菌、不发酵糖革兰阴性杆菌和厌氧菌的体外抗菌作用。方法采用琼脂稀释法测定头孢米诺对884株临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和厌氧菌等的体外抗菌作用。结果 316株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中不产酶株96株(30.4%),单产ESBLs菌173株(54.7%),单产AmpC酶菌6株(1.9%)和产ESBLs+AmpC酶菌41株(13.0%)。头孢米诺对上述大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中不产酶和单产ESBLs菌株,以及变形杆菌属和摩根菌属细菌均具有良好的抗菌活性,MIC50和MIC90值大多≤2 mg/L;抗菌活性优于头孢美唑和头孢西丁;头孢米诺对不产酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的抗菌活性亦优于测试的头孢硫脒、头孢呋辛、头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦2种酶抑制剂复方,但抗菌活性均不及亚胺培南和美罗培南。头孢米诺对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产AmpC酶菌株的抗菌活性和肠杆菌属、沙雷菌属、枸橼酸杆菌属细菌和铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等不发酵糖革兰阴性杆菌的抗菌活性差;但头孢米诺对梭杆菌属细菌有高度抗菌活性,MIC50和MIC90分别为≤0.06 mg/L和1 mg/L,对其他受试的厌氧菌亦具有良好的抗菌活性。结论头孢米诺对不产酶和单产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,以及变形杆菌属细菌、摩根摩根菌和厌氧菌等均具有良好的抗菌活性。提示头孢米诺可用于上述敏感菌以及厌氧菌所致感染的治疗。     

头孢美唑对产ESBLs肠杆菌科细菌的体外抗菌作用研究

目的 评价头孢美唑对产ESBLs肠杆菌科细菌的体外抗菌活性.方法 采用琼脂稀释法测定头孢美唑对临床分离大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌523株的体外抗菌作用.结果 523株细菌中产ESBLs 294株、产AmpC酶7株、同时产ESBLs和AmpC酶40株,非产ESBLs和AmpC酶182株.头孢美唑对上述4种肠杆菌科细菌中产ESBL-s菌株和非产ESBLs菌株均具有良好的抗菌作用,并较头孢西丁强2～4倍,但较头孢米诺为差.头孢美唑对ESBLLs高度稳定,但对AmpC酶稳定性差,产AmpC酶菌株对其多呈现耐药.头孢美唑对产ESBLs菌株的作用优于受试的半合成青霉素,第一、第二、第三和第四代头孢菌素,亦优于氨苄西林-舒巴坦、头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦,但差于亚胺培南、美罗培南和帕尼培南;较受试的氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗菌药略强或相仿.结论 头孢美唑对ESBLs稳定,对产ESBLs菌株和非产ESBLs菌株均具有良好的抗菌作用.提示该药是治疗产ESBLs肠杆菌科细菌所致感染的可选药物之一.     

检测超广谱β—内酰胺酶的简易方法

产生超广谱 β 内酰胺酶 (ｅｘｔｅｎｄｅｄ -ｓｐｅｃｔｒｕｍ β ｌａｃｔａｍａｓｅｓＥＳＢＬｓ)是革兰阴性杆菌对第三代头孢菌素及单环β 内酰胺类抗生素产生耐药的主要机制之一。自 1983年首次报道ＥＳＢＬｓ以来 ,产ＥＳＢＬｓ菌株在世界各地流行与传播的报道日渐增多[1～ 3] 。迄今已有多种检测细菌产ＥＳＢＬｓ的实验室方法 ,其中双纸片法是目前应用最多的方法。此法简单易行 ,但双纸片间的最佳距离难以确定 ,因而影响其检出率[4 ,5] 。作者等采用 30、2 5、2 0、15ｍｍ 4种不同的距离 ,对 94株ＥＳＢＬｓ可疑产生菌进行检测 ,同时…     

上海地区产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的实验和临床研究

目的：了解上海地区临床分离大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的发生率、流行情况、对抗菌药物的耐药性、产酶基因的转移特征以及感染类型和医院感染的临床特征。方法：用双纸片法和表型确证试验(MIC法)检测ESBLs产生株;Kirby-Bauer(KB)法测定细菌对抗菌药物的敏感性;接合转移试验检测产酶基因的可传播性;对上述细菌感染中部分患进行病史调查与分析。结果：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中ESBl0产生株的发生率分别为39．4％、21．5％,ES—BLs产生株对于大多数β内酰胺类药物明显耐药,并对氨基糖苷类、氟喹诺酮类多数耐药,对亚胺培南则呈现敏感;ESBLs产生株可以通过接合转移将其产酶基因转移给敏感株,转移频率多在10^-3～10^-7,双纸片法和表型确证试验结果显示转移接合子具有与产ESBLs供体菌相同的耐药表型,质粒提取、聚合酶链反应(PCR)检测结果两亦相同;ESBLs产生株主要引起医院感染且患的转归较差。结论：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌ESBLs产生株大多为多重耐药菌;ESBLs产生株可通过结合转移将产酶基因转移给敏感菌,导致耐药性传播;ESBLs产生株为引起医院感染的重要病原菌,治疗较困难,需要加强检测。     

卡他莫拉菌的检测及药物敏感性

目的：以DNA酶试验鉴定结果为标准,建立聚合酶链反应(PCR)鉴定卡他莫拉菌的方法,并测定抗菌药物对卡他莫拉菌的最低抑菌浓度(MIC)。方法：PCR扩增卡他莫拉菌特异性片段,DNA酶试验检测卡他莫拉菌所产生的DNA酶,琼脂稀释法测定抗菌药物对卡他莫拉菌的MIC及头孢硝噻吩法检测β内酰胺酶。结果：在68株疑为卡他莫拉菌的临床分离菌株中,有48株细菌DNA酶试验阳性,此48株细菌PCR结果亦为阳性;20株DNA酶试验阴性菌株PCR结果亦阴性,PCR检测和DNA酶检测符合率达100％(68／68)。口内酰胺酶产生率为95．8％(46／48)。2株不产酶卡他莫拉菌对受试的7种抗菌药物均显示敏感,药物的：MIC均≤0．06mg／L;氨苄西林等7种抗菌药物对46株产酶卡他莫拉菌的MIC50和MIC90范围分别为≤0．06～2mg／L和0．25～4mg／L。结论：PCR检测方法具有方便、快速及高特异性的特点,可作为检测卡他莫拉菌的辅助方法之一;卡他莫拉菌产酶株对酶抑制剂复方制剂、第三代头孢菌素、喹诺酮类及米诺环素均显示敏感。     

90株肺炎链球菌的耐药性测定

肺炎链球菌是儿童呼吸道感染的主要致病菌,而且此菌对青霉素耐药率持续增高,给临床治疗带来困难.为了了解肺炎链球菌的耐药情况,我们收集了本院呼吸科肺炎患儿痰标本中分离到的90株肺炎链球菌,应用琼脂扩散法测定了青霉素及其他8种抗生素的耐药情况.并对苯唑西林≤19 mm的菌株用青霉素E-test法确定.