苦瓜多糖抗肿瘤及免疫增强活性的研究

目的：研究苦瓜多糖的体内抗肿瘤及增强免疫作用,探讨可能作用机制。方法：通过建立小鼠S180肉瘤、H22肝癌肿瘤模型观察苦瓜多糖的抗肿瘤作用．此外应用MTT法观察苦瓜多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响．应用比色法观察苦瓜多糖对小鼠单核巨噬细胞RAW264．7吞噬功能的影响．运用Gfiess试剂检测苦瓜多糖促进小鼠单核巨噬细胞RAW264．7分泌No含量的变化。结果：苦瓜多糖高中低剂量组能明显抑制小鼠S180肉瘤、H22肝癌肿瘤的生长,同时能明显增加荷瘤小鼠的脾腺指数和胸腺指数。此外苦瓜多糖能显著刺激小鼠脾淋巴细胞增殖．明显提高小鼠单核巨噬细胞RAW264．7吞噬中性红的能力,明显促进小鼠单核巨噬细胞RAW264．7分泌No。结论：推测苦瓜多糖具有较强的免疫增强活性并可能通过刺激淋巴细胞、并增强巨噬细胞的活化来调节机体的免疫功能．从而抑制肿瘤细胞的生长。     

螺旋藻多糖硫酸酯化修饰前后抗肿瘤及免疫活性的研究

比较螺旋藻多糖硫酸酯化修饰前后体内外抗肿瘤及免疫活性.采用MTT比色法研究药物在体外对人肿瘤细胞株的抑制作用,促进正常小鼠脾淋巴细胞的增殖活性以及对荷瘤小鼠NK和CTL细胞活性的影响.采用移植性肿瘤实验方法考察了药物对小鼠S180肉瘤的抑制作用.结果显示,螺旋藻多糖（NPSP）对肿瘤细胞株几乎无细胞毒作用,硫酸酯化螺旋藻多糖（SNPSP）对肿瘤细胞株具有显著的细胞毒作用,其中对SMMC-7721人肝癌细胞株抑制率最高达50%.NPSP50 mg/kg对小鼠S180肉瘤无抑制,相同剂量的SNPSP对小鼠S180肉瘤的抑制率达35.42%.NPSP具有促进脾淋巴细胞增殖作用,但对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应无促进作用,SNPSP促进脾淋巴细胞增殖作用较NPSP增强,同时对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应也具有明显的促进作用.NPSP和SNPSP均能促进荷瘤小鼠NK细胞和CTL细胞活性,其中SNPSP促进CTL细胞活性较NPSP增强.     

甜菜碱对S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的:以S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞作为研究材料,研究甜菜碱对S180町荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖影响的内在机制.方法:MTF法测S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖程度.ELISA方法检测甜菜碱对S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞分泌肿瘤坏死因子α的含量的影响.结果:培养48 h后,甜菜碱在50-5 000μg/ml,的浓度范围内可促进S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖反应(P<0.01).甜菜碱在浓度为50～500μg/ml的范围内可促进S180舶荷瘤小鼠脾淋巴细胞TNF-α的产生(P<0.01).结论:甜菜碱能够促进S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖、促进TN-α的产生,说明甜菜碱的促进增殖作用主要与促进TNF-α的产生有关.     

枸杞多糖抗肿瘤作用免疫学机理的探讨

目的:探讨枸杞多糖对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用.方法:60只小鼠随机分为6组:正常对照组、荷瘤对照组、环磷酰胺(Cy)阳性对照组和5,10,20 mg·kg -1 ·d -1 枸杞多糖(LBP)组,每组10只,各组分别给予相应剂量,灌胃给药后,检测胸腺重量及巨噬细胞吞噬功能、脾细胞抗体、CTL杀伤功能.结果:一定剂量的LBP能显著抑制移植性肿瘤S180的生长,且能明显增强荷瘤鼠巨噬细胞率和吞噬指数,增加脾细胞抗体生成,提高荷瘤鼠的脾细胞转化功能和CTL的杀伤能力,均以10 mg·kg -1 ·d -1 LBP效果最佳.结论:LBP显著提高荷瘤小鼠的非常异性免疫、体液免疫和细胞免疫功能,且能显著提高荷瘤小鼠CTL的杀伤能力.这可能是枸杞多糖抗移植性肿瘤的机理之一.     

短葶山麦冬多糖对免疫抑制小鼠的免疫功能的影响

目的研究短葶山麦冬多糖(LMP)对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响。方法应用环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,连续21天灌胃给予不同剂量(0.5、1.0、2.0g·kg-1)LMP后,测定小鼠胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、血清溶血素、细胞因子IL-2、TNF-α、IL-6含量、脾淋巴细胞增殖、NK细胞活性等免疫指标。结果 LMP能升高免疫低下小鼠胸脏指数,明显增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率,增加血清溶血素和细胞因子(IL-2、TNF-α)含量,同时能明显提高脾淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性。结论 LMP能够增强免疫抑制小鼠机体免疫功能。     

江苏地产白首乌C21甾体苷对荷瘤小鼠的免疫保护作用

目的：探讨白首乌C21甾体苷对肝癌实体型（Heps）小鼠的抗肿瘤作用和免疫保护机制。方法：建立小鼠Heps移植模型，进行抑瘤率计算，对肿瘤病理组织进行观察；计算小鼠的胸腺、脾脏指数；用腹腔巨噬细胞吞噬中性红及分泌NO反映整体免疫功能；MTT法检测T、B淋巴细胞增殖；双抗体夹心ABC-ELISA法检测脾淋巴细胞诱生IL-2及腹腔巨噬细胞诱生TNF—α. 结果：C21甾体苷三个剂量组的抑瘤率分别为34．79％、47．08％和50．23％，病理检查可见肿瘤组织中有片状坏死；各剂量组均可降低荷瘤后异常增高的脾指数，升高胸腺指数；增强巨噬细胞吞噬能力；明显增强T、B淋巴细胞增殖反应；使脾细胞分泌IL-2及腹腔巨噬细胞分泌．TNF-α量显著提高：结论：白首乌C21甾体苷可提高荷瘤小鼠特异性和非特异性细胞免疫功能，促进抗肿瘤细胞因子的分泌．     

鲨鱼软骨粉对S_(180)荷瘤小鼠免疫细胞调节功能的影响

目的研究鲨鱼软骨粉(SCP)对S180荷瘤小鼠免疫细胞功能的影响。方法鲨鱼软骨粉300、200、100mg·kg-1小鼠灌胃给药10 d。MTT法检测其对S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖功能的影响;流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群的变化;ELISA法测定荷瘤小鼠血清中细胞因子TNF-α、IFN-γ含量。结果 SCP能提高小鼠脾淋巴细胞的增殖活性;不同程度地提高小鼠脾细胞CD4+细胞数,增加CD4+/CD8+细胞比值;明显提高小鼠巨噬细胞的吞噬活性;促进外周血清中TNF-α和IFN-γ的分泌水平。结论 SCP能提高T细胞介导的细胞免疫应答,提高巨噬细胞调节免疫应答的功能,促进TNF-α、IFN-γ等细胞因子的分泌,从而发挥其抗肿瘤作用。     

枸杞糖缀合物和糖链对小鼠巨噬细胞功能的影响

目的确定巨噬细胞是枸杞糖缀合物和糖链免疫作用的靶细胞之一。方法应用中性红吞噬实验和鸡红细胞吞噬实验测定了枸杞糖缀合物LbGp4和糖链LbGp4-OL对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;用硝酸根还原法、酶联免疫吸附实验(ELISA)和生物活性测定法测定了巨噬细胞产生一氧化氮(NO)、IL-1β和TNF-α含量和生物活性的变化。结果LbGp4和LbGp4-OL在(10~100)mg.L-1剂量范围内均可剂量依赖性地促进静息巨噬细胞吞噬中性红的能力,增加活化的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数;增加巨噬细胞培养上清NO、IL-1β和TNF-α的浓度,并增强对L929细胞的杀伤活性,促进胸腺细胞的增殖反应。结论LbGp4和LbGp4-OL对静息和活化的腹腔巨噬细胞的吞噬功能具有明显的促进作用,对巨噬细胞产生NO、分泌IL-1β和TNF-α的含量和生物活性亦具有明显的促进作用,表明巨噬细胞是LbGp4和LbGp4-OL免疫作用的靶细胞之一。     

当归多糖-1cII的抗肿瘤活性研究

目的:研究当归多糖-1cII(Angelica polysaccharide-1cII,APS-1cII)的体内外抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:采用MTT法检测APS-1cII对体外培养的5种肿瘤细胞增殖的抑制作用;建立小鼠移植瘤模型,采用荷瘤小鼠抑瘤率检测APS-1cII对荷S180肉瘤小鼠的体内抗肿瘤作用.以对荷瘤小鼠免疫器官质量、血液淋巴细胞数量、巨噬细胞对中性红的吞噬率、巨噬细胞产生细胞因子的影响评价APS-1cII对小鼠免疫功能的作用.结果:体外实验中APS-1cII在10～1 000 mg·L-1浓度范围内对培养的4种肿瘤细胞无抑制作用,体内实验中在20～100 mg·kg-1剂量范围内剂量依赖性地抑制移植性动物肿瘤S180的生长,显著提高荷瘤小鼠脾脏和胸腺质量、血液淋巴细胞数量.经APS-1cII刺激后,小鼠巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β的量明显增加.结论:APS-1cII体外无抗肿瘤作用,其体内抗肿瘤活性是通过增加荷瘤小鼠免疫器官的质量和免疫细胞的数量,激活小鼠巨噬细胞实现的.     

生姜对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的:了解生姜对小鼠免疫功能的影响。方法:①PFC法检测小鼠脾细胞抗体生成水平;②常规法检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性;③3H-T dR摄入法检测小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒活性;④乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测小鼠脾脏NK细胞杀伤活性。结果:与空白对照组比较,在有效剂量范围内,生姜能促进脾细胞抗体的生成,能增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性及细胞毒活性,能增强NK细胞杀伤活性。结论:生姜具有调节机体免疫功能的作用。     

枸杞多糖对肝癌Hca-F 荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及其机制

目的研究枸杞多糖（LBP）对小鼠Hca-F肝癌的生长抑制作用及机制。方法建立小鼠Hca-F肝癌模型,腹腔注射不同浓度的枸杞多糖连续10d。称重检测枸杞多糖对肿瘤生长、脾脏和胸腺指数的影响;采用MTT法、ELISA法分析枸杞多糖对荷瘤小鼠脾巨噬细胞的吞噬活性、细胞因子分泌等免疫指标的影响。结果枸杞多糖对小鼠实体瘤生长具有抑制作用,枸杞多糖40mg·kg^-1与对照组相比有显著差异（P〈0.05）;实验组小鼠脾指数和胸腺指数均高于对照组。枸杞多糖40mg·kg^-1即可明显促进IL-2的产生,降低VEGF蛋白的表达。结论枸杞多糖对Hca-F肝癌小鼠肿瘤生长有抑制作用,可能与提高荷瘤小鼠细胞和分子免疫活性有关。     

大豆多糖对S_（180）荷瘤小鼠免疫调节作用的研究

目的从免疫学角度探讨大豆多糖对荷瘤小鼠抗肿瘤作用的机制。方法采用分光光度计测定大豆多糖对S180荷瘤小鼠巨噬细胞一氧化氮生成量的影响,利用酶标仪测定大豆多糖对S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,定量溶血分光光度法检测B细胞功能。结果与对照组比较,大豆多糖各组均能显著提高小鼠巨噬细胞的吞噬活性,同时能明显提高荷瘤小鼠巨噬细胞产生一氧化氮的能力,并能使体内B淋巴细胞数量增加而提高抗体生成量。结论大豆多糖通过调节荷瘤小鼠免疫功能发挥抗肿瘤作用。     

灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠外周血TNF—α含量的影响

目的：探讨灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠外周血肿瘤坏死因子α（TNF—α）表达的影响。方法：给接种S180肉瘤细胞小鼠分别灌服高、中、低剂量的灵芪胶囊及阳性对照药复方环磷酰胺后,采用ELISA法检测S180荷瘤小鼠外周血TNF-α含量。结果：灵芪胶囊高、中剂量组与复方环磷酰胺模型对照组比较,S180荷瘤小鼠外周血TNF-α含量明显增加（P〈0．05）。结论：灵芪胶囊能够增加荷瘤小鼠外周血TNF-α含量,为其在临床应用提供了一定的实验和理论依据。     

Immunomodulation and antitumor activity by a polysaccharide-protein complex from Lycium barbarum

The modulation of a polysaccharide-protein complex from Lycium barbarum (LBP3p) on the immune system in S180-bearing mice was investigated. The mice inoculated with S180 cell suspension were treated p.o. with LBP3p (5, 10 and 20 mg/kg) for 10 days. The effects of LBP3p on transplantable tumors and macrophage phagocytosis, quantitative hemolysis of sheep red blood cells (QHS), lymphocyte proliferation, the activity of cytotoxic T lymphocyte (CTL), interleukin-2 (IL-2) gene expression and lipid peroxidation were studied. LBP3p could significantly inhibit the growth of transplantable sarcoma S180 and increase macrophage phagocytosis, the form of antibody secreted by spleen cells, spleen lymphocyte proliferation, CTL activity, IL-2 mRNA expression level and reduce the lipid peroxidation in S180-bearing mice. The effect is not dose-dependent in a linear fashion. A total of 10 mg/kg dose is more effective than 5 and 20 mg/kg doses. This suggests that LBP3p at 10 mg/kg has a highly significant effect on tumor weight and improves the immune system.     

硫化氢对恶性肿瘤化疗后感染的病理生理学作用研究

目的探讨硫化氢（H2S）在恶性肿瘤患者化疗后粒细胞减少合并感染过程中的病理生理学作用。方法 52例恶性肿瘤患者（试验组）,32例非肿瘤患者（对照组）。2组均于感染前后留取静脉血,低温离心后保存。H2S水平采用敏感硫电极法测定,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-1（IL-1）水平采用酶联免疫吸附法测定（ELISA）。结果对照组在合并感染时血清H2S、TNF和IL-1水平均较未感染时显著升高（P〈0.05）,而感染控制后三者水平显著下降（P〈0.05）;试验组血清H2S、TNF和IL-1水平均较对照组显著升高（P〈0.01）;化疗后患者白细胞总数降低[（1.0～2.0）×10^9/L],未感染时血清H2S水平即较化疗前变化不明显（P〉0.05）。而TNF和IL-1水平较化疗前明显下降（P〈0.05）。合并感染时血清H2S水平较前显著升高（P〈0.01）;而血清TNF水平较未感染时明显下降（P〈0.01）;血清IL-1水平较未感染时略有升高,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 H2S在肿瘤患者化疗后粒细胞减少后感染过程中发挥重要的病理生理作用。     

Immune response mechanism of mouse monocytes/macrophages treated with κ-carrageenan polysaccharide

This study investigated the function of κ-carrageenan polysaccharide in immune regulation. The immune response of RAW 264.7 cells treated with κ-carrageenan polysaccharide was explored by MTT assay, general morphological observation, neutral red phagocytosis assay, Griess method, fluorescence method, and enzyme-linked immunosorbent assay. In addition, TLR4 blocking experiment and double-fluorescence immunostaining were performed on cells to demonstrate their immune response mechanism. Results show that κ-carrageenan polysaccharide not only promotes cell proliferation but also activates RAW 264.7 cells, thereby improving the cells’ phagocytic capability, NO production, and tumor necrosis factor-α (TNF-α) secretion. In addition, the use of TLR4-specific inhibitors can significantly mediate the increased TNF-α secretion induced by κ-carrageenan polysaccharide. The RAW 264.7 cells treated with κ-carrageenan polysaccharide show upregulated TLR4 expression, and the main subunit of NF-κB (p65) is translocated. These results support the immunomodulatory function of κ-carrageenan polysaccharide in RAW 264.7 cells.     

柚皮苷对人皮肤角质细胞分泌趋化因子RANTES及其核转录因子-kB信号通路影响的实验研究

目的：研究炎症性细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）和γ干扰素（IFN-γ）对人皮肤角质细胞（HaCaT）分泌趋化因子RANTES的诱导作用;以阿维A为阳性对照药,研究柚皮苷对此诱导作用的抑制作用及其机制。方法：将HacaT分为阴性对照组、模型刺激组（TNF-α＋IFN—γ）、阿维A预处理组（TNF-α＋IFN—γ＋阿维A）和柚皮苷预处理组（TNF-α＋IFN—γ＋柚皮苷）等;采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定HaCaT细胞经单用和合用TNF-α、IFN-γ刺激以及加入阿维A和柚皮苷后RANTES的分泌量。采用免疫细胞化学方法和Western blot法检测HaCaT中核转录因子-KB P65（NF—kB P65）蛋白的表达。结果：单用或合用TNF—α、IFN-γ可显著诱导细胞分泌RANTES,并以合用组作用最显著（P〈0．01）。柚皮苷、阿维A均能明显抑制TNF-α、IFN-γ诱导的RANTES的分泌（P〈O．01）及NF—kB P65蛋白的表达。结论：柚皮苷可以抑制TNF-α、INF-γ诱导RANTES的分泌及相关蛋白的产生,其机制可能是通过抑制NF—kB信号传导途径的活化而实现。     

寻常型银屑病患者的外周血T淋巴细胞亚群和血清肿瘤坏死因子α的变化及临床意义

目的了解寻常型银屑病患者的外周血T淋巴细胞亚群和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的变化和临床意义。方法采用流式细胞术测定了50例银屑病患者和32例正常对照组的T淋巴细胞亚群。用酶联免疫吸附试验测定血清中TNF-α的含量。结果寻常型银屑病组的CD4+百分率和CD4+/CD8+比值均低于对照组(P<0.01和P<0.05)。血清TNF-α含量与正常对照组相比较有显著增高(P<0.01)。结论银屑病患者T细胞免疫功能发生紊。TNF-α是一种与银屑病免疫炎性反应密切相关的细胞因子,T淋巴细胞亚群和TNF-α在银屑病的发生、发展及维持中起着重要的作用。     

干扰素-α联合5-氟尿嘧啶对HepG-2细胞DLC-1和Bcl-2表达的影响

目的探讨干扰素(IFN)-α联合5-氟尿嘧啶(FU)对人肝癌HepG-2细胞株DLC-1和Bcl-2表达的影响。方法培养人肝癌细胞HepG-2,将其分为对照组,5-FU组,IFN-α组及联合用药组,采用噻唑蓝(MTT)实验法观察细胞增殖,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝癌缺失基因DLC-1、凋亡抑制基因Bcl-2表达变化。结果IFN-α单独应用对HepG-2细胞增殖抑制作用不明显,与5-FU联合应用时抑制作用明显增强,经药物处理48h后,联合用药组的细胞凋亡率为(16.27)%,与对照组及IFN-α和5-FU单独应用组相比增高。联合用药组HepG-2细胞DLC-1的表达较对照组和单药组明显上升,Bcl-2的表达较对照组和单药组明显下降。结论IFN-α和5-FU联合应用可明显抑制HepG-2细胞的增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是调节肝癌缺失基因DLC-1的表达,引起了天门冬氨酸(caspase-3)介导的细胞凋亡;调节凋亡抑制基因Bcl-2的表达,影响内源性凋亡信号传导通路来发挥作用,并且两者之间存在一定的协同效应。     

宫颈电环切除术前后肿瘤坏死因子α及白细胞介素2的变化及意义

目的探讨宫颈电环切除术（LEEP）前后肿瘤坏死因子α（TNF-α）及白细胞介素2（IL-2）等细胞因子的变化及意义。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定高危人乳头瘤病毒（HPV）感染的宫颈上皮内瘤变I级（CINI）30例、Ⅱ级（CINII）30例、Ⅲ级（CINⅢ）27例患者LEEP手术前后宫颈局部TNF—α及IL-2的水平。并与25例非HPV感染正常宫颈组织（NCE）相比较。结果LEEP手术前CINI组中TNF-α及IL-2水平与对照组比较．差异无统计学意义（P〉0．05）;LEEP手术前CINⅡ、CINⅢ组中TNF—α及IL-2水平均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;手术后均下降,与手术前比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;CINⅡ组手术后TNF-α、IL-2水平及CINⅢ组手术后IL-2水平与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;CINⅢ组手术后TNF-α水平高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。CINI、CINⅡ、CINⅢ组HPV病毒转阴率分别为100．0％、93．3％、96．3％,总转阴率为96．6％。结论高危HPV感染的宫颈高度病变中宫颈局部可能存在免疫失衡,LEEP术后免疫失衡有所改善,手术对宫颈局部TNF-α及IL-2水平的影响有限,仍需大样本、多因素的长期追踪。