基于粪便代谢组学技术的逍遥散抗抑郁作用机制研究

目的应用核磁共振氢谱(1H-NMR)代谢组学技术研究慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁大鼠粪便中内源性代谢物及代谢通路的变化,并评价逍遥散的改善作用,探讨其抗抑郁作用机制。方法使用CUMS造模程序建立抑郁模型,采用1H-NMR技术结合多变量统计分析方法,研究CUMS抑郁大鼠粪便代谢物谱的变化、鉴定相关代谢标志物并构建代谢通路。结果在抑郁大鼠粪便样本中共筛选10种与抑郁相关的潜在生物标志物。与对照组比较,模型组天冬酰胺、天冬氨酸、乳酸和丙酸水平显著升高(P0.05、0.01),而苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸和脯氨酸水平显著降低(P0.05、0.01)。与模型组相比,逍遥散能显著升高苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸的水平,能显著降低天冬酰胺、乳酸和丙酸的水平。与对照组比较,CUMS抑郁大鼠粪便中6条代谢通路发生了显著变化:包括(1)氨基酰t RNA生物合成,(2)丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,(3)精氨酸和脯氨酸代谢,(4)谷氨酸和谷氨酰胺代谢,(5)苯丙氨酸代谢以及(6)丙酮酸代谢。而逍遥散可显著回调(2)、(3)、(4)、(5)和(6)条代谢通路。结论逍遥散可能通过调控氨基酸代谢、糖代谢和肠道微生物的代谢等途径发挥抗抑郁作用。     

氨基酸代谢与缺血性脑中风的相关性研究

目的 利用基于氯甲酸乙酯衍生化反应的气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)的代谢组学测定方法,测定正常组、假手术组和模型组大鼠脑组织中18种氨基酸的含量,利用主成分分析方法(PCA)分析脑内氨基酸代谢与缺血性脑中风的相关性,从代谢组学角度初步揭示缺血性脑中风潜在的生物标志物。方法 通过氯甲酸乙酯化反应,将生物样品中的氨基酸、脂肪酸、有机酸、糖类和固醇类物质制成热稳定性强、易挥发的酯或醚,通过优化色谱条件对大鼠脑组织中18种氨基酸含量进行分析测定。结果 利用已建立的GC-MS测定方法,测定大鼠脑组织中18种氨基酸的含量,并通过主成分分析方法比较了正常组、假手术组和模型组之间的差异。结论 初步发现了13种与缺血性脑中风密切相关的氨基酸类生物标志物,13种化合物分别为丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、组氨酸、酪氨酸和色氨酸。     

基于~1H-NMR的干寒性气质失调证糖尿病大鼠肝组织代谢变化研究

目的:观察干寒性气质失调证糖尿病模型大鼠肝脏组织的代谢变化。方法:对模型肝脏组织进行核磁共振检测,并对其代谢轮廓变化进行分析。结果:与健康组比较,干寒性气质失调证大鼠肝组织中β-羟基丁酸、肌酸、氧化三甲胺、苏氨酸和胆碱等代谢物含量明显升高,而乳酸、肌酸肝、葡萄糖和肌醇等含量明显降低;干寒性气质失调糖尿病大鼠肝组织中β-羟基丁酸、肌酸、肌醇和葡萄糖等含量明显升高,但异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、乳酸、丙氨酸、鸟氨酸、瓜氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、α-酮戊二酸、乙酰天冬氨酸、甲胺、肌氨酸、肌酸肝、组氨酸、色氨酸、甘氨酸、苏氨酸、胆碱、酪氨酸、苯丙氨酸、烟酸和马尿酸等含量均明显降低。结论:干寒性气质失调证的发生伴随有多种能量代谢的变化。     

基于GC-MS代谢组学分析刺五加总苷提取物的降糖作用

目的:采用GC-MS代谢组学分析糖尿病模型小鼠血清代谢物组,并对刺五加总苷提取物的降糖作用进行探讨。方法:建立链脲佐菌素联合四氧嘧啶诱导小鼠糖尿病模型,采用多元分析方法研究小鼠血清代谢物组及变化规律;通过NIST11数据库匹配及对照品指认鉴定差异代谢物;借助代谢组学途径分析(Met PA)数据库分析代谢通路。结果:糖尿病小鼠模型成功复制。刺五加总苷提取物能够降低模型组中棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、酪氨酸、苯丙氨酸、天冬氨酸、丝氨酸的浓度;升高丙氨酸,乳酸,柠檬酸,谷氨酰胺,缬氨酸,甘氨酸,(异)亮氨酸和β-羟基丁酸的浓度并使之转归。Met PA富集分析发现6条代谢通路与糖尿病关系密切。结论:刺五加总苷提取物具有降糖作用,其机制可能与调节能量代谢、氨基酸代谢、氨基酸生物合成及有机酸代谢相关。     

基于血清~1H-NMR代谢组学的地榆升白片治疗白细胞减少症作用机制研究

目的:明确地榆升白片治疗白细胞减少症的药理作用,并采用核磁(~1H-NMR)代谢组学的方法探讨其对内源性代谢物的调节作用,阐释其作用机制。方法:构建4T1乳腺癌荷瘤小鼠,采用腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺进行造模,建立肿瘤化疗后白细胞减少症模型。将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组和地榆升白片0.14 g/kg组,连续灌胃给药一周。利用传统药效学指标(血常规和脏器指数)评价地榆升白片药效。采用~1H-NMR技术对血清样本进行分析,寻找与地榆升白片疗效相关的差异代谢物,并对其关键代谢通路进行分析,阐释其作用机制。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠白细胞含量显著降低(P<0.01),脾脏和胸腺指数显著下降(P<0.01),肝脏指数明显升高(P<0.05)。与模型对照组相比,地榆升白片0.14 g/kg组可显著升高白细胞的含量(P<0.01),并明显改善脏器指数(P<0.05或P<0.01)。代谢组学结果表明地榆升白片可明显回调8种差异代谢物的水平(P<0.05或P<0.01),并通过调节谷氨酰胺和谷氨酸代谢、氮代谢、精氨酸生物合成、丙氨酸,天冬氨酸和谷氨酸代谢等代谢途径发挥作用。结论:地榆升白片改善白细胞减少症的主要效应机制与调节谷氨酰胺和谷氨酸代谢、氮代谢、精氨酸生物合成、丙氨酸,天冬氨酸和谷氨酸代谢等有关。     

基于~1H-NMR代谢组学的酸枣仁改善失眠大鼠睡眠作用机制研究

目的利用氢核磁共振(~1H-NMR)代谢组学技术研究酸枣仁对对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导的失眠大鼠血清内源性代谢物的影响,探讨酸枣仁改善睡眠的作用机制。方法大鼠ipPCPA溶液(400mg/kg)制备失眠模型,采用1H-NMR代谢组学技术,以主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)及正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析方法为手段,对各组大鼠血清代谢物进行分析,筛选出潜在生物标志物;借助MatPA分析构建潜在靶标代谢通路和代谢网络。结果 1H-NMR代谢组学分析方法共筛选11种与失眠相关的潜在生物标志物;通过MatPA分析得到8条潜在靶标代谢通路,包括谷氨酸和谷氨酰胺代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸的代谢,乙醛酸和二羧酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙酮酸代谢,色氨酸代谢,三羧酸(TCA)循环。酸枣仁中剂量(15 g/kg)和高剂量(30 g/kg)均可显著回调11种潜在生物标志物。结论酸枣仁可通过调控失眠大鼠的能量代谢和氨基酸代谢,使大鼠内源性代谢物趋近正常水平,为进一步阐明酸枣仁改善睡眠的作用机制提供依据。     

活血胶囊对气虚血瘀大鼠血浆中游离氨基酸的影响

目的检测气虚血瘀证大鼠接受活血胶囊治疗后血浆中9种氨基酸的浓度。方法将采用力竭游泳与饥饿造模的40只SD大鼠分成气虚血瘀模型组和活血胶囊组,另选10只SD大鼠作为正常对照组。眼球取血,血样分析采用高效液相色谱法,以邻苯二甲醛进行柱前衍生。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血浆中丝氨酸、苯丙氨酸的浓度显著升高(P0.01),天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、酪氨酸、色氨酸及异亮氨酸的浓度显著降低(P0.01)。活血胶囊剂量为2~8 g/kg时,均可不同程度地逆转上述氨基酸的变化,且呈剂量依赖性关系。结论活血胶囊能够通过影响氨基酸的浓度提高机体免疫功能,从而达到治疗气虚血瘀证的效果。     

基于尿液代谢组学的冠心病血瘀证模型大鼠生物学基础研究

目的研究冠心病血瘀证模型大鼠尿液代谢组学特征,探讨其潜在的生物学基础。方法将20只SD大鼠随机分为假手术组和冠心病血瘀证模型组。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备冠心病血瘀证模型。利用超高效液相色谱-质谱联用技术检测假手术组和冠心病血瘀证模型组尿液样本小分子内源代谢物,进行主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析,筛选潜在生物标志物与显著代谢通路。结果与假手术组比较,冠心病血瘀证模型组有36种差异代谢产物水平紊乱,涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,磷酸戊糖途径,糖酵解/糖异生,泛酸和辅酶A生物合成,柠檬酸盐循环,丙酮酸代谢,嘌呤代谢,甘油脂代谢,戊糖和葡萄糖醛酸酯的相互转化等多条显著代谢通路。结论冠心病血瘀证模型大鼠尿液代谢组学出现改变,其病理机制主要涉及能量代谢失衡,以及氨基酸代谢、糖代谢、嘌呤代谢紊乱及脂质堆积等多个层面。     

基于GC-MS的针刺治疗类风湿性关节炎的代谢组学研究

目的:分析类风湿性关节炎(RA)患者血清内源性代谢物的变化,筛选差异性代谢物,观察针刺对差异性代谢物的调节作用,从代谢组学的角度探究针灸治疗RA的作用机制。方法:RA患者按随机数字表法分为针刺组及阳性药对照组,每组15例;同时收集健康体检者10例作为正常对照组。针刺组予双侧风池、阳池等穴针刺治疗,每次20 min,每天1次,治疗3个月;阳性药对照组予雷公藤多苷片口服,1片/次,每天3次,治疗3个月。观察两治疗组患者治疗前后压痛指数、肿胀指数、晨僵时间,ELISA法检测类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)含量及血红细胞沉降率(ESR)。采集正常对照组及针刺组治疗前后血清,采用GC-MS技术检测血清差异代谢物。MetaboAnalyst 4.0进行通路分析,SPSS23.0软件对差异性代谢物与药效指标进行Pearson相关性分析。结果:与治疗前比较,治疗后两治疗组压痛指数、肿胀指数、晨僵时间及RF、CRP均显著降低(P0.05)。与正常对照组比较,共筛选出14种差异性代谢物,升高的有乳酸、柠檬酸盐、肌酸、3-羟基丁酸、花生四烯酸、缬氨酸、软脂酸;下降的有甘氨酸、色氨酸、精氨酸、L-苯丙氨酸、葡萄糖、谷氨酰胺、天冬氨酸。OPLS多变量模式分析结果显示,针刺治疗后血清差异性代谢物有向正常对照组回归的趋势。主要涉及7条代谢通路:丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢;苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸代谢;甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢;乙醛酸二羧酸代谢;淀粉和蔗糖代谢;苯丙氨酸代谢;花生四烯酸代谢。柠檬酸盐、肌酸、花生四烯酸、缬氨酸、葡萄糖与压痛指数、肿胀指数、晨僵时间、RF、CRP、ESR呈正相关;甘氨酸、L-苯丙氨酸、谷氨酰胺与疗效指标呈负相关。结论:RA患者存在氨基酸及糖代谢紊乱,纠正氨基酸代谢紊乱及糖代谢可能是针灸治疗RA的作用机制之一。     

银杏叶提取物对谷氨酸诱导的兔视网膜NO水平及细胞凋亡的影响

目的 :探讨银杏叶提取物 (extract of ginkgo biloba ,EGB)对谷氨酸诱导的兔视网膜NO水平及细胞凋亡的影响作用。方法 :利用谷氨酸兔玻璃体内注射 ,诱导视网膜细胞凋亡的模型 ,眼球后注射不同剂量的EGB ,采用分光光度法测定兔视网膜NO水平 ,琼脂糖凝胶电泳分析视网膜细胞DNA断裂。结果 :实验对照组视网膜的NO的水平与空白对照组相比显著增加 (P<0.001) ,EGB大剂量治疗组视网膜NO水平比实验对照组显著降低 (P<0.001) ,EGB小剂量治疗组视网膜的NO水平与实验组相比轻度降低 ,但无统计学差别。EGB大剂量治疗组和空白对照组视网膜细胞无DNA凋亡样断裂 ,而实验组和EGB小剂量治疗组视网膜细胞DNA凋亡样断裂。结论 :银杏叶提取物可能通过抑制谷氨酸诱导的兔视网膜NO自由基的产生而抑制细胞凋亡 ,对谷氨酸诱导的兔视网膜损伤具有重要保护作用。     

菊花、叶、茎抗氧化活性比较

目的:研究菊花、叶和茎的体外抗氧化活性,为菊花、叶、茎资源的充分利用提供科学依据。方法:以绿原酸为对照组(CHA),分为菊花水提物组(JH-S),菊花醇提物组(JH-C),菊叶水提物组(JY-S),菊叶醇提物组(JY-C),菊花茎水提物组(JJ-S),菊花茎醇提物组(JJ-C),分别测定提取物的还原能力及对羟基自由基(·OH),二苯代苦味酰基自由基(DPPH·),脂自由基和超氧阴离子(O-2·)的清除率,研究其体外抗氧化活性。结果:菊花,叶,茎提取物和绿原酸的抗氧化作用与浓度呈正相关。菊花、叶、茎的水、醇提取物(0.20 g·L-1)和绿原酸相比,还原能力分别为2.260,2.270,2.261,2.260,2.261,2.272,2.256均无差异,且各醇提物和水提物之间也无差异;对·OH,O-2·均具较强的清除作用,且水提物的作用均好于其醇提物,尤其抗O-2·作用明显强于绿原酸清除DPPH·,脂自由基方面效果均优于水提物,菊茎醇提取物对DPPH·清除率略高于绿原酸,相同浓度下菊叶清除脂自由基作用胜于菊花。结论:菊花、叶和茎提取物均有较强的抗氧化活性,菊叶抗氧化作用与菊花相当。菊叶和茎作为天然抗氧化剂有较好的开发利用价值。     

药用菊非药用部位的资源化利用现状与展望

菊花Chrysanthemum morifolium是我国传统中药材,其非药用部位的产量远远高于花序,仅菊茎叶产量就为药用部位的3.5倍;长期以来,菊非药用部位未得到充分利用,造成了极大的资源浪费和环境污染,因此,药用菊非药用部位的深入研究与开发值得关注。研究表明,菊非药用部位富含挥发油类、黄酮类、酚酸类以及多糖类等成分,具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗惊厥和改善肠道失调等功效。通过对药用菊在栽培和生产过程中所产生的茎、叶、根等非药用部位的化学成分、药理作用及其资源利用现状进行归纳分析,以期为药用菊非药用部位的资源价值发现与产业化提供科学依据和参考。     

菊花中216种农药残留检测分析

目的：建立菊花中216种常用农药残留的快速检测方法。方法：样品经乙腈高速匀浆提取后浓缩,采用液相色谱-质谱法和气相色谱-质谱法,以多反应监测模式进行数据采集,采用空白基质匹配法及校准曲线法进行定量检测。结果：菊花中216种农药的线性关系良好,90%以上农药指标r>0.995,各待测农药指标回收率为70%～115%,符合农药多残留的痕量分析要求;78批菊花中检出农药68种。结论：菊花中农药残留检出率较高、检出品种较多,但检出的多为中低毒性农药。建立的方法有针对性地检测了菊花中高风险的农药品种,涵盖了大多数常用农药品种,检测方法快速、准确,适用于菊花中农药多残留的风险监测和日常快速筛查,可为基质类似的中药材农药多残留检测方法研究提供借参考。     

菊资源国内外专利布局现状与开发利用策略

我国菊资源丰富,花序为其主要药用部位,其种植、采收过程的茎叶及根等非药用部位常被废弃。菊非药用部位同样含有丰富的资源性化学成分,具有多种药理作用,开发利用前景广阔。以国家知识产权局专利数据库和Patsnap专利数据库为数据源,对菊资源国内外专利进行系统整理分析,从发展趋势、全球分布、申请人构成、技术领域、技术生命曲线、技术生长率及专利质量等多个角度阐述菊资源当前专利的活动特征,揭示菊资源产业发展态势及资源化利用现状。在此基础上,进一步系统梳理菊花及菊非药用部位资源性化学成分特点及其潜在资源价值,并基于循环经济发展理念提出精细高值化、转化增效、粗放低值化及文旅融合特色化的菊资源多元化开发利用策略与途径,为提升菊资源利用效率,延伸菊资源经济产业链,推动碳达峰、碳中和目标实现提供研究思路和理论依据。     

祁菊秸秆中奎宁酸酯类成分的分离与结构鉴定

[目的]对祁菊非药用部位秸秆70%乙醇提取物的化学成分进行研究,为提高现有药用植物资源的再生能力和内在质量奠定化学基础。[方法]利用正相硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱及高效液相色谱等方法进行分离纯化,并通过理化性质及波谱分析鉴定化合物结构。[结果]从祁菊非药用部位秸秆70%乙醇提取物中分离鉴定了8个奎宁酸酯类单体化合物,分别为3-O-咖啡酰基奎宁酸(1),绿原酸甲酯(2),4-O-咖啡酰基奎宁酸(3),1,5-二咖啡酰基奎宁酸(4),1,4-二咖啡酰基奎宁酸(5),3,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(6),3,4-二咖啡酰基奎宁酸(7),3,4-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(8)。[结论]化合物2为首次从该种植物中分离得到,3、5、6、8为首次从秸秆中分离得到。     

施肥和覆盖地膜对福田河菊花产量与品质的影响

目的 研究施肥和覆盖地膜等农艺措施对福田河菊花产量与品质的影响,以期为福田河菊花的规范化栽培提供指导.方法 采用田间试验方法 ,测定不同农艺措施下菊花的产量,用比色法测定菊花中总黄酮,用HPLC法测定绿原酸.结果 偏施氮肥时,菊花产量和品质均较低;将有机肥和无机肥料(氮、磷,钾、硼、锌等)配合施用时,菊花产量、品质与经济效益均大幅提高.高氮配方的肥料可显著提高菊花产量,但降低了其品质;而高钾配方的肥料可显著提高菊花中总黄酮与绿原酸的量,且菊花产量也较高.采用覆盖地膜栽培时,可促进菊花花期提前,并显著提高菊花前期花产量与总产量,从而也提高了种植菊花的经济效益.结论 在福田河菊花生产上,应采用覆盖地膜栽培,并应施用高钾配方的有机-无机复混专用肥.     

菊花化学成分、药理作用的研究进展及质量标志物预测分析

菊花作为我国传统的一味中药材,种类繁多,分布广泛,具有很高的药用价值。菊花在药用和保健中都有很好的效果,是我国卫生部发布的第一批药食两用药材。近年来,菊花在药品及保健食品中的应用越来越广泛,其主要的药效成分为黄酮、挥发油和苯丙素类化合物。在对其化学成分及药理作用综述的基础上,结合质量标志物概念,基于化学成分、临床药效、药动学、传统药性、传统药效、不同储藏条件以及不同加工方法的影响等几个方面对菊花质量标志物进行预测分析,为菊花质量评价研究提供科学依据。     

药用菊花常见病害及其发病规律与防治措施研究进展

菊花是我国传统大宗药材之一,在药品、食品等方面被广泛使用。近年来,随着市场需求逐步增加,人工集约化种植面积不断扩大,菊花病害发生日益严重,已严重威胁到菊花产业的健康可持续发展。其中,菊花枯萎病是最主要的病害,其次为菊花根腐病,叶部病害以黑斑病最为严重。根据目前药用菊花病害研究进展,对菊花栽培中其常出现的根部病害（枯萎病、根腐病、白绢病）、叶部病害（黑斑病、霜霉病、叶枯病、炭疽病、病毒病）的病原物、危害特征、发病规律及防治措施等进行综述,旨在为我国药用菊花的田间病害防控提供参考。     

3种常见中药材中绿原酸类成分提取的“逆溶解度”现象

目的 揭示艾叶、菊花和金银花中绿原酸类成分的提取规律。方法 运用超高效液相色谱法（UHPLC）测定艾叶、菊花和金银花中绿原酸类成分在常见溶剂水和乙醇中的溶解度,采用超声辅助法和加热回流法比较3种中药材中绿原酸类成分在水和乙醇中的提取率,并考察各绿原酸类成分在不同体积分数乙醇中的提取规律。结果 7个绿原酸类成分在乙醇中的溶解浓度远大于纯水;菊科植物艾叶和菊花超声提取在乙醇中的提取率显著低于纯水,加热回流提取除异绿原酸A外,其余绿原酸类成分在乙醇中的提取率均显著低于纯水;忍冬科植物金银花超声提取新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸在乙醇中的提取率略低于纯水,加热回流提取新绿原酸、隐绿原酸和异绿原酸B在乙醇中的提取率显著低于纯水。上述结果表明,中药绿原酸类成分提取过程中存在“逆溶解度”现象,即中药材中绿原酸类成分在某种溶剂中的提取率与其在该溶剂中的溶解性能相反的现象。在不同体积分数乙醇中,金银花中绿原酸类成分含量都是随乙醇体积分数的升高而先升高后降低,在体积分数为50%时绿原酸类成分含量达到最高点;菊科植物艾叶、菊花中新绿原酸、隐绿原酸等多种成分含量随乙醇体积分数的升高而降低,展现出显著的“逆溶解度”现象,在纯水中含量最高,但不同植物中也略有差异。结论 揭示了中药材中绿原酸类成分提取的“逆溶解度”现象,将为绿原酸类成分的提取及后续深入研究、开发应用提供参考。     

药用菊花叶片主要活性成分比较

对不同栽培类型药用菊花叶片主要活性成分进行分析,为进一步中药新资源开发利用提供依据.该研究以UV-VIS测定不同栽培类型药用菊花叶片总黄酮(TF)含量,HPLC测定木犀草苷(GA),槲皮苷(QU),绿原酸(CA),3,5-O-二咖啡酰奎宁酸(CQ)的含量.结果显示安徽歙县晚贡菊TF量最高为7.13%;安徽亳州大亳菊GA量最高为33.45 mg·g^-1;江苏射阳红心菊QU量最高为29.25 mg·g^-1;江苏射阳长瓣菊CA量最高为13.14 mg·g^-1;浙江桐乡大洋菊CQ质量分数最高为7.35 mg·g^-1.不同产地不同栽培类型药用菊花叶片中主要活性成分含量差异显著,且不同产地相同栽培类型之间差异亦显著,结果表明药用菊花叶片可以作为中药新资源开发的新来源.