维生素C对紫外线诱导HLF细胞凋亡的保护作用

目的 探讨紫外线诱导人HLF细胞凋亡对DNA降解特点，以维生素C对紫外线诱导细胞凋亡的保护作用。方法 紫外线（UVB）分别照射体外培养的人肺成纤维细胞3min和5min，同时添加维生素C（50μmol/L）。设立对照组。利用吖啶荧光染料染色鉴定凋亡细胞，利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder。结果 紫外线可以诱导人肺成纤维细胞凋亡，作用存在时间效应关系。紫外线诱导人肺成纤维细胞凋亡时，未出现典型的DNA ladder现象。维生素C对于紫外线诱导的细胞凋亡有显著的抑制作用。结论 DNAladder不能作为细胞凋亡的唯一的标志，紫外线诱导的细胞凋亡与DNA ladder的出现并不总是一致的。维生素C具有拮抗紫外线诱导的细胞凋亡作用。     

对年轻细胞诱导早衰前后凋亡敏感性的研究

目的探讨年轻细胞被诱导衰老后对凋亡的敏感性与年轻细胞的差异，并分析可能存在的机制。方法以人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)为研究对象，以H2O2诱导2BS细胞早衰后，再以H2O2分别诱导早衰2BS细胞和年轻细胞凋亡，DNA ladder分析和苔盼蓝排除法检测细胞死亡率。结果早衰细胞较年轻细胞不易被H202诱导凋亡。该因素是多方面的，不限于caspase-3的作用。结论早衰细胞与衰老细胞一样，对凋亡诱导因素的反应性降低。     

丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡及其机制

目的 研究丁酸钠诱导子宫颈癌细胞株HeLa和原代培养的人胚肺成纤维细胞凋亡情况,建立丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡模型,并探讨其诱导凋亡机制。方法 倒置相差显微镜下观察细胞形态改变;MTT法检测药效动力学特征;流式细胞仪检测药物作用前后细胞凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯状条带,RT-PCR检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2转录水平。结果 丁酸钠抑制细胞生长呈时效和量效关系,其对HeLa细胞的生长抑制作用较对人胚肺成纤维细胞的作用明显;亚G1峰和AnnexinV／PI、DNA Ladder结果显示,丁酸钠作用后HeLa细胞72h后出现的凋亡率显著高于人胚肺成纤维细胞;RT-PCR结果显示丁酸钠作用前后HeLa细胞中凋亡相关基因：Bax和Bcl-2表达水平无明显改变。结论 一定浓度的丁酸钠可以选择性诱导子宫颈癌细胞株HeLa凋亡,而对正常人二倍体细胞毒性较小,并且这种凋亡诱导作用并非通过调控：Bax和Bcl-2的转录水平而实现。     

茶多酚对紫外线引起的DNA损伤的保护作用

目的　研究茶多酚对由紫外线诱导的DNA损伤的保护作用。方法　体外培养人肺成纤维细胞 ,加茶多酚处理 2h后 ,紫外线分别照射 7、15、30min ,然后用单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA的损伤情况。结果　经紫外线直接照射的细胞DNA损伤严重 ,而在照射过程中加入浓度为 2 5 0 μg/L的茶多酚后细胞DNA损伤明显减轻。结论　紫外线照射细胞可使DNA受到损伤 ,茶多酚具有拮抗这种损伤的作用 ,可能与其抗氧化等功能有关     

负极性聚四氟乙烯驻极体对成纤维细胞凋亡的影响

目的：研究负电晕充电的聚四氟乙烯（PTFE）驻极体对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制。方法：选用－300、－500和－1000VPTFE驻极体作用于成纤维细胞24、48和72h,利用流式细胞仪和透射电子显微镜研究负极性驻极体对成纤维细胞凋亡的影响。结果：－300、－500和－1000V驻极体作用成纤维细胞24、48和72h以后,与对照组相比,成纤维细胞的凋亡量从0．5％增至105（部分可达15％）;驻极体作用成纤维细胞48－72h,出现细胞凋亡特有的形态学特征,即：细胞异染色质边集,细胞裂解,可见凋亡小体。驻极体诱导成纤维细胞凋亡的效应与作用时间和场强呈正相关性（P＜0．05）。结论：负极性驻极体有促进成纤维细胞凋亡的作用。     

人胚肺二倍体细胞KMB17凋亡的形态学发生

无血清培养是诱导细胞凋亡的常规方法,具有简便、快速的特点。用光学显微镜、荧光显微镜及透射电镜观察了人胚肺二倍体成纤维细胞（ＫＭＢ１７）在无血清培养过程中细胞凋亡的形态学发生过程。结果：无血清诱导后１ｈ,光镜下可见致密单层的成纤维状细胞出现疏松状态;３ｈ后,少数细胞（１％～５％）出现圆缩;６ｈ后,成纤维细胞全部由长梭形收缩为圆形,体积缩小。荧光及电镜下可将细胞凋亡形态上分为两个阶段,第一阶段细胞出现     

Ca^2＋在紫外线诱导成纤维细胞凋亡中的作用

目的 了解细胞内外钙离子浓度对紫外线（ＵＶＢ）辐射诱导成纤维细胞（ＮＩＨ３Ｔ３）凋亡作用的影响。方法 ＵＶＢ照射成纤维细胞１０ｍｉｎ，培养１２ｈ后，用流式细胞仪测定凋亡率。结果 ＵＶＢ照射组比ＵＶＢ不照射组凋亡率有显著增加；ＵＶＢ照射组内各组间凋亡率因细胞内外Ｃａ＾２＋浓度不同存在明显差异。结论 ＵＶＢ辐射诱导成纤维细胞发生凋亡与胞内外Ｃａ＾２＋浓度有关，Ｃａ＾２＋参与了凋亡的信号转导。ＵＶＢ诱导     

Xaf1诱导XIAP-／-成纤维细胞凋亡机制的研究

【目的】利用XIAP-/-成纤维细胞，检测在剔除XIAP的情况下Xaf1诱导细胞凋亡的作用，探索Xaf1诱导细胞凋亡的机制。【方法】Xaf1诱导的XIAP-/-成纤维细胞凋亡由流式细胞DNA含量来表示，免疫荧光显微镜检测XIAP-/-成纤维细胞中Xaf1的亚细胞分布，共转染并细胞周期DNA含量流式细胞术检测Bc12对Xaf1诱导的细胞凋亡的影响．细胞色素C流式细胞术检测Xaf1对细胞色素C释放的调节。【结果】Xaf1与TNFα显著协同诱导XIAP-/-成纤维细胞凋亡，凋亡峰值27％。Bcl2能抑制Xaf1诱导的XIAP-/-成纤维细胞凋亡．凋亡峰值由27％下降至6％。在剔除XIAP的情况下，Xaf1仍可诱导细胞色素C释放，峰值为21％。【结论】Xaf1通过胱冬肽酶非依赖机制释放细胞色素C而诱导肿瘤细胞凋亡。     

亚硒酸钠溶液诱导胃上皮肿瘤SGC-7901细胞凋亡的实验研究

目的：探讨亚硒酸钠能否诱导胃上皮肿瘤SGC 7901细胞凋亡，以及凋亡诱导与细胞周期改变的关系。方法：亚硒酸钠溶液不同浓度、不同作用时间分别处理SGC 7901细胞，应用电子显微镜观察亚硒酸钠溶液作用后细胞形态变化，应用DNA末端原位标记染色法 (TUNEL)及流式细胞仪技术分析细胞凋亡及细胞周期的改变。结果：亚硒酸钠作用于SGC 7901细胞后，可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化：细胞核固缩、染色质凝集、呈新月型紧贴于核膜周边，核碎裂，染色质片段化，凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。TUNEL染色法细胞凋亡指数在8.4％～33.4％。结论：亚硒酸钠能够诱导SGC 7901细胞凋亡，亚硒酸钠诱导SGC 7901细胞凋亡与细胞周期阻滞密切相关。     

人参皂苷-Rf诱导骨肉瘤细胞DNA损伤和修护受损的人成纤维细胞研究

目的:探讨人参皂苷-Rf对骨肉瘤细胞和人成纤维细胞是否具有细胞凋亡和DNA损伤的作用。方法:体外培养骨肉瘤细胞系(MG-63,U-2OS,HOS和SAOS-2)和人成纤维细胞;利用MTT法检测人参皂苷-Rf对骨肉瘤细胞系和人成纤维细胞增殖的影响;再用彗星电泳和γH2AX焦点实验检测人参皂苷-Rf诱导MG-63和U-2OS细胞的DNA损伤作用;最后利用DNA梯度实验观察人参皂苷-Rf对受损人成纤维细胞的修护作用。结果:MTT显示人参皂苷-Rf对骨肉瘤细胞增殖有抑制作用。人参皂苷-Rf诱导骨肉瘤MG-63、U-2OS细胞凋亡和DNA损伤,随浓度和处理时间增加而显著增加;进一步发现人参皂苷-Rf可修复和保护发生DNA损伤和凋亡(MNNG诱导)的人成纤维细胞。结论:人参皂苷-Rf可抑制骨肉瘤细胞的增殖,同时保护和修复受损的正常细胞。因此人参皂苷-Rf不仅可以作为抗癌药物使用,同时与其它抗癌药物配合使用可以有效的降低抗癌药物对正常细胞的副作用,保护正常细胞,使抗癌药物更好的发挥作用。     

催乳素保护人B淋巴细胞免其凋亡的实验研究

目的:研究人催乳素(PRL)在B淋巴母细胞系IM-9细胞凋亡中的保护作用。方法:在地塞米松诱导IM-9细胞凋亡的实验体系中加入PRL(10ng/ml),DNA琼脂糖凝胶电泳观察PRL对地塞米松诱导IM-9细胞凋亡的保护。结果:地塞米松组诱导的IM-9细胞在48h后出现细胞凋亡,DNA琼脂糖凝胶电泳显示有大量小分子DNA片段形成,呈典型的细胞凋亡DNA梯形带,地塞米松-PRL组的IM-9细胞的DNA经电泳后未出现凋亡的DNA条带。结论:地塞米松能诱导IM-9细胞的凋亡,PRL能保护IM-9细胞,免其凋亡。     

Induction of Apoptosis by Superoxide Anion and the Protective Effects of Selenium and Vitamin E

Objective:The purpose of this study is to investigate the effect of superoxide anion on the apoptosis of cultured fibroblasts and the protective role of seleium and Vitamin E.Methods:Cultured fibroblasts(NIH3T3),with or without selenium or vitamin E in the medium,were treated by superoxide anion produced by xanthine/xanthine oxidase reaction system and changes in cell structure and DNA were observed microscopically and electrophoretically,Results:Apoptosis was observed when superoxide anion at a concentration of 5nmol/L or 10nmol/L had acted on the fibroblasts for 5-10h.Selenium and Vitamin E in the medium inhibited the apoptosis significantly when their concentrations reached 1.15mol/L and 2.3mol/L respectively.Concleusion:selenium and vitamin Ehave protective effect against the apoptosis induced by superoxide anion.The effect of selenium is more remakable than that of vitamin E.     

扇贝多肽对UVB损伤HaCaT细胞ERKs/MAPKs通路的影响

目的 探讨扇贝多肽（PCF）对中波紫外线（UVB）辐射损伤HaCaT细胞的作用及对细胞外调节激酶-丝裂原活化蛋白激酶（ERKs/MAPKs）通路的影响.方法 建立UVB（20 mJ/cm2）对体外培养的HaCaT细胞辐射损伤的病理模型,实验分为对照组、模型组、UVB＋5.69 mmol/L PCF组、UVB＋2.84 mmol/L PCF组、UVB＋1.42 mmol/L PCF组和UVB＋5.69 mmol/L维生素C组.琼脂糖凝胶电泳观察各组不加入或分别加入Caspase-3抑制剂（DEVD-FMK）、ERKs通路抑制剂（PD98059）后的细胞凋亡情况;Western blot检测ERKs、MEKs磷酸化与非磷酸化的活性.结果 PCF能剂量依赖性地减少UVB所致的HaCaT细胞DNA片段的出现;预先应用ERKs通路抑制剂可使DNA片段增加;预先应用Caspase-3抑制剂使DNA片段减少;PCF还能提高磷酸化ERKs、MEKs的活性,但不影响总的ERKs、MEKs的含量.结论 PCF能抑制UVB辐射诱导的细胞凋亡,对UVB辐射损伤的细胞具有保护作用.其作用通过调节ERKs/MAPKs的信号通路和Caspase级联反应实现.     

不同价态锰对神经细胞的毒性比较以及硒的保护作用

目的研究不同价态锰化合物对神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)DNA损伤作用、细胞凋亡和细胞周期的影响,以及抗氧化剂硒的保护作用,从而探讨锰的神经毒作用机制。方法将培养的SH-SY5Y细胞随机分为染毒的二价锰和三价锰化合物(0.5 mmol/L)组、空白对照组、硒干预组。培养24 h后应用单细胞凝胶电泳检测细胞DNA链断裂情况。48 h后用流式细胞仪测定细胞凋亡率、细胞周期分布。结果三价锰组DNA损伤程度比二价锰组严重。二价锰和三价锰组均出现亚二倍体的凋亡峰;细胞周期分布也发生改变,与对照组相比S期细胞明显增多,差异有统计学意义(P<0.01);三价锰比二价锰更易引起细胞凋亡(P<0.01)和细胞周期变化(P<0.05)。硒可降低锰化合物引起的细胞DNA损伤、凋亡率和细胞周期中S期细胞数。结论不同价态锰对神经细胞均有损伤作用,且三价锰大于二价锰。硒对锰致细胞DNA损伤、凋亡和细胞周期改变有一定的保护作用,提示氧化应激可能参与了锰的毒作用。     

氧化修饰低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡

通过观察凋亡细胞的核形态及特征DNA梯形图谱（DNAladder）．研究了氧化修饰低密度脂蛋白（Ox－LDL）诱导的巨噬细胞凋亡。结果显示：Ox－LDL可引起明显的巨噬细胞凋亡，表现在Ox－LDL处理的细胞核发生固缩，染色体DNA断裂的凝胶电泳图谱呈典型的梯形，正常和乙酰化LDL（N－LDL和AC－LDL）未引起明显的巨噬细胞凋亡。Ox－LDL引起的巨噬细胞凋亡具有浓度和时间效应且与其修饰程度有关，修饰程度越高，引起凋亡越明显．     

阿霉素对MGc-803胃癌细胞凋亡的诱导作用

[目的 ]研究阿霉素对MGc 80 3胃癌细胞凋亡的诱导作用 .[方法 ]通过细胞涂片苏木精与伊红染色法、吖啶橙荧光染色法和琼脂糖凝胶电泳法 ,观察了阿霉素诱导MGc 80 3胃癌细胞凋亡的形态变化 .[结果 ]阿霉素能使MGc 80 3胃癌细胞出现典型的凋亡 .DNA电泳呈梯形带 ,进一步证实了光学显微镜所见 .[结论 ]阿霉素可诱导MGc 80 3胃癌细胞发生细胞凋亡 .     

脂质体介导c-myc反义寡核苷酸诱导HeLa细胞凋亡的实验研究

目的体外研究C-MYC反义寡核苷酸(ASODN)对人宫颈癌HELA细胞凋亡的影响,寻求提高肿瘤细胞放射敏感性的方法。方法免疫组化、流式细胞术、半定量RT-PCR法鉴定ASODN的有效性;GIEMSA染色、流式细胞术检测凋亡指数(AI)、DNA LADDER检测细胞凋亡。结果转染后,免疫组化结果显示C-MYC蛋白表达降低;半定量RT-PCR结果显示C-MYC MRNA表达较空白对照组及阴性对照组明显减弱(P<0.05)。GIEMSA染色可见凋亡小体;流式细胞术结果显示转染后凋亡指数为(10.29±0.66)%,转染ASODN(C-MYC)联合放射的凋亡指数为(16.83±0.57)%,均明显高于空白对照组(1.79±0.19)%(P<0.05);DNA LADDER呈现具有凋亡特征的梯带。结论本实验所设计的ASODN能有效地抑制C-MYC基因的表达;转染ASODN(C-MYC)能够显著增加HELA细胞凋亡,从而提高肿瘤细胞的放射敏感性。     

人参总皂苷诱导HL-60细胞凋亡作用及对Caspase-3、Fas表达的影响

目的 探讨人参总皂苷诱导HL-60细胞凋亡的作用机制及其对凋亡相关基因Caspase-3、Fas表达的影响.方法 采用人参总皂苷0、100、200及400 μ g/ml作用于HL-60细胞,并在不同时间内用MTT法检测人参总皂苷对HL-60细胞的抑制率;48h后予普通光镜、荧光显微镜检测HL-60细胞形态的变化;予流式细胞仪、DNA凝胶电泳检测HL-60细胞凋亡;予RT-PCR法检测Caspase-3、Fas基因表达的变化.结果 人参总皂苷抑制HL-60细胞生长呈剂量及时间依赖性;在100～400 μ g/ml时,HL-60细胞凋亡逐渐增加,可见典型的凋亡细胞形态和明显的DNA梯度;在该浓度范围内,Caspase-3、Fas表达逐渐增加.结论 一定浓度的人参总皂苷可诱导HL-60细胞发生凋亡,且细胞凋亡率与人参总皂苷浓度呈一定的量效依赖关系,Caspase-3、Fas基因的表达变化在人参总皂苷诱导HL-60细胞凋亡中可能起重要作用.     

乙酰半胱氨酸拮抗三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡效应的初步研究

目的：探讨抗氧化剂乙酰半胱氨酸（NAC）能否抑制三氧化二砷（AT）诱导肝癌细胞凋亡及其可能的机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）、DNA梯形电泳及苏木精-伊红染色的方法观察AT对人肝癌细胞BEL-7402的杀伤效应、诱导凋亡效应以及NAC对该效应的影响。结果：①适量AT能抑制肝癌细胞的恶性生长，诱导细胞凋亡；②一定量的NAC能拮抗AT对肝癌细胞的杀伤效应及诱导凋亡效应。结论；AT对肝癌细胞的作用与细胞内谷胱甘肽有密切关系；很可能通过与细胞内巯基（-SH）结合，导致多种功能蛋白失活来诱导细胞凋亡，抑制肝癌细胞的恶性生长。     

胃液、稀盐酸、阿霉素对BIU-87细胞系细胞凋亡的影响

目的 :探讨胃代膀胱术抑制膀胱肿瘤复发的机制。方法 :采用HE染色、荧光染色、DNA电泳、流式细胞术等技术 ,观察了胃液、稀盐酸、阿霉素对膀胱癌细胞系BIU 87细胞凋亡的影响。结果 :发现胃液能诱导体外培养的膀胱癌细胞凋亡 ,细胞形态学观察凋亡细胞数增多 ,DNA电泳出现梯状电泳带 ,流式细胞术可见凋亡峰 ,胃液组细胞凋亡率为 8.0 9% ,与阿霉素组 (4 2 .74% )和无药培养液组 (6 .71% )比较差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ,与稀盐酸组 (7.2 6 % )比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :胃液作为一种诱导膀胱癌细胞系细胞凋亡的因子 ,可能在胃代膀胱术中起到抑制膀胱肿瘤复发的作用。