Aβ25-35对原代培养大鼠皮质神经元的损伤作用

目的 考察Aβ25-35对原代培养大鼠皮质神经元的损伤作用.方法 将原代培养的大鼠皮质神经元分为对照组、谷氨酸(glutamate,Glu)组及3个浓度的Aβ25-35组,每组各6孔.观察神经元的形态改变,并测定细胞存活率及培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活力值.结果 与对照组比较,Glu组可造成大鼠皮质神经元明显损伤,形态发生显著改变,细胞存活率为(53.1±5.5)%(P<0.01),并且培养液中LDH漏出显著增多,LDH的活力值为(39.9 4±2.9)U/g Prot (P<0.01);Aβ25-35三个剂量组神经元存活率均显著降低,分别为(69.3±5.9)%(P<0.01)、(52.7±3.0)%(P<0.01)和(33.2±1.8)%(P<0.01),Aβ25-35低、中剂量组培养液中LDH漏出未见明显改变,LDH活力值分别为(23.5±1.4)U/g Prot和(24.7±1.3)U/g Prot(P>0.05),Aβ25-35高剂量组培养液中LDH漏出显著升高,LDH活力值为(38.8±2.0)U/g Prot(P<0.01),与Glu组相当(P>0.05).结论 Aβ25-35能剂量依赖性地损伤皮质神经元,1 μmol/L Aβ25-35剂量组处理24 h后细胞存活率可降低50%左右,可用于Aβ25-35体外诱导阿尔茨海默病细胞模型的建立.     

梓醇保护L-谷氨酸和Aβ25-35损伤PC12细胞作用比较作用比较

目的观察梓醇对L-Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞的保护作用的异同。方法常规培养神经元样PCI2细胞，预先加入梓醇及对照生理盐水24h后分别加L—Glu 5mmol／L和Aβ25-35 20μmol／L损伤24h，K252a干预组细胞在梓醇前1h加入200nmol／LK252a。MTT法测定细胞存活率，放射配基结合分析测定M2受体密度。结果梓醇100μmol／L明显提高细胞存活率（P〈0．01），10μmol／L、100μmol／L升高M2受体密度（P〈0．05，P〈0．01），K252a部分阻断梓醇对Aβ25-35损伤细胞的保护作用，对梓醇保护L—Glu损伤的阻断作用更强。结论梓醇对L—Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞保护作用有差异。     

梓醇保护L-谷氨酸和Aβ25-35损伤PC12细胞作用比较作用比较

目的观察梓醇对L-Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞的保护作用的异同。方法常规培养神经元样PCI2细胞，预先加入梓醇及对照生理盐水24h后分别加L—Glu 5mmol／L和Aβ25-35 20μmol／L损伤24h，K252a干预组细胞在梓醇前1h加入200nmol／LK252a。MTT法测定细胞存活率，放射配基结合分析测定M2受体密度。结果梓醇100μmol／L明显提高细胞存活率（P〈0．01），10μmol／L、100μmol／L升高M2受体密度（P〈0．05，P〈0．01），K252a部分阻断梓醇对Aβ25-35损伤细胞的保护作用，对梓醇保护L—Glu损伤的阻断作用更强。结论梓醇对L—Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞保护作用有差异。     

抗脑衰胶囊对Aβ25-35诱导的神经元损伤作用的影响

目的探讨抗脑衰胶囊对Aβ25-35诱导的皮质神经元损伤作用的影响。方法采用Aβ25-35（10μmol/L）处理原代培养的大鼠皮质神经元损伤模型,加入抗脑衰胶囊含药血清共培养24h,倒置显微镜下观察神经元的形态变化,应用MTT法测定神经元存活率。结果与模型组相比,抗脑衰胶囊含药血清共培养组神经元的生存状态明显改善,神经元存活率明显提高。结论抗脑衰胶囊可显著对抗Aβ25-35对神经元的神经毒性作用,提高细胞存活率。     

H102对Aβ342致神经元毒性的保护作用

目的：观察H102在细胞水平上对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响，寻找最佳药物浓度及对Aβ42所致神经元毒性的保护作用。方法：将不同浓度的H102作用于人神经母细胞瘤株SY5Y，利用噻唑蓝（MTT）法测定细胞的存活率，制定浓度-药效曲线得出最佳药物浓度；将人神经母细胞瘤株SY5Y细胞接种后分为对照组、Aβ42损伤模型组及Aβ42损伤加H102保护组，观察各组的MTT代谢率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、细胞形态。结果：H102在10-160μmol／L浓度范围内均可增加SY5Y细胞的存活率（P〈0．01），20μmol／L是增加细胞活性的最适浓度；与对照组相比，Aβ42损伤模型组MTT代谢率下降（P〈0．05）、LDH漏出率增高（P〈0．01），细胞突起损伤、死细胞增多，加入H102保护后可使上述指标恢复或接近正常。结论：H102具有神经保护作用，可减轻由Aβ42所致的神经元毒性。     

孕酮及别孕烯醇酮对Aβ_(25-35)诱导的神经元损伤作用的影响

目的:研究孕酮及别孕烯醇酮对Aβ25-35诱导的神经元损伤作用的影响。方法:采用Aβ25-35(1μmol.L-1)处理原代培养的大鼠大脑皮质神经元建立损伤模型,另分别加入不同浓度孕酮及别孕烯醇酮与Aβ25-35共孵育24h,观察神经元的形态学变化并测定存活率(MTT法)。结果:与模型组比较,孕酮共孵育组神经元生存状况明显改善,神经元存活率浓度依赖性地升高(r=0.757,P<0.01),高剂量组的存活率为(100.7±7.9)%,与对照组比较无统计学差异(P>0.05);别孕烯醇酮共孵育组神经元生存状况与模型组比较无明显改善,神经元存活率呈浓度依赖性降低(r=-0.841,P<0.01)。结论:神经甾体孕酮能浓度依赖性地抑制Aβ25-35诱导的神经毒性作用,提高细胞存活率;孕酮的代谢物别孕烯醇酮不能对抗Aβ25-35引起的神经元损伤,并浓度依赖性地加重上述损伤任用。     

脱氢表雄酮唾液酸苷对A β25-35致海马神经元损伤作用研究

目的:应用原代培养胎鼠海马神经元,观察脱氢表雄酮唾液酸苷对β-淀粉样蛋白(A β25-35)损伤海马神经元的保护作用.方法:海马神经元分别与A β25-35(0.1μM)、脱氢表雄酮硫酸酯及脱氢表雄酮唾液酸苷孵育24 h后,检测细胞内漏出的乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性、脂质过氧化物(MDA)含量及细胞存活率的变化.结果:海马神经元与A β25-35共同孵育24 h后,细胞存活率显著下降、GSH-Px活性降低、LDH和MDA含量升高;海马神经元与不同浓度脱氢表雄酮硫酸酯和脱氢表雄酮唾液酸苷共孵24 h后,能改变A β25-35引起的损伤,使细胞存活率显著升高、GSH-Px活性升高、LDH活力和MDA含量降低.唾液酸苷衍生物在对部分指标的影响上,效价高于相应的硫酸酯.结论:脱氢表雄酮唾液酸苷可对抗A β25-35所造成的神经元损伤,作用可能是通过清除氧自由基、抗脂质过氧化作用和提高神经元产生抗氧化能力实现的.     

糖皮质激素促进β-淀粉样蛋白对海马神经元损伤的研究

目的在体外实验条件下,观察糖皮质激素是否促进β-淀粉样蛋白的神经元毒性作用。方法通过LDH释放率法检测细胞活力、TUNEL法测细胞凋亡以及LSCM测胞内Ca2 浓度的变化。结果单独的地塞米松(10-8,10-7,10-6mol.L-1)组或Aβ25-35(0.5μmol.L-1)组分别作用海马神经元后,细胞活力变化不明显(P>0.05);但与同剂量的DEX、Aβ25-35组相比,DEX Aβ25-35组的细胞活力明显降低(P<0.05),同时胞内Ca2 显著上升(P<0.05),神经元的凋亡率增加明显,细胞内出现凋亡的典型形态学特征。结论糖皮质激素可能通过促进Aβ引起海马神经元胞内Ca2 升高增加神经元毒性作用。     

丹酚酸B对β-淀粉样蛋白介导原代培养皮层神经元毒性的保护作用

目的　观察一氧化氮(NO)在谷氨酸(Glu),β-淀粉样蛋白［β-AP(1-40)］引起神经细胞损伤中的作用以及丹酚酸B(Sal B)对β-AP(1-40)引起的神经细胞损伤保护作用。方法　原代培养大鼠皮层神经元,建立了硝普钠(SNP),Glu,β-AP(1-40)等3种损伤模型,用形态学观察、MTT比色法、Griess法分别测定神经元活力,培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出和NO释放。结果　Glu和β-AP(1-40)可以引起神经元NO的释放增加,造成神经毒性。nNOS在Glu的毒性中起重要作用,iNOS可能在Aβ_1-40的毒性中起作用。Sal B能显著增加细胞活力,降低LDH释放率,并剂量依赖地减少NO释放。 结论　NO介导了Glu和β-AP(1-40)的毒性,Sal B可以通过减少NO释放,改善β-AP(1-40)的毒性作用。     

吡格列酮对Aβ_(25-35)引起的皮层神经元损伤保护作用部分机制的研究

目的研究吡格列酮对抗淀粉样β蛋白片段25-35(Amyloid-β,Aβ25-35)所致培养皮层神经元损伤作用的机制。方法取培养7d大鼠乳鼠大脑皮层神经元,Aβ组加入Aβ25-35(20μmol.L-1)作用24h;吡格列酮组和各种阻断剂组,先加入吡格列酮(0.1、1、10μmol.L-1)或各种阻断剂作用1h,然后加入Aβ25-35(20μmol.L-1)作用24h;正常对照组加入等量培养基。MTT法测定细胞存活率;免疫荧光染色法测定活性的caspase-3细胞内定位;Westernblot检测活性的caspase-3表达水平;Griess法测定培养细胞上清液中一氧化氮(NO)含量。结果神经元经NSE和NF200免疫荧光鉴定,其阳性率可达90%以上。Aβ25-35(20μmol.L-1)可使神经元细胞存活率下降、caspase-3表达明显增加,同时神经元培养液中的NO含量也明显增加。吡格列酮可明显抑制Aβ25-35诱导的神经元细胞存活率下降、抑制caspase-3表达的增加,吡格列酮还可明显抑制Aβ25-35诱导的神经元培养液中NO含量增加,且呈浓度依赖性。GW9662(10μmol.L-1)能明显对抗吡格列酮对Aβ25-35诱导的神经元细胞存活率下降、活性的caspase-3表达增加、NO增加的抑制作用。SP600125(5μmol.L-1)、SB203580(20μmol.L-1)和SMT(1mmol.L-1)可明显对抗Aβ25-35诱导的神经元细胞存活率下降及培养液中NO含量增加。结论吡格列酮能够明显的抑制Aβ25-35引起的皮层神经元损伤作用,这种作用可能与激活PPARγ受体、抑制JNK信号传导通路和p38MAPK信号传导通路有关。     

地黄寡糖对谷氨酸诱导海马神经元损伤的影响

目的观察地黄寡糖对谷氨酸诱导海马神经元损伤的影响。方法将培养7～9d的SD大鼠海马细胞进行NSE鉴定,然后随机分为:正常组(control);单纯地黄寡糖用药组(ROS);谷氨酸损伤组(Glu);谷氨酸损伤前地黄寡糖预处理组(ROS+Glu)。采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,比色法测定培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)含量,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果0.1mmol·L-1谷氨酸作用于海马神经元24h,出现明显细胞损伤,细胞存活率下降,培养液中LDH含量明显增加,细胞凋亡率增高(P<0.01);4、20、100mg·L-1的地黄寡糖可不同程度的改善谷氨酸损伤引起的神经细胞形态的改变,提高细胞存活力,减少LDH的漏出,降低细胞凋亡率,并呈一定的剂量依赖性。4、20、100mg·L-1单纯地黄寡糖组与正常组间各指标差异没有显著性(P>0.05)。结论谷氨酸能诱导海马原代细胞的凋亡,地黄寡糖能有效保护海马神经细胞免受谷氨酸诱导的细胞损伤。     

半枝莲黄酮对β-淀粉样蛋白所致星形胶质细胞损伤的影响

目的探讨半枝莲黄酮(SBF)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)损伤星形胶质细胞的干预作用。方法培养第3代星形胶质细胞分为空白对照组,模型对照组和半枝莲黄酮小、中、大剂量组。半枝莲黄酮小、中、大剂量组细胞分别给予17.5,35.0和70.0μg·m L-1半枝莲黄酮作用24 h后,模型对照组和半枝莲黄酮小、中、大剂量组细胞再分别加入终浓度Aβ25-35100μmol·L-1继续作用24 h。噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞存活率,分光光度法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,免疫组织化学方法测定细胞内LDH的合成量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定培养液中细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。结果与空白对照组比较,模型对照组细胞存活率降低49.94%(P<0.01)。与模型对照组比较,半枝莲黄酮小、中和大剂量组细胞存活率分别提高12.50%(P<0.05),16.67%(P<0.01)和2.08%(P>0.05)。与空白对照组比较,模型对照组细胞培养上清液中LDH减少36.65%(P<0.01)。与模型对照组比较,半枝莲黄酮小、中和大剂量组LDH分别增加11.35%(P>0.05),26.40%(P<0.01)和32.44%(P<0.01)。与空白对照组比较,模型对照组星形胶质细胞LDH蛋白表达的阳性面积比例降低24.92%(P<0.05)。与模型对照组比较,半枝莲黄酮中和大剂量组LDH蛋白表达的阳性面积比例分别提高31.20%和53.60%。与空白对照组比较,模型对照组细胞培养液中IL-1β和IL-6水平分别降低23.60%和15.47%(P<0.01)。与模型对照组比较,半枝莲黄酮小、中和大剂量组IL-1β释放量分别增加5.74%(P>0.05),24.82%(P<0.01)和6.86%(P>0.05);IL-6释放量分别增加11.30%(P<0.05),17.39%(P<0.01)和3.87%(P>0.05)。结论半枝莲黄酮对Aβ25-35引起的星形胶质细胞损伤具有保护作用,这可能有利于阐述半枝莲黄酮治疗阿尔茨海默病的作用机制。     

苦参碱对缺血性脑中风小鼠神经元及星形胶质细胞的保护作用

目的：观察苦参碱（Matrine）对缺血性脑中风小鼠的神经保护作用及对缺氧缺糖诱导的神经元和星形胶质细胞损伤的减轻作用,并初步探讨可能的作用机制。方法：采用原代培养小鼠大脑皮层神经元及星形胶质细胞缺氧缺糖模型（Oxy-gen and glucose deprivation,OGD）,MTT法和测定乳酸脱氢酶（LDH）观察Matrine对OGD神经元及星形胶质细胞的损伤是否有减轻作用;建立小鼠永久性大脑中动脉阻塞（Permanent mid-dle cerebral artery occlusion,pMCAO）模型,观察Matrine 10min、1h、3h及6h四个不同时间点给药后,脑梗死面积和神经症状的改善情况及其分子机制是否与抑制神经元及星形胶质细胞NF-κB信号通路有关。结果：经OGD诱导后,原代培养小鼠大脑皮层神经元及星形胶质细胞活力明显下降,与OGD模型组比较,给予Matrine（50μmol/L）干预后,神经元及星形胶质细胞的存活率明显提高（P〈0.01）;与此同时,OGD可使小鼠大脑皮层星形胶质细胞LDH漏出量增高（P〈0.01）,Matrine（50μmol/L）与模型组比较,LDH漏出量明显降低（P〈0.01）;Matrine（37.5mg/kg）10min、1h两个给药时间点的脑梗死面积与模型组比较明显减少（P〈0.01）;与模型组比较,Martine 10min、1h两个给药时间点术后24h的神经症状评分明显降低（P〈0.01）;Matrine可降低pMCAO缺血区IκBα与IKK蛋白的表达水平（P〈0.01,P〈0.05）,同时降低细胞核NF-κB蛋白的表达（P〈0.01）。结论：Matrine可通过直接保护神经元及星形胶质细胞改善缺血性脑中风症状,其作用时间窗可能在发病1h以内,Matrine保护作用可能与NF-κB信号通路有关。     

Aβ_(25-35)对大鼠大脑皮质神经元神经甾体水平的影响

目的研究Aβ25-35对大鼠大脑皮质神经元合成神经甾体的影响。方法采用Aβ25-35(1μmol·L-1)处理原代培养的大鼠大脑皮质神经元,固相萃取结合高效液相色谱-质谱联用法测定细胞培养液中神经甾体的浓度,四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞活性。结果与对照组相比,Aβ25-35处理后神经元存活率降低约50%(P<0.01),胆固醇处理组神经元存活率未见改变(P>0.05),但Aβ+胆固醇组的神经元存活率明显高于Aβ处理组(P<0.01)。与胆固醇组相比,Aβ25-35处理后神经甾体PREG水平略有降低(P>0.05),PROG水平明显下降(P<0.01),AP水平明显增高(P<0.01)。结论神经甾体PREG-PROG-AP代谢通路在Aβ25-35引起的大鼠大脑皮质神经元损伤时发生明显改变,并能部分地对抗Aβ的神经毒性作用。     

复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用研究

目的:研究复方脑康胶囊对β-淀粉样肽(Aβ)25-35(Aβ25-35)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法:将SH-SY5Y细胞接种后分为对照、Aβ25-35(25μmol.L-1)和复方脑康胶囊(0.725g.mL-1)+Aβ25-35(25μmol.L-1)组。通过测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞轴突长度、胞体面积,观察复方脑康胶囊对Aβ导致神经毒性的保护作用。结果:与对照组比较,Aβ25-35组SY5Y细胞的轴突长度和胞体面积均较小,MTT代谢率降低,LDH漏出率升高,而加入复方脑康胶囊水提液后,可使上述指标恢复或接近正常。结论:复方脑康胶囊具有神经保护作用,可减轻Aβ导致的神经毒性。     

诃子提取物对过氧化氢所致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的研究诃子提取物对过氧化氢（H2O2）所致心肌细胞损伤的保护作用。方法采用H2O2处理体外培养心肌细胞,造成氧化应激模型,通过检测细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）漏出量,丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性来反映诃子提取物对H2O2氧化模型的影响,并采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）测定细胞的代谢率。结果与模型组相比,诃子提取物能显著减少LDH和CK漏出量（P〈0.01）,升高A值（P〈0.01）,降低培养液中MDA含量（P〈0.05,P〈0.01）,升高SOD活性（P〈0.01）。结论诃子提取物可减轻H2O2对心肌细胞的损伤程度,对心肌细胞具有保护作用,其机制可能与稳定细胞膜和抗氧化有关。     

基于Nrf2信号通路的三七总皂苷对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的保护作用机制研究

目的探讨三七总皂苷对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及分子机制。方法利用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤模型,MTT法检测PC12细胞活力,试剂盒测定LDH漏出量、ROS水平、MDA含量、Caspase-3活力以及抗氧化酶SOD、CAT和GHS-Px活力,TUNEL染色检测细胞凋亡,JC-1染色观察线粒体膜电位,Western blot检测相关蛋白HO-1、Lamin-B、细胞核内Nrf2及总Nrf2的蛋白表达。结果三七总皂苷能够明显抑制Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞活力下降(P<0.01)和LDH漏出(P<0.01),减少ROS和MDA的产生(P<0.01),增加SOD、CAT和GSH-Px活力(P<0.01),稳定线粒体膜电位,抑制caspase-3的活化(P<0.01)。而且,三七总皂苷还能够上调PC12细胞细胞核Nrf2、总Nrf2和细胞质中HO-1的蛋白表达。HO-1抑制剂Sn PP能够抑制三七总皂苷的神经保护作用。结论三七总皂苷可能通过上调Nrf2/HO-1信号通路,从而抑制Aβ25-35诱导PC12细胞氧化应激和凋亡。     

安脑丸对大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺损伤的防护作用

目的探讨安脑丸对神经元缺氧缺糖损伤大鼠模型细胞凋亡的防护作用。方法体外培养新生sD大鼠皮层神经元,完全随机分为正常对照组、模型组及安脑丸高、中、低剂量组。正常对照组正常培养,模型组及安脑丸各剂量组建立氧糖剥夺模型,安脑丸各剂量组加不同浓度（分别稀释10、20、30倍）含药血清的培养液,测定各组细胞存活率及凋亡率,免疫印迹法检测caspase-12、细胞色素C、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、Bcl-2表达量的变化。结果与正常对照组相比,氧糖剥夺模型组细胞凋亡率增加[（22．0±2．2）％比（3．2±0．6）％,P〈0．05],存活率明显降低[（62．4±4．6）％比（100．0±3．1）％,P〈0．05];GRPT8表达上调（P〈0．05）,细胞色素c蛋白表达增加（P〈0．05）,caspase-12表达增加（P〈0．05）,Bcl-2表达减少（P〈0．05）。安脑丸低、中、高剂量组细胞存活率分别为（74．9±2．7）％、（83．0±2．2）％、（75．2±2．8）％,均明显高于模型组（均P〈0．05）;安脑丸中剂量组细胞存活率明显高于安脑丸低、高剂量组（均P〈0．05）。安脑丸中剂量组与模型组比较,24h凋亡率明显减少[（10．4±0．7）％比（22．0±2．2）％,P〈0．05];细胞Bcl-2表达增加（P〈0．05）,细胞色素c释放和caspase-12的表达减少（均P〈0．05）。结论安脑丸对氧糖剥夺诱导的皮层神经元细胞凋亡有防护作用。     

肉苁蓉总苷对β淀粉样蛋白25-35诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的研究肉苁蓉总苷(GCs)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡的保护作用。方法体外培养的大鼠PC12细胞分6组:正常对照组、模型组、银杏叶片组(40mg·L-1)、GCs低剂量组(25mg·L-1)、GCs中剂量组(50mg·L-1)和GCs高剂量组(100mg·L-1)。细胞培养至对数生长期时分别加入上述各组药物,每日1次。培养h96时,模型组、银杏叶片组和GCs各剂量组分别加入终浓度20μmol·L-1的Aβ25-35,正常对照组以等体积培养基替代。继续培养24h和48h时,光镜观察各组细胞的形态及生长情况,MTT比色法检测各组细胞的存活率,分光光度法检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞术AnnexinⅤ/PI法检测细胞凋亡率。结果与正常对照组比较,模型组细胞数目显著减少,部分细胞皱缩,变圆、脱落的细胞数目较多,其存活率显著降低、LDH活性明显提高、凋亡率显著增加(P<0.01)。与模型组相比,GCs各剂量组细胞数目显著增多,细胞形态学变化明显改善,细胞的存活率增高、LDH活性下降、凋亡率降低,有非常显著差异(P<0.01)。其中,GCs高剂量作用48h效果最显著。结论GCs对Aβ25-35引起的PC12凋亡细胞损伤具有明显的保护作用。     

地塞米松和淀粉样β蛋白联合作用致大鼠学习记忆能力下降

目的研究地塞米松(DEX)和淀粉样β蛋白(Aβ)联合作用对大鼠学习记忆能力的影响。方法①整体实验SD大鼠摘除肾上腺后,在sc给予DEX 0.2 mg.kg-1〔糖皮质激素(GC)维持对照组〕维持GC水平的基础上,按分组再分别sc给予DEX 1和5 mg.kg-1,Aβ25-355μg,DEX1+Aβ25-35和DEX5+Aβ25-35组,Morris水迷宫检测逃避潜伏期和游泳距离;HE染色观察海马CA1区病理变化。②体外实验海马神经元分为正常对照组,DEX 1和10μmol.L-1组,Aβ25-35 1和5μmol.L-1组(,DEX 1+Aβ25-35 1),(DEX 1+Aβ25-35 5),(DEX 10+Aβ25-35 1)和(DEX 10+Aβ25-35 5)组,MTT法检测细胞存活率,连续性监测法检测海马神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放率;碱性单细胞凝胶电泳检测DEX 10μmol.L-1组,Aβ25-35 5μmol.L-1组,DEX 10+Aβ25-35 5和H2O2 100μmol.L-1组海马神经元拖尾长度。结果①整体实验与GC维持对照组相比,DEX 1 mg.kg-1组的逃避潜伏期和游泳距离差异无统计学意义,DEX 5 mg.kg-1和Aβ25-35组逃避潜伏期和游泳距离有升高趋势,但差异无显著性;DEX+Aβ25-35组逃避潜伏期和游泳距离显著延长(P<0.05)。与单用DEX和单用Aβ25-35组相比,DEX+Aβ25-35组海马CA1区神经元数目明显减少、排列紊乱、核固缩和浓染。②体外实验与正常对照组相比,DEX1和10μmol.L-1组及Aβ25-351μmol.L-1的细胞存活率以及LDH释放率差异无显著性,Aβ25-35 5μmol.L-1的LDH释放率升高(P<0.05);与相同浓度的单用DEX和单用Aβ25-35组相比,同时给予DEX和Aβ25-35后,细胞存活率显著降低,LDH释放率明显升高(P<0.05)。与正常对照组相比,单用DEX 10μmol.L-1组彗星拖尾长度无明显改变,单用Aβ25-35 5μmol.L-1彗星拖尾长度显著延长;与单用Aβ25-35组相比,DEX+Aβ25-35组彗星拖尾长度进一步延长(〔11.8±2.3)μm vs(9.8±1.8)μm,P<0.05〕。结论 DEX和Aβ联合作用致鼠学习记忆能力下降和海马组织损伤,此作用可能与DEX直接促进Aβ致海马神经元损伤有关。