自体骨泥混入骨膜碎片植骨与单纯自体骨泥植骨修复骨缺损的效果对比实验

目的：观察应用白体骨泥混入骨膜碎片修复骨缺损的效果，并与单纯自体骨泥植骨修复，骨缺损的效果作比较。方法：实验于2004-10／2005-02在广西医科大学第四附属医院骨科实验室完成。选择新西兰白兔12只，建立双侧桡骨中段1．5cm&;#215;0．3cm的骨缺损。实验侧（左侧）将髂骨制成的骨泥与髂骨内板骨膜剪成的碎片相混匀后取0．5g植入骨缺损处，对照侧用松质骨骨泥0．5g植入，于术后2,4，6，8，10，12周分别摄X射线片并在麻醉状态下每次处死2只，于骨缺损处两端剪断桡骨，完整取出骨缺损段，分析天平称重，双侧对比，光镜和电镜下观察组织学情况。结果：纳入12只白兔均进入结果分析。①术后12周平均骨质量比较：实验侧明显高于对照侧[（1．31&;#177;0．05，1．12&;#177;0．03）g，（P〈0．05）]。②术后平均骨愈合时间比较：实验侧明显低于对照侧[（3．66&;#177;0．30，4．25&;#177;0．55）周，（P（0．05）]。③光镜下检查结果：4周实验侧除了有大量的新生骨细胞外，开始出现较多的骨小梁等正常结构，对照侧的骨小梁结构较实验侧少；实验侧和对照侧在6周以后的骨痂已经有了正常的骨结构，骨细胞均匀，骨小梁排列整齐。④电镜检查结果：术后2周实验侧与对照侧骨痂组织中均有大量的胶原纤维，在实验侧发现正常的骨祖细胞，而对照侧未发现；4周时实验侧可见较成熟的骨细胞，而对照侧所见到的骨细胞发育较差；两侧6周以后的骨痂组织中均有正常的骨细胞。结论：自体骨泥混入骨膜碎片后成骨愈合能力较单纯自体骨泥植骨明显增强，可提高骨质量，缩短骨愈合时间，促进骨细胞的发育，具有方法简单、不增加手术难度和创伤，效果可靠等优点，为临床工作提供了一种新的植骨方法。     

人骨形态发生蛋白2基因活化纳米骨浆的成骨能力

背景：纳米骨浆在骨缺损修复过程中仅起支架和骨传导作用,不具备骨诱导能力。目的：观察人骨形态发生蛋白2（human bone morphogenetic protein-2,hBMP-2）基因活化纳米骨浆的异位诱导成骨能力和修复骨缺损效果。时间及地点：实验于2006-06/2007-03在华中科技大学同济医学院分子生物中心实验室和协和医院骨科实验室完成。材料：将纳米骨浆与hBMP-2基因真核表达质粒相复合,形成hBMP-2基因局部释放系统。方法：实验一：昆明种小鼠24只右侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆＋hBMP-2质粒作为实验侧,其中12只小鼠左侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆＋空白质粒为对照侧1,另12只左侧注射纳米骨浆为对照侧2。实验二：新西兰白兔54只,其中6只作左桡骨中段骨缺损,不植入材料,为空白对照;另48只制成双侧桡骨中段15mm骨缺损模型,随机分成3组,缺损处分别植入hBMP-2＋纳米骨浆、空白质粒＋纳米骨浆、纳米骨。主要观察指标：实验一：采用放射学、分子生物学和组织形态学等方法检测成骨基因hBMP-2表达和诱导成骨效应。②实验二：取桡骨标本作影像学检查、组织学观察和生物力学检测。结果：实验一：小鼠术后2,4周实验侧有hBMP-2表达。实验侧术后2周出现大量软骨组织和呈岛状散在分布的骨组织,术后4周可见大量成骨组织,新生骨相互融合生长并形成较为成熟的板层骨和骨小梁结构;对照侧未见骨组织形成。实验侧碱性磷酸酶活性明显高于对照侧（P〈0.01）。实验二：术后12周空白对照组骨缺损无愈合,其余3组骨缺损均修复。植入hBMP-2＋纳米骨浆组的碱性磷酸酶水平、成骨速度及新生骨力学强度均明显优于植入空白质粒＋纳米骨浆或纳米骨组（P〈0.05）。结论：经组织学、影像学及生物力学的综合检测验证,纳米骨浆复合hBMP-2质粒后,具有一定的骨诱导作用,植入体内后成骨速度、质量及力学强度较单纯的纳米骨浆明显增强,能够有效修复骨缺损。     

骨形态发生蛋白对去势大鼠股骨颈骨形态、骨密度和骨生物力学的影响

目的:观察在去势大鼠股骨颈植入牛骨形成蛋白后其骨形态、骨密度及骨强度的变化。方法:实验于2006-06/12在解放军兰州军区兰州总医院骨科研究所完成。①实验材料:普通级3个月龄wistar雌性大鼠60只。骨形态发生蛋白冻干粉剂(从幼龄牦牛新鲜长骨皮质中提取)。②实验分组:以同一只大鼠左右肢体为对照,右侧为实验侧,左侧为对照侧。③大鼠摘除卵巢制作绝经后骨质疏松模型经双能X射线骨密度仪检测筛选出造模成功的44只大鼠,实验侧距大转子0.5cm处股骨颈植入牛骨形成蛋白冻干粉剂,对照侧植入牛血清白蛋白。④实验评估:术后4周、8周时麻醉下处死大鼠取材,应用苏木精-伊红染色,组织切片后光镜下观察、CT扫描、双能X射线骨密度仪及万能生物力学机观察大鼠股骨颈骨形态学、骨皮质厚度、骨密度及骨强度的变化。结果:纳入造模成功后的44只大鼠均进入结果分析。①股骨颈骨组织形态学观察:4周时实验侧股骨颈局部骨小梁完整、连续性尚好;对照侧股骨颈局部骨小梁稀少、连续性中断,不完整。8周时实验侧股骨颈骨小梁致密,数量增多、完整,连接成网状结构、分布均匀;对照侧股骨颈骨小梁稀疏、变细、间距变大,呈髓腔扩大。②骨皮质厚度、骨密度及生物力学测定:4周时实验侧和对照侧股骨颈皮质厚度无明显差异,骨密度及最大载荷有明显差异(P<0.05);8周实验侧较对照侧骨皮质厚度明显增加、骨密度、最大载荷均增高[皮质厚度:(2.632±0.042),(1.728±0.034)mm,骨密度:(0.210±0.026),(0.182±0.029)g/mm2,最大载荷:(97.2±8.1),(85.6±7.9)N,P均<0.05]。结论:植入牛骨形成蛋白可以提高去势大鼠股骨颈局部骨皮质厚度、骨密度及生物力学强度,这将可能为绝经后骨质疏松性股骨颈骨折的防治提供一种新的途径。     

可调性Cem-Ostetic^TN人工骨浆和自体富血小板血浆复合物修复骨不连的实验研究

目的探讨复合富血小板血浆（PRP）和可调性Cem-Ostetic^TM人工骨浆对管状骨骨不连的修复作用。方法新西兰大白兔28只,在双侧前臂桡骨中上段截除1．5cm骨段（包括骨膜）,骨断端用骨蜡封闭髓腔,制成骨不连模型。取其中24只,一侧桡骨作实验侧,骨不连处填入复合PRP的人工骨浆;另一侧为对照侧,仅填人人工骨浆,另外4只作为空白对照组。分别在术后第2、4、8和12周通过大体观察、X线片、组织学及生物力学检测等手段观察桡骨愈合情况。结果术后第2周,实验侧和对照侧的新生纤维组织和骨组织均主要集中在截骨端,实验侧新生组织略多于对照侧。第4、8周,实验侧人工骨表面及孔隙内被大量新生骨组织覆盖和填充,人工骨与宿主骨桥接紧密;对照侧的新生骨组织主要限于人工骨两端,且相对实验侧较幼稚。第12周,实验侧骨缺损完全修复,髓腔再通;对照侧断端间新骨形成骨桥,但尚未见到髓腔再通,空白对照组均未见骨痂。结论复合富血小板血浆（PRP）和可调性Cem-Ostetic^TM人工骨浆对管状骨骨不连的修复有促进作用。     

自体骨泥混入骨膜碎片植骨与单纯自体骨泥植骨修复骨缺损的效果对比实验

目的:观察应用自体骨泥混入骨膜碎片修复骨缺损的效果,并与单纯自体骨泥植骨修复,骨缺损的效果作比较。方法:实验于2004-10/2005-02在广西医科大学第四附属医院骨科实验室完成。选择新西兰白兔12只,建立双侧桡骨中段1.5cm×0.3cm的骨缺损。实验侧(左侧)将髂骨制成的骨泥与髂骨内板骨膜剪成的碎片相混匀后取0.5g植入骨缺损处,对照侧用松质骨骨泥0.5g植入,于术后2,4,6,8,10,12周分别摄X射线片并在麻醉状态下每次处死2只,于骨缺损处两端剪断桡骨,完整取出骨缺损段,分析天平称重,双侧对比,光镜和电镜下观察组织学情况。结果:纳入12只白兔均进入结果分析。①术后12周平均骨质量比较:实验侧明显高于对照侧[(1.31±0.05,1.12±0.03)g,(P<0.05)]。②术后平均骨愈合时间比较:实验侧明显低于对照侧[(3.66±0.30,4.25±0.55)周,(P<0.05)]。③光镜下检查结果:4周实验侧除了有大量的新生骨细胞外,开始出现较多的骨小梁等正常结构,对照侧的骨小梁结构较实验侧少;实验侧和对照侧在6周以后的骨痂已经有了正常的骨结构,骨细胞均匀,骨小梁排列整齐。④电镜检查结果:术后2周实验侧与对照侧骨痂组织中均有大量的胶原纤维,在实验侧发现正常的骨祖细胞,而对照侧未发现;4周时实验侧可见较成熟的骨细胞,而对照侧所见到的骨细胞发育较差;两侧6周以后的骨痂组织中均有正常的骨细胞。结论:自体骨泥混入骨膜碎片后成骨愈合能力较单纯自体骨泥植骨明显增强,可提高骨质量,缩短骨愈合时间,促进骨细胞的发育,具有方法简单、不增加手术难度和创伤,效果可靠等优点,为临床工作提供了一种新的植骨方法。     

自体微小颗粒骨复合牛骨形态发生蛋白修复骨缺损

目的：观察自体微小颗粒骨复合牛骨形态发生蛋白的成骨效果。方法：实验于2002-10／2003-05在哈尔滨医科大学附属第二医院动物实验中心完成。将30只新西兰白兔两侧桡骨干中段造成1．5cm长骨缺损模型，随机分为实验组21只，空白对照组9只。其中实验组左侧植入颗粒骨＋骨形态发生蛋白，右侧植入颗粒骨；空白对照组双侧植入明胶海绵。分别于术后2，4，12周实验组各取7只、空白对照组各取3只对兔桡骨植入物进行大体形态、放射学检查及组织学检查，12周进行生物力学试验。结果：纳入免30只，均进入结果分析。①兔桡骨植入物大体、X射线与组织学检查结果：术后12周实验组两种方法均可以修复节段性骨缺损，但左侧无论从成骨时间及成骨效果上都要优于右侧，空白对照组无骨愈合现象。②兔桡骨植入物生物力学测试结果：证明实验组左侧在最大应力方面要优于右侧[（101．03&;#177;12．49），（7371&;#177;9．75）N，P〈0．051；在弹性模量上二者无显著性差异。结论：自体微小颗粒骨可较好的修复骨缺损，但复合骨形态发生蛋白后在成骨时间和成骨质量上更优。     

带负电荷硫酸钙/β-磷酸三钙复合骨水泥在椎体成形中的应用

背景：新型带负电荷硫酸钙/β-磷酸三钙复合骨水泥具有成骨效应,但目前尚无其应用于椎体成形的相关研究。目的：通过动物实验评估新型带负电荷硫酸钙/β-磷酸三钙复合骨水泥在体内的生物力学性质及成骨性能。方法：取30只新西兰大白兔建立骨质疏松模型4周后,在每只兔L 3、L 5椎体中央制造骨缺损,分别注射新型带负电荷硫酸钙/β-磷酸三钙复合骨水泥（实验组）与聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥（对照组）,L 1椎体为未干预的骨质疏松模型。于术后3,6个月各处死15只,取3组椎体进行Micro-CT分析及生物力学实验。结果与结论：①MicroCT三维重建显示,术后3个月时,实验组骨小梁三维结构参数明显优于对照组（P＜0.05）,与骨质疏松模型组无显著差别（P＆gt;0.05）;术后6个月时,实验组骨小梁三维结构参数明显优于对照组和骨质疏松模型组（P均＜0.05）。②术后3个月时,实验组椎体强度明显小于对照组（P ＜0.05）,但高于骨质疏松模型组（P ＜0.05）;椎体刚度小于对照组和骨质疏松模型组（P均＜0.05）。术后6个月时,实验组椎体强度与对照组接近（P ＆gt;0.05）,但高于骨质疏松模型组（P ＜0.05）;椎体刚度与对照组和骨质疏松模型组无差异（P ＆gt;0.05）。表明新型带负电荷硫酸钙/β-磷酸三钙复合骨水泥可以迅速有效地提高椎体生物力学强度,具有诱导成骨效应。     

富血小板纤维蛋白/异种冻干骨复合物修复骨缺损及骨整合的作用

背景：异种冻干骨具有很好的骨引导性及低抗原性,但骨诱导性相对较差;自体富血小板纤维蛋白具有很好的诱导成骨能力。目的：观察富血小板纤维蛋白/异种冻干骨复合物在修复种植体周骨缺损及骨整合过程中的作用。方法：取新西兰大白兔12只,于双侧下颌无牙区造极限骨缺损模型。在两侧缺损区的近中、远中端骨壁各植入1枚钛螺纹钉,使种植体临近缺损侧无骨支持,右侧缺损区填压入自体富血小板纤维蛋白/异种冻干骨复合物,作为实验组;左侧缺损区填入异种冻干骨,作为对照组。植入4,8,12周后取完整下颌骨标本进行大体形态观察、植体扭矩测试及组织学观察。结果与结论：植入4周时,实验组可见新生血管,成骨细胞数量多,呈单层紧密排列在新生骨小梁的表面;对照组可见炎性细胞浸润,纤维组织增多,新生血管稀疏,成骨细胞及新生骨数量较实验组少。植入8周时,实验组见大量新生血管,骨小梁密集,呈网状连接,部分已逐渐融合成岛状;对照组新生血管较实验组少,骨小梁纤细,散乱。植入12周时,实验组新生骨组织成熟,骨小梁钙化程度高,可见形成板状新骨;对照组骨小梁融合成片,趋向成熟,但成熟度不及实验组。实验组不同时间点种植体-骨结合强度高于对照组（P 〈0.05）。表明富血小板纤维蛋白/异种冻干骨复合物具有很好的骨修复与骨整合能力。     

磷酸钙骨水泥强化椎弓根螺钉固定的生物力学特性

背景：聚甲基丙烯酸甲酯能改善椎弓根螺钉和周围骨质间界面的情况，显著提高螺钉固定强度，但它在术中和术后伴有聚合热损伤效应。毒性和不可吸收等特点。磷酸钙骨水泥具有生物相容性和生物安全性好，可降解，不产生聚合热等优点，是一种较理想的聚甲基丙烯酸甲酯替代材料。目的：从生物力学方面评价磷酸钙骨水泥对椎弓根螺钉固定的强化作用。设计：随机对照，重复观察测量。单位：南京医科大学第二附属医院骨科。材料：实验于2002—08／2003—02在华中科技大学同济医学院完成。①由同济医科大学解剖教研室提供两具新鲜男性尸体椎骨，一具52岁，一具50岁。各取10个椎骨（T8-12，L1-5）分别构成52岁组和50岁组。摄X线片排除先天性畸形、骨折和肿瘤等病变。两组椎骨均为Ⅰ级骨质疏松，符合实验要求。②磷酸钙骨水泥固相主要成分是磷酸四钙和磷酸三钙超细粉末，液相主要成分是构橼酸盐溶液，使用时按1g固相：1mL液相的比例进行配制，初步凝固时间15min，最终凝固时间12h，最大压缩强度介于45-57MPa。③椎弓根螺钉自制，螺钉直径5mml，螺纹段长34mm，螺距2mm，螺纹深0．8mm。方法：①磷酸钙骨水泥最终凝固时强化椎弓根螺钉固定的生物力学测试：取50岁组椎骨作为测试对象。对照侧：钉道直接置人椎弓根螺钉；强化侧：填人磷酸钙骨水泥再置人椎弓根螺钉。置钉后的椎骨在37℃恒温箱里放置12h，然后测定椎弓根螺钉的最大轴向拔出力。②磷酸钙骨水泥初步凝固时强化椎弓根螺钉固定的生物力学测试：取52岁组椎骨作为测试对象。用同样方法在椎弓根对照侧直接置人椎弓根螺钉，强化侧填入骨水泥后再置人椎弓根螺钉，37℃恒温箱里放置15min，测定椎弓根螺钉初步凝固时的最大轴向拔出力。③磷酸钙骨水泥强化松动椎弓根螺钉固定的生物力学测试：取测试后的50岁组椎骨，用磷酸钙骨水泥重新固定12h后拔松的椎弓根螺钉，测定其两侧的最大轴向拔出力。主要观察指标：①磷酸钙骨水泥最终凝固时强化椎弓根螺钉固定的生物力学测试结果。②磷酸钙骨水泥初步凝固时强化椎弓根螺钉固定的生物力学测试结果。③磷酸钙骨水泥强化松动椎弓根螺钉固定的生物力学测试结果。结果：（1）50岁组对照侧和强化侧的椎弓根螺钉最大轴向拔出力中位数分别为620N和1136N，强化侧较对照侧增加83％（P〈0．01）。强化骨一螺钉界面的抗剪切应力中位数从1．16N／mm^2增加到2．13N／mm^2。②52岁组对照侧和强化侧的椎弓根螺钉最大轴向拔出力中位数分别为554．5N和859．5N，强化侧较对照侧增加55％（P〈0．01）。强化骨-螺钉界面的抗剪切应力中位数从1．039N／mm^22增加到1．61N／mm^2.（3）50岁组椎骨对照侧和强化侧重新固定12h后最大轴向拔出力中位数分别为517N和876N，和同侧松动后轴向拔出力中位数比较，分别增加了63，6％和54.2％（P均〈0．01）。结论：磷酸钙骨水泥初步凝固和最终凝固时能强化椎弓根螺钉的固定，并且椎弓根螺钉松动后使用磷酸骨水泥能使螺钉重新获得固定。椎体强化侧的椎弓根螺钉均从骨-螺界面剥离开来，不伴周边骨质和椎弓根的严重损害，有利于螺钉松动、拔出后的二次置入。     

胶原膜引导下同种骨颗粒修复免桡骨节段性缺损

背景：胶原膜是一种可吸收引导成骨材料,同种异体骨是较为理想的骨替代材料,但单独应用均有其不足,拟将两种材料结合使用以期达到理想效果。目的：利用膜引导组织再生技术,观察胶原膜复合同种骨颗粒修复兔桡骨节段性骨缺损的成骨速度和质量,并与单纯胶原膜进行比较。设计、时间及地点：同体对照观察实验,于2004—09／2005-02在中国辐射防护研究院医用组织库中心实验室完成。材料：胶原膜规格20mm&#215;20mm,由北京天新福医疗器材有限公司提供。同种异体骨颗粒按美国组织库标准制备,直径0．2-0．7mm,由山西省医用组织库提供。方法：健康成年新西兰大白兔40只,制备双侧15mm桡骨缺损模型,采用同体对照方法,实验侧（左侧）缺损区移植胶原膜及同种骨粒,对照侧（右侧）仅移植胶原膜。主要观察指标：光镜组织学观察骨缺损愈合情况,计算机图像分析仪计算骨小梁的成骨面积,扫描电镜观察缺损再生修复情况。结果：①光镜组织学变化：实验侧新骨增生明显,迅速,以膜性化骨及软骨内化骨的方式由骨缺损周围向中央成骨或以同种骨粒为中心由周围向骨粒内成骨,最后骨膜形成,新髓腔不断扩大、再通,骨重建顺利,缺损修复完成。对照侧成骨方式以软骨化骨为主,新骨形成较同期实验侧慢,新骨成熟度不如实验组。②成骨面积图像分析：结果显示术后2,4,8周新生骨小梁成骨面积均大于同期对照侧（P〈0．05）。③扫描电镜观察：术后8周实验侧有较多分泌胶原的成骨细胞和带有较多突起的骨细胞,钙盐沉积,骨质排列开始有序。对照侧软骨与类骨质互相存在,低倍下骨基质排列无序,胶原纤维编织样排列。术后12周实验侧骨质排列有序,胶原粗大排列整齐,大量骨细胞方向有序,大量钙盐沉积,可见哈佛氏管和血管。对照侧骨质排列有序,但胶原纤维较细、基质钙化程度不如实验侧。结论：两种方法均能成骨修复缺损,但胶原膜复合同种异体骨粒组成骨速度快,且成骨质量优于单纯胶原膜组。     

体外冲击波治疗家兔股骨头坏死的实验研究

目的 探讨体外冲击波对物理损伤型和激素型兔股骨头坏死的影响，并阐述其作用机理。方法 22只日本大耳白兔，按随机数字表分为冷冻致股骨头缺血性坏死组(A组)和激素致股骨头缺血性坏死组(B组)，每组各11只，双后肢制造股骨头坏死模型。所有实验兔右后腿作为治疗侧，采用电压为12kV，频率为60次／min，冲击量为1000次的体外冲击波治疗；左后腿作为对照侧，不予治疗。分别于治疗后2，4和8周将兔处死，并拍摄X线片，切片后于光镜和电子显微镜下观察。结果 治疗后第8周X线片示实验兔治疗侧股骨头塌陷程度均比对照侧轻；治疗侧空骨陷窝率、血管数和成骨细胞计数与对照侧比较，差异均有统计学意义。结论 冲击波疗法对冷冻致股骨头缺血性坏死和激素致股骨头缺血性坏死均有较好疗效，其作用机制可能与冲击波治疗使血管再通或促进成骨细胞成骨有关。     

医用TH胶栓塞建立月骨缺血性坏死兔模型

背景：目前缺乏与人类月骨缺血性坏死病理过程类似的Kienb？ck病动物模型。〈br〉 目的：采用医用TH胶栓塞法建立一种新型月骨缺血坏死兔模型,并探讨造模方法的合理性。〈br〉 方法：选择健康成年新西兰兔30只,雌雄不限。采用自身对照方法随机分为实验侧和对照侧,实验侧采用月骨中心钻孔,注射医用TH胶0.2 mL,反复注药3次;对照侧月骨中心钻孔注射同等量的生理盐水。于实验4,8,12周行X射线、大体观察、Micro-CT 骨计量学及组织病理学检测。 结果与结论：大体标本、X射线及组织学检测结果可见实验侧造模后8周月骨出现缺血坏死表现,12周月骨缺血坏死更为典型。Micro-CT 骨小梁微观参数中,实验侧骨小梁密度参数骨体积分数及骨小梁数量均明显低于对照侧（P＜0.05）;骨小梁空间参数明显增高,其中实验侧骨小梁离度及结构模型指数明显高于对照侧。提示注射医用TH胶栓塞后8周实验侧出现月骨缺血坏死表现,注药后12周可建立月骨缺血坏死兔模型,可以实现在周围组织无明显损伤情况下出现月骨内血运受损、骨小梁骨折、空骨陷窝等与人类月骨坏死类似的改变。     

应力条件下微小骨折块的愈合

背景:应力刺激可以促进四肢长骨干骨折愈合。目的:观察应力因素对微小骨折块愈合的影响。方法:制作兔双侧股骨大转子劈裂撕脱微小骨折模型,一侧采用克氏针固定(对照组),另一侧采用拉力螺钉置入固定(实验组)。结果与结论:①X射线表现:实验组骨痂生长速度较对照组快,外骨痂量多,灰度高,骨痂塑型时间短。②CT表现:实验组内外骨痂生长速度比对照组要快,骨折处塑形较对照组好。③骨痂组织切片光镜观察发现,两组骨折愈合都表现为软骨内成骨方式,实验组血肿消失、机化较快,修复性纤维组织较早被软骨性骨痂取代,骨痂生长旺盛,断端骨痂愈合早且快,而且软骨性骨痂骨化、骨样小梁转化为编织骨均较对照组早,骨改建塑型亦较对照组好。④实验组和对照组骨折间隙内骨痂钙、磷元素的含量术后均逐渐升高至6周后开始下降,4周时实验组钙磷含量指标明显高于对照组(P<0.01)。表明微小骨折块的愈合方式表现为软骨内成骨,适宜的加压固定较不加压固定骨折块周围组织水肿消退快,炎性反应小,骨痂中钙磷沉积早,含量大,骨折愈合时间短,骨痂质量好塑型快。     

骨髓间充质干细胞自体移植促进兔缺血肢体的血管生成

背景:常规药物治疗、介入或血管旁路移植手术对下肢动脉闭塞症的远期疗效均不理想。近年来采用干细胞的血管再生疗法在梗死部位修复或重新建立有效侧支循环逐渐成为可能。目的:验证骨髓间充质干细胞自体移植对兔缺血后肢血管再生的促进作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-08/2006-11在江苏省血吸寄生虫病防治研究所完成。材料:选用新西兰大白兔8只,制备兔后肢缺血模型。按随机数字表法分为2组,实验组及对照组各4只。方法:分离培养实验组兔骨髓间充质干细胞,5-溴-2-脱氧尿苷标记,将骨髓间充质干细胞制成悬液注射于实验组兔后肢缺血部位;对照组注射等量生理盐水。主要观察指标:2周后行兔股动脉二维及彩色多普勒超声检测,观察移植前后的血管内径、血流峰值速度及血流加速时间等;取缺血部位肌肉组织,通过免疫荧光及苏木精-伊红染色观察移植细胞分布及血管生成情况。结果:细胞移植2周后实验组兔的股动脉内径、血流峰值速度均大于对照组(P<0.01),血流加速时间短于对照组(P<0.01)。免疫荧光染色结果显示实验组兔移植部位有抗5-溴-2-脱氧尿苷染色阳性细胞存在;苏木精-伊红染色结果显示实验组缺血部位血管密度高于对照组。结论:骨髓间充质干细胞具有促进血管生成的作用,自体移植可望成为一种简单的、有效的治疗下肢缺血的方法。     

葛根素在兔牙周组织改建中的作用

背景：研究发现葛根素对体外骨形成具有一定的促进作用。目的：葛根素在牙周组织改建中的作用。方法：33只兔随机分成空白对照组3只、阴性对照组15只和和实验组15只。给兔双侧下颌第1磨牙安装加力装置,均加力14d结束后,安装保持器装置,保持期对照组耳缘静脉注射生理盐水,实验组给予葛根素注射液。分别于加力保持1,3,7,14,21d,每个时间点各处死3只,取组织标本。结果与结论：实验组：第1天远中侧可见新骨形成,边缘有成骨细胞,近中侧可见较多的破骨细胞;第14,21天近远中侧均明显的新骨堆积,致密的骨小梁形成。阴性对照组：第1天组与实验组类似;第14天近远中侧均有新骨形成,见未完全钙化的类骨质,骨吸收陷窝消失,表面见成骨细胞;第21天近远中侧均见大量新骨形成。与阴性对照组比较,各时间点实验组骨形态发生蛋白2的表达量高于阴性对照组,第7,14,21天两组表达量差异有显著性意义（P〈0.05）。实验组骨形态发生蛋白2的表达呈逐渐增强的趋势,阴性对照组骨形态发生蛋白2的表达呈逐渐减少的趋势。实验组与阴性对照组骨形态发生蛋白2的表达均强于空白对照组（P〈0.05）。提示葛根素可能在保持期通过上调骨形态发生蛋白2的表达而促进成骨细胞抑制破骨细胞从而缩短保持期时间。     

应力条件下微小骨折块的愈合

背景：应力刺激可以促进四肢长骨干骨折愈合。目的：观察应力因素对微小骨折块愈合的影响。方法：制作兔双侧股骨大转子劈裂撕脱微小骨折模型,一侧采用克氏针固定（对照组）,另一侧采用拉力螺钉置入固定（实验组）。结果与结论：①X射线表现：实验组骨痂生长速度较对照组快,外骨痂量多,灰度高,骨痂塑型时间短。②CT表现：实验组内外骨痂生长速度比对照组要快,骨折处塑形较对照组好。③骨痂组织切片光镜观察发现,两组骨折愈合都表现为软骨内成骨方式,实验组血肿消失、机化较快,修复性纤维组织较早被软骨性骨痂取代,骨痂生长旺盛,断端骨痂愈合早且快,而且软骨性骨痂骨化、骨样小梁转化为编织骨均较对照组早,骨改建塑型亦较对照组好。④实验组和对照组骨折间隙内骨痂钙、磷元素的含量术后均逐渐升高至6周后开始下降,4周时实验组钙磷含量指标明显高于对照组（P〈0.01）。表明微小骨折块的愈合方式表现为软骨内成骨,适宜的加压固定较不加压固定骨折块周围组织水肿消退快,炎性反应小,骨痂中钙磷沉积早,含量大,骨折愈合时间短,骨痂质量好塑型快。     

以小肠黏膜下层基质为支架复合骨髓间充质干细胞构建组织工程仿生骨膜:在兔体内的成骨及其血管化

目的:探讨组织工程仿生骨膜同种异体内成骨修复骨缺损及其血管化的可能性.方法:以猪小肠黏膜下层基质为支架复合体外培养的新西兰大白兔骨髓间充质干细胞构建组织工程仿生骨膜.2个月龄新西兰大白兔12只,制备双侧桡骨临界骨缺损模型.随机选一侧植入组织工程仿生骨膜,作为实验组;另一侧仅植入单纯小肠黏膜下层基质,作为对照组.植入后观察动物一般情况;植入4周时,以四环素荧光标记法、甲醛-墨汁灌注法,观察工程骨组织的血管化情况,同时以苏木精-伊红染色观察新骨组织形成.结果:术后动物饮食及日常行为基本正常;伤口无红肿、溢脓等.大体标本观察见实验侧骨缺损得到初步修复,而对照侧骨缺损未修复.四环素荧光标记及组织学染色均证明实验侧骨缺损处有新生骨组织;甲醛-墨汁灌注标本检测证明工程骨组织中有较丰富的血管形成.结论:所构建的组织工程仿生骨膜在同种异体体内可以成骨,并可血管化成活.     

应用鼠神经生长因子修复周围神经损伤对骨质疏松的影响

背景：神经损伤后骨质疏松症发生机制与其他原因造成的失用性骨质疏松症不完全相同,在其发生发展过程中可能蕴含着更为复杂的因素,除了失去应力刺激外,细胞因子异常、神经功能的异常、激素水平的改变均参与了神经损伤后骨质疏松的发生。目的：通过活体动物实验探讨神经损伤后和骨质疏松的相互关系。方法：雄性SD大鼠随机分为正常对照组和失神经组,失神经组大鼠切断股骨神经造成失神经支配模型,然后分为模型对照组和失神经支配注射鼠神经生长因子组（神经生长因子组）。神经生长因子组在两侧下肢腓肠肌处部位注射鼠神经生长因子0.2 mL,频率1次/d,失神经支配对照组注射同等量生理盐水,正常对照组不做处置。30 d后称质量、取血、处死动物,取股骨进行骨组织计量学检查。结果与结论：失神经支配大鼠注射鼠神经生长因子后,体质量、骨小梁量与模型对照组相比具有明显增加,提示局部予以鼠神经生长因子治疗可明显减轻失神经支配后大鼠骨质疏松的程度,并可减弱因失神经导致的体质量减轻,而各组的血钙磷浓度无明显改变。说明神经性骨质疏松的发生并非源自钙磷流失,而是由骨小梁的结构改变所致,同时外源性鼠神经生长因子在神经性瘫痪后骨质疏松的恢复中具有积极意义。     

β-磷酸三钙支架材料即刻植入对保存剩余牙槽嵴的影响

背景:拔牙后在牙槽窝内即刻植入成骨材料,如脱蛋白小牛骨、羟基磷灰石、硬组织代用品、人脱钙冻干骨等,可防止或延缓牙槽嵴在拔牙后的快速、持续吸收。目的:观察β-磷酸三钙支架材料即刻植入对剩余牙槽嵴保存的影响。方法:完整拔除18只新西兰大白兔双侧下颌中切牙,一侧牙槽窝内即刻植入β-磷酸三钙作为实验组,另一侧不处理作为对照组。术后4,8,12周测量剩余牙槽嵴长度、宽度、高度;甲苯胺蓝染色观察术区牙槽嵴愈合过程中的组织病理改变,X射线观察术区牙槽嵴骨密度改变,扫描电镜观测β-磷酸三钙与拔牙窝骨小梁的结合界面。结果与结论:术后8,12周时,实验组牙槽嵴高度、宽度及长度均高于对照组(P<0.05)。随着时间的延长,实验组拔牙窝内可见成骨细胞散在分布,新生骨小梁逐渐增多,血管网由稀疏变得丰富,新生骨与β-磷酸三钙结合日益紧密,并且β-磷酸三钙不断降解,与拔牙窝牙槽骨交界处有新生骨组织形成。说明β-磷酸三钙具有良好的骨传导特性及生物相容性,拔牙后即刻植入β-磷酸三钙材料可有效保存剩余牙槽嵴解剖形态,防止牙槽嵴的进一步吸收。     

注射型可吸收聚氨基酸/硫酸钙复合材料动物体内降解吸收及促成骨作用

背景：注射型人工骨可经皮穿刺注射植入体内,对机体创伤较小,同时该型材料可以任意塑形,能较好地充填骨缺损,但目前临床上尚无在体内能完全降解吸收且具有较好促成骨作用的注射型人工骨产品。目的：评估注射型可吸收聚氨基酸/硫酸钙复合材料（硫酸钙含量70%）动物体内的降解吸收及促成骨作用,观察其修复骨缺损的能力。方法：取48只新西兰大白兔,在股骨外髁处制备直径为5mm、深10mm的骨缺损模型,以随机数字表法分为实验组和对照组,实验组将注射型可吸收聚氨基酸/硫酸钙复合材料植入骨缺损处,对照组未予干预。结果与结论：X射线平片示：实验组骨缺损逐渐被骨痂填充,术后16周,骨缺损处恢复正常松质骨密度,塑形完成;对照组骨缺损处修复不明显。组织学检查（苏木精-伊红、MASSON染色）示：术后4周,材料开始降解,新生原始骨小梁长入材料内;术后12周,编织骨开始转化为板层骨;术后16周,材料完全被降解吸收,新生骨组织完全修复骨缺损。结果显示注射型聚氨基酸/硫酸钙复合材料在动物内能够完全降解、吸收,具备一定的成骨活性,可望用作骨修复材料。