苗药黑骨藤多糖部位HGT-5A的细胞免疫抑制作用及其可能的活性成分

目的观察苗药黑骨藤多糖部位HGT-5A的细胞免疫抑制作用及探讨其可能的活性成分。方法采用二硝基氯苯建立小鼠迟发型超敏反应模型,初次致敏当天开始ig给予HGT-5A,每天1次,连续10 d,第11天处死小鼠测定耳肿胀度,观察HGT-5A体内对细胞免疫反应的影响;用[3 H]TdR掺入法检测HGT-5A及其多糖组分对小鼠脾细胞增殖反应的影响;用MTT法检测HGT-5A对脾淋巴细胞存活的影响。结果HGT-5A 50和100 mg.kg-1可以明显抑制迟发型超敏反应模型小鼠耳肿胀,耳肿胀度由模型组的(8.9±2.2)mg分别降低至6.4±1.7和(7.1±1.5)mg;HGT-5A 50～500 mg.L-1体外应用可促进小鼠脾细胞自发增殖反应,但在HGT-5A 100 mg.L-1以上时可明显抑制刀豆蛋白A诱导的小鼠脾细胞增殖反应(P<0.05),对脂多糖诱导的小鼠脾细胞增殖反应无明显影响;HGT-5A与脾细胞共培养24,48和72 h对脾细胞存活无明显影响。从HGT-5A分离获得的中性糖部位HP1,酸性糖部位HP2,从HP1中分离得到的多糖成分HP1-3,以及从HP2中分离得到的多糖成分HP2-3和HP2-4 0.5～50 mg.L-1可促进脾细胞自发增殖反应;HP2,HP1-3,HP1-4,HP2-2和HP2-4明显抑制刀豆蛋白A诱导的T细胞增殖反应。结论 HGT-5A可抑制T细胞活化增殖,对细胞免疫反应具有抑制作用,多糖成分HP1-3,HP1-4,HP2-2和HP2-4可能是黑骨藤发挥免疫抑制作用的活性成分。     

GST－π基因和癌基因int－2在乳腺癌中的扩增与基因的表达

采用ＤＮＡ和ＲＮＡ的斑点杂交分析方法，对３２例乳腺癌和相应的癌旁正常组织中ＧＳＴ－π和ｉｎｔ－２基因的ＤＮＡ扩增和ＲＮＡ转录表达情况进行研究，发现ＧＳＴ－π在乳腺癌中存在基因扩增和明显的ｍＲＮＡ表达增强，ＧＳＴ－π基因表达调控主要在转录水平进行；癌基因ｉｎｔ－２与乳腺癌的发生有一定关系。同时还发现乳腺癌中ＧＳＴ－π与ｉｎｔ－２基因之间存在有共扩增和共表达现象。     

枸杞多糖免疫调节作用机制研究进展

枸杞子是传统的名贵补益中药,具有"滋阴补血、益精明目"之功效.枸杞多糖是其中的主要生物活性成分,具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老等多种生物学作用.近年来,随着植物化学分离纯化技术的不断改进,枸杞多糖得到了进一步的分离和纯化,因此其免疫作用的分子机制如其作用的靶细胞、信号转导途径等研究取得了较明显进展.     

黄芪中一种新葡聚糖的分离纯化与化学结构研究

目的 从中药黄芪中提取免疫活性多糖并研究其化学结构。方法 用乙醇分级沉淀、脱蛋白、CTAB选择性沉淀、离子交换及凝胶过滤柱层析的方法从黄芪水提物提取均一多糖;运用凝胶过滤法确定多糖的均一性和分子量;运用糖组成分析、甲基化分析、Smith降解、IR及^13CNMR等方法研究多糖的结构。结果 得到均一多糖A2Nb,其平均分子量为360000,由D-葡萄糖组成,主要连接方式为α-D-（1→4)-Glc,在每25个葡萄糖中有一个6-O位上的分枝。结论 从黄芪中首次分离到具有促脾细胞增殖作用的高分子量葡聚糖A2Nb。     

六味地黄多糖体外抗肿瘤作用的初步研究

目的　六味地黄多糖 Ｃ Ａ４ ３ Ｂ 和 Ｐ ３ 是具有免疫调节作用的活性多糖,在此基础上进一步观察其体外对肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法　用［３ Ｈ］ Ｔｄ Ｒ 参入法,琼脂克隆形成法及细胞形态学和 Ｎ Ｂ Ｔ 还原染色等方法观察其对小鼠淋巴细胞白血病细胞系 Ｌ１２１０ 、人早幼粒白血病细胞系 Ｈ Ｌ６０增殖反应、克隆存活率的影响以及对 Ｈ Ｌ６０ 细胞的分化诱导作用。结果　 Ｃ Ａ４ ３ Ｂ和 Ｐ ３ 对 Ｌ１２１０ 和 Ｈ Ｌ６０ 细胞的体外增殖反应和克隆形成率具有不同程度的抑制作用,对 Ｈ Ｌ６０细胞的分化形态及 Ｎ Ｂ Ｔ 阳性细胞率无明显影响,但可以使 Ｈ Ｌ６０ 细胞体积明显缩小。结论　六味地黄多糖 Ｃ Ａ４ ３ Ｂ 和 Ｐ ３ 对肿瘤细胞生长有抑制作用,可能是具有免疫调节和直接抑瘤双重作用的活性多糖;另外提示 Ｃ Ａ４ ３ Ｂ 和 Ｐ ３ 对 Ｈ Ｌ６０ 细胞分化有一定的诱导作用     

黑骨藤活性部位抗炎与免疫调节作用研究

目的从黑骨藤（HGT）中分离筛选免疫抗炎活性部位,探讨其抗炎及免疫调节作用,为研制和开发新药提供实验依据。方法应用巴豆油诱发的急性小鼠耳肿胀及二硝基氯苯（DNCB）诱发的小鼠迟发型超敏反应（DTH）作为免疫抗炎活性的评价指标,观察HGT 5A对急性炎症及细胞免疫反应的影响。结果HGT 5A 100～500 mg&#8226;kg 1灌胃给药对巴豆油诱发的小鼠急性耳肿胀具有明显抑制作用,50～100 mg&#8226;kg 1灌胃给药对DNCB诱导的DTH反应具有明显抑制作用,并且对DTH模型小鼠脾细胞增殖反应均具有明显抑制作用。结论HGT 5A具有较明显的抗炎和免疫调节作用。     

六味地黄多糖CA4-3对小鼠B细胞功能的作用

目的　研究六味地黄多糖CA4 3的免疫药理学活性及作用的靶细胞 ,为阐明六味地黄汤发挥免疫调节作用的物质基础和作用机制奠定基础。方法　溶血空斑实验 (PFC)、[3H] TdR参入、酶联免疫吸附实验 (ELISA)及酶联免疫斑点 (ELIspot)等方法。结果　CA4 3口服给药对环磷酰胺处理小鼠脾细胞抗体生成反应能力低下具有明显的改善作用 ;体外应用可直接促进小鼠B细胞增殖反应 ,升高脾细胞产生抗体IgG水平 ,增加脾细胞中产生抗体IgG细胞的数目 ,而对T细胞直接作用不明显。结论　六味地黄多糖CA4 3是免疫活性多糖 ,B细胞是其直接作用的主要靶细胞之一 ,提示六味地黄汤中的酸性多糖是该复方发挥免疫调节作用的重要物质基础之一     

GST—π基因和癌基因int—2在乳腺癌中的扩增与基因…

采用ＤＮＡ和ＲＮＡ的斑点杂交分析方法，对３２例乳腺癌和相应的癌旁正常组织中ＧＳＴ－π和ｉｎｔ－２基因的ＤＮＡ扩增和ＲＮＡ转录表达情况进行研究，发现ＧＳＴ－π在乳腺癌中存在基因扩增和明显的ｍＲＮＡ表达增强，ＧＳＴ－π基因表达调控主要在转录水平进行；癌基因ｉｎｔ－２与乳腺癌的发生有一定关系。同时还发现乳腺癌中ＧＳＴ－π与ｉｎｔ－２基因之间存在有共扩增和共表达现象。     

六味地黄汤及其拆方对正常小鼠和SAMP8胸腺淋巴细胞分化相关基因表达的影响

目的:研究六味地黄汤及其"三补(SB)"、"三泻(SX)"拆方对正常小鼠和快速老化模型小鼠(SAMP8)胸腺淋巴细胞分化相关的Notch信号转导通路基因表达的影响.方法:以荧光实时定量PCR方法检测Notch1、PS1、PS2、HES1等基因表达的变化.结果:口服LW(5、10、20 s/kg)可明显促进正常小鼠胸腺细胞PS2、HES1基因的表达;口服LW(10g/kg)及其SB、SX拆方,可不同程度地降低SAMP8的PS2、HES1基因表达水平.结论:LW可增强正常的小鼠胸腺细胞Notch信号强度;对免疫老化的SAMP8,LW能够降低胸腺细胞Notch信号强度.     

酶联免疫斑点方法改进及应用

建立了ELISPOT方法并通过改进 ,应用到抗人CD8杂交瘤细胞及LACA小鼠体外脾细胞分泌IgG量的检测 ,同时观察六味地黄多糖CA4 3在体外对LACA小鼠脾细胞分泌IgG的影响。结果表明 10 μg/mlLPS作用下可明显提高小鼠脾细胞体外产生抗体的量和提高分泌抗体的细胞数。 5 0 μg/mlCA4 3在体外与LPS具有相似的作用 ,可以刺激小鼠脾细胞分泌IgG的量和分泌抗体的细胞数量增多。