变性骨骼肌与自体神经联合移植修复猕猴尺神经缺损

用血管植入变性骨骼肌与自体腓肠神经联合移植修复猕猴尺神经５ｃｍ缺损，并与同等长度的血管植入变性骨骼肌、标准腓肠神经移植和单根腓肠神经移植进行比较，共２４条尺神经。经９个月观察，电生理、形态学和肌力检查表明联合移植的效果与标准腓肠神经移植相似，优于单纯血管植入变性骨骼肌移植。提出应把属于非神经移植体的血管植入变性骨骼肌放在替补而不是完全取代自体神经移植体的地位。     

用骨骼肌桥接神经缺损的灵长类动物实验研究

用两种形式的骨骼骨移植体即带蒂骨髂肌和植入血管的变性骨髂肌桥接灵长类动物猕猴尺神经3cm的缺损，并与自体腓肠神经移植进行比较，采用电生理和组织学定量的研究方法，经10个月观察，示涌证实再生神经长过带蒂骨骼肌桥，神经于近端形成较大神经瘤、轴突延伸不到肌桥中段。面植入血管的变性肌桥与自体腓肠神经移植比较，两组的运动神经传导速度、复合动作电位幅值和面积积分、神经纤维密度差异无显著性，但前者移植体中段神经纤维成熟程度较差。     

静脉体基底膜许旺细胞和NGF合移植桥接神经缺损的实验研究

目的 观察静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植桥接神经缺损的作用。方法 采用健康白兔40只，分为4组，每组10条坐骨神经。A组为静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植组，B组为自体静脉组，C组为人羊膜基底膜组，D组为自体神经移植组。均修复坐骨神经1.5cm缺损，术后3个月观察肢体运动，肌电图动作电位波幅、潜伏期和传导速度，工常规HE染色、免疫组化SP法梁色显示髓磷脂碱性蛋白（MBP）及Cajal吡啶银染色，镜下观察移植体段神经束面积、有髓神经纤维密度、直径、轴突直径等，做统计学处理。结果 静脉体、基底膜、许旺细胞和这在子复合移植组的上述指标与自体神经移植组比较，差异无显著性（P＞0.05），与静脉和人羊膜基底膜组比较，差异有显著性（P＜0.05）。结论 （1）静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植起到了自体神经移植桥接神经缺损的作用；（2）移植体内有较粗大成熟的有髓神经纤维轴突再生为有效神经再生，再生有髓神经纤维直径和轴突直径与功能恢复密切相关。     

静脉体基底膜许旺细胞和NGF复合移植桥接神经缺损的实验研究

目的观察静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植桥接神经缺损的作用。方法采用健康白兔40只，分为4组，每组10条坐骨神经。A组为静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植组，B组为自体静脉组， C组为人羊膜基底膜组，D组为自体神经移植组。均修复坐骨神经1.5 cm缺损，术后3 个月观察肢体运动，肌电图动作电位波幅、潜伏期和传导速度，并常规HE染色、免疫组化SP 法染色显示髓磷脂碱性蛋白（MBP）及Cajal吡啶银染色，镜下观察移植体段神经束面积、有髓神经纤维密度、直径、轴突直径等，做统计学处理。结果静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植组的上述指标与自体神经移植组比较，差异无显著性(P＞0.05)，与静脉和人羊膜基底膜组比较，差异有显著性(P＜0.05)。结论（1 ）静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植起到了自体神经移植桥接神经缺损的作用；（2）移植体内有较粗大成熟的有髓神经纤维轴突再生为有效神经再生，再生有髓神经纤维直径和轴突直径与功能恢复密切相关。     

自体雪旺细胞促周围神经端侧吻合轴突侧支发芽的实验研究

目的：研究周围神经损伤行端侧吻合口自体雪旺细胞（Sc)移植对端侧吻合的作用，探讨改善端铁合质量的方法。方法：72只Wistar大鼠随机平均分为3组：A组，左腓神经端端吻合组；B组，左胫腓神经端侧吻合组；C组，左胫腓神经端侧吻合后再生小室内注自体雪旺细胞悬液组。于术后2、4、6个月每组分别取8只大鼠取材、检测，依次行大体观察、神经电生理检测、肌湿重、组织学及电镜观察等。结果：C组与B组各项指标比较：肌力、肌纤维截面积、有髓纤维截面积差异有显著性（P＜0．05）。神经电生理、肌湿重、有髓纤维数目差异有非常显著性（P＜0．01），显示恢复较好，某些指标（神经电生理、肌湿重、肌纤维截面积）在6个月时接近A组（P＞0．05）。结论：自体雪旺细胞移植可以促进周围神经端侧吻合轴突侧支发芽，改善端侧吻合口质量。     

神经导管联合自体变性肌桥修复大鼠周围神经缺损的实验研究

目的探讨PLGA神经导管联合化学萃取的自体骨骼肌肌桥,修复大鼠坐骨神经缺损的可能性。方法SD大鼠45只,建立大鼠左侧坐骨神经缺损模型。随机分为3组．分别采用自体神经（A组）、PLGA神经导管（B组）和PLGA神经导管联合化学萃取自体骨骼肌肌桥（C组）．来修复神经缺损。术后通过大体观察、坐骨神经功能指数测定、腓肠肌湿质量恢复率测定、组织学观察和图像分析对比等,检测神经缺损修复情况。结果神经导管联合化学萃取自体骨骼肌肌桥能促进坐骨神经再生．各项指标均优于单纯神经导管移植．但是效果略差于自体神经移植。结论PLGA神经导管联合化学萃取自体骨骼肌肌桥．对大鼠坐骨神经缺损具有良好的桥梁作用和促神经生长的作用。     

带蒂腱滑膜管羊膜雪旺氏细胞粗制品复合体修复神经缺损实验研究

用带蒂腱滑膜管与植入雪旺氏细胞的人羊膜基底膜组成复合体接兔胫神经15mm缺损，以神经原位移植作对照。经术后3个月的电生理及形态学观察，复合移植体内已形成一套完整的神经干样内、外血管系统；再生神经纤维可经复合体顺利长入远端神经，成熟良好，其传导速度、复合动作电位幅值及轴突数目恢复率，与神经原位移植对比无显著差异性（P＞0．05）。强调移植体血供、基底膜、雪旺氏细胞及神经再生室等局部微环境对神经再生的影响作用。     

骨髓间质干细胞与胚胎嗅鞘细胞联合移植治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

目的：观察人骨髓间质干细胞（MSCs）与胚胎嗅鞘细胞（OECs）联合移植治疗大鼠脊髓损伤的效果，探讨共移植的OECs对MSCs分化的影响。方法：采用Allen’s法制作大鼠脊髓损伤模型．随机分为MSCs移植组（A组）、OECs移植组（B组）、MSCs与OECs联合移植组（C组）及PBS注射组（D组），术后1-5周采用BBB评分、经颅磁刺激运动诱发电位及组织学方法检查脊髓损伤修复情况。结果：术后2周起，A、B、C组BBB评分和诱发电位潜伏期与D组比较恢复明显，C组与A、B组相比亦有显著性差异（P〈0．05），术后5周时C组损伤区有较密的神经轴突分布，近端可见大量成束再生轴突；A、B组损伤区及近端再生轴突分布稀疏；D组损伤区及近端少见轴突。C组移植的MSCs中Nestin及NF表达阳性的比率较A组高（P〈0.05）。结论：联合移植OECs可促进MSCs向神经元方向转化，提高MSCs分化为神经元的比例；MSCs与OECs可以在脊髓损伤修复中发挥协同作用，联合细胞移植是提高脊髓损伤修复效果的可行方法。     

静脉桥接周围神经缺损再植入肌肉的实验研究

目的：比较自体静脉移植桥接神经再植入肌肉，自体神经直接植入，自体神经移植再植入三者的疗效。方法：选用Ｗｉｓｔａｒ大白鼠３６只，随机分成上述３组。于术后３个月、６个月检测肌电活动，光镜及电镜下观察其组织学变化和超微结构特征。结果：自体神经直接植入优于自体神经或自体静脉移植再植入（Ｐ〈０．０１），自体神经移植再植入和自体静脉移植再植入之间，两者差异无显著性意义（Ｐ〉０．０５）。结论：在临床应用中，应尽     

无细胞的异体神经修复鼠坐骨神经缺损

目的 通过化学萃取同种异体神经,去除髓鞘和雪旺细胞,形成无细胞基膜管后桥接鼠坐骨神经缺损,研究神经再生效果。方法 正常鼠坐骨神经用非变性生物剂处理后得到无细胞的基膜管,桥接鼠坐骨神经20mm缺损。实验分3组:无细胞基膜管移植组(A组),自体神经移植组(B组)和异体神经移植组(C组)。术后进行肌电图、光镜、电镜及图象分析仪检查。结果 A组再生神经有大量轴突通过移植体,术后2个月电生理检测再生神经的潜伏期及波幅低于B组(P<0.05),术后3个月2组差异无显著意义。髓鞘厚度在术后3个月时亦低于B组,差异有显著意义(P<0.05)。轴突直径及数目两组无差异。C组因无神经再生,结果无法测量。结论 这种无细胞基膜管移植体能支持轴突的生长和雪旺细胞的迁移,是一种良好的神经移植替代材料。     

血管移植在四肢血管损伤中的应用

目的:探讨血管移植在四肢血管损伤中的作用。方法:44例（52条）四肢血管损伤患者,男35例,女9例,年龄14⁵8岁,平均27·3岁,分别采用自体血管（42条）和人造血管（10条）移植。结果:截肢3例,人工血管移植物感染行股浅-静脉原位置换2例,肢体缺血挛缩6例,神经功能恢复不完全7例。其余移植血管均通畅,远端肢体血循环良好。结论:血管移植治疗血管损伤保肢成功率高;治疗中须注意早诊断、早修复、严格显微外科原则、积极行骨筋膜室切开减压。     

Axonal regeneration rate through cross-face nerve grafts

The disfigurement of irreversible unilateral facial paralysis can be corrected by cross-face nerve grafting in conjunction with muscle transplantation. A total of 33 patients underwent cross-face nerve grafting using the sural nerve prior to undergoing the second stage of the procedure. Before a muscle transplant can be successfully connected to the distal end of the cross-face nerve graft, the regenerating axons need to have grown from the contralateral facial nerve to the distal end of the nerve graft. This can be tested by the Tinel sign. A retrospective study was performed to determine the rate of growth of regenerating axons through the cross-face nerve graft. A rate of axon growth of 1.8 mm/day was found, and also an inverse relationship between the age of the patient and the regeneration rate. These results can be used as a guide in planning patients' treatment. © 1993 Wiley-Liss Inc.     

神经端侧缝合与神经转位缝合及带血运神经移植疗效比较的实验研究

目的 比较神经端侧缝合与神经转位缝合、带血运神经移植方法疗效的优劣。方法 健康兔24只,随机分成三组。A组为腓总神经远断端与胫神经端侧缝合;B组为胫神经近断端转位于腓总神经远断端缝合;C组将腓总神经制成6cm长带血运移植段原位缝合做电生理检查后取材,测肌湿重及组织学检查。结果 肌湿重、肌纤维横截面积、MCV、SCV显示A与B、A与c组间无显著性差异,B与C组间存在显著性差异;神经轴突再生显示A与B组间无显著性差异,B与C、A与c组间存在显著性差异。结论 神经端侧缝合后再生质量同神经转位缝合与长段带血运神经移植相比基本相同,但神经转住缝合优于带血运神经移植。     

周围神经移植修复大鼠陈旧性脊髓损伤的实验研究

目的：探讨利用自体周围神经组织游离移植修复大鼠陈旧性脊髓损伤病理机制。方法：利用改良Allen撞击方法建立脊髓打击损伤模型后，将大鼠分为2组，各20只。神经移植组切取后肢腓肠神经，利用显微外科技术去除神经外膜，将其修剪成小段，游离移植于脊髓损伤处，对照组不作处理。分别于术后4、12周，在光镜下观察脊髓损伤段及移植周围神经再生情况，并应用辣根过氧化物酶神经逆行示踪技术进行脊髓神经束的再生评价。分3个时点（1、2、3个月）观察大鼠后肢运动功能恢复情况。结果：对照组脊髓变性，可见瘢痕和空洞，移植组术后12周，损伤区脊髓与周围神经融合良好，可见再生轴突，跨越损伤段脊髓，周围神经无变性。12周时脊髓神经束的再生评价结果提示：神经移植组优于对照组．移植组大鼠后肢运动功能明显恢复。结论：周围神经组织游离移植修复大鼠陈旧性脊髓损伤后，存活良好并可促进大鼠脊髓结构和功能的恢复。     

四肢骨骼肌肌内血管瘤的诊断与治疗

目的：探讨CTA和MRI在四肢骨骼肌肌内血管瘤的诊断和治疗中的价值,以及手术治疗的疗效。方法：2003年4月至2011年2月,采用手术切除或密集环形缝扎方法治疗18例四肢骨骼肌内血管瘤患者。其中男8例,女10例;年龄5～28岁,平均12.5岁;病程1～5年。主要症状为易变性肿物和疼痛,部分有多次破溃出血史。18例行MRI检查,11例同时行CTA检查,证实为骨骼肌内血管瘤。据肿块变化、疼痛、复发3方面情况评价手术效果。结果：18例分布情况：上肢6例,下肢12例。病理分型均为血管畸形,其中毛细血管型畸形13例,静脉型畸形4例,动静脉瘘型畸形1例。18例随访时间为6个月～2年,平均8.8个月。术后显效15例,有效2例,不满意1例。结论：CTA和MRI对四肢骨骼肌内血管瘤诊断符合率高,CTA三维立体解剖成像,对确定最佳的手术入路、保护重要血管以及处理瘤体供应血管有重要的价值。在肌肉侵犯的术前判断及手术方式决策上,MRI较CTA更有价值。     

零切迹颈椎前路融合固定系统与传统融合器钢板内固定系统治疗单节段颈椎间盘突出症的病例对照研究

目的 :比较零切迹颈前路椎间融合固定系统(Zero-p)与传统钛板联合cage融合内固定术治疗单节段颈椎间盘突出症的临床疗效。方法:对2011年8月至2014年3月接受颈前路椎间盘切除植骨融合内固定术的139例单节段颈椎间盘突出症患者的临床资料进行回顾性分析,根据已采取的不同术式分为A,B两组,其中A组63例,行前路椎间盘切除与Zero-P融合内固定;B组76例,行前路椎间盘切除椎间cage融合与钢板内固定。分别于手术前后对患者进行JOA评分、Odom功能评级;采用电视透视吞咽研究(videofluorographic swallowing study,VFSS)评估患者椎前软组织厚度;采用Bazaz吞咽困难分级评估患者术后吞咽困难的发生率。术后12个月时采用颈椎正侧位X线及CT检查评估植骨融合情况,采用MRI检查评估临近节段退变情况。比较两组患者术中出血量、手术时间、手术前后JOA评分、Odom评级及VFSS中的椎前软组织厚度、术后患者吞咽困难发生率(Bazas评分)、椎体间融合率、邻近节段退变发生率。结果:手术前后两组患者的JOA评分、Odom功能评级差异比较无统计学意义(P0.05);两组患者术前VFSS中的椎前软组织厚度比较差异无统计学意义(P0.05);两组患者手术时间及术中出血量比较差异无统计学意义。两组患者VFSS中的椎前软组织厚度、吞咽困难发生率在术后第2天,术后3、6个月及末次随访时差异均有统计学意义(P0.05)。术后1年所有患者获植骨融合,两组融合率比较差异无统计学意义(P0.05)。A组8例(12.7%)出现邻近节段退变,B组19例(25%)出现临近节段退变,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:应用零切迹颈椎前路椎间融合固定系统和传统钛板联合cage融合内固定治疗单节段颈椎间盘突出症均可取得满意疗效,前者术后吞咽困难和临近节段退变发生率较低,中长期疗效有待进一步观察。     

缺血对失神经肌肉超微结构及酶组织化学的影响

目的 研究肢体缺血对失神经支配骨骼肌组织学、超微结构及Na、K—ATP酶和Ca—ATP酶活性的影响。方法 选用SD大鼠24只，建立双下肢失神经支配腓肠肌实验模型后，结扎右侧股动脉，观察肌细胞的组织学，超微结构及Na、K—ATP酶和Ca—ATP酶活性变化。结果 缺血侧肢体肌细胞直径及截面积较对照侧下降速度快25．48％及32．33％(t=2．94，P＜0．05；t＝2．88，P＜0．05)；缺血加速肌细胞线粒体，肌质网退变；Na、K—ATP酶活性术后2周实验侧较对照例增高59．68％，而术后4周缺血侧较对照侧下降17．45％(t＝2．24，P＜0．05)；Ca—ATP酶活性下降速度缺血侧较对照侧分别快26．42％及21．87％(t＝2．64、2．24，P＜0．05)。结论 缺血加速失神经支配骨骼肌萎缩的发生与发展，周围神经损伤合并肢体动脉损伤时，动脉尽可能予以全部修复。     

Serum Brain-Derived Neurotrophic Factor and Myostatin Levels Are Associated With Skeletal Muscle Mass in Kidney Transplant Recipients

BackgroundSarcopenia, or reduced muscle mass, can be an important complication in kidney transplant recipients. The skeletal muscles were recently reported to secrete various myokines, such as brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and myostatin, to regulate their mass, function, or both. The aim of the present study was to analyze the interrelationship between myokines (BDNF and myostatin) and skeletal muscle mass in kidney transplant recipients.MethodsThe study population comprised 40 patients who underwent kidney transplantation at Kansai Medical University Hospital. Twenty patients had low skeletal muscle mass index (SMI) values, as measured on dual-energy x-ray absorptiometry, and were categorized into 2 groups (low SMI and normal).ResultsMean serum BDNF levels were 15.7 ng/mL in the low SMI group and 17.8 ng/mL in the normal group (P = .013). Mean serum myostatin levels were 362 pg/mL in the low SMI and 267 pg/mL in the normal group (P = .024). There was a significant positive correlation among metabolic equivalents and serum BDNF levels (r = 0.817; P < .001) and a significant negative correlation among metabolic equivalents and serum myostatin levels (r = –0.541; P < .001). Receiver operating characteristic analysis showed that serum BDNF and level of area under curve was 0.712, and serum myostatin level of area under the curve was 0.690. Serum BDNF and myostatin levels showed no significant difference.ConclusionThese results suggest that BDNF and myostatin are potential biomarkers of reduced muscle mass in kidney transplant recipients.     

Use of Erythropoietin as adjuvant therapy in nerve reconstruction

Background and aims Adjuvant therapies may improve the outcome after nerve reconstruction. We analyzed the influence of recombinant human Erythropoietin (rHuEpo), which has proven angiogenic and neuroprotective effects, on the quality of peripheral nerve regeneration. Methods Thirty two female Lewis rats underwent nerve reconstruction by means of tubulization (groups I and II) or autologous sciatic nerve grafting (groups III and IV). Groups I and III received daily subcutaneous rHuEpo injections over 2 weeks (1,000 U/kg bw) with normal saline injections as controls (groups II and IV). Data on histology and muscle weight were collected after 7 weeks. Axon count and diameter were assessed by a new method based on digital segmentation. Results Atrophy of the tibial muscle was less severe in the rHuEpo-treated group compared to controls resulting in significant higher muscle weight quotients (p = 0.006). The same trend was found in the gastrocnemius muscle, but without being statistically significant. No significant differences in axon count or axon diameter were detected in the presence of rHuEpo treatments. Conclusion Our findings give evidence for a positive effect of Erythropoietin on functional recovery after nerve grafting. Muscle recovery benefited from rHuEpo administration despite absence of improved neural morphology. Semi-automated axon detection facilitated accurate morphometrical assessment. German Society of Surgery, Surgical forum 2008, Best of Abstracts The paper was presented at the following scientific meetings: 11th European conference of scientists and Plastic Surgeons (ECSAPS), Aachen, Germany, 21–22.09.2007. 11. Chirurgische Forschungstage, Saarbrücken, Germany, 15–17.11.2007.     

Neuronal regeneration in denervated muscle following sensory and muscular neurotization

Background and purpose?Neurotization of denervated muscles has been shown to improve muscle bulk, but the neuronal regeneration response has not been compared previously in different surgical techniques of neurotization. Thus, using a rat model of experimental skeletal muscle denervation, we studied neuronal regeneration following sensory neurotization by two methods: sensory nerve to motor branch of muscle and direct sensory nerve implantation to muscle.

Material and methods?The lateral head of the gas-trocnemius muscle was denervated in 36 rats, of which the first 12 served as denervated controls. In the second group of 12, the sural nerve was anastomozed to the motor branch of the gastrocnemius muscle (sensory-to-motor nerve neurotization) and in the remaining 12 rats the sural nerve was split into 4 fascicles and embedded into 4 quadrants of the muscle (direct sensory nerve-to-muscle neurotization). Immunohistochemistry was used to examine nerve fibers in muscle containing the sensory neuropeptides substance P (SP) and calcitonin gene-related peptide (CGRP), and general neuronal marker protein gene product 9.5 (PGP 9.5).

Results?Semiquantitative analysis showed that, compared to the control side, the number of nerve fibers on the experimental side was highest (p < 0.01) for group III (direct sensory nerve-to-muscle neurotization) for all 3 markers. The difference was 71%, 298%, and 254% for PGP 9.5, CGRP, and SP, respectively.

Interpretation?This method may be a good option for inducing neuronal regeneration in denervated muscles, and has therapeutic implications for prevention of atrophy of denervated muscles and as an adjunct for reconstruction of soft tissue defects.