快速老化小鼠的听功能和耳蜗毛细胞的增龄性变化

目的:研究快速老化小鼠听觉功能和耳蜗毛细胞的增龄性变化。方法:选1,3,5,7,9月龄的快速老化小鼠亚系1(Senescence accelerated mouse/prone1,SAMP1)作为实验组,而同龄抗快速老化亚系1(Senescence accelerated mouse/resistance1,SAMR1)作为SAMP系的正常对照组。分别观察其听觉脑干反应阈值以及耳蜗毛细胞损失情况等方面的增龄性变化。结果:听功能改变:第7,9月龄SAMP1小鼠的脑干反应阈值较同龄SAMR1小鼠明显增高(P<0.05);耳蜗形态学改变:耳蜗铺片、毛细胞计数显示第7,9月龄SAMP1小鼠外毛细胞较同龄SAMR1小鼠明显缺失(P<0.05)。结论:SAMP1小鼠随月龄增长耳蜗外毛细胞缺失、听功能减退,7,9月龄SAMP1小鼠出现明显的衰老特征,表现出听功能明显低下,可作为老年聋动物模型用于耳聋的相关研究。     

快速老化小鼠耳蜗传出神经的增龄性变化

目的 研究快速老化小鼠耳蜗传出神经的增龄性变化.方法 选择1、3、5、7、9月龄的快速老化小鼠亚系1(SAMP 1)作为实验组,而同龄抗快速老化小鼠亚系1(SAMR 1)作为SAMP系的正常对照组,观察其耳蜗传出神经末梢的增龄性变化.结果 第7、9月龄SAMP 1小鼠耳蜗传出神经纤维及末梢较同龄SAMR 1小鼠明显缺失(P<0.05),并伴有传出神经纤维突触结构损伤.结论 SAMP 1小鼠随月龄增长耳蜗传出神经出现增龄性损伤.     

快速老化小鼠耳蜗组织MeCP2的增龄性变化

目的 探讨快速老化小鼠听觉功能、以及耳蜗组织中甲基化结合蛋白-2(methyl-CpG-binding protein 2,MeCP2)的增龄性变化.方法 本研究选3、5、7、9月龄的快速老化小鼠亚系1(Senescence acceler-ated mouse/prone 1,SAMP 1)作为实验组.而同龄抗快速老化亚系1(Senescence accelerated mouse/resistance 1,SAMK 1)作为SAMP 1的正常对照组.应用听觉诱发反应仪检测其听觉脑干反应阈值;应用RT-PCR和Western印迹杂炙对耳蜗组织中MeCP2 mRNA和蛋白的表达水平进行半定量分析.结果 第7、9月龄SAMP 1脑干反应阅值较同龄SAMR 1明显增高(P<0.05);MeCP2 mKNA和蛋白在不同月龄快速老化小鼠耳蜗组织中均有表达,第7、9月龄SAMP 1小鼠耳蜗组织中的MeCP2 mRNA和蛋白较同龄SAMR 1小鼠明显降低(P<0.05).结论 MeCP2 mKNA和蛋白的表达水平随着快速老化小鼠听觉功能增龄性减退而降低,说明MeCP2可能与维持耳蜗的功能状态有关.     

快速老化小鼠海马组织中IL-18的增龄性变化

目的:探讨老化小鼠海马组织中IL-18表达变化特点.方法:本研究选3、9月龄的快速老化小鼠亚系8(Senescence accelerated mouse/prone 8,SAMP 8)作为实验组,而同龄抗快速老化亚系1(Senescence accelcrated mouse/resistance 1,SAMR 1)作为SAMP系的正常对照组.用RT-PCR方法检测各组动物海马组织中IL-18的表达,ELISA方法检测各组动物海马组织中IL-18蛋白表达.结果:3、9月龄SAMR 1海马组织中仅有少量IL-18 mRNA及IL-18蛋白表达.9月龄SAMP 8海马组织中IL-18 mRNA的表达均较SAMR 1对照组显著增高(P＜0.05);IL-18蛋白的表达类似于IL-18mRNA的改变.结论:老化小鼠海马病理性损伤与海马组织IL-18的异常表达有关.     

淀粉样前体蛋白在快速老化痴呆小鼠P8海马中表达的免疫组化学研究

目的:观察淀粉样前体蛋白(APP)在快速老化痴呆小鼠P8(SAMP8)海马中的表达,探讨其与SAMP8小鼠增龄性变化的关系。方法:选用1、4、8、12月龄的SAMP8,用同龄正常老化小鼠R1(SAMR1)作为对照组,每组各8只,用免疫组化方法检测海马区APP的表达。结果:APP主要在SAM鼠海马神经元胞浆内表达,海马不同区域均有表达。定量结果显示对照组SAMR1小鼠海马各区域APP的表达随月龄增加无显著性改变(P>0.05);而SAMP8小鼠APP的表达则随月龄增加而增加,8月龄和12月龄SAMP8小鼠CA1区的表达量显著高于1月龄组(P<0.05),也分别显著高于同月龄对照组(P<0.05),CA3区APP的改变稍晚于CA1区,与同品系1月龄小鼠及同龄对照组比较,12月龄时显示有显著性增加(P<0.05)。结论:SAMP8小鼠海马APP的表达随月龄增加而增加,提示APP表达量的增加与SAMP8小鼠的快速老化相关。     

快速老化小鼠耳蜗组织神经生长因子的增龄性变化

目的 探讨快速老化小鼠听觉功能、以及耳蜗组织中神经生长因子(NGF)的增龄性变化.方法 该研究选3、5、7、9月龄的快速老化小鼠亚系8(SAMP 8)作为观察对象.应用听觉诱发反应仪检测其8kHz短纯音听觉脑干反应阈值;应用RT-PCR和Western印迹杂交对耳蜗组织中NGF mRNA和蛋白的表达水平进行半定量分析.结果 SAMP 8脑干反应阈值随着月龄增加而显著增高(P ＜0.05);NGF mRNA和蛋白在不同月龄快速老化小鼠耳蜗组织中均有表达,SAMP 8耳蜗组织中的NGF mRNA和蛋白随着月龄增加而显著降低(P＜0.05).结论 NGF mRNA和蛋白的表达水平随着快速老化小鼠听觉功能增龄性减退而降低,说明NGF可能与维持耳蜗的功能状态有关.     

MTH2和MTH3蛋白在快速老化模型鼠SAMP8胸腺中增龄性表达的比较研究

目的 检测抗核酸氧化酶蛋白MTH2和MTH3在快速老化小鼠SAMP8胸腺中的表达,探讨其与SAMP8增龄性变化的相关性.方法 选用1、4、8、12月龄的SAMP8小鼠及同龄的抗快速老化小鼠R1(SAMR1)作为实验对象.采用免疫印迹法检测胸腺中MTH2和MTH3蛋白的表达.结果 免疫印迹结果显示,在SAM鼠胸腺中MTH3蛋白的表达量均显著高于MTH2.定量结果显示,1、4、8、12月龄的SAMP8胸腺中MTH3表达的灰度值(grey level)分别为0.546、0.322、0.207、0.164,显著低于同龄SAMR1(P＜0.05),而MTH2在SAMP8和SAMR1胸腺中的表达却没有显著性差异(P＞0.05).与同组1月龄小鼠相比,MTH3在4、8、12月龄的SAMP8鼠胸腺中的表达量分别下降41％、62％、70％;在SAMR1鼠中分别下降19％、43％、67％,差异有统计学意义(P＜0.05).而MTH2在SAMP8和SAMR1胸腺中的表达也存在相同的增龄性下降的变化趋势(P＜0.05).结论 MTH2和MTH3蛋白在SAMP8和SAMR1小鼠胸腺中的表达量均呈增龄性下降,提示MTH2和MTH3蛋白表达量的减少在SAM鼠胸腺的衰老过程中具有重要意义,其中MTH3蛋白表达量的减少可能与SAMP8小鼠胸腺的快速衰老密切相关.     

当归芍药散对快速老化模型小鼠海马蛋白表达的影响

目的 研究当归芍药散(powder of Chinese Angelica and Peony,DSS)对快速老化模型小鼠(senescence-accel-crated mouse,SAM)海马蛋白表达的影响.方法 选择12月龄SAM的快速老化亚系SAMP8和抗快速老化亚系SAMR1作为研究对象,分为SAMR1组、SAMP8组和SAMP8 DSS组(3.2 g/kg),每组10只,连续给药30 d.应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定,观察DSS对SAMP8海马蛋白表达的影响.结果 与SAMR1组比较,SAMP8组海马中有9个蛋白表达下调,13个蛋白表达上调;SAMP8 DSS组与SAMP8组比较,海马中有14个蛋白表达下调,21个蛋白表达上调.经肽质量指纹谱分析及蛋白数据库检索,表达有明显变化的蛋白根据功能可分为5类:线粒体相关蛋白、能量代谢相关蛋白、突触形成相关蛋白、细胞骨架蛋白、其他蛋白.结论 SAMP8和SAMRI海马蛋白表达存在明显差异,DSS可影响快速老化模型小鼠海马蛋白的表达,其作用是多途径多靶点的.     

快速老化小鼠SAMP8海马组织中基因表达谱的研究

目的观察快速老化小鼠P8（SAMP8）与同龄正常老化小鼠R1（SAMR1）海马组织中基因表达谱的差异。方法选用1、4、6、8、12月龄的SAMP8小鼠,用SAMR1作为对照组,每组各9只,快速处死后取海马组织提取总RNA, 用纯化后的总RNA合成cDNA并标记荧光染料,与32k小鼠寡核苷酸微阵列芯片杂交,用共聚焦扫描仪LuxScanTM 10KA及LuxScan 3.0软件进行图像采集与数据处理,用SAM软件分析差异表达的基因,用MAS系统对差异基因进行通路（pathway）分析。结果正常老化小鼠SAMR1各月龄间表达谱差异无显著性,快速老化小鼠SAMP8各月龄间差异显著,两种品系小鼠的比较结果显示1月龄、12月龄基因表达差异最为显著,6月龄无显著差异。Pathway分析结果显示MAPK信号通路的基因表达差异最为显著。结论SAMP8小鼠与SAMR1小鼠海马的基因表达存在明显的差异,以MAPK信号通路的基因表达差异最为显著。     

神经生长因子在新生大鼠耳蜗的定位及其意义

目的 观察神经生长因子在新生大鼠耳蜗中的定位,为进一步研究其在听觉通路中的作用机制提供依据.方法 出生后5～7 d健康SD大鼠20只,制备耳蜗石蜡切片,用兔抗小鼠神经生长因子(nerve growth factor,NGF)多克隆抗体行免疫组织化学染色(S-P法),检测NGF在耳蜗中的表达.结果 新生SD大鼠膜迷路呈类三角形结构,可清晰看见幼稚柯替器、螺旋神经节细胞、蜗轴中的细胞染色阳性,细胞核及细胞质内均有表达.结论 NGF对出生后5～7 d大鼠螺旋神经节细胞和毛细胞的存活、成熟密切相关.     

山茱萸环烯醚萜苷对快速老化小鼠行为学及病理学改变的影响

目的 研究山茱萸环烯醚萜苷(cornel iridoid glycoside,CIG)对快速老化小鼠(senescence-accelerated mouse prone 8,SAMP8)的行为学表现及阿尔茨海默病相关病理学改变的影响。方法 应用8月龄的SAMP8小鼠及正常老化小鼠(senescence accelerated mouse/resistant 1,SAMR1)作为对照小鼠,灌胃给予药物CIG处理。2个月后,应用自主活动仪观察小鼠的自主活动能力,避暗试验检测小鼠的被动回避记忆能力。应用Western blotting法分别检测小鼠脑内淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)代谢相关蛋白及突触相关蛋白的变化。结果 与对照小鼠相比,SAMP8小鼠的自主活动次数及避暗试验中的步入潜伏期均显著降低,而CIG给药可以显著改善以上行为学表现,增强其自主活动和记忆能力。进一步机制研究发现,CIG可以增加SAMP8小脑内去整合素金属蛋白酶10 (a disintegrin and metalloproteinase 10,ADAM10)和胰岛素降解酶(insulin-degrading enzyme,IDE)的表达,增加可溶性淀粉样前体蛋白α(soluble amyloid procurer protein α,sAPPα)的表达,同时增加了突触相关蛋白synaptophysin、PSD95、GluR1和p-CaMKIIα的表达。结论 CIG可以用于改善老化引起的认知障碍及阿尔茨海默病样的病理改变。     

二苯乙烯苷对SAMP8鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响

目的观察二苯乙烯苷(TSG)对快速老化小白鼠/8(SAMP8)脑组织氨基酸类神经递质含量的影响。方法选用6月龄的SAMP8鼠50只,随机分为5组,每组10只:SAMP8对照组,阳性药(石杉碱甲)对照组,TSG低、中、高剂量组,另选用6月龄SAMR1鼠10只作正常对照组。各组分别灌胃相应药物50天后,采用高效液相色谱法检测各组小鼠脑组织氨基酸类神经递质含量。结果与正常对照组SAMR1组比较,SAMP8对照组脑组织谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)含量明显升高,差异有显著性(P<0.05或P<0.01),天冬酰胺(Asn)、甘氨酸(Gly)有升高趋势,但差异无显著性(P>0.05);TSG各剂量组能显著降低SAMP8鼠Glu、Asp含量(P<0.05或P<0.01),但对Gly的降低作用不明显(P>0.05)。部分TSG剂量组对降低Gln、Asn和GABA含量作用明显(P均<0.05)。结论 TSG能显著降低SAMP8鼠脑组织Glu、Asp含量,纠正了SAMP8鼠脑区氨基酸类递质代谢的紊乱状态,使兴奋性和抑制性氨基酸神经递质最终趋向平衡。     

Effects of Acupuncture on Expressions of the Transcription Factors NF-E2,YB-1,LRG47 in the SAMP10 Mice

To explore the mechanism of acupuncture for delaying aging. Methods: Using the senescence accelerated mouse pattern SAMP10 and the normal aging mice SAMR1 as models and applying RT-PCR and digoxin (DIG)-labeled Northern blot technique to observe expressions of NF-E2,YB-1,LRG47 genes in the forebrain,cortex and hippocampus in a 8-month old SAMR1 control group,a 8-month old SAMP10 control group,a 8-month old SAMP10 acupuncture group and a 8-month old SAMP10 non-point stimulation group.Results: In the SAMP 10 control group,the expressions of NF-E2,YB-1 and LRG47 were down-regulated in the forebrain,cortex and hippocampus,and after acupuncture they were up-regulated and tended to normal. Conclusion: The brain aging of the SAMP10 mice is related with abnormal expressions ofNF-E2,YB-1 and LRG47 genes; and acupuncture can regulate the expressions of NF-E2,YB-1 and LRG47 genes,strengthening the functions of erythrocyte series,increasing the proliferation of cells and enhancing the cellular immune function in anti-bacteria,hence delaying aging.     

丰富环境对快速老化小鼠SAMP8情感的影响

目的：探讨丰富环境对快速老化小鼠SAMP8情感的影响．方法：3mo龄SAMP8小鼠和3mo龄SAMR1小鼠随机分为丰富环境组（n=16）和标准环境组（n=10）,饲养3mo后用高架十字迷宫实验评测小鼠的情感改变．用RT—PCR方法检测小鼠海马脑源性神经生长因子（BDNF）的表达．结果：丰富环境组小鼠进入开放臂次数比例（OE％）及在开放臂停留的时间（OT％）比例均明显高于标准环境组（P〈0．01）．丰富环境组海马BDNF mRNA的表达明显高于标准环境组（P〈0．01）．结论：丰富环境能提高SAMP8小鼠海马BDNF mRNA的表达,并对SAMP8小鼠的精神行为具有干预作用,降低SAMP8小鼠的焦虑行为．     

利用基因芯片研究针刺对快速老化小鼠海马基因表达的影响

[目的]利用基因芯片技术研究“益气调血,扶本培元”针法对快速老化小鼠(SAMP10)海马基因表达的影响。[方法]选取雄性8月龄快速老化小鼠(SAMP10)(分成针刺腧穴组,针刺非穴组,对照组)和同源正常老化小鼠(SAMR1),采用cDNAmicroarray技术,分析伴随快速老化SAMP10海马基因表达谱的变化以及针刺对其的影响。[结果]芯片结果显示,伴快速老化,P10海马共有7类10个基因的表达发生变化,8个基因表达下调,2个基因表达上调,施予“益气调血,扶本培元”针法后,所有与SAMP10快速老化相关基因的表达均被部分或全部的逆转,显示针刺具有特异性。[结论]“益气调血,扶本培元”针法能够良性调节脑老化相关基因的表达,并可能通过该种作用延缓脑衰老。     

TRPV1在正常BALB/c小鼠耳蜗中的定位表达

目的 研究瞬时受体电位通道蛋白V1(TRPV1)在正常小鼠耳蜗中的定位观察.方法 选择10只健康成年BALB/c小鼠,应用免疫荧光染色方法观察TRPV1在耳蜗中的定位与表达,同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试小鼠的听力.结果 TRPV1在小鼠耳蜗螺旋器的内、外毛细胞、螺旋神经节细胞和血管纹边缘细胞等都有表达,且主要定位于细胞膜;蛋白质印迹检测结果亦显示小鼠耳蜗中有TRPV1的表达.结论 TRPV1在正常BALB/c小鼠耳蜗的多种细胞中均有表达,这为深入TRPV1在内耳听觉生理和病理生理中的作用奠定基础.