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目的:通过诱导皮层肌动蛋白(cortactin)的过表达分析其在结肠癌细胞侵袭迁移以及肝转移过程中的作用。方法:构建含CTTN基因和绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体,转染293T细胞。取含CTTN基因和绿色荧光蛋白的病毒上清液转染结肠癌细胞株SW1116使cortactin稳定表达。蛋白印迹实验检测cortactin的表达,通过Transwell实验评估结肠癌细胞侵袭迁移能力的改变。利用SW1116细胞株使裸鼠皮下成瘤,取肿瘤组织种植新一批裸鼠结肠壁并观察结肠癌肝转移的情况。结果:成功构建cortactin过表达的SW1116细胞。侵袭和迁移实验中,过表达组穿膜细胞数分别为(147±12)个、(286±17)个,而阴性对照组为(83±10)个、(112±11)个,空白对照组为(75±7)个、(103±9)个,后两组与过表达组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:上调cortactin的表达能显著促进结肠癌细胞的侵袭迁移和肝转移能力,提示cortactin在结肠癌的转移过程中发挥重要作用。 相似文献
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目的 检测具有不同转移能力的结肠癌细胞亚系中皮层肌动蛋白的表达,探讨皮层肌动蛋白的差异表达与结肠癌转移的相关性.方法 本实验应用具有不同肝转移能力的结肠癌细胞系SW1116、人结肠癌皮下5代细胞系(SW1116_5)、人结肠癌肝转移细胞系1代(CRCLM1)和人结肠癌肝转移细胞系3代(CRCLM3).4种细胞在皮下成瘤后再原位种植到裸鼠结肠观察其肝脏转移能力的差异,用Western blotting和real time-PCR检测皮层肌动蛋白表达的差异,同时行体外迁移侵袭实验检测癌细胞的侵袭转移能力的差异,免疫组化方法分析临床86例结肠癌组织中皮层肌动蛋白的表达情况及其与临床病理特征之间的关系.结果 Western blotting和real time-PCR均证实在4种细胞中皮层肌动蛋白表达自SW1116、SW1116_5、CRCLM1、CRCLM3逐渐增高,四者两两比较差异有统计学意义,均P<0.05;动物实验证实CRCLM3(100%)和CRCLM1(89%)与SW1116(40%)和SW1116_5(44%)相比具有较强的转移能力,免疫组化提示皮层肌动蛋白表达在86例中57例(66%)为强阳性,29例(34%)为阴性.结论 皮层肌动蛋白差异表达与结肠癌的转移以及临床分期呈正相关,皮层肌动蛋白有可能成为结肠癌临床分期以及肿瘤转移的判断指标. 相似文献
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目的:明胶酶(包括MMP-2和MMP-9)在恶性肿瘤转移扩散中发挥着重要的作用,探讨运用胞内抗体技术通过胞内抗体与明胶酶结合,阻断明胶酶向细胞表面的分泌,对恶性肿瘤细胞侵袭转移抑制的效果.方法:构建可在真核细胞内质网表达抗明胶酶抗体基因的真核表达载体PcDNA3.1.ER.scFv,瞬时和稳定基因转染,Western blot 检测基因表达,免疫沉淀实验检测胞内抗体与靶蛋白结合情况,明胶酶谱检测明胶酶的分泌,用相关方法观察细胞体外运动、侵袭和增殖.结果:ER.scFv抗体基因在PG细胞内表达,能与靶蛋白MMP-9特异性结合,对PG细胞明胶酶分泌具有显著的抑制作用.ER.scFv胞内抗体对PG细胞体外Matrigel侵袭有抑制作用,抑制率为76.3%(P<0.05),对PG细胞的体外迁徙没有影响.在体外增殖实验中,稳定表达ER.scFv的PG细胞在Matrigel的增殖受到明显抑制.结论:内质网滞留型胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌这一关键通路中抑制肿瘤细胞明胶酶的活性,进而抑制与明胶酶直接相关的侵袭和增殖,在肿瘤基因治疗中具有应用前景. 相似文献
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目的:研究ets-1反义寡核苷对胃癌细胞株SGC-7901体外侵袭力的影响.方法:应用ets-1反义、正义寡核苷酸转染SGC-7901细胞,并设PBS对照组.转染后应用逆转录聚合酶链式瓜检测ets-1mRNA的变化,应用克隆形成试验检测细胞增殖活性的变化,Transwell小室检测侵袭能力的变化.结果:转染ets-1反义寡核苷酸后,ets-1mRNA表达降低,反义组形成克隆数目(24.2±4.8)较正义组、对照组减少(47.6±8.1,44.3±7.6,P<0.01),侵过小室滤腊细胞数目减少(97.1±11.1,198.7±18.3,205.8±22.2,P<0.01).结论:ets-1反义,SGC-7901细胞·肿瘤侵犯·体外研究 相似文献
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基质金属蛋白酶表达在膀胱癌侵袭转移中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨基质金属蛋白酶 1、2 (MMP 1,MMP 2 )在肿瘤侵袭转移过程中的作用。 方法 采用原位核酸分子杂交技术检测膀胱肿瘤手术标本中MMP 1、MMP 2mRNA的表达水平 ,结合临床资料进行分析。 结果 MMP 1和MMP 2mRNA在正常膀胱壁有少量表达。膀胱肿瘤中MMP 1和MMP 2mRNA的表达位于胞质内。MMP 1mRNA阳性率 4 3.5 % ,与细胞分级和临床分期无明显相关性。MMP 2mRNA阳性率 5 9.6 % ,其表达随细胞级别的升高而增强 (P <0 .0 5和P <0 .0 1) ,侵袭性癌与表浅性癌之间的表达差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。 结论 MMP 2可作为判断肿瘤侵袭转移习性的指标 ,对临床制订治疗方案有一定意义。 相似文献
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皮层肌动蛋白在原发性肝癌中表达的意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨皮层肌动蛋白在原发性肝癌组织中表达的意义.方法 收集2002年1月至2008年5月空军总医院53例原发性肝癌的病理标本,采用免疫组织化学Elivision二步法检测原发性肝癌石蜡标本皮层肌动蛋白表达情况,分析皮层肌动蛋白表达与临床病理参数的关系.采用单项有序等级资料Wilcoxon秩和检验和双向有序分组资料Spearman等级相关分析.结果 皮层肌动蛋白表达在肿瘤包膜完整性、TNM分期、门静脉癌栓或肝外转移方面差异有统计学意义(u=2.19,3.584,2.796,P<0.05).肿瘤侵袭性与皮层肌动蛋白表达呈正相关(r=0.5794,P<0.05).结论 皮层肌动蛋白高表达可能是原发性肝癌侵袭力增强的因素之一,皮层肌动蛋白表达水平可以作为评价肝癌侵袭力的指标. 相似文献
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目的:探讨粪便中分泌型卷曲相关蛋白2(secreted frizzled-related protein 2,SFRP2)基因超甲基化作为筛查大肠癌的非侵袭性工具的可行性.方法:用甲基化特异性PCR(MSP)技术分析69例大肠癌、34例腺瘤和26例增生性息肉患者的瘤组织和粪便中SFRP2基因启动子甲基化状态,30例内镜下正常的健康者作为对照.其中大肠癌患者的粪便分别于术前及术后第9天采集.同时分析SFRP2基因甲基化与肿瘤临床病理因素之间的关系.结果:SFRP2基因在91.3%(63/69)的大肠癌组织、79.4%(27/34)的腺瘤组织和53.8%(14/26)的增生性息肉组织中发生超甲基化,并在同一患者所对应的粪便中有87.0%(60/69)、61.8%(21/34)和42.3%(11/26)检测到发生超甲基化.在正常对照的结肠黏膜中没有检测到SFRP2基因甲基化,但在粪便中有2例发生了SFRP2基因甲基化.在大肠癌患者术前和术后第9天的粪便中SFRP2基因超甲基化比较差异有统计学意义(P<0.001).此外,SFRP2超甲基化与肿瘤的临床特征包括性别、年龄、肿瘤分期、位置及病理分级等无显著相关性.结论:粪便中SFRP2基因超甲基化是大肠癌的一种新的分子标志,对于非侵袭性检测大肠癌具有高度的潜力. 相似文献
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癌相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境中主要的基质细胞。CAF可在血小板源性生生长因子、成纤维细胞生长因子、白介素6及肝细胞生长因子等多种分泌因子作用下由正常成纤维细胞转化形成,也可由间充质干细胞、脂肪细胞等多种细胞可通过上皮间质转化(EMT)过程形成,还有部分由癌症干细胞转化而来。近来有研究显示,乳腺癌中的CAF可通过分泌多种细胞因子及外泌体、参与EMT及细胞外基质重塑,进而促进乳腺癌细胞侵袭转移,也可在肿瘤缺氧微环境下通过激活相关信号通路促进乳腺癌细胞生长和侵袭。此外,CAF通过增加了乳腺癌细胞的凋亡阈值、作为抗肿瘤药物的物理屏障、分泌的谷氨酰胺增加乳腺癌细胞的存活率、激活生长因子相关的信号通路或增加线粒体功能产生抗凋亡作用等多种途径介导乳腺癌化疗耐药、内分泌治疗耐药及多药耐药。笔者总结CAF的重要来源及其在乳腺癌侵袭转移与治疗耐药中的研究进展。 相似文献
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胰腺移植进展 总被引:4,自引:0,他引:4
世界上第一例胰腺移植手术由美国明尼苏达州立大学的Kelly和Lillehei于1966年完成。该手术的成功使得许多胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)患者得到了有效的治疗。目前在美国每年要进行2500~3000例胰腺移植手术[1]。早期的胰腺移植手术患者的并发症主要是败血症,据统计死亡率可达60%。但此后胰腺移植手术的成功率不断上升,这主要归功于UW灌洗液的应用、手术技术的提高、免疫抑制剂的发展、及时有效的并发症诊断和处理以及尸体器官移植的减少。目前该手术已被美国糖尿病协会接受为I型糖尿病合并终末期肾病(ESRD)的标准治疗方法。截止1997年全… 相似文献
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人口老龄化使得肌肉减少症(sarcopenia)(简称肌少症)的患病率逐年增加,流行病学调查显示该疾病会带来严重的致残率和致死率,受到国内外学者的诸多关注,对于肌少症的发病机制、危险因素、诊断评估以及治疗均有大量研究,但目前国内外对于该疾病的认识仍然存在差异。我国对于肌少症的研究尚处于探索阶段,肌少症作为脆性骨折的一个独立危险因素,及时诊治肌少症对降低骨折与跌倒风险具有重要意义,研究肌少症与骨质疏松症的相关性也是目前预防跌倒性骨折的重要研究方向。本文将从概述、流行病学、发病机制、诊断和治疗干预等方面对肌少症的新进展进行综述。 相似文献
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Indian Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery - 相似文献
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