用HPLC法分析2′-氟-2′,3′-二脱氧腺苷和2′-氟-2′,3′-二脱氧肌苷

2′氟2′,3′二脱氧腺苷(FddA)及其代谢物2′氟2′,3′二脱氧肌苷(FddI)具有抗HIV的活性。作者用HPLC法同时测定了狗血浆和尿中的FddA和FddI浓度。实验中的内标物质为3′,5′脱水胸苷(IS)。标准品的制备　含有FddA和FddI的血浆和尿标准品的标准曲线范围在血浆中为0.1～20μg·mL-1,在尿中为2～257μg·mL-1。3份血浆对照品(含FddA和FddI为1.0,15.2或50.8μg·mL-1)与2份尿样标准品(含FddA为36.0或366μg·mL-1,含FddI为42.0或420μg·mL-1)经制备后与供试样品一同分析。色谱条件　DuPontZorbaxC8柱(4.6mm×250mm,5μm粒径)…     

HPLC法测定小鼠血浆中N-丙磺舒-他克林的含量

目的:建立小鼠血浆中N-丙磺舒-他克林的含量测定方法。方法:以地西泮为内标。采用Shimadzu HPLC仪,以Shim-pack c18色谱柱为分析柱,甲醇-水(70:30)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,柱温35℃,于检测波长为233 nm进行检测,进样量为20μL。结果:在0.5-40.0μg·mL-1浓度范围内,测定方法具有良好的线性关系,线性方程为:Y=0.0322X-0.036,r=0.9998。回收率、精密度符合生物测定的要求,最低定量限为0.2μg·mL-1,最低检测限为0.03μg·mL-1。结论:本法用于测定小鼠体内N-丙磺舒-他克林的含量简便、准确。     

复方对乙酰氨基酚片(Ⅱ)人体药动学研究

目的:建立同时测定人血浆中对乙酰氨基酚、异丙安替比林和咖啡因浓度的HPLC法,研究健康志愿者口服复方对乙酰氨基酚片(Ⅱ)(每片含对乙酰胺基酚250 mg,异丙安替比林150 mg,咖啡因50 mg)后的人体药动学。方法:20例健康受试者单剂量口服复方对乙酰氨基酚片(Ⅱ)2片后24 h内间隔取血分离血浆。以茶碱为内标,血浆经乙酸乙酯提取后,用HPLC测定对乙酰氨基酚、异丙安替比林和咖啡因的血浆浓度。色谱条件为:Phe- nomenex Phenyl-BDS色谱柱(250 mm×4．6 mm,5μm),甲醇-醋酸盐缓冲液为流动相梯度洗脱分离,紫外260 nm检测。测定血药浓度经时过程,3P97程序计算主要药动学参数。结果:对乙酰氨基酚的主要药动学参数Cmax,Tmax, t1/2(λZ),MRT,AUC0-24h,CL／F和V／F分别为(3．57±0．82)μg·mL-1,(0．43±0．20)h,(4．27±0．76)h,(5．05±1．06)h,(13．17±3．27)h·μg·mL-1,(41．64±25．62)L·h-1和(166．57±109．80)L;异丙安替比林的分别为(2．50±0．69)μg·mL-1,(0．54±0．27)h,(2．01±0．44)h,(2．94±0．58)h,(6．37±1．80)h·μg·mL-1,(53．68±17．45)L·h-1和(106．86±21．42)L;咖啡因的分别为(1．23±0．33)μg·mL-1,(0．45±0．23)h,(5．49±1．44)h,(7．85±1．88)h, (8．78±3．20)h·μg·mL-1,(13．15±4．91)L·h-1和(87．51±15．06)L。结论:建立的HPLC方法专属、准确、灵敏度适宜,适用于复方对乙酰氨基酚片(Ⅱ)药动学研究。     

HPLC法测人血浆对乙酰氨基酚浓度及其药代动力学研究

目的建立HPLC法测人血浆中对乙酰氨基酚浓度,并进行药代动力学研究.方法血浆样品采用液-液萃取法萃取,UltimateTM XB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱分离;流动相为乙腈:水(10∶90,V/V),流速:1.0mL·min-1;检测波长237nm.结果对乙酰氨基酚血药质量浓度在0.025~25μg·mL-1内的线性关系良好(r=0.9989),血浆中低、中、高3种浓度(0.05,5,20μg·mL-1)的相对回收率在92.9%~92.1%之间;日内RSD≤5.77%,日间RSD≤4.24%.结论本法操作简便、准确、灵敏,适用于乙酰氨基酚的药动学研究.     

HPLC测定血浆中的游离肉碱

目的 建立血浆中游离肉碱的测定方法.方法 用高效液相色谱(HPLC)测定各患者的血浆游离肉碱,并进行比较.结果 方法线性范围为2 ～ 32μg·mL-1;最低检测浓度为2μg·mL-1,总分析时间为9.248 min.肉碱的平均保留时间(8.467±0.042) min.高、中、低3种浓度的平均回收率为98.7％.批内批间RSD分别为4.8％和10.9％(n=5).结论 HPLC法测定血浆游离肉碱浓度灵敏、可靠、简便,适用于快速检测肉碱缺乏症病人的临床筛选工作.     

HPLC法测定万古霉素血药浓度

目的 利用高效液相色谱法(HPLC),旨在建立一种快速、方便、准确的人血浆中万古霉素的浓度测定方法 .方法内标物:去甲万古霉素;色谱柱:Axxlaim?PolarAdvantageⅡ-C18(4.6×250mm,5μm);流动相为甲醇:磷酸二氢钾(pH 3.1)=19:81;检测波长:281nm;流速:1.0mL·min-1;柱温:30℃;进样量:10μL;血浆样品采用10%(w/v)的硫酸锌直接沉淀蛋白后进样检测.结果 万古霉素在1.5~150μg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=0.0136X-0.009(R2=0.9989).日内精密度在0.08%~1.29%之间,日间精密度在1.28%~3.56%之间,样品稳定性符合方法学要求.结论 本方法操作简便、线性范围广、结果准确,可用于临床监测万古霉素血药浓度.     

芍药苷在大鼠体内的药动学和生物利用度研究

目的建立血浆中芍药苷(paeoniflorin,PF)的HPLC检测方法;研究PF在大鼠灌胃和静注给药的药动学和绝对生物利用度。方法采用阿魏酸作为内标,流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液(30∶70),流速0.8mL·min-1,检测波长芍药苷232nm,内标322nm,色谱柱Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm)。结果以PF浓度和与内标的峰高比进行回归,回归方程:Y=0.1825 X-0.0256,r2=0.9974,最低检出量为20μg.L-1。PF绝对回收率83.41%～90.74%,日间和日内精密度RSD%均小于5%,PF大鼠灌胃给药的绝对生物利用度为(21.11±7.92)%。结论建立了PF血浆浓度检测方法,此方法可用于测定PF在人或其它动物血浆中的浓度。     

高效液相色谱荧光法测定人血浆替米沙坦浓度

目的建立测定人血浆替米沙坦浓度的高效液相色谱荧光法。方法以β-萘酚为内标,血浆用乙酸乙酯提取处理;采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);柱温:20℃;流动相:乙腈-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液=49∶51(V/V);流速:1.0 mL.m in-1;荧光检测激发波长:308 nm,发射波长:380 nm。结果血浆内源性杂质对样品测定无干扰,替米沙坦最低定量浓度为5 ng.mL-1,在5~2 000 ng.mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 8)。替米沙坦的日内、日间精密度RSD均<15%,样品多次冻融及提取后稳定性好。结论该法准确、快速、灵敏、简便,可作为人血浆替米沙坦浓度的测定方法。     

HPLC法测定养血调经合剂中芍药苷的含量

目的 建立养血调经合剂中芍药苷的高效液相色谱含量测定方法.方法 采用Inertsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5.0μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(15∶85)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长为230nm.结果 芍药苷浓度在0.629~62.949μg·mL-1 范围内呈良好的线性关系(r=1.0000);加样回收率平均98.16%,RSD为0.56%(n=9).结论 该方法操作易行,快速准确,可用于养血调经合剂中芍药苷的含量测定.     

双白片质量标准研究

目的:建立双白片的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法鉴别双白片中黄芪、刺五加和芍药;采用高效液相色谱(HPLC)法测定双白片中芍药苷的含量。结果:双白片中黄芪、刺五加及芍药的TLC分别在与对照品色谱对应的位置上显相同颜色的斑点,专属性好。芍药苷进样浓度在3.20～64.00μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9993);平均回收率为99.12%,RSD=1.18%(n=6)。结论:所建标准可用于双白片的质量控制。     

不同血浆样品制备方法对芍药苷血液药物浓度测定的影响

目的比较乙腈法、高氯酸法和磷酸二氢钠酸化法三种不同的血浆样品处理方法对芍药苷血液药物浓度测定的影响,优选最佳的血浆样品处理方法。方法高效液相色谱法测定血浆样品中不同浓度的芍药苷,比较三种方法对样品中芍药苷的回收率、检测的灵敏度以及实验结果可重复性等方面的影响。结果用乙腈和高氯酸处理芍药苷浓度>50μg/ml的血浆样品时,均能得到较高的回收率;但对于芍药苷浓度<50μg/ml的血浆样品,仅高氯酸处理的样品才能得到较高的回收率;并且高氯酸处理血浆能检测的最低芍药苷血液药物浓度为0.5μg/ml,具有较好的灵敏度。结论对于检测芍药苷的血液药物浓度,用高氯酸处理血浆样品最为适合。     

高效液相色谱法测定比格犬血浆中的芍药苷浓度及其药物代谢动力学研究

目的建立高效液相色谱法测定比格犬血浆中芍药苷的含量,并用于药物代谢动力学研究。方法血浆样品采用乙酸乙酯处理,以栀子苷作为内标,色谱柱为Phenomenex Luna C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水(含5 mmol·L-1醋酸铵和0.05%H3PO4)-乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1,紫外检测波长232 nm。比格犬单剂量静脉注射3、6和12 mg·kg-1的芍药苷,HPLC-UV法测定芍药苷的血药浓度,并采用DAS 2.0软件计算药物代谢动力学参数。结果结果表明内源性杂质不干扰芍药苷和内标的测定,线性范围0.125¹6.0μg·m L-1,定量限为0.125μg·m L-1。方法精密度、准确度、稳定性和回收率均符合生物样品测定的要求,适合比格犬血浆中芍药苷浓度的测定,可以应用该方法进行芍药苷的药物代谢动力学研究。比格犬单剂量静脉注射3、6和12 mg·kg-1芍药苷后的血药浓度-时间曲线下面积(AUC016.0μg·m L-1,定量限为0.125μg·m L-1。方法精密度、准确度、稳定性和回收率均符合生物样品测定的要求,适合比格犬血浆中芍药苷浓度的测定,可以应用该方法进行芍药苷的药物代谢动力学研究。比格犬单剂量静脉注射3、6和12 mg·kg-1芍药苷后的血药浓度-时间曲线下面积(AUC0^τ)分别为(225.17±49.86)、(484.66±125.63)、(1 042.35±164.69)μg·min·m L-1,不同剂量下AUC0τ)分别为(225.17±49.86)、(484.66±125.63)、(1 042.35±164.69)μg·min·m L-1,不同剂量下AUC0^τ比为1:2.2:4.6,与剂量比1:2:4近似成比例,说明在研究剂量范围内,芍药苷在Beagle犬体内的消除过程是线性的。结论本方法操作简便、灵敏、专属性强,方法学考证符合生物样品测定的要求并成功用于芍药苷在比格犬体内的药物代谢动力学研究。     

顶空气相色谱法测定洛伐他汀原料药中的有机溶剂残留量

目的:建立测定洛伐他汀原料药中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、甲苯4种有机溶剂残留量的方法。方法:采用顶空气相色谱法。色谱柱为DB-624石英毛细管柱,柱温采用程序升温,检测器为氢火焰离子化检测器,检测器温度为280℃,进样口温度为160℃。结果:乙醇、丙酮、乙酸乙酯、甲苯的检测浓度的线性范围分别为10.0～250(r=1.0000)、10.0～250(r=0.9999)、10.0～250(r=0.9999)、1.78～89μg.mL-(1r=0.9997);平均回收率为97.6～99.1(RSD=0.9～1.9),定量限为0.22～5.61μg.mL-1;4批样品中4种有机溶剂残留量均符合《中国药典》2005年版要求。结论:该方法操作简便、精密度好,结果准确、可靠。     

壳聚糖对丙酸倍氯米松凝胶在大鼠体内的促透皮吸收作用研究

目的:考察壳聚糖(CS)对丙酸倍氯米松(BD)凝胶在大鼠体内的促透皮吸收作用。方法:采用高效液相色谱法,考察含1%CS的BD凝胶经皮给药后在大鼠血浆及皮肤中的药物浓度,并与含1%氮酮的BD凝胶及不含透皮促进剂的BD凝胶进行比较。结果:含1%CS的BD凝胶、1%氮酮的BD凝胶及不含透皮促进剂的BD凝胶,其大鼠血浆Cmax分别为(11.2±3.64)、(19.1±5.61)、(3.05±0.11)μg·mL-1,tmax分别为(4.46±0.10)、(4.96±2.39)、(5.15±0.74)h,AUC0～t分别为(142±7.42)、(263±8.68)、(61.7±3.44)μg·h·mL-1;其皮肤Cmax分别为(13.5±4.28)、(19.4±3.55)、(18.9±1.35)μg·mL-1,tmax分别为(3.12±0.30)、(2.68±0.21)、(2.87±0.12)h,AUC0～t分别为(216±4.18)、(285±6.23)、(298±5.29)μg·h·mL-1。结论:CS对BD凝胶具有透皮促吸收作用,但比同浓度氮酮作用弱。     

顶空毛细管气相色谱法测定替卡西林钠原料药中的有机溶剂残留量

目的:建立测定替卡西林钠原料药中甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯6种有机溶剂残留量的方法。方法:采用顶空气相色谱法。色谱柱为DB-624石英毛细管柱,柱温采用程序升温,检测器为氢火焰离子化检测器,检测器温度为250℃,进样口温度为150℃,以水为溶解介质。结果:甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯的检测浓度的线性范围分别为12.0～1200(r=0.9999)、10.0～1000(r=0.9998)、10.0～1000(r=0.9999)、1.20～120(r=0.9997)、10.0～1000(r=0.9998)、1.78～178μg·mL-1(r=0.9996);平均回收率为98.5%～99.6%(RSD=0.6%～2.0%);定量限为0.20～11.80μg·mL-1;3批样品中6种有机溶剂残留量均符合《中国药典》要求。结论:本方法简单、准确、灵敏度高、重复性好,可用于该原料药中有机溶剂残留量的测定。     

厄贝沙坦片在大鼠体内血药浓度的测定及药动学研究

目的:建立厄贝沙坦片给药后大鼠血药浓度的高效液相色谱测定法并进行药动学研究。方法:色谱柱为Consmosil-C18,流动相为磷酸-甲醇-乙腈(7∶80∶13,V/V/V),流速为1.0mL·min-1,检测波长为272nm;大鼠灌胃给予厄贝沙坦水溶液30mg·kg-1后分别在在给药前及给药后0、5、10、20、30、45、60、120、180、240、360、480min测定血浆中厄贝沙坦的浓度,计算药动学参数。结果:厄贝沙坦的检测浓度线性范围为0.5～50μg.mL-(1r=0.999 1);回收率为93.89%,RSD小于4.14%;t1/2、tmax、Cmax、AUC0～t分别为(48.71±4.037)h、(0.33±0.12)h、(1.33±0.18)μg·mL-1、(23.10±1.56)mg·L·h-1。结论:所建立的血药浓度测定方法简单、灵敏、专一,能够满足血药浓度和药动学研究的需要。     

HPLC法同时测定Beagle犬血浆中茴三硫及其代谢物浓度的方法学研究

目的:考察高效液相色谱法同时测定Beagle犬血浆中茴三硫(AT)及其代谢物对羟基苯基三硫酮(ATX)浓度的方法学。方法:用乙腈直接沉淀犬血浆样品中的蛋白质,取上清液进样分析。色谱柱为Diamonsil ODS-C18,流动相为甲醇-水(80∶20),流速为1.0mL·min-1,紫外检测波长为346nm。结果:AT和ATX与犬血浆中的内源性物质完全分离且无其它干扰,保留时间分别为5.5、3.4 min。二者检测浓度线性范围分别为0.254～3.392、0.125～1.664μg·mL-1(r分别为0.999 9、0.999 8);平均回收率分别为(93.89±2.39)%、(96.28±2.83)%;日内RSD分别为0.83%～4.11%、0.55%～1.23%,日间RSD分别为0.71%～4.51%、1.74%～3.92%;最低定量浓度分别为0.254、0.125μg·mL-1。结论:方法学考察结果表明,所建立方法简便、准确、重复性好,可用于犬血浆中AT及ATX的浓度测定。     

HPLC法测定人血浆中非诺贝特酸的浓度

目的:建立非诺贝特酸简便快速的血浆样品提取及准确灵敏的高效液相色谱分析方法。方法:血浆样品加地西泮和乙腈,涡旋振荡,高速离心后进样分析。其中,色谱柱为Eclipse XDB C18,流动相为乙腈∶甲醇∶0.04mmol·L-1乙酸钠(冰乙酸调pH值为3.50)=45∶15∶40,检测波长为296nm。结果:乙腈能够去除绝大部分的血浆杂质,不干扰色谱峰;非诺贝特酸、内标地西泮保留时间分别约为4.10、5.40min。非诺贝特酸检测浓度在0.2~20μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 7);其低、中、高(0.5、5.0、18.0μg·mL-1)浓度的提取回收率分别为100.53%、102.64%、91.81%,日内RSD均<8%,日间RSD均<7%。非诺贝特酸血浆样品预处理室温放置24h及于—20℃冰箱中贮存15d稳定。结论:本方法简便、快速、准确、重现性好,符合生物样品测定要求,适合非诺贝特临床药动学的研究。     

HPLC法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用外标法,以甲醇沉淀法处理血样后进样测定,色谱柱为Intersil ODS-3,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(30∶70),流速为1.0mL·min-1,检测波长为225nm,柱温为27℃。结果:拉莫三嗪血药浓度在0.8～40μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),定量下限为0.5μg·mL-1;平均回收率为(99.35±3.93)%,日内、日间RSD均<5%。20例癫痫患儿拉莫三嗪血药浓度的范围为1.3～15.4μg·mL-1,中位数为4.7μg·mL-1。患儿血浆中拉莫三嗪的血药浓度随年龄的减小,波动范围明显增大。结论:该方法灵敏、准确、简便、快速,适用于拉莫三嗪的血药浓度监测及其药动学研究。年龄越小的患儿,越需要对拉莫三嗪进行血药浓度监测。     

2种丙泊酚注射液犬体内药动学研究

目的:比较2种丙泊酚制剂在犬体内的药动学情况。方法:12只Beagle犬随机交叉单次静脉注射丙泊酚微乳注射液或丙泊酚脂肪乳注射液4mg·kg-1后,采用高效液相色谱法测定丙泊酚血药浓度,用3p97软件计算主要药动学参数,并进行比较。结果:丙泊酚微乳注射液和丙泊酚脂肪乳注射液的药-时曲线均呈二室模型,二者t1/2β分别为(46.40±41.77)、(62.75±51.85)min;AUC(0～)t分别为(27.67±9.60)、(21.90±10.10)μg·min·mL-1,AUC(0～∞)分别为(29.33±13.55)、(28.66±13.76)μg·min·mL-1;经方差分析、双单侧t检验及(1-2α)置信区间法统计分析,药动学参数AUC(0～∞)间无显著性差异(P>0.05)。结论:2种丙泊酚制剂在犬体内的药动学过程相近。