基于PI3K/AKT/mTOR通路、HIF-1α、ES观察新风胶囊对佐剂关节炎大鼠滑膜血管新生的影响

目的:观察新风胶囊(XFC)对佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜PI3K/AKT/mTOR通路的影响。方法:将大鼠随机分成正常对照组、模型对照组、甲氨蝶呤组、雷公藤多苷组、XFC组。采用免疫组化法检测滑膜微血管密度(MVD)表达,酶联免疫吸附法检测白介素(IL)-6、IL-10、HIF-1α、VEGF-A表达,免疫印迹法检测PI3K、AKT1、p-AKT1、mTOR、ES蛋白在滑膜血管中表达。结果:模型对照组滑膜组织MVD计数升高,血清IL-6、VEGF、HIF-1α和滑膜PI3K、AKT1、p-AKT1、mTOR、ES表达显著升高,血清IL-10表达量降低;治疗后,XFC组MVD呈高计数量,HIF-1α、IL-6、VEGF-A表达降低,滑膜PI3K、p-AKT1、mTOR、ES蛋白表达降低,血清IL-10升高。结论:XFC通过调节PI3K/AKT/mTOR信号通路、HIF-1α、ES表达改善AA滑膜血管新生。     

IL-18对BALBc小鼠结直肠癌肝转移模型PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平的影响

目的 探讨白介素18(IL-18)对BALBc小鼠结直肠癌肝转移模型PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平的影响.方法 选取60只BALBc小鼠,采用随机数字表法将小鼠分为:空白对照组、低、中、高剂量IL-18组,每组15只;除空白对照组外各组采用脾内种植法构建结肠癌肝转移小鼠模型,低剂量、中剂量、高剂量IL-18组分别于构建前或构建后注射(20、40和80μg/kg)的IL-18结合蛋白(IL-18BP);检测各组小鼠转移灶大小、数目、质量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清和腹水中IL-18水平;采用蛋白质印记法及免疫组化检测各组小鼠结直肠癌肝转移组织中E-cadherin、N-cadherin表达;采用蛋白质印记法检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达情况.结果 相比空白对照组,低剂量IL-18组小鼠腹水IL-18水平、血清IL-18水平、N-cadherin阳性率、p-AKT蛋白相对表达、PI3K蛋白相对表达水平显著升高,E-cadherin阳性率显著降低(P<0.05),总AKT蛋白相对表达差异无统计学意义(P>0.05);相比低剂量组,中剂量组小鼠瘤体积、转移灶数量、瘤重、腹水IL-18水平、血清IL-18水平、N-cadherin阳性率、p-AKT蛋白相对表达、PI3K蛋白相对表达水平显著升高且高剂量组上述指标高于中剂量组(P<0.05);相比低剂量组,中剂量组E-cadherin阳性率显著降低,且高剂量组上述指标低于中剂量组(P<0.05),低、中、高白介素18组总AKT蛋白相对表达差异均无统计学意义(P>0.05).结论 IL-18可以通过激活型PI3K/AKT信号通路促进BALBc小鼠结直肠癌的转移及生长.     

枸杞多糖通过调控PI3K/Akt/eNOS信号通路对去卵巢大鼠心肌产生抗氧化作用

目的:观察枸杞多糖对去卵巢大鼠心肌PI3K/Akt/e NOS信号通路的影响。方法:将30只SD雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、补佳乐组、枸杞多糖高剂量组及枸杞多糖低剂量组,ELISA法比较各组血清雌激素、LDH及CK水平,检测心肌H_2S含量及氧化应激损伤相关指标,HE染色观察各组心肌的形态变化,Western blot法检测各组大鼠心肌e NOS蛋白及PI3K/Akt通路蛋白的表达。结果:与假手术组相比,去卵巢组大鼠血清雌二醇水平降低,心肌H_2S含量和GSH-Px活性下降,心肌e NOS蛋白及PI3K/Akt通路蛋白的表达均有所降低,心肌ROS活性和MDA含量升高(P0.05),心肌细胞排列紊乱,细胞间隙增大,血清LDH和CK活性均增多;与去卵巢组比较,枸杞多糖高剂量组大鼠血清雌二醇含量增加(P0.05),心肌H_2S含量、GSH-Px活性、e NOS蛋白及Akt磷酸化水平均提高,心肌ROS活性和MDA含量下降(P0.05),血清LDH和CK活性均降低,并且改善大鼠心肌形态的变化。结论:枸杞多糖可以通过调控PI3K/Akt/e NOS通路改善去卵巢大鼠心脏变化防治绝经后心血管病变。     

白藜芦醇对腔隙性脑梗死大鼠脑损伤的影响

目的 探讨白藜芦醇（resveratrol,RES）对腔隙性脑梗死（lacunar infarction,LI）大鼠脑组织损伤的影响。 方法 选取60只SD大鼠均分为假手术组、模型组、RES组以及联合组（RES+LY294002）,月桂酸钠法制备LI模型,Zea-Longa’s法评估神经功能,TTC法观察脑梗死体积,酶联免疫法检测脑组织氧化应激、炎性因子水平,Weidener法观察微血管密度,Western blotting检测脑组织磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶（P13K/Akt）通路相关蛋白及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白水平。 结果 RES组能降低LI大鼠神经功能评分、脑梗死体积和MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平（P<0.05）,增加微血管密度、SOD、CAT、GSH-PX、IL-10水平和VEGF、p-PI3K、p-AKT蛋白表达（P<0.05）,联合组上述指标与RES组相比呈相反趋势（P<0.05）。 结论 RES可改善LI大鼠脑损伤和血管新生,PI3K/Akt信号通路参与该过程。     

马勃多糖对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及可能机制

为探讨马勃多糖(Calvatia gigantea polysaccharide, CGP)对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及潜在机制,给小鼠接种4T1细胞建立乳腺癌荷瘤模型,将建模成功的小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组(25 mg/kg)和CGP高(200 mg/kg)、中(100 mg/kg)、低(50 mg/kg)剂量组,每组8只;另随机选取8只健康小鼠为对照组(给予生理盐水)。灌胃给药,1次/d,给药周期为14 d。给药结束后检测瘤重、脾脏指数、胸腺指数,血清细胞因子水平及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果发现,与模型组比较,CGP高、中、低剂量组小鼠瘤重均明显减轻(P0.05);与模型组比较,除CGP低剂量组小鼠胸腺指数外,各剂量组小鼠脾脏指数、胸腺指数、NK细胞增殖率、脾脏淋巴细胞增殖刺激指数及血清IFN-γ、IL-6、IL-2水平均明显增加(P0.05);与模型组比较,CGP高、中、低剂量组小鼠p-PI3K、p-Akt和p-mTOR的相对表达量均明显降低(P0.05)。以上结果提示CGP对乳腺癌荷瘤小鼠的肿瘤生长具有抑制作用,该作用与免疫调节及抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活有关。     

蛇床子素调节PI3K/Akt/mTOR信号通路对妊娠高血压大鼠氧化应激损伤的影响

目的 探讨蛇床子素（OST）调节磷脂酰肌醇3-激酶/苏氨酸蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR信号通路对妊娠高血压（HDCP）大鼠氧化应激损伤的影响。方法 通过灌胃左旋亚硝酸精氨酸甲酯（L-NAME）法建立HDCP大鼠模型。并将SPF级雌性大鼠随机分为：对照组（Control组）、模型组（Model组）、低剂量OST组（OST-L组，40 mg/kg）、高剂量OST组（OST-H组，80 mg/kg）、高剂量OST+PI3K抑制剂组（OST-H+LY294002组，80 mg/kg OST+5 mg/kg LY294002），每组12只。于大鼠妊娠第12、16、17和21天检测大鼠尾动脉血压和24 h尿蛋白含量。RT-PCR法检测HDCP大鼠胎盘组织中Flt-1和PIGF mRNA的表达。取大鼠全血血清进行ELISA检测，检测可溶性Flt-1、PIGF、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和谷胱甘肽（GSH）水平。Western blot检测HDCP大鼠胎盘组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白表达。结果 与Control组相比，Mod...     

甘草酸对切口愈合模型大鼠促进切口愈合及防止瘢痕形成效果的研究

目的研究甘草酸促进胶原合成对切口愈合模型大鼠瘢痕形成及切口愈合的效果。方法选择50只SD健康大鼠,随机分为空白对照组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只。模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组均建立切口愈合模型,30 min后对低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠分别静脉注射10 mg/kg、15 mg/kg、30 mg/kg甘草酸,术后3 d、7 d、14 d观察各组大鼠变化。进行组织切片、HE染色,观察大鼠病理组织学变化,检测创面组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、VEGF、b FGF、EGF mRNA表达量及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、PTEN/AKT/VEGF信号通路蛋白表达量,计算愈合瘢痕面积、创面愈合率及愈合时间,并进行组间比较。结果术后3 d、7 d、14 d低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠创面组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、VEGF、b FGF、EGF mRNA及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、VEGFR2、p-AKT蛋白表达量均高于模型组,PTEN蛋白表达量低于模型组,差异具有统计学意义(P 0. 05);术后3 d、7 d、14 d中剂量组、高剂量组大鼠创面组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、VEGF、b FGF、EGF mRNA及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、VEGFR2、p-AKT蛋白表达量均高于低剂量组,PTEN蛋白表达量低于低剂量组,差异具有统计学意义(P 0. 05);术后3 d、7 d、14 d高剂量组大鼠创面组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、VEGF、b FGF、EGF mRNA及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、VEGFR2、p-AKT蛋白表达量均高于中剂量组,PTEN蛋白表达量均低于中剂量组,差异具有统计学意义(P 0. 05)。术后3 d、7 d、14 d低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠愈合瘢痕面积、创面愈合率均高于模型组大鼠,创面愈合时间短于模型组,差异具有统计学意义(P 0. 05);术后3 d、7 d、14 d中剂量组、高剂量组大鼠愈合瘢痕面积、创面愈合率均高于低剂量组,创面愈合时间短于低剂量组,差异具有统计学意义(P 0. 05);术后3 d、7 d、14 d高剂量组大鼠愈合瘢痕面积、创面愈合率均高于中剂量组,创面愈合时间短于中剂量组,差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论甘草酸通过作用于PTEN/AKT/VEGF信号通路,减轻切口创面炎性浸润,促进胶原合成、创面愈合,防止瘢痕形成,且呈剂量依赖。     

葛根素对臂丛神经根性撕脱伤脊髓前角iNOS、CGRP蛋白表达及PI3K/Akt信号通路的影响

目的　探讨葛根素对臂丛神经根性撕脱伤（brachial plexus root avulsion injury,BPRAI）脊髓前角iNOS、CGRP蛋白表达及PI3K/Akt信号通路的影响。 方法　将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葛根素低、中、高剂量治疗组,每组10只。模型组,葛根素低、中、高剂量治疗组进行BPRAI造模,撕脱大鼠右侧C5~7脊神经前根,后根剪断,术后3个治疗组予腹腔注射葛根素,剂量分别为50、100、200 mg·kg-1·d-1,正常组、模型组腹腔注射等体积生理盐水,持续4周。采用尼氏染色、免疫荧光化学、Western blot方法,观察损伤侧脊髓前角α运动神经元（alpha motorneurons,α-MNs）的存活率,iNOS、CGRP、PI3K/Akt通路相关蛋白的表达。 结果　第4周时,低、中、高剂量的葛根素治疗可抑制α-MNs丢失（P<0.05或P<0.01）;中、高剂量的葛根素治疗可抑制iNOS表达（P<0.05）;高剂量的葛根素治疗可促进CGRP蛋白表达（P<0.05或P<0.01）;低、中、高剂量葛根素均可显著抑制p-Akt1/2/3表达（P<0.01）。 结论　葛根素可改善BPRAI造模引起的α-MNs死亡,其机制可能与葛根素能抑制iNOS蛋白的表达、促进CGRP蛋白的表达有关,并且PI3K/Akt信号通路参与其调控。     

血必净通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路减轻大鼠睾丸缺血再灌注损伤

目的:探究血必净对缺血再灌注(I/R)损伤大鼠睾丸的保护作用及其相关机制。方法:45只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、血必净低剂量组、血必净高剂量组和地塞米松组(均n=9);除对照组大鼠外,其它各组大鼠构建睾丸扭转复位模型,术后低、高剂量组及地塞米松组大鼠分别腹腔注射0.5和2 mL·kg^-1·d^-1血必净及0.5 mL·kg^-1·d^-1地塞米松。用药第3、7和14天取各组大鼠左侧睾丸,采用HE染色观察各组大鼠睾丸组织病理学改变;生化检测各组大鼠睾丸组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素1(ET-1)和一氧化氮(NO)水平,Western blot检测各组大鼠睾丸组织中细胞周期相关蛋白、细胞凋亡相关蛋白以及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的水平。结果:血必净可显著减轻I/R大鼠睾丸损伤,显著升高I/R大鼠睾丸组织中SOD活性,降低MDA、ET-1和NO的含量,抑制I/R损伤组织中的氧化应激,介导细胞周期和细胞凋亡相关因子的表达,并显著升高I/R大鼠睾丸中p-PI3K、p-AKT、p-mTOR和p-S6K的蛋白水平,其作用效果具有时间依赖性和剂量依赖性。结论:血必净通过介导细胞周期和细胞凋亡相关蛋白的表达,抑制氧化应激反应,激活PI3K/Akt/mTOR信号通路来减轻大鼠睾丸I/R损伤,且其作用效果呈剂量依赖性和时间依赖性。     

蛇床子素对膝骨关节炎大鼠的作用及对PI3K/Akt/NF-κB信号通路的影响

目的 观察蛇床子素对膝骨关节炎大鼠的治疗作用,探讨其对PI3K/Akt/NF-κB信号通路的影响.方法 SD大鼠(n=50),利用改良Hulth法建立膝骨关节炎大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、蛇床子素低剂量组(25 mg/kg)、蛇床子素高剂量组(50 mg/kg)及美洛昔康组(0.78 mg/kg),每组10只.模型制备成功6周后给予相应药物连续灌胃8周,假手术组及模型组给予等体积蒸馏水.HE观察大鼠膝关节软骨组织病理改变及Mankin评分;ELISA检测大鼠血清中IL-1β、TNF-a、IL-6、MMP-3、MMP-9及MMP-13水平;Western blot检测鼠软骨组织中MMP-3、MMP-9、MMP-13、PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB及p-NF-K B蛋白的表达.结果 蛇床子素低、高剂量组及美洛昔康组大鼠Mankin评分显著降低,IL-1β、TNF-o、IL-6、MMP-3、MMP-9及MMP-13水平显著降低,且MMP-3、MMP-9、MMP-13、PI3K、p-Akt及p-NF-κB蛋白表达显著降低,与模型组相比,差异显著(P＜0.05).结论 蛇床子素改善膝骨关节炎模型大鼠的症状,与抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关.     

黄芩苷通过PI3K/Akt/mTOR通路参与子痫前期 大鼠免疫状态及炎症反应的调控及机制

目的：研究黄芩苷对子痫前期大鼠免疫状态及炎症反应的调控机制及PI3K/Akt/mTOR 信号通路的影响。 方法：雌性大鼠随机分为对照组、模型组和处理组。处理组和模型组大鼠妊娠13~21 d 时给予L- 精氨酸甲酯,治 疗组大鼠于妊娠17~21 d 时给予黄芩苷注射液,对照组和模型组大鼠具给予等量的生理盐水,3 组均持续给药至 妊娠21 d。妊娠21 d 时,采用电脑尾袖式血压计测定各组大鼠血压;采用全自动生化分析仪测定各组大鼠血清中 尿素氮（BUN）水平;测定大鼠血清中和胎盘中炎症因子白细胞介素（IL）-6、IL-1β 和肿瘤坏死因子-α（TNF-α） 水平;采用蛋白免疫印迹法测定大鼠胎盘组织中Akt 和mTOR 蛋白含量、尿蛋白水平和炎症介质NF-κB和IκB-α 蛋白表达水平;采用RT-qPCR 法测定大鼠胎盘组织中α7nAChR RNA表达水平;采用流式细胞仪测定各组大鼠全 血中T 淋巴细胞的比例。结果：模型组大鼠舒张压、收缩压、BUN和尿蛋白水平显著高于对照组,处理组舒张 压、收缩压、BUN和尿蛋白水平与模型组相比均显著降低;模型组大鼠IL-6、IL-1β 和TNF-α 水平显著高于对照 组,处理组IL-6、IL-1β 和TNF-α 水平与模型组相比均显著降低;模型组大鼠Akt 和mTOR 蛋白表达水平显著低 于对照组,处理组Akt 和mTOR 蛋白表达水平与模型组相比均显著升高;模型组大鼠NF-κB和IκB-α 蛋白表达水 平显著高于对照组,处理组NF-κB和IκB-α 蛋白表达水平与模型组相比均显著降低;模型组与对照组胎盘组织中 α7nAChR RNA表达水平相当,处理组大鼠胎盘组织中α7nAChR RNA表达水平显著高于模型组和对照组;模型 组大鼠CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ 水平均显著高于对照组,CD8+ 水平显著低于对照组;处理组大鼠与模型组相比, CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ 水平均显著降低,CD8+ 水平显著升高。结论：黄芩苷可以通过促进PI3K/Akt/mTOR 信 号通路抑制机体炎症反应,改善机体免疫功能。     

LED红光对糖尿病大鼠创面愈合的影响

目的探讨LED红光照射对糖尿病大鼠创面愈合的作用及相关机制。 方法将30只4周龄雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常创面组、糖尿病创面组、红光治疗糖尿病创面组,每组10只。红光治疗糖尿病创面组及糖尿病创面组大鼠高脂饮食4周,正常创面组大鼠正常饮食。饲养4周后对红光治疗糖尿病创面组及糖尿病创面组大鼠按50 mg/kg的量腹腔注射10 mg/mL的链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,2组大鼠均造模成功。造模成功后在3组大鼠的背部两侧各制造2个1.5 cm×1.5 cm的全层皮肤缺损创面,每2 d对大鼠创面进行酒精消毒1次,红光治疗糖尿病创面组大鼠每次消毒后对创面进行LED红光照射5 min,能量密度为20 J/cm²,另外2组大鼠不进行LED红光照射。在观察第7、10、14、21天,观察红光治疗糖尿病创面组大鼠创面有无出现皮疹、红肿、水疱、烫伤等光照不良反应;肉眼观察3组大鼠创面愈合情况;统计3组大鼠创面愈合率。观察第10天从各组随机取2只大鼠,处死后取背部创面组织,固定后,进行苏木精-伊红染色观察创面新生血管情况及肉芽组织生长情况;采用免疫荧光法检测各组大鼠创面组织中CD34、血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达情况。数据比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。 结果观察第7、10、14、21天,红光治疗糖尿病创面组大鼠经LED红光照射后皮肤未见皮疹、红肿、水疱、烫伤等光照不良反应。在各个观察时间点,肉眼观察正常创面组及红光治疗糖尿病创面组创面愈合情况均优于糖尿病创面组,且正常创面组创面愈合情况略优于红光治疗糖尿病创面组;观察第7、10、14、21天,正常创面组的创面愈合率分别为(34.62±2.116)%、(53.83±7.92)%、(70.20±5.41)%、(95.65±2.58)%,红光治疗糖尿病创面组创面愈合率分别为(31.76±2.44)%、(50.48±4.54)%、(66.26±11.35)%、(93.96±2.80)%,糖尿病创面组创面愈合率分别为(23.67±4.18)%、(42.71±3.40)%、(53.77±7.74)%、(84.07±4.43)%,3组比较差异均有统计学意义(F＝34.69、10.35、10.32、34.40,P<0.05);观察第7、10、14、21天,正常创面组及红光治疗糖尿病创面组创面愈合率始终高于糖尿病创面组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察第7、10天,正常创面组创面愈合率高于红光治疗糖尿病创面组,差异均有统计学意义(t＝2.80、3.26,P<0.05),观察第14、21天,正常创面组创面愈合率仍高于红光治疗糖尿病创面组,但差异均无统计学意义(t＝1.16、1.40,P>0.05)。观察第10天,创面组织苏木精-伊红染色显示,正常创面组内含大量新生毛细血管,肉芽组织内胶原及细胞排列紧密有序;红光治疗糖尿病创面组见较多新生毛细血管,肉芽组织内胶原及细胞较多,但少于正常创面组;而糖尿病创面组新生血管最少,肉芽组织内细胞及胶原稀疏。免疫荧光法检测创面组织中CD34、VEGF表达情况可见,正常创面组CD34、VEGF表达高于红光治疗糖尿病创面组,而红光治疗糖尿病创面组表达高于糖尿病创面组。 结论LED红光可促进糖尿病大鼠创面组织中CD34、VEGF表达,促进血管新生,进而促进创面愈合。     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰腺胰岛素PI3K-Akt信号通路的调节作用

目的探讨丝胶是否通过影响胰腺胰岛素PI3K-Akt信号通路发挥降血糖的作用。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只。采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素(35mg/kg,2次,1次/d)连续腹腔注射法制作2型糖尿病大鼠模型,模型成功标准是空腹血糖≥11.1mmol/L。模型成功建立后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃35d。采用ELISA法检测大鼠血清脂联素水平,Western blotting法和Real-time PCR法分别检测大鼠胰腺胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和Akt蛋白和mRNA的表达情况。结果与糖尿病模型组比较,丝胶治疗组大鼠血清脂联素水平,胰腺IR、IRS-1、PI3K、Akt蛋白和mRNA的表达明显升高(P0.01,P0.05)。结论丝胶可通过上调糖尿病模型大鼠胰腺IR、IRS-1、PI3K和Akt的表达,改善糖尿病时胰腺胰岛素PI3K-Akt信号转导通路的异常,从而发挥降低血糖的作用。     

姜黄素对创面愈合作用的影响及其机制的初步探讨

目的 观察姜黄素(Curcumin,Cur)对大鼠皮肤创面愈合作用的影响及其机制.方法 取30只雄性SD大鼠,用6 mm打孔器在每只大鼠背部制作4个直径为6 mm大小创面模型.每只大鼠的每个创面每天施加不同浓度姜黄素(30、15、0mg/mL)及PBS干预创面的愈合.在术后第1、3、7、10、14 d随机取6只大鼠计算各创面愈合速率,采用免疫组织化学法检测各组中不同时间点各创面中血管内皮生长因子(vascular endothlial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达量,采用免疫荧光法检测各组中不同时间点各创面中M1型及M2型巨噬细胞含量.结果 溶媒剂对创面愈合未见明显影响;与对照组相比,Cur15组及Cur30组创面愈合明显增快;Cur15组及Cur30组术后第7天和第10天创面VEGF免疫组化平均光密度数值均多于相同时间点Cur0组及PBS组(P＜0.05);Cur15组术后第3、7和10天及Cur30组术后第7天和第10天bFGF免疫组化平均光密度数值均多于相同时间点Cur0组及PBS组(P ＜0.05);Cur15组及Cur30组术后第3和7天创面CD68与诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide sythase,iNOS)双阳性细胞百分比均少于相同时间点Cur0组及PBS组(P＜0.05);Cur15组术后第3和7天及Cur30组术后第3、7、10和14天创面CD68与精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)双阳性细胞百分比均多于相同时间点Cur0组及PBS组(P＜0.05).结论 Cur能够明显促进创面愈合,其机制可能与Cur对M1与M2型巨噬细胞的极化调节有关;Cur浓度为15 mg/mL时创面愈合速率最快.     

正常与糖尿病小鼠脂肪间充质干细胞移植促进皮肤创伤愈合的比较

目的比较正常和糖尿病小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stem cells,ADSCs)移植促进皮肤创伤愈合疗效差别。方法无菌条件下获取正常小鼠及糖尿病小鼠的ADSCs,应用流式细胞术对3代细胞表面抗原CD34、CD45、CD90、CD105进行表型鉴定。应用WST法和Transwell迁移实验检测细胞增殖和迁移情况。应用ELISA对正常小鼠及糖尿病小鼠的ADSCs条件培养液中VEGF、HGF和IGF-1蛋白含量进行检测。建立小鼠皮肤创伤模型并随机分为3组,分别以皮内注射方式将3代正常小鼠或糖尿病小鼠来源ADSCs的细胞混悬液移植到小鼠创面四周,空白对照组注射生理盐水,于伤后14d观察创面愈合情况;Western blot检测伤后14d创面组织Bcl-2蛋白表达。结果小鼠ADSCs表达CD90和CD105,不表达CD34和CD45,与正常小鼠相比,糖尿病小鼠来源的ADSCs增殖和迁移能力下降,条件培养液中VEGF、HGF和IGF-1蛋白含量明显降低。糖尿病小鼠ADSCs移植组于创伤后第14d伤口愈合率为(79.6%±6.2%),均显著低于正常小鼠移植组14d的(97.1%±4.1%),两者均高于对照组14d的(64.6%±2.9%,0.05)。与正常小鼠移植组相比,糖尿病小鼠移植组伤后14d创面组织Bcl-2表达水平降低,高于对照组创面组织Bcl-2表达水平。结论正常小鼠来源ADSCs较糖尿病小鼠ADSCs更能促进小鼠皮肤创面愈合。     

肝素化羊脱细胞真皮基质对深Ⅱ度烧伤创面组织中血管内皮生长因子和层粘连蛋白的影响

目的研究肝素化羊脱细胞真皮基质(ADM)促进深Ⅱ度烧伤创面愈合的作用机制。 方法制作大鼠深Ⅱ度烧伤模型,随机分为碘伏纱布组、猪ADM组、羊ADM组和肝素化羊ADM组,每组40只。在伤后不同时间段,观察各组创面愈合率,同时在各个时间段处死大鼠8只,取创面组织标本做RT-qPCR和蛋白质印迹法检测各组创面组织中血管内皮生长因子(VEGF)和层粘连蛋白(LN)的mRNA与蛋白表达情况。对数据行单因素方差分析和t检验。 结果肝素化羊ADM组深Ⅱ度创面的愈合率优于碘伏纱布组。RT-qPCR检测发现,VEGF的mRNA在各组伤后3 d的创面组织中表达较对照组高,各组间的比较发现,伤后7 d,肝素化羊ADM组的VEGF的mRNA表达量明显高于碘伏纱布组(t＝80.83,P<0.05),羊ADM组和猪ADM组在伤后7 d也较碘伏纱布组的表达量高(t＝60.80、53.42,P值均小于0.05);蛋白质印迹法检测肝素化羊ADM组伤后3 d时VEGF蛋白表达量较多,随后便逐渐减少,伤后21 d时蛋白表达较少。伤后3 d,碘伏纱布组LN在创面的表达明显下降,在之后的治疗过程中,LN的表达逐渐恢复,伤后14 d的表达量明显高于伤后3 d(t＝19.5,P<0.001),伤后21、28 d的表达量与伤后14 d相差不明显。蛋白质印迹法检测发现肝素化羊ADM组LN在伤后3 d便开始出现表达量逐渐增多,伤后21 d时出现蛋白表达较多。 结论肝素化羊ADM能够保护创面及促进创面组织中VEGF和LN的表达,进而促进创面愈合。     

姜黄素抑制HGF诱导血管内皮细胞迁移和VEGF表达的体内外研究

目的:探索姜黄素抑制肝细胞生长因子(HGF)诱导血管生成的分子机制。方法:利用管腔形成实验、划痕实验、Western blot实验和动物实验观察姜黄素、c-Met抑制剂SU11274、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002和m TOR抑制剂rapamycin对HGF诱导的内皮细胞迁移、管腔形成能力、血管内皮生长因子(VEGF)表达、相关信号通路和瘤体内血管密度的影响。结果:姜黄素可显著抑制HGF诱导内皮细胞发生迁移、小管形成及VEGF的表达,同时抑制c-Met/AKT/m TOR/S6通路的磷酸化,并可减少瘤体内VEGF的表达和微血管密度。使用c-Met抑制剂SU11274、PI3K抑制剂LY294002或m TOR抑制剂rapamycin能得到和姜黄素相似的效应。结论:姜黄素抑制HGF诱导的血管生成可能是通过抑制c-Met/AKT/m TOR/S6信号通路活化实现的。     

Aloe vera: a systematic review of its clinical effectiveness.

BACKGROUND: The use of aloe vera is being promoted for a large variety of conditions. Often general practitioners seem to know less than their patients about its alleged benefits. AIM: To define the clinical effectiveness of aloe vera, a popular herbal remedy in the United Kingdom. METHOD: Four independent literature searches were conducted in MEDLINE, EMBASE, Biosis, and the Cochrane Library. Only controlled clinical trials (on any indication) were included. There were no restrictions on the language of publication. All trials were read by both authors and data were extracted in a standardized, pre-defined manner. RESULTS: Ten studies were located. They suggest that oral administration of aloe vera might be a useful adjunct for lowering blood glucose in diabetic patients as well as for reducing blood lipid levels in patients with hyperlipidaemia. Topical application of aloe vera is not an effective preventative for radiation-induced injuries. It might be effective for genital herpes and psoriasis. Whether it promotes wound healing is unclear. There are major caveats associated with all of these statements. CONCLUSION: Even though there are some promising results, clinical effectiveness of oral or topical aloe vera is not sufficiently defined at present.     

Expression of vascular endothelial growth factor in diffuse malignant pleural mesothelioma

Angiogenesis is an important part of normal and pathological processes, including tumour growth, metastasis, inflammation and wound healing. VEGF is the best known angiogenic factor, implicated in tumour-associated microvascular hyperpermeability and carcinogenesis. We investigated 103 malignant pleural mesotheliomas, analysing the expression of vascular endothelial growth factor using immunohistochemistry and insitu hybridization. The grade of microvessel density was assessed with the aid of anti-factor-VIII antibodies. An increased expression of VEGF was found in biphasic and epithelioid mesotheliomas, correlating in a statistically significant manner (P<0.042). Insitu hybridization confirmed the specificity of VEGF mRNA expression. There was a robust correlation between VEGF expression and increased microvessel density (P<0.001), and positive mesotheliomas had significantly higher microvessel densities than negative specimens. There was also a significant correlation between microvessel density and histological pattern. As growth pattern tended towards biphasic and sarcomatoid mesotheliomas the density of micovessels decreased (P<0.05).