头花蓼水提取物对CYP450酶诱导和抑制作用研究

目的考察头花蓼水提取物对人肝微粒体CYP450 5种亚型酶的体外抑制作用和对小鼠的体内诱导作用,从而预测发生药物相互作用的可能性,为临床合理用药提供科学依据。方法以探针底物代谢物生成法,考察头花蓼水提取物体外对人肝微粒体主要I相代谢酶CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4活性的影响;采用微粒体体外孵育法,考察小鼠经高、低剂量(1.16、0.58 g·kg-1)头花蓼水提取物分别连续灌胃7 d和14 d后,小鼠肝微粒体中主要I相代谢酶活性的变化,以评价头花蓼水提取物对小鼠肝微粒体主要CYP450酶是否有诱导作用。结果头花蓼水提取物对人肝微粒体中主要的CYP450 I相代谢酶的抑制作用均不强,IC50值在849.6~2 287 mg·L-1;与空白对照组比较,1.16 g·kg-17 d组小鼠CYP2C9和CYP3A4活性分别增加了49.9%和21.1%(P<0.01和P<0.05),0.58 g·kg-114 d组小鼠CYP2C9和CYP3A4活性分别增加了27.6%和15.5%(P<0.01和P<0.05),1.16 g·kg-114 d组小鼠CYP2C9和CYP3A4活性分别增加了67.5%和32.1%(P<0.01),头花蓼提取物对其余CYP亚型活性未见明显影响。结论在临床剂量下,头花蓼水提取物对人肝微粒体CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4无明显抑制作用,对小鼠肝微粒体CYP2C9和CYP3A4显示诱导作用。     

四氯化碳体外与大鼠肝微粒体膜作用的研究

向大鼠肝微粒体膜悬液中加入CCl_4(0.05～1μl/ml),可致膜脂过氧化和膜脂流动性降低。二巯基苏糖醇(DTT)和普鲁卡因能拮抗上述效应。CCl_4与微粒体膜作用后,ANS荧光强度降低并出现红移。结果提示,CCl_4诱发的膜脂过氧化可致微粒体膜的物理状态发生改变。     

银杏叶醇提取物对异烟肼和利福平肝毒性保护作用的实验研究

目的 :观察银杏叶醇提取物对异烟肼和利福平肝毒性的保护作用及其机制探讨。方法 :分别测定肝损害组和银杏叶醇提取物大、小剂量组小鼠的血清谷丙转胺酶 (SGPT)、肝指数、肝匀浆丙二醛 (MDA)含量、肝微粒体P4 50和线粒体Ca2 ATP酶活性 ,以及肝病理检查 ,并与对照组比较。结果 :银杏叶醇提取物大、小剂量均可对抗异烟肼和利福平引起的MDA、SGPT、肝微粒体P4 50 的增高 (P <0 .0 5) ,以及对抗其引起的形态学改变 ;银杏叶醇提取物大剂量对抗其线粒体Ca2 ATP酶活性的降低。结论 :银杏叶醇提取物可对抗异烟肼和利福平所致肝毒性。     

银杏叶醇提取物对异烟肼和利福平肝毒性保护作用的实验研究

目的:观察银杏叶醇提取物对异烟肼和利福平肝毒性的保护作用及其机制探讨。方法:分别测定肝损害组和银杏叶醇提取物大、小剂量组小鼠的血清谷丙转胺酶(SGPT)、肝指数、肝匀浆丙二醛(MDA)含量、肝微粒体P₄₅₀和线粒体Ca²⁺ ATP酶活性,以及肝病理检查,并与对照组比较。结果:银杏叶醇提取物大、小剂量均可对抗异烟肼和利福平引起的MDA、SGPT、肝微粒体P₄₅₀ 的增高(P<0.05) ,以及对抗其引起的形态学改变;银杏叶醇提取物大剂量对抗其线粒体Ca²⁺ ATP酶活性的降低。结论:银杏叶醇提取物可对抗异烟肼和利福平所致肝毒性。     

青蒿素对大鼠肝脏微粒体过氧化损伤的影响

观察青蒿素体外对细胞微粒体过氧化损伤的影响。方法：采用提取大鼠肝脏微粒体方法,建立体外ＮＡＤＰＨ／ＶｉｔＣ诱发大鼠肝脏微粒体脂质过氧化损伤模型,观察青蒿素对减少肝脏微粒体脂质过氧化物的形成作用。结果;青蒿素能明显减少肝微粒体脂质过氧化物的形成（Ｐ＜０．０５～０．０１）。结论：青蒿素能抵抗细胞微粒体的过氧化损伤,此为其治疗机理之一。     

绞股蓝总皂甙对离体大鼠肝脏脂质过氧化及膜流动性损伤的保护作用

在体外实验中绞股篮总皂甙(GP)能抑制大鼠肝微粒体自发的和由Fe_-~(2+)-半胱氨酸、Vit C-NADPH和CCl_4诱发的脂质过氧化,其作用强于人参总皂甙。Fe_-~(2+)-半胱氨酸导致大鼠肝微粒体、线粒体膜流动性降低,同时加入GP可防止膜流动性的下降。     

7种中药水提物体外抗氧化活性研究

目的 探讨7种中药水提物的抗氧化作用及其剂量反应关系. 方法 采用维生素C（Vit C）/亚铁离子（Fe2+）诱导小鼠肝微粒体脂质过氧化, 通过测定产生的丙二醛（MDA）含量, 观察枸杞子、淫羊藿、垂盆草、黄芩、虎杖、连翘和葛根水提物对肝微粒体过氧化损伤的保护作用. 结果 七种中药的水提取物都有不同程度的抗氧化作用, 其中枸杞子、淫羊藿以及垂盆草的抗氧化作用最为明显, 黄芩、虎杖水提物的抗氧化作用次之, 连翘和葛根的抗氧化作用相对较弱.枸杞子、黄芩水提物抗氧化活性还呈现一定的剂量依赖关系.结论 该 结果 可为抗氧化功能食品的开发提供理论依据.     

葛根素及葛根提取物在大鼠肝微粒体内代谢动力学研究

为了研究葛根素单体和葛根提取物中的葛根素在大鼠肝微粒体中的代谢是否存在差异,建立微粒体孵育体系。采用高效液相色谱法测定葛根素在肝微粒体代谢系统中的含量,并应用GraphPad Prism 5.0软件分析数据,计算酶促反应动力学参数。在体外代谢系统中,葛根素单体的酶促反应动力学参数K_m为(0.93±0.17)μmol/L,V_(max)为(93.59±2.82) nmol/min·mg,CL_(int)(V_(max)/K_m)为(100.6±1.07) mL/min·mg;葛根提取物中葛根素的相应的动力学参数分别为(1.02±0.09)μmol/L,(22.48±1.53) nmol/min·mg和(22.04±1.72) mL/min·mg。葛根素单体和葛根提取物中的葛根素在大鼠肝微粒体的代谢存在明显的差异,葛根素单体的代谢速度快于葛根提取物中的葛根素的代谢速度。结果提示中药提取物中的其它成分可影响有效成分单体的代谢过程。     

云南昭通产苦丁茶配糖体抗脂质过氧化研究

目的　观察云南昭通产苦丁茶总苷及 3种配糖体即阿克苷、紫茎女贞苷A和B对脂质过氧化的影响。方法　用Fe2 + 半胱氨酸反应系统产生超氧自由基激发大鼠肝微粒体脂质过氧化 ;Cu2 + 诱导人血浆低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰以及静脉注射四氧嘧啶引发小鼠自由基损伤。结果　 3种配糖体显著降低微粒体脂质过氧化产物MDA水平、延长LDL氧化修饰的延迟时间 (lagtime) ,总苷能显著降低小鼠血清及肝脏MDA升高水平。结论　苦丁茶总苷及 3种配糖体具有抗脂质过氧化作用。     

从非洲药用植物Thonningia sanguinea中分得新的抗氧化剂thonningianin A和B

在加纳蛇菰科植物T.sanguinea Vahl用于预防支气管哮喘。该植物提取物对DPPH显示自由基清除活性,且能抑制H_2O_2诱导的肝微粒体中的脂质过氧化,抑制     

胡柚提取物抑制硝苯地平肝微粒体酶代谢的研究

目的:探讨胡柚不同部位提取物对体外小鼠肝微粒体酶代谢活性的抑制效应。方法:在小鼠肝微粒体孵育体系中加入硝苯地平和胡柚不同部位的提取物后,应用HPLC法测定体系中硝苯地平的剩余含量。结果:硝苯地平的标准曲线方程为Y=2.136×10⁴X+2.334×10⁴（r=0.999 3）,线性范围:0.15～240 mg·L^-1。含有相同浓度硝苯地平及3种胡柚提取物的小鼠肝微粒体孵育体系中,柚汁、果肉、柚皮中剩余硝苯地平浓度分别为8.802,7.497,4.227mg·L^-1。结论:胡柚不同部位提取物对小鼠肝微粒体酶活性有抑制作用,尤其是柚汁和果肉部分活性较强。     

阿魏酸钠部分减轻氢化泼尼松引起的小鼠肝脏毒性

氢化泼尼松(Pred)20mg·kg^-1可明显增高小鼠sGPT与sGST水平,增加肝匀浆MDA含量及肝微粒体与线粒体膜流动性。表明Pred致sGPT及sGST水平增高与肝脂质过氧化作用增强及膜流动性改变有关。经1g阿魏酸钠(SF)100mg·kg^-1使sGPT与sGST水平降低,肝脏MDA含量减少,但sGPT与MDA仍高于正常对照组水平。肝微粒体膜流动性恢复,线粒体膜流动性进一步增高。电镜观察亦见线粒体仍有损害,提示SF不能完全对抗Pred所致肝损害。     

银杏叶醇提取物对异烟肼和利福平肝毒性保护作用的实验 …

目的：观察银杏叶醇提取物对异烟肼和利福平肝毒性的保护作用及其机制探讨。方法：分别测定肝损害组和银杏叶醇提取物大、小剂量组小鼠的血清谷丙转胺酶（ＳＧＰＴ）、肝指数、肝均浆丙二醛（ＭＤＡ）含量、肝微粒体Ｐ４５０和线粒体Ｃａ＾２＋ ＡＴＰ酶活性,以及肝病理检查,并与对照组比较。结果：银杏叶醇提取物大、小剂量均可对抗异烟肼和利福平引起的ＭＤＡ、ＳＧＰＴ、肝微粒体Ｐ４５０的增高（Ｐ〈０．０５）,以及对抗其引     

毛喉鞘蕊花提取物福司可林的体外代谢研究

研究福司可林在血浆和肝微粒体中的代谢性质,为临床合理用药提供参考。采用HPLC-MS/MS的检测方法,通过测定福司可林的浓度,考察福司可林在大鼠、比格犬、猕猴和人4个不同种属肝微粒体中的代谢稳定性,鉴定福司可林在人肝微粒体中代谢的主要参与酶以及对人肝微粒体中细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)各亚型酶的抑制作用。结果表明,福司可林在大鼠、比格犬、猕猴和人4个种属血浆中均不代谢;在4个种属肝微粒体中均有不同程度的代谢,其t1/2分别为(52.0±15.0)、(51.2±5.9)、(6.0±0.2)、(11.9±1.8)min;CLint分别为(75.6±18.7)、(60.9±6.8)、(513.8±14.3)、(176.2±25.6)mL.min 1.kg 1;CL分别为(34.8±4.5)、(23.3±1.0)、(40.3±0.5)、(17.9±0.3)mL.min 1.kg 1。在人肝微粒体中福司可林主要被CYP3A4代谢;福司可林在浓度为0.1 ng.mL 1～5μg.mL 1内,对人肝微粒体中CYP3A4存在竞争性抑制作用。可见,福司可林在肝微粒体中代谢消除较快,在临床上与其他被CYP3A4代谢的药物合用时应注意药物相互作用。     

补骨脂酚的体外肝微粒体代谢及代谢减毒作用的种属比较

目的研究补骨脂酚在人、比格犬和大鼠肝微粒体的体外代谢动力学及种属差异,评价不同种属肝微粒体对补骨脂酚人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)的减毒作用。方法应用MTT法检测HK-2细胞的存活率来评价补骨脂酚对HK-2细胞的毒性作用以及不同种属肝微粒体对其毒性的影响。应用HPLC法分析补骨脂酚在3个种属肝微粒体孵育液中的剩余浓度,研究其在肝微粒体中的代谢稳定性和代谢动力学。结果在3个种属肝微粒体分别作用下,补骨脂酚的HK-2细胞毒性明显降低。补骨脂酚在人肝微粒体中的代谢最慢,在大鼠肝微粒体中的代谢最快,人、犬和大鼠的代谢动力学参数Km、Vmax、T21和CLint分别为:(81.66±3.41),(89.35±4.32)和(31.89±2.60)μmol.L-1;(0.47±0.01),(0.57±0.01)和(1.88±0.09)μmol.L-1.min-1;(44.14±1.13),(53.31±0.29)和(6.79±0.39)min;(39.38±1.04),(65.16±0.35)和(365.92±20.01)ml.min-1.kg-1。结论肝微粒体降低补骨脂酚的HK-2细胞毒性,这一减毒作用与补骨脂酚经肝微粒体酶的代谢相关。补骨脂酚的体外肝代谢动力学性质存在着一定的种属差异;犬肝微粒体对高浓度补骨脂酚所致的HK-2细胞毒性的降低作用要弱于人和大鼠肝微粒体。     

五味子对扑热息痛肝脏毒性的保护作用

五味子果仁乙醇提取物(五仁醇)及其有效成分之一五味子醇乙(醇乙),预先24h给药能显著降低大剂量扑热息痛(400mg/kg)肝中毒所致的小鼠死亡率,并防止肝内谷胱甘肽(GSH)的耗竭,增强肝微粒体代谢扑热息痛的速度,血中扑热息痛含量下降。从这些结果推测,五仁醇和醇乙的抗扑热息痛肝脏毒性作用可能是通过对肝微粒体细胞色素P-450的诱导作用,调整肝微粒体对扑热息痛代谢的途径,减少毒性代谢产物的生成量。醇乙是五味子对抗扑热息痛肝脏毒性的主要有效成分。     

桃仁提取物对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究桃仁乙醇提取物对四氯化碳(CCl4)和乙醇所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:采用CCl4和乙醇制备小鼠急性肝损伤模型,观察桃仁乙醇提取物对小鼠血清和肝匀浆谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量的影响。结果:桃仁乙醇提取物能降低急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST活性;降低肝匀浆AST活性和MDA含量;提高SOD活性和GSH含量。结论:桃仁乙醇提取物对急性肝损伤有一定的保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化作用有关。     

新疆两色金鸡菊提取物抗脂质过氧化及对糖尿病小鼠的保护作用

目的比较新疆两色金鸡菊乙酸乙酯和正丁醇提取物体外抗脂质过氧化的能力,并考察正丁醇提取物对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病小鼠体重、体内生化指标和主要脏器的影响。方法响应面优化提取两色金鸡菊总黄酮部位,提取液经石油醚萃取后,剩余水相分别用乙酸乙酯和正丁醇萃取,获得乙酸乙酯(EAE)和正丁醇提取物(BE)。采用硫代巴比妥酸法测定提取物抗脂质过氧化能力;STZ诱导的糖尿病小鼠灌胃给予正丁醇提取物(0.2、0.4、0.8 g·kg~(-1))连续4周,监测小鼠体重变化、血浆生化指标以及肝脏、胰腺、肾脏的脏器系数和组织病理切片考察对机体的作用。结果在亚油酸反应体系下,测得EAE和BE抗脂质过氧化能力(SC50)分别为:(443.96±11.24)mg·L~(-1)和(840.29±16.38)mg·L~(-1);采用大鼠肝匀浆体系测得结果为:(23.59±3.67)mg·L~(-1)和(60.37±4.27)mg·L~(-1)。正丁醇提取物能明显改善糖尿病小鼠体重下降的趋势,增加脏器系数;同时能明显改善体内多项生化指标;经HE染色病理切片检查,正丁醇提取物各剂量组均对受损的肝脏、胰腺和肾脏具有一定的修复和改善作用。结论新疆两色金鸡菊乙酸乙酯和正丁醇提取物具有一定的抗脂质过氧化的能力,正丁醇提取物对糖尿病小鼠受损器官有一定的保护作用。     

肝舒胶囊对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用研究

肝舒胶囊主要成分为五味子、枸杞子、灵芝、栀子提取物，五味子有抗脂质过氧化、保护肝细胞膜、降ALT(谷丙转氨酶)、促进肝细胞增长等作用；枸杞子有抗脂质过氧化、保肝、抗脂肪肝等作用；栀子能抑制CCI4(四氯化碳)在肝微粒体内代谢活化；灵芝能降ALT。本文主要研究用以上四种保肝降酶中草药提取物为主要原料所制的肝舒胶囊对四氯化碳致小鼠肝损伤是否具有保护作用，现报告如下。     

采用UPLC-MS/MS法研究树豆酮酸A在不同种属肝微粒体中的代谢差异

建立测定肝微粒体孵育体系中树豆酮酸A(CAA)质量浓度的方法,并比较其在不同种属肝微粒体中的代谢特征。方法:分别将CAA溶解于由还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)启动的大鼠、比格犬、人肝微粒体孵育体系中,置于37℃水浴中进行孵育,分别于孵育的0、5、10、15、30、45、60 min时用乙腈终止反应,以染料木素为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测各孵育体系中CAA的质量浓度。色谱柱为Waters BEH C_(18),流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸)(45∶55,V/V),流速为0.25 mL/min,柱温为30℃,进样量为2μL;采用电喷雾离子源,以选择反应监测模式进行负离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 353.14→309.11(CAA)、m/z 269.86→224.11(内标)。以孵育0 min时CAA的质量浓度为参照,计算其在不同孵育体系中的剩余百分比和酶动力学参数。结果:CAA检测质量浓度的线性范围为0.05～20μg/mL,定量下限为0.05μg/mL,最低检测限为0.01μg/mL;日内、日间RSD均小于10%,相对误差为-4.83%～8.94%,提取方法和基质效应均不影响待测物的测定。孵育60 min时,CAA在大鼠、比格犬、人肝微粒体中的剩余百分比分别为(62.79±9.99)%、(64.07±11.59)%、(96.66±5.71)%;在大鼠、比格犬肝微粒体中的半衰期(72.19、68.61 min)均显著短于人肝微粒体(364.74 min),清除率[0.019 2、0.020 2 mL/(min·mg)]均显著高于人肝微粒体[0.003 8 mL/(min·mg)](P<0.05)。结论:本研究建立的UPLC-MS/MS法简便、快速、专属性强、灵敏度高,可用于肝微粒体孵育体系中CAA质量浓度的测定及体外代谢稳定性的研究。CAA在大鼠、比格犬肝微粒体中的代谢稳定性均差于人肝微粒体。