骨髓微环境中成骨细胞与白血病细胞相互作用的实验研究

目的 研究骨髓微环境中成骨细胞对白血病细胞存活、凋亡以及白血病细胞对成骨细胞细胞因子表达的影响及机制.方法 将小鼠急性髓系白血病AML1-ETO9a-Rac1细胞与小鼠颅骨成骨细胞体外共培养,流式细胞技术检测白血病细胞的存活比例;Annexin Ⅴ/PI标记流式细胞术检测白血病细胞凋亡,Western blot法检测白血病细胞内的凋亡相关信号分子的活化水平;实时定量反转录PCR检测成骨细胞内细胞因子TPO、N-cadherin、OPN、Ang1的转录水平.结果 与成骨细胞共培养的AML1-ETO9a-Rac1细胞的GFP阳性率明显高于单独培养的AML1-ETO9a-Rac1细胞.与成骨细胞共培养的AML1-ETO9a-Rac1细胞凋亡率显著低于单独培养4d的AML1-ETO9a-Rac1细胞,且共培养的AML1-ETO9a-Rac1细胞的PARP活化水平比单独培养的AML1-ETO9a-Rac1细胞明显偏低.AML1-ETO9a-Rac1白血病小鼠的原代成骨细胞的N-cadherin转录水平显著升高,Ang1、OPN两类因子的转录水平则显著下降,TPO的转录水平较正常小鼠的升高.结论 成骨细胞能够支持白血病细胞的存活,抑制白血病细胞的凋亡.同时,白血病细胞也能反作用于成骨细胞,使其产生的微环境相关因子表达发生改变.     

骨髓成纤维样基质细胞系对急性髓细胞白血病细胞系增殖与分化影响的研究

目的：以急性髓细胞白血病（acute myeloid leukaemia，AML）细胞系为研究对象，观察正常人骨髓成纤维样细胞系（human bone marrow fibro—blastoid stromal cell line，HFCL）对急性单核细胞白血病细胞系U937、急性粒细胞白血病敏感细胞HL-60和多药耐药细胞HL-60／VCR增殖和分化的影响。方法：建立U937、HL-60和HL-60／VCR细胞与HFCL细胞的共培养模型，实验分对照组、直接接触组和transwell组。采用台盼蓝拒染法测定生长曲线；硝基四氮唑蓝（NBT）确定细胞分化；流式细胞仪检测细胞周期和CD11b、CD13、CD14和CD33细胞表面抗原进一步鉴定细胞分化；west-ernblot检测增殖细胞核抗原（PCNA）和P-糖蛋白（P-gP）的表达。结果：与HFCL细胞共培养96h后，U937、HL-60和HL-60／VCR细胞的生长受抑，且与HFCL细胞直接接触组的抑制作用大于用tr-answell组，P〈0．01。同时发现AML细胞系与HFCL细胞共培养后，G0／G1期细胞比例均增高，而S期细胞均减少，P〈0．01；尤其是直接接触组CD11b和CD14表达也均增高（P〈0．01），CD13和CD33变化不大，NBT阳性细胞轻度增高，且差异有统计学意义。Western blot检测结果显示，3种AML细胞系PCNA表达下调；以直接接触组为甚。提示介导着白血病细胞和骨髓基质细胞间的相互作用的整合素p1（VLA-4）和p2（LFA-1），在HFCL细胞对AML细胞生长作用影响中起着不可忽视的作用。结论：HFCL对3种具有代表性的AML细胞系U937、HL-60和HL-60／VCR有增殖抑制和诱导分化作用，除了能抑制AML细胞的生长，抑制PCNA的表达，出现G0／G1期阻滞外，还能诱导其部分向单核细胞分化。     

肺癌细胞和蛙皮素抑制树突状细胞的产生和功能

目的：了解肺癌细胞株及蛙皮素对树突状细胞（DC）产生及功能的影响。方法：树突状细胞由健康人外周血单个核细胞CD14^ ，在完全细胞培养液中加入1000U／ml GM-CSF和1000U／ml IL-4,培养7天获得，肺癌细胞株CRL－5815，CRL－5826，Bombesin和Bombesin受体拮抗剂加入培养液中，Annxin V检测DC凋亡；流式细胞仪检测CD40，CD86，CD83，CD80，HLA－DR阳性表达。结果：培养7－10天后的DC前体细胞表达高水平的HLA－DR CD80 CD86 CD83 CD40。肺癌及蛙皮素可导致DC前体细胞凋亡，而蛙皮素受体拮抗剂可部分保护蛙皮素致DC凋亡的作用。加入肺癌细胞株或蛙皮素与DC共培养时明显抑制上述细胞表型的表达和DC刺激同种异体T细胞的增殖能力，当加入蛙皮素受体拮抗剂时，DC细胞表达HLA－DR CD80 CD86 CD83 CD40明显增加，接近DC正常对照组。结论：肺癌细胞株及蛙皮素可导致DC的凋亡，抑制树突状细胞的产生和功能。     

5-氮杂脱氧胞苷增强苯丁酸钠对Kasumi-1细胞的诱导分化和凋亡作用

目的 探讨组蛋白脱乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠(PB)联合DNA甲基化抑制剂5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-CdR)阻断AML1-ETO的生物学功能．消除AML1-ETO的转录抑制,诱导t(8;21)急性髓系白血病细胞系Kasumi-1细胞的分化和凋亡作用。方法 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察PB单药或联合5-Aza-CdR对细胞生长的抑制作用;流式细胞术分析细胞周期和检测髓系分化抗原CD11b和CD13的表达,判断细胞分化;Annexin V和碘化丙啶(PI)双标记,经流式细胞术分析细胞早期凋亡。结果 (1)5-Aza-CdR可增强PB对Kasumi-1细胞的生长抑制作用,半数抑制浓度(IC50)下降为1．95mmol/L。(2)PB处理使Kasumi-1细胞阻滞于G0／G1期,5-Aza-CdR与PB联合则使细胞阻滞于G2／M期。(3)低剂量5-Aza-CdR增强PB诱导：Kasumi-1细胞髓系分化抗原CD11b和CD13的表达。(4)低剂量5-Aza-CAR不能增强PB诱导的Kasumi-1细胞凋亡,而高剂量5-Aza-CdR增强PB诱导的Kasumi-1细胞早期凋亡。结论 DNA甲基化抑制剂5-Aza-CdR增强脱乙酰化酶抑制剂PB抑制Kasumi-1细胞生长、诱导分化和凋亡的作用。     

VEGF反义核酸与柔红霉素联用对增加髓性白血病细胞化疗敏感性的研究

 目的　探讨血管内皮生长因子VEGF(VascularEndothelialGrowthFactor)反义核酸与柔红霉素联用 ,对AML、CML细胞药物敏感性的影响。方法　采用以前实验筛选所得的最优反义核酸A7,长度为 2 0脱氧核糖核苷酸 ,全硫代修饰 ;以脂质体介导转染细胞 ,2 4h以后加入柔红霉素 ,继续培养 72h ,用0 .4 %苔盼蓝拒染法计数活细胞 ,用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白的浓度 ,用流式细胞仪检测细胞凋亡百分数。结果　VEGF反义核酸显著增加柔红霉素抑制AML、CML细胞生长 ,下调VEGF蛋白的表达 ,诱导AML、CML细胞凋亡。结论　VEGF反义核酸提高AML、CML细胞对柔红霉素敏感性 ;内源性VEGF蛋白使AML、CML细胞产生耐药性     

CD7纳米抗体衍生的CAR-T细胞对CD7阳性急性髓系白血病细胞的杀 伤活性

目的：针对CD7阳性的急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）细胞开发一种新型的CD7嵌合抗原受体修饰 的T细胞（CD7-CAR-T）,观察其对CD7阳性AML细胞的杀伤作用。方法：基于CD7纳米抗体序列、CD28和4-1BB共刺激域序 列构建CD7-CAR慢病毒载体,包装病毒颗粒并与CD7蛋白阻断剂（protein expression blocker,PEBL）慢病毒共感染人T细胞, 制 备CD7-CAR-T;应用实时无标记动态细胞分析技术（real time cellular analysis,RTCA）验证CD7-CAR-T对CD7过表达的293T细 胞的特异性杀伤能力,流式细胞术检测CD7-CAR-T对CD7高、中、低表达的AML细胞（KG-1、HEL、Kasumi-1细胞）的增殖和细 胞因子分泌的影响。结果：成功构建CD7-CAR-T 细胞并阻断其表面 CD7 的表达,与 T 细胞相比,CD7-CAR-T 细胞可以抑 制 CD7-293T 细胞的增殖并促进其分泌 TNF、Granzyme B 和 INF-γ,可显著促进 CD7 阳性的 KG-1 细胞和 HEL细胞的凋亡 （t=147.1、 P＜0.01; t=23.57、 P＜0.01）和细胞 因 子 分 泌（P＜0.05 或 P＜0.01）,而对低表达 CD7 的 Kasumi-1 细胞无显著影响 （t=0.7058、 P＞0.05）。结论： CD7-CAR-T细胞能够特异性杀伤CD7阳性的AML细胞。     

CD47在初诊正常核型急性髓系白血病患者中的表达及其临床意义

目的 探讨CD47在初诊正常核型急性髓系白血病(AML)患者中的表达水平及临床意义.方法 选取137例初诊正常核型AML患者及3名健康志愿者.采用流式细胞术及实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)对健康志愿者骨髓造血干细胞(HSC)和造血祖细胞(MPP)及AML患者骨髓单个核细胞(MNC)和白血病干细胞(LSC,Lin-CD34+CD38-CD90-)的CD47表达水平进行检测;采用基因组分析平台检测患者FMS样酪氨酸激酶3内部串联重复(FLT3-ITD).采用超高速流式分选系统分选CD34+CD38-CD47lo和CD34+CD38-CD47hi细胞.将两组细胞均用MethoCult H4445培养液培养接种于含有琼脂糖的甲基纤维素板,12 d后计数MPP集落形成单位(CFU),同时将1×105个CD34+CD38-CD47lo和CD34+CD38-CD47hi细胞分别移植到经280 cGy照射的NSG(NOD-SCID IL-2Rγnull)小鼠,8周后处死小鼠,流式细胞术检测人CD45+细胞比例.结果 CD47的表达在初诊正常核型AML患者中高于健康志愿者,CD47在AML各法、美、英协作组(FAB)亚型中均有表达,相对表达量比较差异无统计学意义(F=0.545,P>0.05).137例患者中CD34+CD38-CD47hi 37例,其中17例(46%)FLT3-ITD阴性,20例(54%)为FLT3-ITD阳性;CD34+CD38-CD47lo的患者100例,其中63例(63%)FLT3-ITD阴性,37例(37%)FLT3-ITD阳性,CD34+CD38-CD47hi与CD34+CD38-CD47lo患者相比较,FLT3-ITD阳性率差异无统计学意义(χ2=3.79,P>0.05).将FACS分选的CD34+CD38-CD47lo和CD34+CD38-CD47hi接种于含有琼脂糖的甲基纤维素板12 d后,仅CD34+CD38-CD47lo细胞可以形成CFU.NSG小鼠移植实验显示CD34+CD38-CD47lo细胞可重建造血,CD34+CD38-CD47hi植入失败.结论CD34+CD38-CD47hi富集LSC,可作为AML患者化疗后微小残留病的监测指标.     

交联CD44通过Fas途径促进人肥大细胞白血病HMC-1细胞的凋亡

目的:探讨交联CD44分子对人肥大细胞白血病HMC-1细胞株Fas表达及其介导的细胞凋亡的影响.方法:应用流式细胞术检测HMC-1细胞表面CD44及Fas的表达,并观察透明质酸(native hyaluronan,HA)、低分子质量透明质酸(fragmented hyaluronan,F-HA)处理或抗体交联CD44分子后细胞表面Fas表达的变化,进而检测PI3K、PKC及MAPK信号通路抑制剂、蛋白质合成抑制剂和肌动蛋白聚合抑制剂对CD44分子交联后细胞表面Fas表达的影响,用Northern杂交技术检测交联CD44对Fas mRNA表达的影响,用Annexin V/PI双染法检测交联CD44、HA或F-HA对Fas介导的细胞凋亡的影响.结果:HMC-1细胞高表达CD44而低表达Fas,交联CD44分子显著上调细胞表面Fas的表达(P＜0.05),而Fas mRNA转录水平没有明显变化;肌动蛋白聚合抑制剂细胞松弛素B能抑制CD44上调的Fas表达(P＜0.05),所检测细胞信号通路抑制剂和蛋白质合成抑制剂均未能抑制Fas表达的上调(P ＞0.05);F-HA和交联CD44均能够促进Fas介导的细胞凋亡(P＜0.05).结论:CD44分子可上调HMC-1细胞的Fas表达并放大Fas介导的细胞凋亡,CD44分子可能成为肥大细胞白血病治疗的新靶点.     

CD105、TSP-1在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的检测人膀胱移行细胞癌(transitional bladder cell carcinoma,TBCC)中CD105和TSP-1的表达,并探讨两者与TBCC临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法测定60例膀胱移行细胞癌及12例正常的膀胱黏膜组织中的CD105和TSP-1的表达水平及微血管密度(MVD),并分析其在膀胱移行细胞癌各分期、分级中的表达意义。结果 60例膀胱移行细胞癌组织中CD105阳性表达率为78.3%,TSP-1阳性表达率为43.3%。CD105的表达及微血管密度在膀胱移行细胞癌中的表达明显高于正常膀胱组织(P<0.01)。TSP-1在早期膀胱移行细胞癌的表达与正常膀胱组织的表达差异无统计学意义(P>0.05);在中晚期中的表达低于正常膀胱组织(P<0.05)。结论 TBCC中CD105和TSP-1的表达是调控肿瘤血管生成的重要因素且与肿瘤的生长转移密切相关。联合测定两者在膀胱癌中的表达情况,有助于判断膀胱肿瘤的发展情况。     

Hes1对急性髓系白血病患者骨髓CD34+CD38-细胞的作用及其机制研究

  目的  研究Hes1对急性髓系白血病(AML)患者骨髓CD34+CD38-细胞的作用及其机制。  方法  收集初治AML患者及正常供者骨髓样本后，通过密度梯度离心法获取单个核细胞，流式细胞术检测CD34+CD38-细胞比例及其细胞周期。通过免疫磁珠法分选CD34+CD38-细胞后，体外集落形成实验(CFC)检测其增殖能力，并通过Realtime PCR检测其Hes1的表达量。构建Hes1过表达逆转录病毒载体，感染正常供者骨髓CD34+细胞后，流式细胞术分析其细胞周期的改变，CFC检测其增殖的改变。  结果  AML患者骨髓CD34+CD38-细胞比例明显低于正常对照，流式细胞术结果显示患者来源CD34+CD38-细胞大多数进入静止期，CFC结果显示患者CD34+CD38-细胞体外扩增能力下降。Realtime PCR结果发现患者CD34+CD38-细胞中Hes1表达上调。提高正常供者CD34+细胞中Hes1的表达后，细胞增殖减少，进入静止期。  结论  在AML中CD34+CD38-细胞比例下降，进入静止期，与Hes1的表达上调有关。      

Estradiol down-regulates CD36 expression in human breast cancer cells

CD36 is a trans-membrane receptor that regulates apoptosis and angiogenesis in response to its ligand thrombospondin-1 (TSP-1). This study measures expression of CD36 and TSP-1 in breast cancer cell lines. Expression of TSP-1 was approximately 50-fold higher in the aggressive cell line MDA-MB-231 than in less aggressive MCF-7, BT-474, ZR-75 and T47-D cells. In contrast, MDA-MB-231 express 30 to 100-fold less CD36 than less aggressive cells. Hormone-dependent T47-D and MCF-7 cells down-regulate CD36 in response to estradiol, and anti-hormone ICI 182,780 block this effect. These results suggest that the estrogen receptors play a role in regulating CD36 expression and ICI 182,780 prevents loss of CD36 as a novel mechanism for its anti-estrogen effect in breast cancer cells.     

抗CD47单克隆抗体对卵巢癌细胞靶向治疗的体外研究

  目的   探讨抗CD47单克隆抗体在体外对巨噬细胞吞噬卵巢癌细胞作用的影响。  方法   收集天津医科大学附属肿瘤医院2011年6月至2011年12月手术切除的卵巢组织样本45例(包含卵巢癌组织样本39例, 正常卵巢组织样本6例), 获得的组织细胞通过流式细胞术分析CD47的表达水平, 通过细胞功能学实验观察抗CD47单克隆抗体在体外对小鼠巨噬细胞吞噬卵巢癌细胞的靶向治疗作用。  结果   流式细胞术分析显示, 卵巢癌细胞系SKOV-3细胞和卵巢癌组织细胞中CD47表达水平均明显高于正常人卵巢上皮细胞, 差异具有统计学意义(P < 0.01), 且与疾病的分化程度相关(P < 0.05)。细胞功能学实验结果显示, 抗CD47单克隆抗体在体外可促进巨噬细胞对卵巢癌细胞的吞噬作用, 各实验组(1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL)分别较空白对照组吞噬指数显著增加, 并且随抗体浓度的增加吞噬指数呈浓度依赖性, 差异均具有统计学意义(P < 0.01)。统计学分析显示, 10μg/mL浓度组吞噬指数达到峰值, 同20μg/mL浓度组吞噬指数无显著性差异(P > 0.05)。  结论   CD47高表达于卵巢癌组织细胞, 且与组织分化程度相关。抗CD47单克隆抗体在体外可促进巨噬细胞对卵巢癌肿瘤细胞的吞噬作用, 为卵巢癌的靶向治疗提供了实验依据。      

芹菜素诱导乳腺癌T47D细胞系p53依赖性凋亡及G2/M期阻滞

  目的  探讨芹菜素（apigenin）对乳腺癌T47D细胞系凋亡及细胞周期的影响。  方法  常规培养T47D细胞, 用四甲基偶氮唑盐法（MTT法）检测芹菜素对乳腺癌T47D细胞系细胞增殖的影响。荧光染色法观察凋亡细胞的形态变化。流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布。Western blot检测不同浓度（0、10、20、40、80 μM）芹菜素对凋亡及周期相关蛋白表达的影响。  结果  随着芹菜素浓度的增加, 芹菜素对T47D细胞的增殖抑制作用明显增强（P < 0.05）; 凋亡荧光染色及流式细胞仪显示, 芹菜素能够诱导乳腺癌T47D细胞凋亡, 随着其浓度的增高, 各组凋亡率分别为（2.41±0.072）%、（10.87±0.028）%、（18.02±0.056）%、（37.05± 0.092）%和（78.38±0.082）%, 与对照组相比, 差异有统计学意义（P < 0.05）; 流式周期分析显示, 芹菜素能够使T47D细胞系G₂/M期阻滞, 随着芹菜素浓度的增高, 不同浓度组细胞G₂/M期所占的比例逐渐增加, 差异有统计学意义（P < 0.05）; Western blot显示p53、p21、Bax和p-Cdc2的含量及Caspase-3, PARP剪切明显增加, 而Bcl-2、CyclinB1及Cdc2的含量却显著减少。  结论  芹菜素能够诱导乳腺癌T47D细胞系p53依赖性凋亡及G₂/M期阻滞, 从而明显抑制其增殖。      

LINC01234通过调控IGF2BP1 c-Myc对急性髓系白血病细胞增殖侵袭迁移的影响

目的：探讨LINC01234通过调控胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)/c-Myc对急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法：分析2019年3月至2021年9月在湖北省恩施州中心医院确诊的31例AML患者和在本院体检的24例健康志愿者的外周血标本。通过实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测分析LINC01234在AML标本和细胞系（MV-4-11、NB4、KG-1、THP-1、HL-60）中的表达模式。HL-60细胞随机记为空白对照（blank control,BC）组、sh-control组、sh-LINC01234组、sh-LINC01234+pcDNA-control组、 sh-LINC01234+pcDNA-c-Myc组。qRT-PCR检测细胞中LINC01234、IGF2BP1和c-Myc的表达。细胞计数试剂盒-8实验、transwell迁...     

MYCN基因表达变化增强神经母细胞瘤细胞SK-N-BE(2)凋亡

  目的   以MYCN基因高表达神经母细胞瘤细胞株SK-N-BE(2)为研究对象, 改变神经母细胞瘤细胞中MYCN基因的表达水平, 观察对肿瘤细胞凋亡的影响。  方法   分别构建MYCN高表达载体和MYCN-siRNA, 并转染神经母细胞瘤细胞株SK-N-BE(2), Western blot检测MYCN蛋白表达变化, 使用ELISA法检验肿瘤细胞凋亡情况。  结果   Western-blot结果显示转染MYCN高表达载体后SK-N-BE(2)细胞中MYCN蛋白表达显著增加(P < 0.05), 转染MYCN-siRNA后MYCN蛋白表达显著下降(P < 0.05)。肿瘤细胞在MYCN表达改变后, 凋亡率均显著增加。  结论   神经母细胞瘤细胞株SK-N-BE(2)中MYCN基因表达抑制或增加均可诱导肿瘤细胞凋亡。      

慢病毒载体介导RNA干扰抑制Livin对人大肠癌HT-29细胞生物学行为的影响

  目的  探讨慢病毒载体介导RNA干扰(RNAi)抑制大肠癌细胞系HT-29细胞Livin基因表达对其生物学行为的影响。  方法  设计、合成靶向Livin的siRNA, 构建pGCSIL-GFP慢病毒载体, 采用Real-time PCR和Western blot方法观察对人大肠癌HT-29细胞Livin mRNA及蛋白质表达的抑制; 并通过台盼蓝拒染法、原位末端标记法(TUNEL)、流式细胞术及Matrigel穿膜侵袭实验检测细胞增殖、凋亡、细胞周期及细胞侵袭性的变化。  结果  重组慢病毒Livin-RNAi-LV1能够有效抑制Livin的表达, 使Livin mRNA和蛋白表达水平明显降低(P < 0.01);Livin沉默能抑制HT-29细胞增殖(P < 0.05), 细胞凋亡增加(P < 0.01), 细胞周期重新分布, G₀/G₁期细胞比例升高(P < 0.05), S期细胞比例降低(P < 0.05), G₂/M期细胞比例降低(P < 0.05) HT-29细胞体外侵袭能力也明显减弱(P < 0.01)。  结论  利用慢病毒载体介导RNA干扰技术沉默Livin基因的表达可以抑制大肠癌HT-29细胞增殖, 促进细胞凋亡, 使细胞侵袭性减弱。      

PRAME基因在急性白血病中的表达及意义

  目的  研究黑色素瘤特异性抗原（preferentially expressed antigen of melanoma,PRAME）基因在急性白血病中的表达及其临床意义。  方法  应用逆转录－聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测自2009年5月到2010年5月收治的34例急性白血病患者和12例健康者骨髓单核细胞中PRAME基因的mRNA表达水平,并与患者临床资料行相关性分析。  结果  34例急性白血病患者中,PRAME基因表达率为38.2%（13/34）,AML患者PRAME的阳性表达率为40.7%（11/27）,ALL患者的阳性表达率为28.6%（2/ 7）。在AML各亚型中,M3型阳性率最高为80%,其次为M2（33.3%）和M5（28.6%）。分别行PRAME基因阳性与阴性组细胞表面抗原的监测,两组CD15（P < 0.05）及CD33（P < 0.05）的表达率均有显著性差异。染色体核型异常患者PRAME阳性率为61.5%（8/ 13）,明显高于染色体核型正常者28.6%（4/14）（P < 0.05）;患者的年龄、性别、白细胞数、骨髓中原始和幼稚细胞比例与PRAME基因mRNA的表达差异无统计学意义。  结论  PRAME基因在急性白血病中表达率较高,可作为监测微小残留病（minimal residual disease,MRD）的标志基因之一。PRAME有可能作为白血病特异性免疫治疗的靶抗原。      

抗MUC1单克隆抗体C595对人卵巢癌0VCAR-3细胞增殖和凋亡的研究

  目的  探讨抗MUCI单克隆抗体C595在体外抑制高表达MUC1的人卵巢癌OVCAR-3细胞增殖并诱导其凋亡的作用。  方法  免疫荧光标记法和流式细胞术检测单克隆抗体C595标记的MUC1在OVCAR-3细胞表面的表达; MTT法、克隆形成试验检测处理后细胞生长抑制情况, TUNEL法检测细胞凋亡, EIISA检测细胞内细胞色素C和Caspase-3活性的变化。  结果  单克隆抗体C595对人卵巢癌OVCAR-3细胞具有明显的增殖抑制作用, 且呈剂量-时间依赖性, TUNEL结果表明C595(IC₅₀)可以诱导细胞凋亡。ELLSA检测显示治疗后的细胞凋亡与释放细胞色素C和Caspase-3浓度的上升相关。  结论  单克隆抗体C595可以在体外抑制人卵巢癌OvCAR-3细胞增殖并诱导其凋亡, 其机制可能与上调Caspase-3蛋白活性有关。