苓桂气化方干预射血分数保留心力衰竭心肌纤维化的物质基础及分子机制

目的 探讨苓桂气化方干预射血分数保留心力衰竭（HFpEF）心肌纤维化的物质基础及分子机制。方法 采用液相色谱-质谱联用法（LC-MS）定性分析苓桂气化方的活性成分。使用AutoDock软件进行苓桂气化方的活性成分与目标蛋白α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）、Ⅲ型胶原蛋白（ColⅢ）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）之间的分子对接。进行体内实验：40只4周龄自发性高血压大鼠（SHR）平均分为HFpEF组、诺欣妥组（0.018 g·kg^-1）、苓桂低剂量组（3.87 g·kg^-1）及苓桂高剂量组（7.74 g·kg^-1），给予高脂、高盐及高糖饮食16周和腹腔注射链脲霉素溶液8周建立HFpEF大鼠模型。10只WKY大鼠和10只SHR大鼠作为空白组。造模成功后，WKY、SHR及HFpEF组给予等剂量生理盐水，其他3组按照预先规定的干预措施，每天灌胃1次，持续6周。干预结束后，行超声心动图测量左心室（LV）前壁厚度（LVAWd）、LV后壁厚度（LVPWd）、LV舒张末内径（LVIDd）、LV射血分数（LVEF）、等容舒张时间（IVRT）、LV舒张早期二尖瓣流入峰值速度（E）及LV舒张早期二尖瓣环运动速度（e''），并计算E/e''；采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清心房钠尿肽（ANP）、B型利钠肽（BNP）及半乳糖凝集素-3（Gal-3）；病理切片进行马松染色以观察心肌纤维化，并计算胶原体积分数（CVF）及血管周围纤维化比率（PFR）；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测LV心肌α-SMA、ColⅠ、ColⅢ、MMP-9、TIMP-1的mRNA及蛋白表达。结果 LC-MS鉴定出苓桂气化方含有13种活性成分。分子对接提示13种化合物能稳固地与5个靶蛋白结合。体内实验证实：与空白组比较，HFpEF组的LVAWd、LVPWd、LVIDd、IVRT、E/e''、ANP、BNP、Gal-3、CVF及PFR显著升高，LV心肌α-SMA、ColⅠ、ColⅢ mRNA表达及蛋白表达显著上调，MMP-9/TIMP-1 mRNA及蛋白比例明显下调（P<0.05，P<0.01）。与HFpEF组比较，苓桂气化方可能呈剂量依赖性减少LVAWd、LVPWd、LVIDd、IVRT、E/e''、ANP、BNP、Gal-3、CVF及PFR，下调心肌α-SMA、ColⅠ、ColⅢ mRNA表达及α-SMA和ColⅠ蛋白表达，并上调MMP-9/TIMP-1的mRNA及蛋白表达（P<0.05，P<0.01）。结论 苓桂气化方含有多种活性成分，可能抑制HFpEF大鼠的心肌纤维化，进一步减轻LV肥厚、扩大及舒张功能障碍，是治疗HFpEF的有效中药复方。     

扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质TGF-β1、E-cadherin和α-SMA表达的影响

[目的]探讨扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质转化生长因子-β1（TGF-β1）、E-钙黏素（E-cadherin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。[方法]采用SD大鼠切除5/6肾脏+1.5%百特腹透液的方法复制大鼠腹膜纤维化模型。扶肾方干预6周后,检测血清学指标肌酐和尿素氮的含量;苏木精-伊红（HE）染色观察腹膜病理改变;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组腹膜间皮标志物E-cadherin和α-SMA的表达;酶联免疫吸附（ELISA）法检测TGF-β1含量的变化。[结果]扶肾方干预后,各组血清肌酐及尿素氮均呈现下降趋势,尤其以高剂量组最为明显（P<0.05）;扶肾方组腹膜间皮细胞变性、脱落,炎症细胞浸润以及血管新生现象明显减少;RT-PCR检测结果显示,模型组E-cadherin较正常组表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,TGF-β1、α-SMA较正常组表达上调,差异有统计学意义（P<0.01）,与模型组相比,扶肾方干预后的各组E-cadherin表达均有所上调,且以高剂量组上调最为明显（P<0.01）;TGF-β1、α-SMA中、高剂量组有统计学差异（P<0.05或P<0.01）,其他组较正常组有下调趋势,低剂量组结果无统计学意义,中、高剂量组结果有统计学差异（P<0.05）。[结论]扶肾方很可能通过抑制TGF-β1,调节E-cadherin和α-SMA表达,从而抑制腹膜间皮细胞间质转化的发生。     

益心泰对慢性心力衰竭大鼠线粒体分裂蛋白Fis1、Mff的影响

目的 研究益心泰对慢性心力衰竭大鼠线粒体分裂蛋白的干预作用及其机制。方法 60只SD大鼠随机抽取10只作为假手术组，剩余50只采用结扎左冠状动脉前降支法制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、益心泰低、中、高剂量组（1.4、2.8、5.6 g·kg^-1）、曲美他嗪组（10 mg·kg^-1），各给药组予相应剂量药物灌胃，模型组和假手术组给予等体积的生理盐水灌胃，连续给药28 d。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清氨基末端B型利钠肽（NT-pro BNP）、B型利钠肽（BNP）、腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）含量；彩色多普勒超声成像仪检测心功能指标；苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色法观察心脏病理形态学改变，使用Image J软件计算胶原容积分数（CVF）；透射电镜观察心肌细胞超微结构变化；原位末端标记法（TUNEL）染色检测心肌组织细胞凋亡率；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织线粒体外膜线粒体分裂蛋白1（Fis1）、线粒体分裂因子（Mff）表达。结果 与假手术组比较，模型组血清NT-pro BNP、BNP含量显著升高（P<0.01），ATP含量显著降低（P<0.01），左心室射血分数（LVEF）及左心室短轴缩短率（LVFS）下降（P<0.01），左室舒张末期内径（LVIDd）、左室收缩末期内径（LVIDs）升高（P<0.01），心肌细胞排列紊乱、炎性细胞浸润、胶原纤维增多、CVF上升（P<0.01），心肌及线粒体出现损伤，心肌细胞凋亡指数升高（P<0.01），心肌组织线粒体分裂蛋白Fis1、Mff表达上调（P<0.01）；与模型组比较，益心泰低、中、高剂量组及曲美他嗪组血清NT-pro BNP、BNP含量降低（P<0.05），ATP含量升高（P<0.05），益心泰低、中、高剂量组及曲美他嗪组LVEF、LVFS升高（P<0.01），LVIDd、LVIDs均降低（P<0.01），各剂量益心泰治疗组及曲美他嗪组心肌炎症损伤减轻、纤维化得到改善，CVF降低（P<0.01），各剂量益心泰治疗组及曲美他嗪组心肌线粒体结构得到改善，各剂量益心泰治疗组及曲美他嗪组心肌细胞凋亡指数下降（P<0.01）；益心泰中、高剂量组及曲美他嗪组心肌组织Fis1、Mff蛋白表达下调（P<0.05）。结论 益心泰可改善线粒体结构、减轻心肌细胞凋亡、提升心功能，其作用机制可能与抑制心肌组织线粒体分裂蛋白Fis1、Mff表达有关。     

温阳活血化痰方对蒽环类药物心脏损伤的保护机制

目的 研究温阳活血化痰方对阿霉素心脏损伤的保护作用。方法 将SD大鼠随机分为6组,空白组,模型组,温阳活血化痰方低、中、高剂量组,奥诺先组。除空白组外,其余大鼠每周给予2.5 mg·kg^-1阿霉素腹腔注射6周,累计剂量为15 mg·kg^-1。温阳活血化痰方低、中、高剂量组每日分别予4.86,9.72,19.44 g·kg^-1灌胃。空白组、模型组、奥诺先组每日予生理盐水10 mL·kg^-1灌胃。奥诺先组每周于阿霉素前30 min腹腔注射奥诺先25 mg·kg^-1,干预6周。观察大鼠一般状况并监测体质量;高分辨率小动物超声影像系统检测大鼠心功能;苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠心肌组织病理形态学改变;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠心肌组织中微管相关蛋白I轻链3（LC3）Ⅱ,自噬关键分子酵母Atg6同系物（Beclin-1）,p62蛋白的表达变化。结果 与空白组比较,模型组大鼠皮毛无光泽,进食量及活动量减少,部分便溏,精神不振,反应迟钝;体质量显著降低（P<0.01）;左心室射血分数（LVEF）和左心室缩短率（LVFS）均显著降低（P<0.01）;心肌细胞变性、水肿、断裂、溶解;心肌间质间隙扩大;心肌纤维染色不均;可见炎性细胞浸润;大鼠心肌组织中Beclin-1,LC3Ⅱ表达显著增加（P<0.01）,p62显著降低（P<0.01）。与模型组比较,温阳活血化痰方高、中剂量组体质量,LVEF,LVFS均显著增加（P<0.01）;心肌组织病理损伤不同程度减轻;LC3Ⅱ,Beclin-1蛋白表达下降（P<0.05,P<0.01）,p62表达增加（P<0.05,P<0.01）。结论 温阳活血化痰方能有效地防治阿霉素心脏损伤,其作用可能与抑制心肌细胞自噬机制相关,以高剂量效果更佳。     

“黄芪-丹参”对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化及低氧诱导因子-1α表达的影响

[目的] 通过单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型探讨“黄芪-丹参”对于肾间质纤维化和肾小管上皮细胞转分化（EMT）的作用以及缺氧诱导因子（HIF）-1α表达的影响。[方法] 将大鼠分为假手术组、模型组、芪参低剂量组、芪参中剂量组、芪参高剂量组、氯沙坦组。采用UUO模型并灌胃、取材。Masson染色法观察大鼠肾脏组织病理改变;免疫组化法检测大鼠肾脏组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达;PCR法检测大鼠肾脏组织1型胶原蛋白（Col1）、纤连蛋白（FN）mRNA表达;蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测大鼠肾脏组织HIF-1α蛋白表达。[结果] Masson染色：模型组与假手术组比较,胶原容积升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）;芪参中、高剂量与模型组比较出现下降,差异具有统计学意义（P＜0.01）;氯沙坦组与模型组比较下降,差异具有统计学意义（P＜0.001）。免疫组化：大鼠模型组与假手术组比较,α-SMA蛋白表达升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）;芪参中、高剂量以及氯沙坦组与模型组比较,α-SMA均下降,差异具有统计学意义（P＜0.01）。实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测：模型组对比假手术组,Col1、FN表达水平升高（P＜0.001）,药物组与模型组比较Col1、FN表达降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。Western Blot检测：模型组与假手术组比较,HIF-1α表达升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）;芪参中剂量较模型组有下降,差异具有统计学意义（P＜0.01）。[结论] “黄芪-丹参”药对可以通过抑制细胞外基质的生成以及减轻肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化两个方面延缓肾间质纤维化,其机制可能与抑制HIF-1α表达有关。     

榛花消肾安胶囊干预实验性糖尿病大鼠足细胞相关蛋白琢-actinin-4的研究

[目的] 通过实验观察实验性糖尿病（DM）大鼠的肾脏及足细胞相关蛋白α-actinin-4的表达,表明“榛花消肾安胶囊”治疗糖尿病肾病的有效性。[方法] 建立链脲佐菌素（STZ）诱导的实验性糖尿病大鼠模型分为DM模型组、对照组、中药组、西药组,中药组给予榛花消肾安胶囊,西药组给予厄贝沙坦片;检测空腹血糖、24 h尿微量白蛋白、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）,应用光学显微镜和透射电镜及免疫组化方法观察足细胞骨架蛋白α-actinin-4的表达;应用实时定量聚合酶链反应（PCR）技术检测α-actinin-4 m RNA表达。[结果] 中药干预之后中药高、中、低剂量组及西药对照组尿量较DM模型组明显减少（P<0.01）;中药各剂量组与西药对照组大鼠血糖均明显低于DM模型组（P<0.01）;中药各剂量组和西药对照组大鼠α-actinin-4及mRNA含量均低于DM模型组（P<0.01）。[结论] 榛花消肾安胶囊能够降低实验性DM大鼠血糖、Scr、BUN,减少尿微量白蛋白的排泄,而改善肾功能;能够抑制实验性DM大鼠早期肾脏体积增大,而抑制α-actinin-4蛋白表达及其m RNA的表达。     

黄芩素衍生物对大鼠急性肝性脑病模型的干预

[目的] 通过构建硫代乙酰胺（TAA）诱导的大鼠急性肝性脑病模型,研究黄芩素衍生物二磺酸基黄芩素（DB）对急性肝性脑病模型大鼠的保护作用。[方法] 选]择Wistar大鼠为研究对象,将其随机分为对照组、模型组、DB低、中、高剂量（6.25、25、100 mg/kg）组和阳性药（乳果糖,6 g/kg）组。各组大鼠灌胃给予相应剂量药物,对照组与模型组给予等量生理盐水。实验过程中通过Morris水迷宫实验检测大鼠行为学变化。DB干预7 d后处死大鼠,收集结肠内容物、肝脏及脑组织。通过快速血氨测定仪检测大鼠血氨含量;采用pH计法测定结肠内容物pH;通过全自动生化仪检测血清中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBiL）的浓度;通过苏木精-伊红（HE）染色观察肝组织病理变化;采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）水平,前额叶皮质中γ-氨基丁酸（GABA）和谷氨酸（Glu）含量;通过免疫印迹法检测前额叶皮质中磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）和磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）的蛋白表达。[结果] 与模型组相比,DB低、中、高剂量组可降低肝性脑病大鼠死亡率;提高大鼠学习记忆能力;改善大鼠肝组织病理学损伤和纤维化;DB中、高剂量组可显著降低血氨和结肠内容物pH（P<0.01）;显著降低大鼠血清ALT、AST、ALP、TBiL、TNF-α、IL-6水平（P<0.05或P<0.01）;显著降低前额叶皮质中GABA含量（P<0.01）,升高前额叶皮质中Glu的含量。DB中剂量组可显著抑制前额叶皮质中PI3K、p-AKT蛋白表达（P<0.01）。[结论] DB能够改善TAA诱导的急性肝性脑病大鼠的学习记忆能力和肝功能,降低体内氨水平,抑制炎症因子表达,调节前额叶皮质中神经递质（GABA和Glu）水平,其作用机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。     

龟甲胶对肾阴虚大鼠抗氧化活性和Bax、Bcl-2蛋白表达的影响＊

目的 探讨龟甲胶对肾阴虚大鼠抗氧化活性及Bax（Bcl-2同源二聚体X，Bcl2-Associated X）、Bcl-2（B淋巴细胞瘤-2，B-cell lymphoma-2）蛋白表达的作用机制。方法 60只SPF级雌性SD大鼠适应性喂养3天后，随机分为正常组，模型组、给药组（龟甲胶低剂量组、龟甲胶中剂量组、龟甲胶高剂量组）和阳性（六味地黄丸）组，给药21天。除正常组外，其余大鼠通过灌胃甲状腺素建立肾阴虚大鼠病理模型；于造模同时正常组及模型组每天灌胃等体积生理盐水。给药期间，观测大鼠脏器（肝脏、肾脏）指数、体质量、肛温、饮水量和进食量的变化；运用酶联免疫（ELISA）法检测血清超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、雌二醇（E2）、睾酮（T）水平；免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白表达变化；RT-qPCR（荧光定量聚合酶链式反应，Real-time quantitative PCR）法检测Bax、Bcl-2蛋白mRNA相对表达量，并进行组间比较。结果 龟甲胶各给药组均能明显缓解大鼠的阴虚状态，龟甲胶中、高剂量组能显著增加肾阴虚大鼠体质量及肝脏指数（P < 0.05，P < 0.01），龟甲胶高剂量组能升高大鼠肾脏指数（P < 0.01）；龟甲胶各剂量组均能降低肾阴虚大鼠肛温（P < 0.05，P < 0.01）。龟甲胶中、高剂量组大鼠血清中SOD、GSH-Px、E2水平升高（P < 0.05，P < 0.01），MDA含量降低（P < 0.05）；龟甲胶高剂量组大鼠血清中T含量显著升高（P < 0.05，P < 0.01）。龟甲胶低、高剂量组大鼠肾组织中Bax表达水平降低（P < 0.05）；龟甲胶高剂量组大鼠肾组织中Bcl-2表达水平显著升高（P < 0.01）。结论 龟甲胶具有传统滋阴功效，能增强阴虚状态下机体抗氧化能力，提高SOD活力、降低MDA含量；同时下调Bax以及上调Bcl-2等衰老相关因子的蛋白表达，从而延缓机体的衰老。     

明目地黄丸对白内障大鼠晶状体内SOD、MDA影响的实验研究

[目的] 研究明目地黄丸对白内障大鼠晶状体中超氧化物歧化酶(SOD) 活性和丙二醛(MDA)含量的影响。[方法] 建立大鼠白内障模型, 采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸(TBA)法对模型组、治疗组及对照组大鼠晶状体中SOD活性和MDA含量进行检测。[结果] 明目地黄丸高、中剂量组大鼠晶状体中MDA含量明显低于模型组, 高、中剂量组大鼠晶状体中SOD活性明显高于模型组, 差异具有显着性(P<0.05).[结论] 明目地黄丸能明显降低白内障大鼠晶状体中MDA含量, 且能明显升高白内障大鼠晶状体中SOD活性。     

丹参多酚酸盐通过抑制内质网应激减轻小肠缺血再灌注损伤的研究

[目的] 探讨丹参多酚酸盐（SAL）对大鼠小肠缺血再灌注（I/R）后肠组织的保护作用并探索其机制。[方法] 将144只大鼠按照随机数字表法平均分为假手术组（Sham组），I/R组，SAL低（10 mg/kg）、中（20 mg/kg）、高（40 mg/kg）剂量组和银杏叶提取物（EGB）组（3.15 mg/kg）；造模前30 min腹腔注射给药；采用夹闭肠系膜上动脉60 min的方法复制小肠I/R大鼠模型。再灌注120 min后，采用干湿比重法计算肠组织含水量；分别通过苏木精-伊红（HE）染色法、原位末端转移酶标记（TUNEL）法行肠组织病理学检查和细胞凋亡观察，计算损伤评分（Chiu’s氏评分）和凋亡指数（AI）；酶联免疫吸附（ELISA）法检测肠组织炎症因子[C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）]水平；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测内质网应激相关蛋白[糖调节蛋白78（GRP78）、c-Jun氨基端激酶（p-JNK）、增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）]、核因子-κB（NF-κB）、激活型半胱氨酸蛋白酶-3（Cleved Caspase-3）蛋白表达。[结果] 与I/R组比较，SAL中、高剂量组和EGB组大鼠肠组织含水量降低，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；肠系膜细胞脱落、固有层分离、炎性细胞浸润等病变和细胞凋亡状况明显改善，Chiu’s氏评分和AI降低，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；肠组织CRP、TNF-α、IL-1β水平降低，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；GRP78、p-JNK、CHOP、NF-κB、Cleved Caspase-3蛋白表达下调，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。与EGB组比较，SAL高剂量组大鼠Chiu’s氏评分、AI降低，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；肠组织CRP、TNF-α水平降低，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；GRP78、CHOP、NF-κB、Cleved Caspase-3蛋白表达下调差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。[结论] SAL对大鼠小肠I/R损伤具有保护作用；其机制可能与SAL抑制内质网应激通路，进而抑制炎症反应和细胞凋亡有关。     

涤痰散结活血软坚中药对非酒精性脂肪肝大鼠血清白介素-6、超氧化物歧化酶表达的影响

[目的]通过观察涤痰散结活血软坚中药对非酒精性脂肪肝大鼠血清白介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)表达的影响,探讨复方中药的作用机制。[方法]雄性SPF级Wistar大鼠60只,按体质量分层随机分为4组:正常对照组14只,自由饮水和普通饲料饮食。模型对照组18只,中药高剂量组14只,中药低剂量组14只,均予自由饮水和高脂饲料饮食,8周后随机处死模型对照组大鼠4只,确定脂肪肝模型成立。造模成功后,分别对中药低剂量组和高剂量组行中药灌胃,模型对照组、正常对照组以生理盐水灌胃,每周称大鼠体质量,治疗8周后处死,采用ELISA法检测血清IL-6、SOD。[结果]大鼠血清IL-6比较:高剂量组、低剂量组与模型对照组比较差异有显著性(P0.01),高剂量组与低剂量组比较,差异有显著性(P0.05)。大鼠血清SOD比较:高剂量组与模型对照组比较,差异有显著性(P0.01),低剂量组与模型对照组比较差异有显著性(P0.05),高剂量组与低剂量组比较无统计学意义(P0.05)。[结论]涤痰散结活血软坚中药可以显著减低血清IL-6浓度,此作用表现出剂量相关性趋势,可以明显升高血清SOD浓度,此作用没有体现出剂量相关性趋势。     

银杏二萜内酯葡胺注射液对离体心脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

[目的]研究银杏二萜内酯葡胺注射液(DGMI)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制。[方法]取120只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、DGMI低(1.5 mg/kg)、中(3 mg/kg)、高(6 mg/kg)剂量组和维拉帕米2.5 mg/kg组(阳性药物对照组),各20只;手术前2 h,腹腔注射给药,正常对照组和模型组同步给予生理盐水。采用Langendorff灌流系统建立离体心脏灌注模型,正常对照组持续灌注Krebs-Henseleit液(K-H液),模型组、DGMI各剂量组和维拉帕米组平衡灌注20 min后停灌30 min、再灌注60 min后行各指标检测。测定冠脉流出液心肌酶活性;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定心脏组织梗死面积,苏木精-伊红(HE)染色观察心脏组织病变;测定血流动力学指标;测定心肌组织中抗氧化酶活性以及丙二醛(MDA)含量;测定心肌组织ATPase活力。[结果]与模型组比较,DGMI中、高剂量组和维拉帕米2.5 mg/kg组大鼠血清心肌酶谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)活性均显著降低(P0.05或P0.01);心脏组织梗死面积显著降低(P0.01),心脏组织病变明显改善;明显改善血流动力学指标:心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室收缩压最大上升速率(+dP/dt_(max))、左室舒张压最大下降速率(-dP/dt_(min))均显著升高且左室舒张末压(LVEDP)显著降低(P0.05或P0.01);抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]活性显著升高且MDA含量显著降低(P0.05或P0.01);Na~+-ATPase、Ca~(2+)-ATPase酶活力显著升高(P0.05或P0.01)。[结论]DGMI可能通过改善血液流变学、降低氧化应激损伤、改善ATPase活力而对大鼠离体心脏表现出一定的保护作用。     

补心方对慢性心衰大鼠脑钠肽、肌钙蛋白I及高能磷酸盐的影响

研究补心方对心梗后心衰大鼠心肌脑钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)、肌钙蛋白Ⅰ(troponin I,TNI)与高能磷酸盐水平的影响.方法:大鼠60只,经结扎冠状动脉前降支中上1/3部,制作急性心肌梗死(AMI)模型,手术成功2周后,将存活动物随机分为补心方高、中、低剂量组及曲美他嗪组、模型组、假手术组共6组,均予灌胃给药或蒸馏水8周(曲美他嗪混悬液1.0 mg·kg-1·d-1 ig;补心方高、中、低剂量组依次为15.6,7.8,3.9g·kg-1·d-1).采用酶联免疫吸附法检测药物干预前后静脉血中BNP及TNI水平,高压液相色谱法检测高能磷酸盐含量.结果:对BNP与TNI的影响:治疗前,与假手术组相比,模型组及余各组大鼠BNP,TNI水平显著升高(P＜0.01);补心方干预后,与模型组比较,中药各组大鼠BNP,TNI含量显著下降(P＜0.01).对高能磷酸盐的影响:与假手术组比较,模型组大鼠ATP含量明显降低(P＜0.01).补心方干预后,高剂量组及低剂量组ATP含量均升高(P ＜0.05,P＜0.01).结论:补心方可显著降低心衰大鼠心肌BNP及TNI含量,减轻心肌损伤,改善能量代谢,从而改善慢性心衰大鼠症状,延缓慢性心衰的发展.     

熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠皮质和海马多药耐药相关蛋白1表达影响的研究

[目的]研究熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠皮质和海马多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达的影响。[方法]1)利用氯化锂-匹罗卡品制作癫痫大鼠模型。2)实验大鼠按随机数字表法随机分为正常组、模型组、熄风胶囊高剂量组(熄高组)、熄风胶囊中剂量组(熄中组)、熄风胶囊低剂量组(熄低组)、熄风胶囊大剂量+卡马西平(CBZ)组(联高组)、熄风胶囊大剂量+CBZ1/2剂量(联低组)和CBZ组。3)通过Western-blot方法检测癫痫大鼠海马和皮质MRP1的表达程度。[结果]实验结果显示治疗组与模型组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]熄风胶囊能有效抑制MRP1的过度表达。     

强心活力方对阿霉素引起心脏毒性的保护作用

目的:研究强心活力方对抗肿瘤药物阿霉素(ADR)化疗后心脏毒性作用的干预。方法:96只健康Wistar大鼠随机分为6组,正常组,ADR模型组(16 mg·kg-1),参附组(3 g·kg-1),强心活力方高、中、低剂量(3.6,1.8,0.9 g·kg-1)组。观察各组大鼠的精神状态、进食、粪便及皮毛情况。末次灌胃给药24 h后,检测大鼠血浆脑钠肽(BNP)水平、心电图、全心质量指数(HW/BW),苏木精-伊红(HE)染色,马松(Masson)染色和透射电镜(TEM)观察心肌形态学和超微结构改变。结果:与正常组大鼠比较,ADR模型组大鼠精神状态差,体质量减轻,心电图异常改变严重,血浆BNP及HW/BW升高明显(P0.05,P0.01),光镜及电镜观察发现心肌及超微结构损伤严重。而强心活力方对大鼠一般状态及体质量改善明显,并可降低血浆BNP含量和全心质量指数,扭转异常心电,抑制心肌纤维化、细胞水肿及超微结构异常改变,尤以强心活力方高剂量组作用明显,与ADR组比较有显著性差异(P0.05,P0.01)。结论:强心活力方对阿霉素所致的大鼠心脏毒性具有保护作用。     

消渴灵片对2型糖尿病大鼠JNK信号通路的影响

[目的]研究消渴灵片(XKL)对2型糖尿病大鼠JNK信号通路的影响。[方法]将2型糖尿病模型大鼠,按随机数字表法随机分为正常组、模型组、XKL低、中、高组[分别以2、4、8 g/kg XKL作为低、中、高剂量灌胃)、阳性对照组(以0.8 g/kg盐酸二甲双胍灌胃),测定各组大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)及胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)蛋白相对表达情况及JNK m RNA表达情况。[结果]XKL各剂量组均可有效降低模型大鼠FBG水平;XKL中高剂量组可降低MDA水平,提高FINS水平及SOD活性(P0.05);XKL中、高剂量p-JNK蛋白及JNK m RNA表达量显著下降(P0.05),PDX-1蛋白表达量显著升高(P0.05)。[结论]XKL的降糖作用,可能与抑制JNK信号通路的激活有关。     

安肠愈疡汤对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障的修复作用及机制研究

[目的] 观察中药安肠愈疡汤对溃疡性结肠炎（UC）大鼠咬合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白1（Claudin-1）基因、蛋白及白细胞介素-13（IL-13）/酪氨酸激酶1（JAK1）/信号转导与转录激活因子6（STAT6）信号通路的调控作用,探讨其修复肠黏膜屏障的机制。[方法] 将36只SD大鼠随机分为6组,分别为空白组、模型组、美沙拉嗪对照组、安肠愈疡汤低、中、高剂量组,经4.5%葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液造模及药液灌胃后处死大鼠,留取标本,苏木精-伊红（HE）染色检测各组大鼠结肠黏膜组织病理情况,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法、蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测结肠组织Occludin、Claudin-1基因、蛋白的表达,RT-PCR法检测IL-13、JAK1、STAT6基因的表达。[结果] 各用药组均明显降低组织病理学评分,差异均具有统计学意义（P<0.01）,镜下表现为结肠组织结构好转,炎细胞浸润减轻,均可上调Occludin、Claudin-1基因及蛋白表达（P<0.01）,差异均具有统计学意义;除低剂量组外,余用药组不同程度激活IL-13/JAK1/STAT6通路的基因表达（P<0.05或P<0.01）;以中药高剂量组和美沙拉嗪组的作用最为显著,差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。相关性分析发现,Occludin、Claudin-1表达水平与JAK1、STAT6表达水平呈负相关（r=-0.664,r=-0.654,r=-0.629,r=-0.637,P<0.05）,与IL-13表达水平呈正相关（r=0.888,r=0.983,P<0.05）,差异均具有统计学意义。[结论] 中药安肠愈疡汤能够明显促进UC大鼠肠黏膜修复,其作用机制可能与激活IL-13/JAK1/STAT6信号通路,上调Occludin和Claudin-1的表达水平有关。     

葱白提取物对非酒精性脂肪肝模型大鼠ATPase6、ATPase8表达的影响

[目的]观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠ATP合酶Fo亚基6(ATPase6)、ATP合酶Fo亚基8(ATPase8)表达的影响,并探讨其作用机制。[方法]将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葱白低剂量组、葱白中剂量组、葱白高剂量组,每组10只。采用高脂饮食喂养复制NAFLD模型大鼠,造模10周后,给予葱白提取物连续干预4周后,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)的含量;苏木精-伊红(HE)染色法观察肝脏组织结构变化;Real time PCR检测大鼠肝脏组织中ATPase6、ATPase8 mRNA的表达。[结果]与正常组比较,模型组出现明显肝脂肪变性,血清ALT、AST、TC、TG水平明显升高(P0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA的表达明显降低(P0.05);相较于模型组,葱白低、中、高剂量组肝脂肪变性均不同程度减轻;血清ALT、AST、TC、TG水平均不同程度降低(P0.05),ATPase6、ATPase8 m RNA表达不同程度升高(P0.05)。与葱白低剂量组比较,葱白中、高剂量组肝脂肪变性减轻明显,ALT、AST、TC、TG水平明显降低(P0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA水平明显升高(P0.05),中、高剂量葱白组之间差异无统计学意义。[结论]葱白提取物能够改善肝脂肪变性,可能与提高ATPase6、ATPase8的表达,增加肝线粒体ATP合成有关。     

补肾疏肝方联合五行音乐对卵巢储备功能减退大鼠的实验研究

[目的] 探讨补肾疏肝方联合五行音乐对卵巢储备功能减退大鼠的干预作用。[方法] 将54只有规律动情周期、雌性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、补佳乐组、中药低剂量联合音乐组、中药中剂量联合音乐组、中药高剂量联合音乐组6组,每组9只。实验开始后,每日测定6组大鼠动情周期,对照组正常进食水,其余5组采用慢性不可预见性应激法联合雷公藤多苷片灌胃建立卵巢储备功能减退模型;模型成功后,对照组、模型组正常进食水,补佳乐组给予西药补佳乐灌胃,中药低、中、高剂量联合音乐组3组分别给予补肾疏肝药物,灌胃同时每日听音乐45 min,连续21 d。于实验第42天,进行糖水实验、旷场实验,麻醉,腹主动脉取血,处死后取卵巢并称质量计算卵巢指数,采用酶联免疫吸附（ELISA）测定血中促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）,对卵巢组织进行苏木精-伊红（HE）染色,观察各级卵泡及颗粒细胞的情况。[结果] 实验结束后,模型组大鼠体质量增加缓慢,被毛稀松,饮食、饮水均减少。与模型组相比,其余各组上述表现有所改善。造模结束后,与空白组比较,其余5组大鼠动情次数减少、糖水偏嗜度下降、直立及垂直次数减少,E2升高,FSH及LH均下降,差异有统计学意义（P<0.05）,提示造模成功。治疗后与模型组比较,中药低、中、高剂量联合音乐组与补佳乐组E2均升高,FSH与LH均降低,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前后组内比较,治疗后补佳乐组、中药高剂量联合音乐组大鼠动情次数增加、糖水偏嗜度升高、水平及直立次数增多,差异有统计学意义（P<0.05）,其余各组大鼠差异无统计学意义（P>0.05）,但中药低剂量联合音乐组大鼠在治疗前后动情次数均增加、糖水偏嗜度均增高、水平及直立次数均增加,提示药物干预对促进模型的恢复有一定的作用。卵巢病理切片结果：与模型组比较,其余各组卵巢病理切片显示卵泡形态较好,颗粒细胞分级增多,尤其是补佳乐组和中药高剂量联合音乐组。[结论] 补肾疏肝方联合五行音乐对卵巢储备功能减退大鼠的恢复有一定的促进作用。     

何首乌、制何首乌对大鼠免疫球蛋白影响的实验研究

[目的]研究何首乌、制何首乌对SD大鼠免疫球蛋白的影响.[方法]将大鼠分为7组,每日灌胃主药30g/kg,连续给药90d,测定大鼠血清中免疫球蛋白G(IgG)、IgM、IgA的含量和胸腺质量.[结果]给药组与对照组比较,给药60d时大鼠血清中IgM含量,何首乌组、何首乌配大剂量茯苓组、何首乌配小剂量茯苓组、制首乌组、制何首乌配小剂量茯苓组均呈显著性升高(P<0.05).给药90 d时何首乌配大剂量茯苓组、何首乌配小剂量茯苓组、制何首乌配大剂量茯苓组呈显著性升高(P<0.05).lgG含量仅给药90 d的何首乌配小剂量茯苓组降低,以上各组均具有统计学意义.[结论]给药60d、90d何首乌、制何首乌各给药组可以显著增加大鼠血清中IgM的含量,有可能对肝脏的损伤造成有一定意义的影响.