冰冻及石蜡切片对脊髓背角Ⅱ板层BDNF免疫组织化学反应的影响(摘要)

为比较不同制片法对免疫组织化学结果的影响 .分别用成年ＳＤ大鼠Ｌ5脊髓制作冰冻 (2 0 μｍ)和石蜡 (5μｍ)切片 .用兔抗ＢＤＮＦ多克隆抗体作ＡＢＣ免疫组织化学染色 .结果 :石蜡切片组背角ＩＩ板层可见大量ＢＤＮＦ阳性神经膨体 ,几乎未见阳性神经元 .而冰冻切片组除大量ＢＤＮＦ阳性神经膨体外 ,还可见一些阳性神经元 .结果表明 :不同制片法对免疫组织化学结果有影响 .表明冰冻切片者可能较石蜡切片者免疫反应敏感 ,即前者对抗原保存较好 .而后者可能是石蜡包埋过程中因加热使一些抗原损失 .故冰冻切片者所含ＢＤＮＦ可能较石蜡包埋切片…     

免疫组织化学EnvisionTM二步染色法的应用

由ＤＡＫＯ公司新近推出的免疫组织化学染色法ＥｎｖｉｓｉｏｎＴＭ二步染色法，又称ＬＤＰ染色法（ｌａｂｅｌｌｅｄｄｅｘｔｒａｎｐｏｌｙｍｅｒｍｅｔｈｏｄ），是一种优于常用的ＡＢＣ和ＬＳＡＢ法的新方法［１］。我们近期应用于临床病理诊断及科研，取得理想的效果，介绍如下。１　材料与方法１．１　材料　活检组织经中性福尔马林固定，石蜡包埋，切片厚４μｍ。ＴＯ型透明剂代替二甲苯作透明剂同过去报道［２，３］相同。冰冻切片标本用ＳＡＮＤＯＮ６２０Ｅ切片机切片，ＹＭＹ７８１Ａ型医用微波炉为浙江临安电子器材厂产品。１．…     

丙型肝炎病毒抗原的免疫组化检测及方法学探讨

采用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ区、Ｃ区、ＮＳ３区单克隆及多克隆抗体以及丙型肝炎患者血清及血清中ＩｇＧ抗体作为特异性第一抗体，分别应用ＬＳＡＢ、改良ＰＡＰ及直接酶标法对６５例丙型肝炎患者肝组织冰冻及石蜡包埋标本进行ＨＣＶ抗原检测，其中以ＮＳ３区抗体、ＬＳＡＢ法的检测结果较为理想（检出率２７．７％－２９．２％）。ＨＣＶ抗原呈肝细胞胞浆弥漫型、胞核型及胞浆类包涵体型表达。阳性肝细胞多呈单个散在分布。急性丙     

良恶性肿瘤P^53蛋白检测在快速诊断中的应用

目的 探讨常规石蜡切片的前期处理对Ｐ＾５３基因产物免疫组化结果的影响以及Ｐ＾５３蛋白在冰冻切片的快速在良恶性肿瘤鉴别诊断中的应用价值。方法 选用４９例良性病变组织和５１例恶性病变组织作Ｐ＾５３蛋白的检测，冰冻切片采用Ｅｎｖｉｓｉｏｎ法结合微波，常规石蜡切片选用Ｓ－Ｐ法。结果 两种方法表达率几乎一致，且恶性病变组织Ｐ＾５３蛋白的阳性率明显高于良性病变组织。结论 在冰冻切片中Ｐ＾５３基因表达的快速检测     

乳腺良恶性病变ras癌基因产物P^21及性激素受体检测的比较研究

用ｒａｓ癌基因产物Ｐ＾２１单克隆抗体对１０４例乳腺良恶性病变的石蜡包埋切片进行了ＡＢＣ法免疫组织化学染色，同时对其中６０例乳腺癌新鲜组织冰冻切片进行了荧光素标记法的ＥＲ和ＰＲ检测。结果提示Ｐ＾２１阳性表达与乳腺肿瘤的良恶性程度和患者性激素水平有关，并认为Ｐ＾２１免疫组化检测可反映乳腺肿瘤ｒａｓ癌基因活性，表达的强弱与性激素状态和预后可能有关。     

生物素-亲和素系统检测弓形虫病的研究

①目的建立简易、实用的生物素－亲和素系统（ＡＢＣ）的免疫酶染色试验（ＡＢＣ－ＩＥＳＴ）和斑点酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）的方法，以检测弓形虫病的微量抗体。②方法以全虫和可溶性虫体为抗原，在常规ＩＥＳＴ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的基础上，加用ＡＢＣ，观察其特异度和敏感度。③结果ＡＢＣ－ＩＥＳＴ和ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的特异度和常规法相同，但敏感度有显著提高。④结论ＡＢＣ法可应用于微量抗体及早期感染的检测。     

63例肺炎性假瘤临床病理分析

目的：进一步提高对炎性假瘤的认识及诊断水平，进一步探讨枰璀为的性质及组织发生。方法：对６３例原诊断肺炎性假瘤的ＨＥ切片逐个进行组织学和临床病理的回顾性复习研究，结合文献资料进行了组织学分型，命名，并对其中１０例肺硬化性血管瘤应用免疫组化ＬＳＡＢ法进行了６种抗体（ＥＭＡ、ＳＭＡ、ＫＰ－１，波形蛋白，ＣｇＡ，Ｓ－１００）的检测。结果：将肺炎性假瘤分为三型；硬化性血管瘤样型；浆细胞肉芽肿型；纤维组织细胞     

原发性肝细胞癌组织中P16蛋白表达的意义

本研究检测了 3 3例原发性肝细胞肝癌 (ＨＣＣ)中Ｐ16蛋白的分布与表达 ,并对Ｐ16蛋白与肝癌发生的关系进行了初步探讨。1　材料与方法1.1　标本　　 3 3例肝癌组织取自西南医院肝胆科 1996～ 1999年手术切除 ,并经病理证实为原发性肝细胞癌 ,2 0例距肝癌 2ｃｍ的相应癌旁肝组织作为对照。标本用 10 %福尔马林固定 ,常规石蜡包埋 ,连续切片 ,厚 4μｍ ,ＨＥ染色。1.2　免疫组化　　采用敏感的链霉菌素 生物素 (Ｓ Ｐ)法。兔抗Ｐ16为美国Ｓａｎｔａｃｒｕｚ产品 ,Ｓ Ｐ试剂盒购自福州迈新生物技术公司 ,ＤＡＢ显色试剂盒为武汉博士德生物工…     

抗P^185McAb的制备,鉴定及其在免疫组化检测的应用

本文以ＨＥＲ－２／ｎｅｕ癌基因表达产物为抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，采用常规淋巴细胞杂交瘤技术立一株稳定分泌抗Ｐ＾１８５ＭｃＡｂ的杂交瘤株５Ｅ１２，ＭｃＡｂ５Ｅ１２属ＩｇＧ亚类，与ＳＫＢＲ－３，Ｔ４７Ｄ乳癌细胞系呈阳性反应，与ＨＴ２９，ＥＣ１０９，ＤＡＣ－１，ＳＰ２／０，成纤维细胞及小鼠ＮＩＨ３Ｔ３等细胞系列呈阴性反应，３０例乳癌组织石蜡切片同时以自制抗Ｐ＾１８５ＭｃＡｂ５Ｅ１２及进口ＭｃＡｂＣ－ｅ     

生物素—亲和素系统检测弓形虫病的研究

目的 建立简易、实用的生物素－亲和素系统（ＡＢＣ）和免疫酶染色试验（ＢＣ－ＩＥＳＴ）和斑点酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）的方法。以检测弓形虫病的微量抗体。方法 以全虫和可溶性虫体为抗原，在常规ＩＥＳＴ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的基因上，加用ＡＢＣ，观察其特异度和敏感度。结果 ＡＢＣ－ＩＥＳＴ和ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的特异度和常规法相同，但敏感度有显著提高。结论ＡＢＣ法可应用于微量本及     

丙型肝炎病毒抗原的免疫组化检测及方法学探讨

采用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ区、Ｃ区、ＮＳ３区单克隆及多克隆抗体以及丙型肝炎患者血清及血清中ＩｇＧ抗体作为特异性第一抗体，分别应用ＬＳＡＤ、改良ＰＡＰ及直接酶标法对６５例丙型肝炎患者肝组织冰冻及石蜡包埋标本进行ＨＣＶ抗原检测，其中以ＮＳ３区抗体、ＬＳＡＢ法的检测结果较为理想（检出率２７．７％～２９．２％）。ＨＣＶ抗原呈肝细胞胞浆弥漫型、胞核型及胞浆类包涵体型表达。阳性肝细胞多呈单个散在分布。急性丙型肝炎比慢性丙型肝炎的ＨＣＶ抗原检出率更高且抗原颗粒的分布与病理损伤呈正相关，炎症区浸润的淋巴细胞中可见阳性颗粒；而慢性丙型肝炎肝组织中ＨＣＶ抗原与病理损伤无明显关联；支持急性丙型肝炎的肝细胞损伤由病毒的直接作用及免疫攻击协同所致，而慢性丙型肝炎则以免疫反应引起肝细胞持续损伤为主。胞浆弥漫型ＨＣＶ抗原表达是急性或活动性病变时的主要表达形式，而胞核型ＨＣＶ抗原表达多见于病变静止期。     

催化信号放大系统的制备及其在免疫组化和原位杂？…

目的：应用本实验室制备的催化信号放大（ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｓｉｇｎａｌ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ,ＣＳＡ）剂试,提高免疫组化（ＩＨＣ）和原位杂交（ＩＳＨ＿的敏感性。方法：ＣＡＳ法应用于ＩＨＣ检测５０例１０种不同类型的肿瘤切片中４０种不同的抗原和ＩＳＨ检测６种不同的ＲＮＡ成分,并与相应的常规方法进行敏感性比较。同时分析了存在的问题。结果：ＣＡＳ－ＩＨＣ法较传统的ＰＡＯＰ法、ＡＢＣ法和ＬＳＡＢ法敏感     

免疫组织化学在睾丸白血病诊断中的应用

睾丸活检组织常规ＨＥ染色，在诊断睾白时，约有１０％的标本难以确诊，利用一定的特异抗体标记ＨＥ片中可疑细胞有助于明确诊断。本文选用ＣＤ４５（ＬＣＡ），ＣＤ４５Ｒ０（ＵＣＨＬ１），ＣＤ３０（Ｌ２６），ＨＬＡ－ＤＲ，ＣＤ１５，ＣＤ３３等抗体，用ＡＢＣ法对１４例石蜡包埋的成人急白睾丸活检组织和１０例石蜡包埋的儿童睾白尸检组织行免疫组化染色，结果示１４例活睾检组织中６例ＨＥ染色肯定或可疑白血病侵润者至少有一     

用快速斑点免疫金渗滤法检测抗双链DNA抗体

目的为了提供一种简便、快速、可靠的检测抗双链ＤＮＡ（ｄｓ－ＤＮＡ）抗体的新方法。方法将生物素化的质粒ｄｓ－ＤＮＡ结合于包被了亲和素的硝酸纤维素（ＮＣ）膜上，以胶体金标记的葡萄球菌蛋白Ａ（ＳＰＡ）作为显示剂，建立了一种检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的快速斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ）。结果ＤＩＧＦＡ对未经选择的系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）和活动性ＳＬＥ的阳性率分别为６７．２％和９５．９％；对非ＳＬＥ的自身免疫病患者的阳性率仅为２．９％；正常人未见假阳性。与短膜虫免疫荧光法（ＣＬ．ＩＦＡ）、放射免疫法（Ｆａｒ）、酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫结合法（ＤＩＢＡ）四种方法比较，ＤＩＧＦＡ的敏感性优于ＣＬ．ＩＦＡ、ＥＬＩＳＡ和ＤＩＢＡ，特异性优于Ｆａｒ和ＥＬＩＳＡ。结论ＤＩＧＦＡ快速、简便，整个检测过程只需２分钟，不需特殊设备，是一种值得推广的检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的常规方法。     

用改良ABC法测定MA104细胞表面牛轮状病毒受体蛋白

免疫组化染色的ＡＢＣ法、ＢＡ法和ＰＡＰ法等均可用于石蜡切片和单细胞涂片 ［１］。ＡＢＣ法应用的Ａｖｉｄｉｎ(卵白素 )和Ｂｉｏｔｉｎ(生物素 )具有高度敏感度 ,我们选用ＡＢＣ法测定ＭＡ１０４细胞 (恒河猴肾细胞 )表面牛轮状病毒 (Ｂｏｖｉｎｅｒｏｔａｖｉｒｕｓ,ＲＢＶ)受体蛋白 ,目的是建立一种适于检测ＢＲＶ受体蛋白的简便、经济的可靠方法 ,以利于将科研成果推广和应用于临床实践。１材料和方法［２］１ １材料 :将１２ %胎牛血清 -１６４０(培养细胞营养液 )培养的ＭＡ１０４细胞接种于６孔培养板中的盖玻片上 (５ %ＣＯ２、…     

生物素-亲合素斑点免疫金渗滤试验检测血清中登革病毒4型抗原

目的建立用斑点免疫金渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）检测血请中登革病毒抗原的方法。方法一株ＤＶ４型特异性单克隆抗体点加于硝酸纤维膜上,以捕获血清中的ＤＶ４抗原。借助黄病毒组反应性单克隆抗体、生物素化革抗鼠ＩｇＧ抗体、金标ＳＰＡ和金标亲合素,建立用ＤＩＧＦＡ检测血清中登革病毒抗原的方法。结果常规ＤＩＧＦＡ检测的敏感性高于病毒分离,而生物素一亲合素ＤＩＧＦＡ（ＢＡ－ＤＩＧＦＡ）的敏感性又高于常规的ＤＩＧＦＡ。常规ＤＩＧＦＡ可检测到５、０ＴＣＩＤ５０的病毒抗原,ＢＡ－ＤＩＧＦＡ可检测到４３ＴＣＩＤ５０的病毒抗原。结论作者建立的ＢＡ－ＤＩＧＦＡ简便、快速、敏感、特异,可用于快速诊断登革病毒４型感染。     

中枢神经系统原发性非霍奇金淋巴瘤三例

中枢神经系统的原发性非霍奇金淋巴瘤较为少见 ,临床上常误诊为其他肿瘤 ,如胶质瘤等 ,本科确诊 3例 ,介绍如下。1　资料与方法自 1997年 2月至 1999年 5月在我院脑外科手术标本中有3例经ＣＴ确诊为原发性非霍奇金恶性淋巴瘤 ,复习其病史 ,标本均用 10 %中性福尔马林固定 ,常规石蜡包埋 ,切片 ,ＨＥ染色。按照Ｋｉｅｌ分类进行形态学分型。免疫组化染色用ＳＰ法 ,选用第一抗体有ＣＤ4 5(ＬＣＡ)、ＣＤ4 5ＲＯ(ＵＣＨＬ1)、ＣＤ2 0 (Ｌ2 6)、胶质纤维酸性蛋白 (ＧＦＡＰ)、上皮膜抗原 (ＥＭＡ)和神经原特异性烯醇酶ＮＳＥ(美国Ｍａｘｉｎ公司…     

Bcl-w蛋白在原发性胆囊癌中的表达及意义

目的 研究Ｂｃｌ－ｗ蛋白在原发性胆囊癌（ｐｒｉｍａｒｙ ｇａｌｌｂｌａｄｄｅｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＰＧＢＣ）中的表达及其意义。方法 以特异性羊抗免Ｂｃｌ－ｗ抗体,ＤＡＫＯ Ｅｎｖｉｓｉｏｎ＾ＴＭ系统（ＬＤＰ法）免疫组织化学方法检测石蜡我埋的ＰＧＢＣ标本中Ｂｃｌ－ｗ蛋白的表达。结果 ４７例ＰＧＢＣ中Ｂｃｌ－ｗ阳性２８例（６０％）;１５例胆囊腺肌瘤样增生（ＧＢＡＤＨ）Ｂｃｌ－ｗ阳性１４例（９３％）;     

神经系统疾病患者血清和脑脊液髓鞘碱性蛋白及其抗体的ELISA定量研究

用简易的髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）及其抗体（Ａｎｔｉ－ＭＢＰ）酶联免疫吸附定量测定（ＥＬＩＳＡ）法对６组共３３７例神经系统疾病患者进行检测，其中脊髓压迫症（ＣＭＰ）３６例，多发性硬化（ＭＳ）３３例，脑血管疾病（ＣＶＤ）３４例，中枢神经系统感染性疾病（ＩＤ）３１例，癫痫（ＥＰ）１６１例和其他神经系统疾病（ＯＮＤ）４２例。结果显示：ＣＭＰ、ＭＳ．ＣＶＤ、ＩＤ和ＥＰ５组血清ＭＢＰ均值明显高于ＯＮＤ组（Ｐ＜０．０１），其中又以急性外伤所致脊柱骨折伴截瘫为主（３３例）的ＣＭＰ患者血清ＭＢＰ值最高，与ＭＳ组比较Ｐ＜０．０５，与ＣＶＤ、ＩＤ和ＥＰ组比较Ｐ＜０．０１。ＣＶＤ患者ＣＳＦＭＢＰ均值也明显高于ＯＮＤ组（Ｐ＜０．０５）。本法检测６组血清和ＣＳＦ的Ａｎｔｉ－ＭＢＰ含量差异不显著（Ｐ＞０．０５）。     

长期大脑中动脉闭塞后远隔部位MAP—2和GFAP变化的实验研究

目的 探讨长期大脑中动脉闭塞（ＭＣＡＯ）后丘脑、黑质网状部（ＳＮｒ）ＭＡＰ－２及ＧＦＡＰ的变化。方法 ３５只ＳＤ大鼠分为正常且、伪手术后２周组和１个月组、ＭＣＡＯ后２周组、１个月组、３个月组和６个月组等７组,每组５只。Ｔａｍｕｒａ法制作动物模型。脑切片分别用离ＭＡＰ－２、ＧＦＡＰ抗体,ＡＢＣ法染色。观察丘脑的面积改变,ＳＮｒ的面积和长度和改变;ＳＮｒ神经细胞和胶质细胞数的变化。结果 丘脑面积逐渐缩