荧光分光光度法检测豚鼠血中AME

已用多种方法证明AME(互隔交链孢霉A)具有致突变性和致癌性。而且许多研究结果表明,在食管癌高发区林县粮食中的优势污染菌之一——互隔交链孢霉的主要代谢物AME在食管癌病因中起一定作用,     

N-(4-羧基苯基)维甲酰胺对交链孢醇单甲醚致突变性的抑制(摘要)

互隔交链孢霉在食管癌高发区林县粮食中污染严重,交链孢醇单中醚(Alternariol Monomethyl Ether,AME)是互隔交链孢霉提取物分用纯化获得的一种有效成份,为该霉菌的主要代谢产物之一。实验证明在不加s-9时,AME诱发了6-巯基鸟嘌呤抗性(6-TG~r)的V_(79)细胞突受,具有直按致突变性,可能对食管癌发病起一定作用。     

交链孢酚单甲醚对细胞免疫的影响

交链孢酚单甲醚(Alternariol monomethylether,AME)是食管癌高发区林县粮食中分离的优势污染菌互隔交链孢霉(亦称链格孢菌)的毒素之一。多年的研究证实,该毒素具有致突变性和致癌性。为了进一步探讨其对免疫     

互隔交链孢霉提取物261—B_2—3对V_(79)细胞致突变作用的研究

交链孢属是一种广泛存在的植物病原,它侵污许多农作物。食管癌高发区粮食中互隔交链孢霉的污染率高于低发区,本文报告从林县粮食中分离的互隔交链孢霉乙醇、甲醇等溶剂的连续提取物261—B_2—3对V_(7(?))细胞6—巯基鸟嘌呤耐受(6—TG~r)种实变试验获阳性     

互隔交链孢霉提取物诱发细菌回复突变和重组效应的研究

从林县粮食中分离的20株互隔交链孢霉取其培养物的乙醚和乙醇提取物分别对E.Coli-ND160菌株的回复突变和对枯草杆菌H_(17)和M_(45)菌株的重组效应进行检测。其结果20株提取物(包括乙醚和乙醇提取物)中有17株诱发了细菌回复突变,19株中有16株提取物出现     

互隔交链孢霉诱发姐妹染色单体互换及染色体畸变的研究

本文介绍了10株互隔交链孢霉提取物诱发人淋巴细胞姐妹染色单体互换(SCE)及染色体畸变。结果发现,当用不同浓度提取物加入培养基时,有8株所诱发的SCE增高,与对照组比较差异极为显著(P<0.01)、在8株阳性株中,有6株在加入低量提取物时即诱发SCE频率增高显示统计学差异、同时,在阳性株中有两株提取物所诱发的染色体畸变频率增高,与对照组比较亦有极显著性差异(P<0.01)。由此可见,多数互隔交链孢霉菌株(8/10)所产生的代谢产物或毒素,都含有致突变物,不同菌株具有不同强度的致突作用。另外,对应用人淋巴细胞的SCE技术检测致突变物的优点进行了讨论。     

林县互隔交链孢霉素B的分离纯化研究

在测定了林县互隔交链孢霉素A的化学结构并对其致突变作用研究的基础上,我们进一步对互隔交链孢霉261株产生的毒素B组份进行了分离纯化。经TLC和硅胶柱层析纯化,获得了互隔交链孢霉素B,在二氯甲烷:甲醇:水(55:4:4)中TLC,它的Rf值为0.10。它在长波紫外光下显示黄色荧光的特性表明:它是一种荧光活性物质。经美国威斯康辛大学朱繁生教授初步鉴别,认为它与Altenuene相同,互隔交链孢霉素B对大肠杆菌ND—160具有致突变作用。     

霉烂水果优势真菌提取物致突变性研究

用细菌回复突变试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞（ＰＣＥ）微核试验，研究了经分离获得的引发梨霉烂的优势真菌互隔交链孢霉（Ａ．ａｌｔｅｒｎａｔａ）及引发桔子霉烂的优势真菌指状青霉（Ｐ．ｄｉｇｉｔａｔｕｍ）提取物的致突变性。结果表明：所测试的３株互隔交链孢霉（Ａ_１、Ａ_２、Ａ_３）提取物及４株指状青霉（Ｐ_１、Ｐ_２、Ｐ_３、Ｐ_４）提取物均可不同程度地诱发Ｅ．ｃｏｌｉＮＤ－１６０菌株回复突变。且其中Ａ_１、Ａ_２和Ｐ_２、Ｐ_４株提取物还可诱发小鼠骨髓ＰＣＥ微核率明显升高（Ｐ＜０．０１）。结果提示分别引发梨及桔子霉烂的互隔交链孢霉及指状青霉其代谢产物均具致突变性。     

应用DSI试验观察互隔交链孢霉提取物的诱变性

应用DSI试验对食管癌高发区河南林县粮食中分离的互隔交链孢霉的提取物进行诱变性研究。在五个数量级浓度中,互隔交链孢霉提取物均能明显地抑制DNA的合成。其抑制率为51.2%～62.8%,有明显的剂量相关性。与对照组相比有极显著差异(P<0.01)。追踪观察表明,经10~-3mg/ml浓度的提取物作用后,靶细胞DNA合成速度在与提取物脱离接触后的0.5h内呈进行性下降,以后才逐渐回升,在0.5h处形成一个DNA合成的谷值。故可认为,互隔交链孢霉提取物中含有损伤性DNA合成抑制剂,但损伤修复较快。结果表明,互隔交链孢霉提取物中含有诱变性物质。     

林县互隔交链孢霉素x_4结构鉴定

从林县粮食中分离的优势菌株互隔交链孢霉培养物中提取出七种代谢物,对其中成份之一x_4,经质谱、红外光谱、核磁共振光谱测定,同时与标准品及人工合成品作比较,证明x_4成份是交链孢酚(Alternariol AOH)。     

酶联免疫吸附试验检测食管癌高、低发区粮食中交链孢酚单甲醚的研究

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，分别对食管癌高发区林县和低发区商丘各６４份粮食（玉米３２份、小麦３２份）中交链孢酚单甲醚（ＡＭＥ）进行检测。结果：林县６４份粮食中检出ＡＭＥ２５份，阳性率为４０．３％；商丘６４份粮食中有１５份阳性，阳性率为２３．４％。两者比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。不论是小麦还是玉米，ＡＭＥ含量林县均高于商丘，这与粮食中互隔交链孢霉污染情况相符。结果提示：ＡＭＥ可能是人食管癌的病因之一。     

串珠镰刀菌的致突变效应

从食管癌高发地区林县和辉县粮食中心分离的31株串珠镰刀菌培养物的乙醚提取物,用Ames试验和大肠杆菌变异株检测其致突变性,31株提取物不加S9活化、对TA100、TA98、大肠杆菌CM891和ND—160菌株均未显示致突变作用。而加S9活化的28株提取物,有13株对TA100菌株显示致突变效应,其中3株提以物同时也对TA98菌株出现致突变作用。根据以上结果,提示对TA100菌株诱发置换突变型的诱变物可能是亚硝胺类化合物,但还可能有另一种对TA98菌株诱发移码突变型的诱变物存在。     

Etiological role of Alternaria alternata in human esophageal cancer.

In this paper, the mutagenicity and carcinogenicity of alternariol monomethyl ether (AME), alternariol (AOH), and their relevance to the etiology of human esophageal cancer were studied. These mycotoxins were produced by Alternaria alternata which was the main contaminating fungi isolated from the grain in Linxian County, an area with high incidence of esophageal cancer. This study demonstrated that: 1. AME and AOH might cause cell mutagenicity and transformation; 2. AME and AOH could combine with the DNA isolated from human fetal esophageal epithelium, activate the oncogens, c-H-ras and c-mys in it, and promote proliferation of human fetal esophageal epithelium in vitro; 3. squamous cell carcinoma of the fetal esophagus could be induced by AOH. According to the results of the studies of AME and AOH mentioned above, we consider that Alternaria alternata plays an important role in the etiology of human esophageal cancer.

     

交链孢酚对人胎儿食管和胃上皮脂质过氧化的影响

采用硫队巴比妥酸试验测定丙二醛含量反映脂质过氧化程度。用林县粮食中分离的互隔交链孢霉的代谢物交链孢酚(AOH,体外攻击人胎儿食管及胃上皮后观察对相应组织脂质过氧化的影响,AOH可使4人胎儿食管及胃上皮丙二醛含量明显升高(P?0.01),其程度与AOH剂量有关,并随时间延长,其程度增高,4～5h达高峰、食管对AOH反应较胃强烈,提示AOH可引发食管及胃上皮组织的脂质过氧化,并有一定的器官选择性。据结果可推测AOH可能是林县地区人食管癌病因之一。     

我国太行山高发区食管癌流行趋势及防治策略

目的：对我国太行山区食管癌发病率及死亡率进行趋势分析及预测,并探索加速降低食管发病率和死亡率的策略,方法：采用磁到,林县1988－1997年食管部发病,死亡资料,并运用有反馈的人工神经网络模型预测其发病率,死亡率趋势;以林县临淇镇为例,测算以内间技术为主的早诊早治对于食管癌发病,死亡的降低程度及其把握度。结果：近10年来太行山区食管癌的发病率和死亡率均呈下降趋势,但较为缓慢,预测2002年食管癌发病率男性为115．70／10万,女性为79．88／10万,食管癌死亡率男性为94．00／10万,女性为56．29／10万,食管部发病率,死亡率均仍 较高水平,如推行以内窥镜为主的早诊早治技术8年中,干预组的发病率对照组的1／3,把握度可达到88．3％,死亡率在第5年时为对照组的1／4,把握度可达到89．4％,结论：太行山区食管癌发病率,死亡率均仍属较高水平,提示应该继续深入地在该地区开展食管癌的综合防治工作,推行以内窥镜技术为主的早期诊断,早期治疗,从而可在5－8年内明显地降低食管癌死亡率和发生率,建议在该地区进行较大规模的食管癌二级预防。     

交链孢酚单甲醚对人胚肺2BS细胞DNA含量和细胞周期的影响

用显微分光光度计方法研究了食管癌高发区林县粮食中分离的优势污染菌互隔交链孢霉提取物交链孢酚单甲醚(AME)对人胚肺成纤维细胞(2BS株)的DNA含量和细胞周期的影响。结果发现:AME作用人胚肺2BS细胞两个倍增时间后,随着AME浓度的加大,G_1期细胞峰(2C细胞)降低,出现了较高的G_2+M期细胞峰(4C细胞),S期细胞增加,分裂指数降低.并出现了一些非整倍体的细胞,这些改变与对照组相比较有显著性差异。说明AME可以抑制人胚肺2BS细胞的周期,使S期细胞受阻,堆积和损伤,导致非整倍体细胞出现,这些将有可能成为细胞突变的遗传基础。从而为互隔交链孢霉与林县人食管癌的发生可能有一定关系的说法提供了实验佐证。     

河南省食管癌高低发区粮食中互隔交链孢霉毒素的化学检测

互隔交错孢霉毒素从随机采集于食管癌高低发区粮食样品中被提取后,用化学方法纯化,再经薄层层析(TLC)检测。结果显示:高低发区粮食中毒素的阳性率有显著差异,提示高发区互隔交链孢霉毒素在粮食中的广泛存在与食管癌的发生有密切关系。     

CARCINOGENESIS OF ESOPHAGEAL CANCER IN LINXIAN, CB:INA*

In high incidence areas of esophageal cancer the epithelial hyperplasia of upper digestive tract is also prevalent. Esophageal carcinoma usually develops through the mild and severe stages of hyperplasia, although reverse changes or recurring processes are frequently encounter- ed. It wa.s found that ca.rcinogenic nitro,samines (dimetnylnitrosamine, diethyilnitrosamine, me- thylbenzylnitros amine, N-I-methyl- acetonyl-N- 3-methylbutylnitrosamine, etcJ were formed in fungus-contaminated foods from Linxian, and the Fusarioum moniliforme inoculated cornbread induced forestomach carcinoma in rats following prolonged feeding experiment. Trace amourtts of B (a) P and PAH, and a nitr'oso compound, Rous- sin red methylester, were found in the home- made pickled vegetables (PV). Experiments showed the presence of a mutagen and/or car- cinogen and promoter in PV extracts. Carcinogenesis of esophageal epithelium appears to undergo multiple stages. The epithe- lial cells may be initiated first by chemical car- cinogens, nitrosamines and/or other funga.l me- tabolit.es in moudly foodstuffs and those formecl by reaction o.f nitrites and amines in vivo. The action of carcinogens, promoters and cocarcino- gens or some other factors in food results in epi- thelial hyperplasia, and severe cases may finally develop into an early squamous carcinoma and invading cancer of the esophagus. It is important, therefore, to detect and to treat the precancerous lesions in order to bring esophageal cancer under control in high-risk areas.     

交链孢酚单甲醚对鼠肝脂质过氧化及谷胱甘肽过氧化物酶的影响

用食管癌高发区林县的粮食中分离出的互隔交链孢霉的代谢物之一——交链孢酚单甲醚(AME)注入小鼠体内,观察对鼠肝中脂质过氧化及谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响。试验结果显示:AME可以导致丙二醇含量增加(P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶活性降低(P<0.01)。丙二醛含量的增高与AME剂量呈显著正相关(r=0.957,P<0.05),酶活性与丙二醛水平呈明显负相关(r=-0.973,P<0.05)。结果表明:AME可以引发脂质过氧化反应,谷胱甘肽过氧化物酶活性下降,本实验结果为该霉菌极可能是引起食管癌病因之一学说提供的积极佐证。     

交链孢酚单甲醚对人胚食管上皮的作用

用人胚食管上皮体外培养,经交链孢酚单甲醚(Alternariol monomethyl ether,AME)处理后,食管上皮底层细胞比对照组的层次明显增多,细胞排列紧密紊乱,细胞核浆比增加,核不规则,大小不等.浓染,可见核分裂相,且有乳头状向内增生。该变化与甲基硝基亚硝基胍(MNNG)和甲基苯基亚硝胺(MPNA)所诱发的人胚食管上皮癌前病变相类似。结果提示,AME与人的食管癌发生很可能有关。