应用酶工程技术生产1，6－二磷酸果糖

应用酶工程技术生产１，６－二磷酸果糖由王副教授主持的国家＂八五＂攻关课题１，６－二磷酸果糖（ＦＤＰ），是利用现代酶工程技术，从蔗糖生产ＦＤＰ。已完成了小试和中试。用该工艺生产ＦＤＰ具有工艺稳定，三废少，工业成本较低的特点，其固定化酶半衰期＞２０ｄ，固...     

应用酶工程技术生产L－丙氨酸

应用酶工程技术生产Ｌ－丙氨酸由吴梧酮教授主持的本研究项目，应用固定化细胞技术从富马酸生产Ｌ－丙氨酸，填补了我国双酶固定化应用的技术空白。通过小试、中试研究，筛选获得了Ｌ－天冬氨酸β－脱羧酶的高产菌株ＰｓｅｕｄｏｍａｎａｓｄａｃｕｎｈａｌＣＰＵ９００１...     

应用酶工程技术生产L－苯丙氨酸

应用酶工程技术生产Ｌ－苯丙氨酸由吴梧桐教授主持的国家科委＂八五＂攻关项目研究组应用基因工程技术构建高效表达芳香族氨基酸转氨酶的ＣＴＢ２工程菌，再经固定化，用于从Ｌ－苯丙酮酸转化生产Ｌ－苯丙氨酸工程菌发酵收率＞２．５％，菌体酶活力＞２０００ｕ／ｇ·ｈ－...     

铁轴草中Teucvidin的衍生物研究

酶工程制备１，６┐二磷酸果糖的中试研究王文日，王丁刚，吴梧酮，张宏兴．药物生物技术，１９９６，３（１）：４０本文报道了采用聚乙烯醇为介质包埋法制成固定化酵母细胞用以制备１，６－二磷酸果糖的中试研究。确定了以蔗糖为底物，通过固定化酶转化、阴离子交换、过...     

甲壳糖固定血管紧张素转换酶的制备及其性质

目的 将血管紧张素转换酶(ACE)固定化并测定其动力学性质。方法 以甲壳糖为载体，碳二亚胺(EDC)为交联剂，与分离纯化的ACE混合,使ACE固定化；并以马尿酰甘氯酰甘氨酸(HCG)为底物，分别测定了其游离酶和固定化酶的动力学性质。结果 固定化酶活力110u／g湿重，固定化率为22％，与游离酶比较，固定化酶稳定且具良好的耐热性，在50—80℃固定化酶较游离酶稳定。在pH7．1的底物缓冲体系中，37℃，游离酶Km=0.026mol／L；在间歇振摇下固定化酶的表现Km=0．040mol／L。游离酶最适pH为、8.0固定化酶最适pH为9．0。结论 用甲壳糖固定ACE方法简便可行，且固定后的甲壳糖性能稳定，有广阔的应用前景。     

胶囊固定化辣根过氧化物酶酶促体系引发丙烯酰胺聚合研究

研究了以海藻酸钠／壳聚糖／海藻酸钠为囊壁材料的胶囊固定化辣根过氧化物酶的制备及其影响因素，并将肢囊固定化辣根过氧化物酶／乙酰丙酮／H2O2酶促体系用于引发丙稀酰胺的聚合。结果表明，作为囊壁材料之一的壳聚糖的平均分子量以1万左右为宜，以柠檬三酸钠溶液为溶芯荆的溶芯时间控制在2～4min时，固定化率可达60％，相对于游离酶，其相对活力约为60％。胶囊固定化辣根过氧化物酶／乙酰丙酮／H2O2酶促体系可引发丙稀酰胺的聚合。     

酶固定化技术的研究进展

目前,在很多领域内都开始应用固定化酶,这是因为固定化酶有着很多的优点,特别是稳定性和可重复使用性等。固定化酶技术涉及到多个学科,经过多年的发展,已经日趋成熟,随着生物技术的不断发展,固定化酶的应用范围将会越来越广。本文主要介绍酶固定化技术的研究进展,希望可以提供一些有价值的参考意见。     

乙二胺羟丙基壳聚糖固定化天门冬酰胺酶的反应性质

研究了乙二胺羟丙基壳聚糖固定化L-天门冬酰胺酰反应动力学性能，分别考察了固定化酶耐胃蛋白酶性能，保存条件对固定化酶活力的影响，固定化酶的米氏常数Km以及固定化酶在缓冲液中间歇催化底物和连续催化底物的反应动力学性能，结果表明，在适当的间歇和连续反应条件下，固定化酶均具有良好的水解天门冬酰胺性能和效率。     

壳聚糖固定L-天门冬酰胺酶的研究

研究了以壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂，固定化Ｌ－天门冬酰胺酶的最适条件，并对固定化天门冬酰胺酶的理化性质进行了初步探讨。分别从不同固定化程序、缓冲液及保护剂等方面进行了固定化天门冬酰胺酶的条件优化；固定化酶的活力回收可达２０％左右。固定化酶的最适范围变宽，由游离酶的最适ｐＨ＝４～６变为ｐＨ＝６～１０。连续使用６次后仍可基本维持固定化酶的活力。固定化酶对胃蛋白酶的水解性也较游离酶大大提高。     

酶工程课程教学模式改革的探索与实践

酶工程作为一门应用科学,在生命科学领域占据着极其重要的地位,如何使生物技术专业的酶工程教学满足时代发展的要求,培养合格的从事酶工程研究及生产的技术人才,使酶的应用与研究开发得到进一步拓展,是酶工程教学的首要任务。本文旨在探讨新的教学模式,发展新的教学方法,为进一步培养高素质科技人才提供保证。     

光固化聚乙二醇水凝胶及其固定化柘草杆菌的研究

制备了一系列光固和乙二醇水凝胶固定化载体，研究了该水凝胶的结构、性能及其固定化枯草杆菌发酵产出α－淀粉酶的特性。结果表明，用水凝胶作载体制备的固定化枯草杆菌具有强度高、对温度和酸碱度变化的适应性强、贮存及重复使用性能好等优点。而且其产出α－淀粉酶的活力比相应的游离细胞高出２０％以上。固定化细胞半连续发酵１７批，历时３７天，产酶活力仅下降２０％。基本能达到实际应用的要求。     

光固化聚乙二醇水凝胶及其固定化枯草杆菌的研究

制备了一系列光固化聚乙二醇水凝胶固定化载体，研究了该水凝胶的结构、性能及其固定化枯草杆菌发酵产出α－淀粉酶的特性。结果表明，用水凝胶作载体制备的固定化枯草杆菌具有强度高、对温度和酸碱度变化的适应性强、贮存及重复使用性能好等优点。而且其产出α－淀粉酶的活力比相应的游离细胞高出２０％　以上。固定化细胞半连续发酵１７批，历时３７天，产酶活力仅下降２０％。基本能达到实际应用的要求。     

固定化脂肪酶的动力学研究

以壳聚糖为载体，用物理吸附固定化脂肪酶，对影响固定化过程的各种因素进行了考察，确定了最优条件，并比较了游离酶和固定化酶的最适温度、pH、酶的热稳定性以及表观Km。固定化酶水解的最适pH(pH7．0)稍低于游离酶(pH8．0)，最适温度为50℃(游离酶为40℃)。固定化酶在50℃的半衰期(0．96h)是游离酶(0．32h)的3倍，在4℃的冰箱中贮存3个月活力变化很小。     

聚乙二醇改性壳聚糖固定化L-天门冬酰胺酶反应性质研究

研究了聚乙二醇改性壳聚糖(PEG-CS)固定化L-天门冬酰胺酶催化缓冲液中天冬酰胺的反应过程,考察了底物浓度、给酶量、温度、搅拌速率等条件对固定化酶在缓冲液中间歇催化反应过程的影响;以及底物浓度、流量、温度、床层高度等因素对固定化酶在缓冲液中连续催化反应过程的影响。实验结果表明:在适当的反应条件下,聚乙二醇改性壳聚糖固定化L-天门冬酰胺酶可以很好地水解缓冲液中的天冬酰胺。     

聚乙二醇改性壳聚糖固定化L-天门冬酰胺酶的工艺研究

采用交联法制备了聚乙二醇改性壳聚糖(PEG-CS)载体，并将其用于固定化L-天门冬酰胺酶。研究了聚乙二醇浓度、交联剂戊二醛浓度、活化剂甲醛浓度、酶溶液浓度等因素对PEG-CS固定化L-天门冬酰胺酶活力的影响。结果表明：在适当的条件下，PEG-CS固定化L-天门冬酰胺酶的活力可达20～40U／g，并且PEG-CS固定化L-天门冬酰胺酶具有良好的生化性质。     

α－淀粉酶在壳聚糖上的固定化研究

报道从蟹壳中提取壳聚糖的方法。以壳聚糖为载体，戊二醛为双官能团交联剂，将α－淀粉酶固定化。结果表明固定化α－淀粉酶与原酶的最适ｐＨ值基本相同，且均有２个最适ｐＨ值，分别为５和６．５；固定化酶的表观米氏常数ｋｍ′＝０．３３×１０￣（－２）ｍｇ／ｍｌ，而原酶ｋｍ＝１×１０￣（－２）ｍｇ／ｍｌ；固定化酶的热稳定性明显高于原酶，固定化酶的最适温度为６５℃，原酶为５０℃。     

固定化酵母细胞的增殖与应用

固定化酵母细胞的增殖与应用张宏兴，吴梧桐中国生化药物杂志，１９９４，１５（１）：６２～６５本文综述了几种常见方法固定化的酵母细胞在固定化颗粒内部的增殖和代谢的变化情况，讨论了酵母细胞固定化在应用过程中的意义及不利因素。固定化酵母细胞的增殖与应用...     

壳聚糖固定胰蛋白酶的研究

目的：从蟹壳中提取壳聚糖，将胰蛋白酶固定在从蟹壳中提取的壳聚糖上。方法：以自制壳聚糖为载体，戊二醛为双官能团交联剂，将胰蛋白酶固定化。结果：０．２ｇ壳聚糖（干）与４％戊二醛交联后再与５．０ｍｇ胰蛋白酶固定结合，效果较好。固定化酶的表现米氏常数Ｋ′ｍ＝１．５ｍｍｏｌ／Ｌ，而天然酶Ｋｍ＝７．６ｍｍｏｌ／Ｌ；固定化酶最适温度为８０℃，比天然酶提高了２０℃；固定化酶最适ｐＨ为７．０．而天然酶为８．０。该载体来源广，易提取，固定化酶的贮存稳定性很好，２个多月重复使用，酶活力未见明显下降     

应用固定化细胞酶工程技术生产L-天冬氨酸技术成果通过鉴定

中国药科大学生物化学教研室研究应用固定化细胞酶工程技术生产L-天冬氨酸获得成功。该工艺的小试技术在中国药科大学制药厂进行了中试放大,并制定了适合连续化工业生产的工艺路线及工艺操作规程。目前已形成了年产100吨L-天冬氨酸的规模。1992年3月20日国家医药管     

甲醛活化壳聚糖制备固定化l—天冬酰胺酶

研究了以甲醛活化的壳聚糖为载体固定化ｌ－天冬酰胺酶，其活力回收可达到１１３％，比用以戊二醛为交联剂进行固定化的活力回收要高出五倍多。分别从缓冲液的ｐＨ值及甲醛用量等方面进行了固定化ｌ－天冬酰胺酶的条件优化，并且对固定化酶的性质作了探讨。