林县互隔交链孢霉素B的分离纯化研究

在测定了林县互隔交链孢霉素A的化学结构并对其致突变作用研究的基础上,我们进一步对互隔交链孢霉261株产生的毒素B组份进行了分离纯化。经TLC和硅胶柱层析纯化,获得了互隔交链孢霉素B,在二氯甲烷:甲醇:水(55:4:4)中TLC,它的Rf值为0.10。它在长波紫外光下显示黄色荧光的特性表明:它是一种荧光活性物质。经美国威斯康辛大学朱繁生教授初步鉴别,认为它与Altenuene相同,互隔交链孢霉素B对大肠杆菌ND—160具有致突变作用。     

荧光分光光度法检测豚鼠血中AME

已用多种方法证明AME(互隔交链孢霉A)具有致突变性和致癌性。而且许多研究结果表明,在食管癌高发区林县粮食中的优势污染菌之一——互隔交链孢霉的主要代谢物AME在食管癌病因中起一定作用,     

林县互隔交链孢霉素A的分离结构鉴定和致突变性研究

交链孢霉能够引起多种植物疾病,如烟草的棕色斑点症;土豆,西红柿的枯萎症;日本梨的黑点症等。其原因是由于交链孢霉能     

河南省食管癌高低发区粮食中互隔交链孢霉毒素的化学检测

互隔交错孢霉毒素从随机采集于食管癌高低发区粮食样品中被提取后,用化学方法纯化,再经薄层层析(TLC)检测。结果显示:高低发区粮食中毒素的阳性率有显著差异,提示高发区互隔交链孢霉毒素在粮食中的广泛存在与食管癌的发生有密切关系。     

经交链孢酚处理胎儿食管上皮组织中EGFr,Rb基因的扩增

目的：探讨互隔交链孢霉诱导食管癌的发生机制。方法：用交链孢酚（ＡＯＨ）体外处理不同时间胎儿食管上皮组织,提取组织的ＤＮＡ,从１０例食管癌组织及１０例癌旁组织中分别提取ＤＮＡ,设正常胎儿食管上皮ＤＮＡ为对照。ＥｃｏＲＩ酶切,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移,与ＥＧＦｒ癌基因,Ｒｂ抗癌基因探针杂交。结果：正常对照组中ＥＧＦｒ、Ｒｂ无扩主丢失;ＡＯＨ诱导２４ｈ１周和３周的胎儿食管上皮未抗癌基因Ｒｂ的丢失,食管癌组织     

互隔交链孢霉在人食管癌病因学中的意义

霉菌在食管癌病因学中的意义,70年代开始受到人们的关注,现已有多篇综述。甄应中等报道河南省五个食管癌高发县粮食互隔交链孢霉(Alternatia alternata)的污染率高于三个低发县粮食中的污染率。之后,一些研究者相继研究了该菌培养物的粗提物的     

交链孢酚单甲醚对人胚肺2BS细胞DNA含量和细胞周期的影响

用显微分光光度计方法研究了食管癌高发区林县粮食中分离的优势污染菌互隔交链孢霉提取物交链孢酚单甲醚(AME)对人胚肺成纤维细胞(2BS株)的DNA含量和细胞周期的影响。结果发现:AME作用人胚肺2BS细胞两个倍增时间后,随着AME浓度的加大,G_1期细胞峰(2C细胞)降低,出现了较高的G_2+M期细胞峰(4C细胞),S期细胞增加,分裂指数降低.并出现了一些非整倍体的细胞,这些改变与对照组相比较有显著性差异。说明AME可以抑制人胚肺2BS细胞的周期,使S期细胞受阻,堆积和损伤,导致非整倍体细胞出现,这些将有可能成为细胞突变的遗传基础。从而为互隔交链孢霉与林县人食管癌的发生可能有一定关系的说法提供了实验佐证。     

大量互隔交链孢霉代谢物的提取分离与纯化

用简单硅胶柱层析系统及实验室常用仪器和试剂,从大量互隔交链孢霉培养物中提取分离与纯化出七种化学物质(其中有些是已知化合物),避免了使用大型仪器设备和昂贵的药品。     

酶联免疫吸附试验检测食管癌高、低发区粮食中交链孢酚单甲醚的研究

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，分别对食管癌高发区林县和低发区商丘各６４份粮食（玉米３２份、小麦３２份）中交链孢酚单甲醚（ＡＭＥ）进行检测。结果：林县６４份粮食中检出ＡＭＥ２５份，阳性率为４０．３％；商丘６４份粮食中有１５份阳性，阳性率为２３．４％。两者比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。不论是小麦还是玉米，ＡＭＥ含量林县均高于商丘，这与粮食中互隔交链孢霉污染情况相符。结果提示：ＡＭＥ可能是人食管癌的病因之一。     

互隔交链孢霉毒素AME和AOH合成物的诱变性

对互隔交链孢霉毒素——交链孢酚单甲醚(Alternariol monomethyl ether,AME)和交链孢酚(Alternariol.AOH)的合成物进行了细菌回复突变试验.检测其诱变性。结果表明:AME和AOH提取物和合成物(不加S_9)对鼠伤寒沙门氏菌TA102菌株和大肠菌ND-160菌株.均显示致突变效应.而后者对AME和AOH更为敏感。用相同剂量.AOH对大肠杆菌ND—160菌株诱变比值(MR)比AME高2～7倍,表明AOH的诱变性更强。合成物与提取物相比,合成物的诱变作用较强。     

用多元分析法研究朝鲜族成人掌骨

本文在93例朝鲜族成人的手部X线片上测量了掌骨长度,并用多元分析法研究了掌骨与身高及性别的关系。由掌骨长度推算身高的多元回归方程式为男左侧Y=81.2016十06548X_1+O.4425X_2+0.3172X_3一O.5384X_4+O.1498X_5;女左侧Y=96.6148+0.0169X_1+0.5096X_2+0.5919X_3+0.1913X_4一0.3956X_5s。由掌骨长度和身高判定性别的多元回归方程式为Y=-6.0517+0.0757X_l—0.0167X_2一0.0296X_3—2.2417X_4+O.0130X_5+0.0407X_6。分界数为1.4624,使用时所算出的Y值大于分界数则为男性,否则为女性。     

通过骨盆外测量推算中骨盆径的多元回归方程

以126例生育年龄非妊娠女工的髂结节间径、髂前上棘间径、大转子间径及坐骨结节间径为自变量估计因变量中骨盆横径,求出多元回归方程y=-6.89+0.05X_1+0.12X_2+0.23X_3+0.77X_4;以骶耻外径和骨盆倾斜度为自变量估计因变量中骨盆矢径,其回归方程为y=6.09+0.39X_1-0.05X_2;方差分析结果F值分别为40.59与8.26.均具有高度显著性;对偏回归系教进行显著性检验及进行逐步回归分析,得出最优方程为y=-6.87+0.16X_2+0.24X_3+0.78X_4与y=4.20+0.37骶耻外径,F检验结果F值分别为5.410与16.29,均具有极显著意义,可以应用于临床对中骨盆径的估计以取代X线测量.     

202例胎儿测量数据的多元回归分析

本文对202例胎儿测量的数据进行了多元线性回归分析和逐步回归分析,包括胎儿身长(x_1),顶臀长(x_2)、枕额径(x_3)、双顶径(x_4)、头围(x_5)、胸围(x_6)、腹围(x_7)和体重(x_8)等八个自变量与应变量胎龄(y)的关系,即:y=b_0十b_1x_1+b_2x_2+b_3x_3+b_4x_4+b_5x_5+b_6x_6+b_7x_7+b_8x_8的多元回归方程。结果各项指标均与胎龄有明显的相关性,其中x_1、x_3、x_5、x_6、x_7、x_8与胎龄的相关性最大。     

温带臭虫殖(Cimex lectularius Linn.)精巢生殖细胞染色体及血淋巴蛋白和游离氨基酸型的研究

采用南京地区在实验室逐代繁殖的温带臭虫(Cimex lectularius Linn.)作样本。实验结果表明,南京地区雄性温带臭虫的精原细胞染色体数目为29个(2n=29,即26+X_1X_2Y),属非超数性染色体类型。另用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳及岛津920薄板扫描方法,测得雌、雄成虫的血淋巴蛋白均显现带型相似的11条谱带,其中有6条主谱带明显。又用超微量氨基酸薄膜层析荧光分析法对成虫血淋巴中的11种氨基酸进行定量分析,以脯氨酸的含量最高。     

几项补体测定指标间相关性分析

对６８例志愿者与患者作了血清总补体溶血活性，旁路途径溶血活性，Ｃ４活性与含量，Ｂ因子的活性与含量，Ｃ３含量测定。活性测定用免疫溶血法，含量测定用单扩散法。结果表明，经典途径指标中Ｃ４活性检出补体水平异常的阳性率为最高、旁路途径指标中则以ＢＦ活性阳性率最高。     

Role of CX3CL1 in the chemotactic migration of all-trans retinoic acid-treated acute promyelocytic leukemic cells toward apoptotic cells

BackgroundPhagocytic clearance of apoptotic neutrophils by tissue macrophages is a crucial component in the resolution phase of acute inflammation. However, the number of tissue macrophages is low and not likely to cope satisfactorily with the excess number of dying neutrophils. Although recent studies have reported that neutrophils are able to engulf apoptotic neutrophils, the mechanisms by which living neutrophils are attracted to apoptotic neutrophils are poorly defined. Increased amounts of CX3CL1 and microparticles (MPs) are rapidly released by apoptotic cells, and are involved in the chemoattraction of mononuclear phagocytes toward apoptotic cells. The current study investigated the role of CX3CL1 in the chemoattraction of all-trans retinoic acid (ATRA)-treated NB4 (ATRA-NB4) cells toward apoptotic cells.MethodsConditioning medium and MPs were harvested from apoptotic ATRA-NB4 cell cultures to determine their effects on living ATRA-NB4 cells by transmigration assay and adhesion assay. The cytokine levels in the conditioning medium were determined by enzyme-linked immunosorbent assay. Expression of CX3CR1 (a receptor of CX3CL1) on ATRA-NB4 cells was determined by flow cytometric analysis.ResultsATRA-NB4 cells transmigrated toward the apoptotic ATRA-NB4 cells, and this chemoattraction was partially inhibited when the CX3CR1 on ATRA-NB4 cells was blocked by its specific antibody. Both exogenous CX3CL1 and MPs released by apoptotic ATRA-NB4 cells were able to enhance the chemoattraction of ATRA-NB4 cells toward apoptotic cells or the adhesion of ATRA-NB4 cells to endothelial cells. CX3CL1 was expressed on the surface of MPs, and blocking this CX3CL1 with its specific antibody was able to partially inhibit the chemoattractive property of MPs.ConclusionCX3CL1, in either the free or MP form, is released rapidly by apoptotic ATRA-NB4 cells after induction of apoptosis to mediate the chemoattraction of living ATRA-NB4 cells toward apoptotic cells.     

蝎毒抗肿瘤有效成分SVⅡ-A4的提纯及抑瘤活性观察

目的：分离纯化东亚钳蝎原毒,提取活性多肽成分SVⅡ—A4,并观察其抑瘤活性。方法：（1）分离纯化,采用分子筛凝胶柱层析和离子交换柱层析分离纯化蝎毒;（2）纯度分析,用SDS—PAGE电泳和HPLC色谱法对SVⅡ—A4进行纯度分析;（3）活性观察,用MTF法（酶反应比色法）观察比较不同浓度（1、10、100mg／L）的蝎毒及其成分与SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞（A549、HL-60、K562／S及K562／ADR）的抑制作用。结果：经过两步的分离纯化获得5个蝎毒多肽成分,其中的蝎毒抗肿瘤有效成分SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞的抑制作用与阳性对照组相当。结论：经过优化提纯方法,两步即可从东亚钳蝎原毒中获得色谱纯度达96．73％的抑瘤活性单体成分SVⅡ-A4,初步观察,SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞均显示出明显的抑制作用及一定的剂量-效应关系,而且它对布耐药细胞株（K562／ADR）的抑制作用较阳性对照组强有进一步开发利用的价值。     

重组杆状病毒表达轮状病毒SA11毒株VP4蛋白

从培养的SA11病毒中提取病毒dsRNA作为模板，经逆转录、多聚酶链反应（RT-PCR）获得编码VP4蛋白的全基因，全长2362bp.完整的VP4基因克隆到杆状病毒转移载体pVL-1393中，转染Sf9细胞进行同源重组，用声、杂交法筛选出表达VP4蛋白的重组杆状病毒。表达的VP4蛋白能被抗轮状病毒抗体所识别，表达产量约占总蛋白的10％。用表达的VP4蛋白免疫动物后可产生高水平抗亲本SA11毒株中和抗体。抗体能阻断SA11病毒在MA104细胞上引起的细胞病变（CPE），免疫荧光和Westernblot也证实抗体可特异性识别轮状病毒抗原。结果表明，重组杆状病毒表达的VP4蛋白具有良好的抗原性和免疫原性，可望用VP4基因研制轮状病毒重组疫苗和亚单位疫苗。     

板式反应精馏塔的模拟计算——修正的Newton-Raphson法

通过选择合适的迭代变量和分层迭代的方法,提出了一种计算机内存少、机时省且稳定收敛的板式反应精馏塔的数学模拟算法。该算法将模型方程分成内外两层迭代求解。内层以塔板上各组分的液相浓度为迭代变量,以物料衡算方程为残差函数,用Newton-Raphson法求解;外层以各板上汽相流量为迭代变量,用直接迭代法求解焓平衡方程。该算法能适用于非理想性较强,反应级数高于一级的系统。并附计算实例。     

无蹼壁虎抗肿瘤成分的提取及其对CT-26小鼠结肠腺癌的抑制作用

目的：研究无蹼壁虎药物成分的抗肿瘤效果．方法：提取壁虎中有效药物成分,甲基噻唑蓝（MTT）法测定肿瘤细胞的生长,观察壁虎药用成分的抗肿瘤效果;BALB／e小鼠CT-26小鼠结肠癌造模分组,抗肿瘤活性成分组按0．25,0．10,0．05mg／kg剂量,阳性对照组为内皮抑素6mg／kg,阴性对照组为同体积生理盐水,每日一次性侧腋部皮下注射,自由摄食摄水,第15日称体质量,脱颈处死,解剖皮下肿瘤,称湿质量,计算肿瘤抑制率．结果：从壁虎提取得到的成分对肿瘤生长具有良好的抑制作用且与时间和剂量呈相关性;体外抑瘤实验,抑制率最高可达45．50％;小鼠体内抑瘤实验,肿瘤抑制率为67．24％．结论：壁虎含抗肿瘤有效药物成分,具有开发利用的潜力．