β-紫罗兰酮诱导人乳腺癌细胞(ER~+)凋亡作用

目的为了研究β-紫罗兰酮对雌激素阳性的人乳腺癌细胞(MCF-7)凋亡诱导作用的影响。方法采用细胞生长曲线,凋亡细胞的荧光显微镜和电镜观察,TUNEL方法及流式细胞光度术以及Western blot的检测方法,观察了用不同浓度β-紫罗兰酮(25、50、100和200μmol/L)对MCF-7细胞的抑制作用及诱导该细胞产生凋亡情况。结果β-紫罗兰酮可明显抑制MCF-7细胞生长,抑制率分别为6.57%、34.58%、65.22%和81.87%。通过荧光显微镜和电镜技术观察到了MCF-7细胞有凋亡的形态特征;TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶缺口末端标记)方法和流式细胞光度术均检测到β-紫罗兰酮可诱导MCF-7细胞产生凋亡,并随着β-紫罗兰酮浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加。TUNEL凋亡指数(AI)分别为20.74%(24h)和33.15%(48h);流式细胞光度术的凋亡指数(AI)分别为27.96%(24h)和38.59%(48h)。通过Western blotting方法观察到β-紫罗兰酮可对MCF-7的细胞增殖相关蛋白PCNA及bcl-2蛋白表达有明显地抑制作用,呈现明显地剂量-反应关系。结论β-紫罗兰酮可明显地抑制雌激素阳性(ER+)人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并诱导该细胞产生凋亡,其作用机制需要进一步探讨。     

c-myc在植酸诱导人胃癌细胞凋亡中的作用研究

目的研究植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法采用MTT实验法观察植酸对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜下观察植酸对细胞形态的改变;免疫组化法和Westernblot法检测凋亡调控基因c-myc的表达。结果MTT实验结果显示,植酸对SGC-7901细胞具有生长抑制作用,并呈现剂量与时间的效应关系;倒置显微镜下的形态学观察表明加药组细胞的生长受到抑制;植酸组细胞中c-myc蛋白比对照组表达降低,且呈现剂量-反应关系。结论植酸对人胃癌SGC-7901细胞具有诱导凋亡作用,c-myc参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用机制。     

植酸对SGC-7901细胞凋亡相关蛋白Fas、Bax及Caspase-3表达的影响

目的:研究植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法:采用MTT实验法观察植酸对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;DNA琼脂糖凝胶电泳实验(DNA Ladder)观察植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用;Western blotting检测凋亡相关蛋白Fas、Bax及caspase-3的表达。结果:MTT实验结果显示,植酸对SGC-7901细胞具有生长抑制作用,并呈现剂量与时间的效应关系;经3.5mmol/L植酸处理72h的细胞出现了典型的DNA片断的梯形条带;植酸能够诱导caspase-3的活化,植酸处理组细胞中Fas、Bax蛋白比对照组表达增加,且呈现剂量-反应关系。结论:植酸对SGC-7901细胞具有诱导凋亡作用,Fas、Bax及caspase-3参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用机制。     

植酸对人胃癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用的研究

目的了解植酸对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法MTT法检测植酸在体外对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用;AO/EB荧光染色和DNA Ladder实验检测细胞凋亡;免疫组化法检测凋亡调控基因P53蛋白的表达。结果植酸在体外可以明显抑制人胃癌细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡。免疫组化实验结果表明,植酸可以抑制SGC-7901细胞中凋亡相关P53蛋白的表达。结论植酸在体外可以抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,且对于P53蛋白表达的下调作用可能是其诱导细胞凋亡的机制之一。     

芹菜素对人胃癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用的研究

目的:了解芹菜素对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法检测芹菜素在体外对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测细胞的周期分布;DAPI荧光染色和DNA Ladder实验检测细胞凋亡;Western blotting方法检测了凋亡相关信号分子caspase-3和Bcl-2的蛋白表达情况。结果:芹菜素在体外可以明显抑制人胃癌细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡。Western blotting实验结果表明,芹菜素可以诱导SGC-7901细胞中凋亡相关信号分子caspase-3活化片段的产生并抑制Bcl-2蛋白的表达。结论:芹菜素在体外可以抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,且对于caspase-3的活化及Bcl-2蛋白表达的下调作用可能是其诱导细胞凋亡的机制之一。     

植酸对人胃癌细胞增殖抑制作用的体外实验

目的:研究植酸对人胃癌细胞的生长抑制作用及机制。方法:采用MTT实验、Hoechst33342荧光染色法观察不同剂量植酸对SGC-7901细胞增殖的影响,免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达。结果:植酸对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用,且存在剂量-效应关系。荧光染色可见,植酸作用组细胞出现典型的细胞核浓缩、边集、裂解的凋亡特征。植酸处理组细胞中Bcl-2蛋白表达较对照组降低。结论:植酸对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用和诱导凋亡作用。     

甘草提取物(GL-1)对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制及促凋亡作用

目的提取中药甘草提取物(GL-1),研究其对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用。方法将甘草粉末溶于水后取沉淀部分、经丙酮萃取、甲醇分离处理,得到甘草提取物GL-1。通过MTT比色法观察不同浓度的GL-1对SGC-7901细胞增殖抑制情况;AO(吖啶橙)/EB(溴化乙锭)双荧光染色法检测SGC-7901细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪测定各浓度组细胞凋亡率。结果 GL-1对SGC-7901细胞的生长增殖有抑制作用,在12、24、48 h作用于SGC-7901细胞的半数抑制浓度分别为24.18、20.03、15.60μg/m L(P0.05);AO/EB染色结果表明12.5、25、50μg/m L剂量组SGC-7901细胞均有不同程度的凋亡作用;流式细胞仪检测结果表明,GL-1对SGC-7901细胞的诱导凋亡作用具有浓度依赖性。结论 GL-1具有抑制SGC-7901细胞生长增殖作用,并能诱导SGC-7901细胞凋亡。     

β-紫罗兰酮抑制SGC-7901细胞潜在的转移作用

目的观察β紫罗兰酮对人胃腺癌细胞(SGC7901)潜在转移的影响。方法采用细胞生长曲线,酶谱法和RTPCR技术,我们检查了不同浓度(25、50、100和200μmolL)β紫罗兰酮对SGC7901细胞生长,IV明胶酶的活性(MMP2和MMP9),nm23H1基因和金属蛋白酶抑制剂(TIMP1和TIMP2)在SGC7901细胞表达情况。β紫罗兰酮处理时间为24小时和48小时。结果β紫罗兰酮可抑制SGC7901细胞增殖。用不同浓度的β紫罗兰酮处理SGC7901细胞8天的抑制率分别为25.93%、28.21%、74.36%和90.11%。β紫罗兰酮作用于SGC7901细胞的IC50值为89μmolL。β紫罗兰酮不影响SGC7901细胞的基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的活性。然而,β紫罗兰酮可明显地促进nm23H1基因、TIMP1和TIMP2的表达,呈现剂量-反应关系。结论β紫罗兰酮可抑制SGC7901细胞的生长和增殖。可能通过上调nm23H1,TIMP1和TIMP2来影响SGC7901细胞潜在的转移。然而,β紫罗兰酮对SGC7901细胞的IV型明胶酶活性没有影响,因而,β紫罗兰酮抑制SGC7901细胞的转移需要进一步研究。     

植酸对SGC-7901细胞凋亡相关蛋白NF-kBP65、Bcl-2、IkB-α及C-myc表达的影响

目的研究植酸对SGC-7901细胞的生长抑制作用的机制。方法采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白NF-kBP65、Bcl-2、IkB-α及C-myc的表达。结果植酸可抑制人胃癌SGC-7901细胞中Bcl-2、C-myc、NF-kBP65蛋白的高表达;促进IkB-α蛋白的表达。结论凋亡相关蛋白NF-kBP65、Bcl-2、C-myc、IkB-α参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用的调控。     

植酸对胃癌细胞恶性增殖的抑制作用研究

目的研究植酸对bax、bcl-2表达影响与抑制胃癌细胞增殖作用及其机制。方法采用MTT实验法观察植酸对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜下观察植酸对细胞基本生长状态的改变及形态的变化;单细胞凝胶电泳实验观察植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用;Western blotting检测凋亡相关基因bax及bcl-2的蛋白表达。结果MTT实验结果显示,植酸对SGC-7901细胞具有生长抑制作用,并呈现剂量与时间的效应关系;倒置显微镜下的形态学观察表明加药组细胞的生长状态不佳;植酸作用组细胞出现了典型凋亡的彗星施尾,且存在剂量-效应关系;植酸能够下调bcl-2蛋白的表达,植酸处理组细胞中bax蛋白比对照组表达增加,且均呈现剂量-反应关系。结论植酸对SGC-7901细胞具有抑制增殖作用,bax及bcl-2参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用机制。     

β-榄香烯对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用及对Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨β-榄香烯对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用及对Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,以进一步了解其作用机制。方法用含有10%小牛血清的RPMI1640培养基在37℃下,体积分数5%的二氧化碳培养箱中培养人胃癌SGC-7901细胞,以三氧化二砷为阳性对照药物,采用MTT法对比β-榄香烯与三氧化二砷在不同浓度下对细胞增殖的影响,用Western blot法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达情况。结果β-榄香烯和三氧化二砷在浓度为20、40以及80μmol/L时,对人胃癌SGC-7901细胞增殖有显著的抑制作用(P<0.05);而β-榄香烯在浓度为40、80μmol/L时,对人胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用较三氧化二砷更加明显(P<0.05)。随着β-榄香烯的浓度逐渐升高,人胃癌SGC-7901中促进细胞凋亡的Bax蛋白的表达上调,而抑制细胞凋亡的Bcl-2蛋白的表达下调。结论β-榄香烯能够有效抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,并且能够通过调控Bax和Bcl-2蛋白表达,从而达到诱导肿瘤细胞凋亡的目的。     

NF-kBP_(65)及Bcl-2蛋白在植酸诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的:研究植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法:采用AO/EB荧光染色法、彗星实验观察植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用,Western blot法检测凋亡调控基因Bcl-2及NF-kBP65的表达。结果:荧光染色可见植酸组细胞核染色质成固缩状、串珠状或出现凋亡小体等典型的凋亡细胞形态;植酸组细胞出现了具有凋亡特征的彗星样改变,彗星细胞拖尾率随着植酸浓度的增加呈递增趋势。植酸组细胞中Bcl-2、NF-kB蛋白比对照组表达下降,且呈现剂量-反应关系。结论:植酸对SGC-7901细胞具有诱导凋亡作用,对NF-kB途径的抑制作用可能是其抗癌的机制之一。     

维生素E琥珀酸酯对人胃癌细胞中核因子及抗凋亡基因的影响

目的本研究以人胃癌SGC-7901细胞为肿瘤模型,在体外探讨维生素E琥珀酸酯(VES)在抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡过程中对NF-κB组成性激活及抗凋亡基因在转录水平上的调控作用。方法采用MTT法和AnnexinV法分别检测不同浓度水平VES处理人胃癌SGC-7901细胞后细胞的生长和凋亡情况。采用细胞成分分离法获得细胞核总蛋白,然后以Westernblot法测定VES处理后核因子蛋白p65在细胞核总蛋白中的含量。用RT-PCR方法检测VES对SGC-7901细胞中抗凋亡基因c-IAP1、c-IAP-2、NAPI、survivin、XIAP的转录调节作用。结果12.5～50.0μmolVES作用24h后,SGC-7901细胞的生长被明显抑制。50μmolVES作用于细胞12h后可诱导细胞发生凋亡,且作用48h后其凋亡诱导作用更明显。Westernblot结果发现,VES处理SGC-7901细胞后使细胞核内NF-κBp65蛋白的含量下降,即抑制了NF-κBp65向细胞核内的迁移。RT-PCR结果提示,VES处理胃癌细胞后可以在基因水平上抑制抗凋亡基因NAIP和survivin转录,对其他IAPs家族成员-c-IAP1、c-IAP-2、XIAP的转录无下调作用。结论VES对SGC-7901细胞内NF-κB组成性激活的调控作用及对抗凋亡基因在转录水平上的抑制作用可能是其抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞发生凋亡的机制之一。     

两种类胡萝卜素提取物对胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡作用的比较研究

目的比较红心鸭蛋与普通鸭蛋类胡萝卜素提取物对胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、免疫组化法。结果红心鸭蛋类胡萝卜素提取物对SGC-7901细胞增殖抑制作用、凋亡诱导作用及上调促凋亡基因bcl-2、下调抑制凋亡基因Bax表达的作用显著强于普通鸭蛋类胡萝卜素提取物。结论红心鸭蛋类胡萝卜素提取物对SGC-7901细胞增殖抑制与凋亡诱导作用均显著强于普通红心鸭蛋类胡萝卜素提取物。     

亚硒酸钠对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及hTERT表达的影响

目的探讨亚硒酸钠对人胃癌SGC-7901细胞株生长、凋亡和hTERT表达的作用及相关机制。方法用含不同浓度亚硒酸钠(0、0.5、2.5、5.0、8.0μmol/L)的培养液培养SGC-7901细胞24、48、72、96h,用相差显微镜观察亚硒酸钠对SGC-7901细胞形态的影响;MTT法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响;AnnexinV-FITC/PI双染法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞细胞的凋亡的影响;链霉亲和素-生物素-酶复合物(SABC)免疫细胞化学法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞hTERT蛋白表达的影响。结果 (1)MTT法结果显示:用亚硒酸钠培养SGC-7901细胞株24,48,72,96h后,随浓度增加,吸光度值逐渐降低,24h后当亚硒酸钠浓度大于2.5μmol/L时,与对照组比较其吸光度值均明显降低(P<0.01),48、96h后各浓度亚硒酸钠组与正常对照组比其吸光度值均明显降低(P<0.01)。随浓度的增加,亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长抑制率逐渐增加。(2)流式细胞仪检测结果显示:亚硒酸钠可促进SGC-7901细胞发生细胞凋亡。5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组比正常对照组凋亡率明显升高(P<0.01)。(3)免疫细胞化学法检测结果显示:亚硒酸钠可降低SGC-7901细胞中hTERT蛋白免疫细胞化学染色的平均光密度(MOD),24h时5、8μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),48h时0.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),72h时2.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),96h时实验组与对照组比较MOD均明显降低(P<0.01)。结论亚硒酸钠能抑制SGC-7901细胞生长,诱导其凋亡,其作用机制可能与下调hTERT表达有关。     

α-生育酚琥珀酸酯的合成及抑制肿瘤作用

目的合成α-生育酚琥珀酸酯(α-Tocopherol succinate，α-TOS)，验证其对人胃癌细胸SGC-7901的生长抑制作用，并研究其发挥作用的分子形式。方法利用α-生育酚(α-Tocopherol，α-TOH)和琥珀酸酐在催化剂的作用下合成α-TOS，用噻唑蓝[3-(4，5-dimethyl—thiazol-2-y1)-2，5-diphenyl tetrazolium bromide MTT]法观察其对SGC-7901细胞增殖的影响，应用琼脂糖凝胶电泳检测α-TOS对SGC-7901细胞洲亡的诱导作用．并利用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)法检测α-TOS抑制癌细胞生长的作用形式。结果经红外光谱和质谱分析鉴定，本研究合成的α-TOS与标准品一致；与对照组相比，10和20μg／ml剂量组的α-TOS对SGC-7901细胞增殖的抑制作用明显，处理第6d时，癌细胞的生存率分别降至21．7％和7．7％；10和20μg／ml的α-TOS处理SGC-7901细胞48h后，琼脂糖凝胶电泳检测到细胞发生凋亡时DNA降解形成梯形分子条带；在生长受到抑制的SGC-7901细胞及其培养体系中，利用HPLC法仪检测到α-TOS，均未检测到其水解产物α-TOH。结论α-TOS合成品对SGC-7901细咆具有明显剂量依赖的抑制增殖和诱导凋亡作用，且α-TOS以不分解的整体分子形式抑制肿瘤细胞生长。     

植酸对IkB-α表达及胃癌细胞增殖抑制作用

目的 研究植酸对抑制性卡巴蛋白(IkB-α)表达影响与抑制胃癌细胞增殖作用机制.方法 采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法观察植酸对人胃癌(SGC)7901细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜下观察植酸对细胞基本生长状态及形态的影响;单细胞凝胶电泳实验观察植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用;蛋白印迹法(Westem blot)检测凋亡相关基因IkB-α及可能相关的细胞核因子NF-kBP65蛋白表达.结果 MTT实验结果显示,植酸对SGC-7901细胞具有生长抑制作用,并呈现剂量-时间效应关系;不同浓度的植酸对人SGC-7901 3 d时抑制率分别为26.35%,53.20%,69.29%,86.65%和93.61%.倒置显微镜下的形态学观察表明,加药组细胞的生长状态不佳,植酸作用组细胞出现典型凋亡的彗星脱尾,且存在剂量效应关系,不同浓度的植酸对人SGC-7901 DNA损伤率分别为5.9%,11.0%,34.6%和63.1%.植酸能够上调IkB-α蛋白的表达,植酸处理组细胞中IkB-α蛋白比对照组表达升高,且均呈现剂量-反应关系;同时,植酸能够下调NF-kBP65的蛋白表达.结论 植酸对胃癌SGC-7901细胞具有抑制增殖作用,IkB-α参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用机制.     

组织蛋白酶B在紫杉醇诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用

[目的]研究组织蛋白酶B(Cathepsin B)在紫杉醇诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用.[方法]用0.1～0.5 μmol/L紫杉醇作用于SGC-7901细胞.另一组再加入Cathepsin B特异性抑制剂CA-074(Me)对照;再用0.3μmol/L紫杉醇对SGC-7901细胞分别作用0 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h,另一组再加入CA-074(Me),通过形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡率的变化.[结果]①随着紫杉醇浓度的增高和作用时间的延长,SGC-7901细胞的凋亡率明显增高;②加入CA-074(Me)后,细胞凋亡率明显下降.[结论]Cathepsin B在紫杉醇诱导的细胞凋亡中有着相对重要的作用.     

染料木黄酮对人胃癌细胞生长抑制作用研究

目的 :　探讨染料木黄酮对体外培养的人胃癌 SGC- 790 1细胞的抑制和诱导细胞发生凋亡的作用。方法 :　用 MTT法、集落形成实验、透射电镜及流式细胞仪的方法 ,观察染料木黄酮处理 SGC- 790 1后细胞生长和细胞凋亡。结果 :　 (1 ) MTT法和集落形成实验证实染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞生长有抑制作用 ,抑制作用呈剂量 -效应关系 ;　 (2 )透射电镜可见 SGC- 790 1细胞在形态学上出现典型的细胞核固缩、碎裂等凋亡细胞的形态学改变 ;　 (3)流式细胞仪检测到凋亡峰。结论 :　染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞有抑制作用 ,而这一作用的机制之一是通过诱导人胃癌细胞发生凋亡 ,即诱导肿瘤细胞发生凋亡是染料木黄酮抑制肿瘤细胞生长的重要机制之一     

Bcl-2家族蛋白在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的:研究Bcl-2家族蛋白在维生素E琥珀酸酯(RRR-α-tocopheryl succinate,α-TOS;vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡线粒体途径中的作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)法测定VES对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50值);吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色观察细胞凋亡;Mito Tracker Red CMXRos染色观察线粒体膜电位(ΔΨm)的改变;Western Blot法检测不同剂量VES对人胃癌SGC-7901细胞Bid、Bax、Bcl-2蛋白表达和细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)蛋白表达与定位的影响。结果:VES对SGC-7901细胞的IC50值为101.45μg/ml;VES可引起SGC-7901细胞发生凋亡和线粒体膜电位下降;并引起Cyt C蛋白在细胞内重新定位、Bid蛋白剪切活化、Bax蛋白表达增加和Bcl-2蛋白表达减少。结论:VES可抑制SGC-7901细胞的生长,并通过线粒体途径诱导凋亡,其机制可能是通过剪切活化Bid蛋白、上调Bax/Bcl-2相对水平来实现的。