急性坏死性胰腺炎肠黏膜NFκB介导的细胞因子过度表达及生长激素的作用

目的　本研究旨在动态观察急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠肠黏膜核因子κB(NFκB)及其介导的细胞因子 ,包括肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素 1(IL 1β)、诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)、细胞间黏附分子 (ICAM 1)和单核细胞趋化蛋白 (MCP 1)mRNA的变化 ,探讨其在ANP并发肠道衰竭发生中的作用 ;并观察生长激素 (GH)对NFκB活化及细胞因子表达的下调作用。方法　SD大鼠72只 ,随机分为三组 :假手术组 (SO) ;ANP组 ;ANP +GH组。GH治疗组术后皮下注射GH溶液(0 75U/kg体重 ) ,非治疗组则注射等容积生理盐水作对照。大鼠胆胰管内逆行注射 5 %牛磺胆酸钠溶液制备ANP模型。提取肠组织RNA ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)研究术后 6,12 ,2 4h肠黏膜TNFα、IL 1β、iNOS、ICAM 1、MCP 1mRNA表达。术后 3 ,6,12 ,2 4h免疫组化法检测肠黏膜NFκB的活化情况。结果　ANP组大鼠肠黏膜TNFα、IL 1β、iNOS、ICAM 1和MCP 1mRNA表达较SO组增高 ,其中TNFα和IL 1βmRNA表达于术后 6h达峰值 ,且较SO组差异显著 (TNFα :1 0 3± 0 17vs0 3 4± 0 0 7;IL 1β :0 91± 0 0 8vs 0 3 9± 0 0 6,P <0 0 5 ) ;iNOS和ICAM 1mRNA表达于术后 12h达峰值 ,较SO组差异显著 (iNOS :0 62± 0 10vs 0 0 4± 0 0 2 ;ICAM 1:1 48± 0 3 3v     

核因子-кB活化在急性胰腺炎肺损伤中的作用

我们通过大鼠急性胰腺炎模型观察核因子-кB(NF-кB)活化在急性坏死性胰腺炎(ANP)肺损伤中的作用和二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对NF-кB活性的调节及其对ANP肺损伤的作用。 一、材料和方法 1.动物分组与模型制备:将健康雄性Wistar大鼠40只,体重200～250 g。随机分成4组,每组10只,为对照组、ANP组、PDTC1组和PDTC2组。ANP模型制备参照一种大鼠急性胰腺炎模型制备方法的改良,对照组同样操作胆     

生长抑素减轻大鼠急性坏死性胰腺炎的肠屏障损害

目的　观察生长抑素对大鼠急性坏死性胰腺炎 (ANP)肠屏障损害和肠道内毒素移位的影响。方法　采用胰管逆行灌注法复制大鼠ANP模型 ,随机分为正常对照组 (n =6 )、假手术组(n =18)、ANP组 (n =2 0 )和生长抑素治疗组 (n =19)。观察胰腺病理、血淀粉酶、肿瘤坏死因子(TNFα)和白细胞介素 (IL) 1β、肠上皮细胞间紧密连接、肠通透性 (血浆D 乳酸 )、循环内毒素和病死率的变化。结果　生长抑素减轻了ANP早期胰腺病理改变〔8h组织学评分由 (4 2± 0 3)降至 (2 0±0 4) ,P <0 0 1〕 ;72h血淀粉酶由 (6 2 31± 44 6 1)U/L降至 (2 6 48± 1798)U/L ,P <0 0 5 ;72hTNFα由(4 7± 2 4)pg/ml降至 (2 3± 2 1)pg/ml,IL 1β由 (10 3± 40 )pg/ml降至 (5 0± 2 4)pg/ml,P均 <0 0 5 ;肠上皮细胞间紧密连接的破坏减轻 ;2 4h血浆D 乳酸由 (14 7± 4 9) μg/ml降至 (8 0± 4 2 ) μg/ml,P <0 0 1;2 4h血浆内毒素由 (0 6 11± 0 2 10 )EU/ml降至 (0 336± 0 110 )EU/ml,P <0 0 1;ANP大鼠 72h病死率由 5 9%降至 17% ,P <0 0 5。结论　生长抑素可减轻ANP大鼠的肠屏障损害 ,对肠道内毒素移位有抑制作用 ,可降低ANP大鼠的病死率。     

大鼠急性胰腺炎细胞凋亡异常及Fas/FasL系统表达的研究

我们用大鼠制作急性水肿性胰腺炎(AEP)和急性坏死性胰腺炎(ANP)模型,检测胰腺炎时细胞凋亡异常以及凋亡通路Fas、FasL蛋白表达情况,进一步探讨细胞凋亡在急性胰腺炎发生发展中的作用和地位。一、材料和方法1.实验动物及方法:健康雄性SD大鼠3 0只,随机分为3组:AEP组、ANP组和对照组,每组10只。模型制作:大鼠常规喂养,手术前禁食不禁饮12h。1%硫喷妥钠溶液4ml/kg体重腹腔内注射麻醉,无菌操作下切开大鼠腹部,显露十二指肠及胰胆管。用钝5号注射器针头穿过十二指肠对系膜缘经乳头逆行插入胰胆管,用血管夹分别夹闭近肝门处胆总管及针头插…     

急性坏死性胰腺炎时NO变化及三七总甙的治疗作用

目的:探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠体内一氧化氮(NO)在疾病发展过程中的变化规律,中药三七总甙对ANP的治疗作用及对NO的影响.方法:将120只SD大鼠随机分为假手术组、对照组及实验组,用5%牛磺胆酸钠制成ANP模型,实验组用三七总甙治疗,对照组不用药物治疗,分别于术后2 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h测定血清及胰腺的NO含量,并比较生存率.结果:实验组和对照组术后2 h NO水平显著增高,8 h后开始降低,24 h仍高于正常水平.但实验组明显低于对照组,实验组的生存率亦明显高于对照组.1周生存率假手术组、ANP组、ANP 中药组分别为100%、0%、70%.结论:ANP时NO有显著变化,三七总甙对其有抑制作用,对ANP有显著的治疗作用.     

核因子-κB活化在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

通过急性坏死性胰腺炎 (ANP)模型 ,探讨核因子 κB(NF κB )活化在大鼠ANP肺损伤发病机制中的作用。一、材料与方法1.实验动物分组与模型 :雄性Wistar大鼠 ,体重 2 0 0～ 2 5 0g ,随机分成 3组 ,对照组、ANP组、NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组 ,每组 30只。大鼠禁食 2 4h ,自由饮水。 2 5 %戊巴比妥钠腹腔注射麻醉 ,胰管末端逆行穿刺 ,近肝门及十二指肠乳头处夹闭胰管两端 ,1ml/kg体重胰管内缓慢匀速注入 5 %牛磺胆酸钠。对照组胰管内注入等量0 9%生理盐水。模型制备后 ,PDTC组立即尾静脉缓慢匀速注入PDTC 10mg/…     

白细胞介素4对重症急性胰腺炎大鼠补体调节因子的影响

本研究将白细胞介素4 (IL 4 )应用于重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型,观察其对膜辅助蛋白(MCP)、衰变加速因子(DAF)和膜反应性溶解物抑制物(CD5 9)表达的影响及疗效,为SAP的治疗提供新的思路。材料与方法1.SAP模型的建立及实验动物分组:健康Wistar大鼠6 1只,体重2 0 0～2 5 0 g ,雌雄不拘,采用胆胰管内逆行注射法制作SAP模型。随机分为A组(2 1只) ,制作SAP模型后不给予任何治疗;B组(2 0只) ,制作SAP模型前0 5h给予IL 4 (英国peprotech公司产品,货号为4 0 0 0 4 )腹腔内注射,剂量为8μg/只[1] ;C组(2 0只)制作SAP模型后0 5h给…     

急性胰腺炎大鼠肾素和血管紧张素Ⅱ水平的变化及卡托普利的治疗效果

我们复制大鼠急性胰腺炎模型 ,检测其血浆淀粉酶、肾素、血管紧张素II水平的变化 ,结合胰腺组织病理学观察 ,探讨肾素、血管紧张素Ⅱ在急性胰腺炎病变发展中的作用以及卡托普利对其的治疗效果 ,报道如下。材料与方法1.实验分组 :选择体重 30 0～ 35 0g的健康SD大鼠 (购自浙江省医学科学院实验动物中心 ) 6 3只 ,随机分成对照组、急性胰腺炎组和卡托普利干预组 ,每组 2 1只 ,分别进行以下处理。急性胰腺炎组 :采用十二指肠闭襻法复制大鼠急性胰腺炎模型[1] 。在诱发急性胰腺炎模型后即刻、10h、2 4h各取 7只动物 ,经腹主动脉抽血检测有关指…     

乌司他丁对急性坏死性胰腺炎发作时胰腺组织CD4、CD8的影响

目的:探讨乌司他丁对急性坏死性胰腺炎(ANP)发作时胰腺组织局部免疫功能的影响.方法:健康的SD大鼠50只随机分成4组:正常对照组(A组)20只;假手术组(B组)10只;ANP未处理组(C组)10只;ANP乌司他丁治疗组(D组)10只.ANP动物模型建立后2 h、6 h、8 h、10h分别检测AMS、NO、TNFα浓度变化及胰腺大体观察及CD4、CD8计数.结果:动物模型建立后2 h、6 h、8 h、10 h,D组AMS、NO、TNFα浓度明显低于C组(P<0.01).胰腺组织C组CD8计数明显高于D组,而CD4计数、CD4/CD8比值明显低于D组.结论:乌司他丁除了具有抑制胰酶和细胞因子的作用外,还可通过改善细胞免疫功能而达到治疗急性坏死性胰腺炎的作用.     

牛磺胆酸钠诱导的急性坏死性胰腺炎大鼠脏器功能障碍观察

目的 探讨急性坏死性胰腺炎大鼠脏器功能障碍及病程演进规律.方法 大鼠分为两组,急性坏死性胰腺炎(acute necrosis pancreatitis,ANP)组64只,对照组48只.采用经胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导ANP,对照组予胰管内注射生理盐水.分别于模型诱导后3、6、9、12、18、24 h(每一时间点各8只大鼠)处死,测定大鼠呼吸、体温、心率、血白细胞、肝肾功能及血气分析,另有16只ANP大鼠观察其24 h生存率.结果 ANP组24 h生存率为75%.ANP组在模型制备后3 h体温、心率、血白细胞明显高于对照组(P<0.05),6 h血清乳酸脱氢酶水平显著升高(2 613 vs 1822 IU/L.P<0.05),9 h血清肌酐水平显著升高(27.5vs 18.7 μmol/L,P<0.05),12 h动脉血PaO2显著降低(7.8vs 12.5 kPa,P<0.05),18 h之后各脏器处于衰竭期.对照组无脏器功能障碍表现.ANP组各时间点胰腺病理学评分显著高于对照组.结论 在5%牛磺胆酸钠诱导的ANP病程中,3 h后出现全身炎症反应综合征,6 h出现肝功能障碍,9 h后进入多脏器功能障碍期,18 h后进入多脏器衰竭期.     

外源性白介素-10对急性出血坏死性胰腺炎大鼠肝脏Bcl-2、Bax表达和肝细胞凋亡的影响

目的　探讨IL 10对急性坏死性胰腺炎 (ANP)肝损害大鼠肝细胞凋亡、Bcl 2、Bax表达的影响。方法　采用 5 %牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射建立大鼠ANP肝损害模型 ,随机分成 3组 :30只大鼠作为正常对照组 ,IL 10静脉注射治疗组 30只 ,急性坏死性胰腺炎组 30只 ,观察肝细胞凋亡、Bcl 2、Bax表达变化 ,肝、胰腺组织病理改变。结果　建立ANP模型后 6h、12h、2 4h ,Bcl 2表达下降 ,Bax表达增高 ,伴有肝细胞凋亡数增高 ,IL 10治疗后 ,IL 10组Bcl 2表达增强 ,Bax表达降低 ,伴有肝细胞凋亡减少 ,肝、胰腺组织损害也相应减轻。结论　肝细胞凋亡、Bcl 2、Bax表达参与ANP发病机制 ,在急性坏死性胰腺炎早期给予IL 10对减轻肝脏、胰腺病变程度 ,改善预后可能是有益的。     

胆胰和胃冲剂对大鼠重型急性胰腺炎合并肺损伤的治疗作用

目的 :探讨胆胰和胃冲剂对大鼠重型急性胰腺炎早期肺损伤的保护作用 ,并阐明其作用机理。 方法 :SD大鼠96只 ,复制重型急性胰腺炎模型 ,并设假手术组、重型急性胰腺炎组及胆胰和胃冲剂治疗组 ,分别于模型制作后 2h、6h、12h、2 4h检测各组动物血清肿瘤坏死因子 -α (TNF -α)、内皮素 (ET)、动脉血氧分压 (PO2 )的含量及肺脏病理情况。 结果 :重型急性胰腺炎各组的TNF -α、ET含量与假手术组各相同时段相比明显升高 (P <0 0 5 ) ,PO2 (除 2h组 )含量与假手术组各时段相比明显下降 (P <0 0 5 ) ;治疗 2h组与重型急性胰腺炎 2h组各指标相比无明显差异 (P >0 0 5 ) ;治疗 6、12、2 4h组TNF -α、ET含量与重型急性胰腺炎组各相同时段相比明显下降 ,PO2 明显升高 (P <0 0 5 )。 结论 :重型急性胰腺炎时可导致肺损伤 ,胆胰和胃冲剂能调控炎症介质的释放 ,降低肺毛细血管通透性而减轻肺损伤。     

急性胰腺炎大鼠的心功能改变及生长抑素的干预作用

本研究拟通过观察急性胰腺炎大鼠心功能的改变及生长抑素对其干预效果 ,进一步探讨“胰 心综合症”的发病机制 ,现报告如下。材料和方法1.动物及分组 :10～ 12周龄的雄性SD大鼠 ,体重 2 0 0～2 5 0g,购自第一军医大学动物中心。心导管及急性胰腺炎模型SD大鼠分为A组 :急性胰腺炎组 (10只 ) ;B组 :生长抑素干预组 (10只 )。2 .实验方法 :大鼠术前禁食 2 4h ,不禁水 ,经右侧颈总动脉插管 (PE5 0 )至左心室 (以出现典型波形为成功标志 ) ,记录左心室压力变化率最大值 (±dp/dtmax)和左心室收缩末压(LVESP)。急性胰腺炎模型A组 :用逆行胰…     

乌司他丁对急性胰腺炎大鼠肺局部致炎因子的影响

目的 探讨乌司他丁(UTI)对急性坏死性胰腺炎所诱发的肺局部炎症因子的影响及意义。方法 Wistar大鼠72只随机分为正常对照组(8只)，ANP模型组(32只)和UTI治疗组(32只)，建立大鼠ANP模型。在术后3、6、12和24h用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织匀浆中白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)—α两种细胞因子的含量，同时进行氧分压(PaO2)和肺湿重／干重比值的测定。结果 ANP组术后3h IL-1β和TNF-α即明显升高，并分别于术后6和12h达到峰值。UTI组炎症因子升高幅度明显低于ANP组(P＜0．05)，且于术后24h基本恢复正常。结论 UTI能明显减少ANP大鼠肺组织中IL-1β和TNF-α的含量，减轻由细胞炎症因子介导的急性肺损伤。     

急性胰腺炎外周循环和胰腺微循环血小板内皮细胞粘附分子-1的表达

目的　探讨急性胰腺炎 (AP)外周循环和胰腺微循环中血小板内皮细胞粘附分子 1(PECAM 1)表达的变化规律。方法　Wistar大鼠 48只 ,诱发AP动物模型 ,用流式细胞仪分析脾静脉和下腔静脉血中多形核白细胞 (PMN )PECAM 1的表达。结果　 ( 1)在急性水肿性胰腺炎(AEP)动物模型中 ,外周循环和胰腺微循环PMNPECAM 1的表达水平在AEP 2、4h组相近 ,自 4h开始 ,外周循环PMNPECAM 1的表达上调直至 8h ;胰腺微循环PMNPECAM 1的表达下调直至 8h ,在AEP 8h组 ,差异有显著性 ( P <0 .0 5 )。 ( 2 )在急性坏死性胰腺炎 (ANP)模型中 ,胰腺微循环PMNPECAM 1的表达下调 ;外周循环组PMNPECAM 1的表达未见明显变化 ,在ANP 4、6h组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　AEP胰腺微循环和外周循环PMNPECAM 1的表达呈逆向性 ,在胰腺微循环呈下调趋势 ,在外周循环呈上调趋势 ;ANP胰腺微循环PMNPECAM 1的表达呈加速性下调 ,该结果显示 ,在ANP早期 ,抑制PMNPECAM 1的过度表达可能有助于改善AP病理改变。     

急性坏死性胰腺炎大鼠水通道蛋白4与脑损伤关系探讨

目的 :探讨水通道蛋白4(AQP4)在急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)大鼠脑组织中的变化趋势,观察其与血脑屏障通透性和脑水肿的相关性。方法:84只成年雄性SD大鼠,随机分为ANP组(n=72)和假手术组(n=12)。制备ANP大鼠模型。假手术组于造模后24 h,ANP组于注射牛磺胆酸钠造模后3、6、9、12、18和24h 6个时间点为6个组,检测脑组织含水量、血脑屏障通透性变化,Western印迹法和半定量逆转录PCR检测脑组织AQP4蛋白及m RNA表达。结果 :脑组织AQP4蛋白及m RNA在损伤后6 h开始表达上调,9、12、18和24 h依次升高(P0.05)。AQP4蛋白及m RNA的表达与脑组织含水量均呈正相关(P0.05)。结论:ANP大鼠的血脑屏障功能降低及脑组织AQP4蛋白及m RNA表达水平增加,可能与脑水肿的形成和发展密切相关。     

粘附分子基因表达在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

目的　研究急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠肺组织细胞间粘附分子 1(ICAM 1)mRNA的表达情况及其与肺损伤的关系。方法　将 33只Wistar大鼠随机分为正常对照组和胰腺炎不同时间点 (1、4、12和 2 4h)各组 ,用逆行胰胆管注射方法制备ANP模型。采用逆转录聚合酶链反应法检测ANP大鼠肺组织中ICAM 1mRNA表达 ,同时观察肺组织髓过氧化物酶 (MPO)及病理改变。结果造模ANP 1h后大鼠肺组织中ICAM 1mRNA(0 82± 0 0 3)比正常对照组 (0 41± 0 0 4)的表达水平高 (P <0 0 5 ) ,并持续升高至 12h及 2 4h(分别为 1 17± 0 0 5及 1 11± 0 0 4) ,同时伴有肺组织病理损害 ,其严重程度与ICAM 1mRNA表达、MPO及肺MPO与ICAM 1mRNA表达均呈正相关 ,相关系数分别为0 85、0 85及 0 96 (P <0 0 5 )。结论　ANP大鼠早期肺组织中ICAM 1mRNA呈过度表达 ,肺损伤严重程度与ICAM 1mRNA表达的高低有关。肺组织中ICAM 1过度表达及中性粒细胞浸润是ANP肺损害发生的原因之一。     

生长激素对急性坏死性胰腺炎大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡的影响

目的观察生长激素 (GH)对急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠早期肠粘膜上皮细胞凋亡的调节作用。方法ANP模型大鼠分ANP组和ANP加GH治疗组 ,假手术组 (SO组 )作为对照。分别用DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪分析和dUTP缺口末端标记法研究肠粘膜细胞凋亡 ,免疫组织化学方法检测肠粘膜凋亡相关蛋白FasL及Bax表达。结果ANP大鼠各时点肠粘膜DNA电泳均可见典型的凋亡“梯形”条带 ,而GH治疗组仅于 3h出现“梯形”条带。术后 3h、6h、12h、2 4h肠粘膜脱落细胞凋亡比例分别为 :SO组为 (5 4± 4) %、(2 8± 6 ) %、(39± 5 ) %、(2 9± 11) % ,ANP组为 (5 0± 11) %、(80± 9) %、(4 8± 17) %、(5 0± 10 ) % ,术后 6h较SO组明显增高 (P <0 0 1) ;GH治疗组 ,(4 8± 11) %、(2 7± 15 ) %、(4 2± 7) %、(30± 10 ) % ,与SO组各时点比较差异无显著意义 ,且术后 6h较ANP组降低(P <0 0 1)。术后 3h、6h、12h、2 4h各时点肠粘膜细胞凋亡指数分别为 :SO组为 (6± 2 )、(8± 2 )、(11±1)、(5± 1) ,ANP组为 (18± 4)、(2 0± 3)、(15± 2 )、(14± 2 ) ,较SO组明显增高 (P <0 0 1) ;GH治疗组为(10± 2 )、(10± 2 )、(13± 2 )、(14± 4) ,其中术后 3h、6h较ANP组降低 (P <0 0 1)。FasL及Bax蛋白在假手术组呈弱表达 ,AN     

急性出血坏死性胰腺炎时中性粒细胞对肺实质细胞的损伤作用

本研究旨在观察急性出血坏死性胰腺炎 (AHNP)时肺实质细胞损伤的病理改变 ,及其与中性粒细胞 (PMN )肺脏聚集的关系。一、材料与方法1.动物分组及方法 :健康Wistar大鼠 (第三军医大学动物所提供 ) 10 0只 ,雌雄不拘 ,体重 (2 2 0± 2 0 ) g ,随机将动物分为 :假手术组 3 0只大鼠 ;AHNP组 40只大鼠 ;耗白组 3 0只大鼠 ;各组动物随机均分为 1、6、12、2 4h的 4个时相点 ,即时活杀取材 ,检测相关指标。AHNP组 :AHNP模型按文献 [1]介绍制备。耗白组 :在模型制作前 72h ,先自鼠尾静脉缓慢注入盐酸氮芥 (上海海普制药厂 ) 1.5mg/kg体重 (…     

鱼油对大鼠急性坏死性胰腺炎抗氧化酶的影响

目的探讨大鼠抗氧化酶系统与急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)的关系以及鱼油对ANP大鼠抗氧化酶系统的影响。方法48只SD大鼠被分为急性坏死性胰腺炎组(A组,n=16)、急性坏死性胰腺炎鱼油干预组(F组,n=16)和对照组(C组,n=16);A组、F组应用3.5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射法诱导ANP模型,F组尚通过皮下注射鱼油进行药物干预;在模型制备后30h、5d后分别处死各组的其中8只大鼠,观察各自胰腺病理变化并测定其血清SOD、GSH-Px活力和淀粉酶浓度。结果病理学检查提示鱼油组的胰腺炎症严重程度低于急性胰腺炎组;血清学检查提示急性坏死性胰腺炎组30h、5d后血清SOD、GSH-Px活力明显低于对照组(分别P<0.05及P<0.01),急性坏死性胰腺炎经鱼油治疗后血清中SOD、GSH-Px活力升高(P<0.05,P<0.01)。结论急性坏死性胰腺炎大鼠血清抗氧化酶含量明显降低;鱼油对急性坏死胰腺炎有治疗作用,其上调抗氧化物酶系统可能是其作用机制之一。