化学发光酶免疫分析法及ELISA法检测在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用价值

目的对比分析化学发光酶免疫分析法及ELISA法检测在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用效果。方法选取于2014年2月至2016年10月开封市中心医院收治的62例疑似肝炎患者,采集所有入选者血液样本,对其乙肝病毒(HBV)及核心抗体Ig G与Ig M先实施ELISA法检测,再实施化学发光酶免疫分析法检测,对比两种检测方法HBV检出情况及对乙肝Ig G与Ig M检出情况。结果 ELISA法HBV阳性检出率(95.16%)与化学发光酶免疫分析法(98.39%)相比,差异无统计学意义(P>0.05);ELISA法对乙肝Ig G与Ig M抗体检测阳性率为19.35%(12/62)、17.74%(11/62),低于化学发光酶免疫分析法69.35%(43/62)、80.65%(50/62),差异有统计学意义(P<0.05)。结论与ELISA法相比,化学发光酶免疫分析法对乙肝病毒的核心抗体检出率较高。     

安图化学发光法检测高血压5项激素相关性分析

目的: 分析不同厂家试剂盒检测高血压5项:肾素、血管紧张素Ⅱ(AⅡ)、醛固酮(ALD)、皮质醇（COR）和促肾上腺皮质激素（ACTH）浓度值差异,并探讨用化学发光法检测高血压5项激素浓度值对原发性和继发性高血压分型诊断、治疗及研究的意义。方法:选取159例高血压患者(收缩压≥140 mmHg,舒张压≥90 mmHg),分别用DRG酶联免疫试剂盒和安图生物化学发光试剂盒测定肾素浓度;选取138例高血压患者,分别用ENZO酶联免疫试剂盒和安图生物化学发光试剂盒测定AⅡ浓度;选取146例高血压患者,分别用IBL酶联免疫试剂盒和安图生物化学发光试剂盒测定ALD浓度;选取239例高血压患者及316例高血压患者,分别用ROCHE全自动电化学发光试剂和安图生物化学发光试剂盒测定COR及ACTH浓度。结果:不同厂家试剂盒检测高血压浓度存在一定的偏差,但相关性良好（相关系数R>0.95）。结论:化学发光法做为一种高灵敏、高特异、高准确的定量检测方法,定量检测高血压5项对原发性和继发性高血压分型诊断、治疗及研究具有重要的意义。     

单纯疱疹病毒2型IgG抗体检测试剂临床对比分析

目的比较考核和参比两种HSV-2 IgG抗体测定试剂(酶联免疫法)的检测结果差异。方法用两种试剂平行对比检测企业样本库1328例样本,不一致样本用第三方试剂(酶联免疫法)复测。结果考核和参比HSV-2 IgG抗体检测试剂阳性符合率96.35%,阴性符合率99.92%,总符合率99.55%,差异无统计学意义(P0.05)。结论考核和参比HSV-2 IgG抗体测定试剂(酶联免疫法)临床性能接近,可以满足临床检测需求,适于临床推广应用。     

探讨样本吸附反应杯对临床检验结果的影响及解决办法

目的研究磁微粒化学发光平台中,样本吸附反应杯造成检测结果的假阳性,为医学实验室提供一种研究样本吸附的方法,并提出相关解决办法。方法首先对磁微粒化学发光和酶联免疫吸附测定(ELISA)平台间测试结果进行比对,确认平台差异标本,然后通过替换磁微粒化学发光试剂盒中磁微粒组分,查找造成平台差异的主要原因,最后在样本稀释液中加入表面活性剂,试图通过表面活性剂的作用,使磁微粒化学发光平台与ELISA平台检测结果一致。结果 5例样本出现平台间差异,其在磁微粒平台全部为阳性,ELISA平台全部为阴性;将磁微粒试剂盒中磁微粒组分替换成缓冲液后,其检测结果仍为阳性,证实磁微粒平台样本与反应杯发生非特异性结合;通过在样本稀释液中添加0.5%Triton X-100后,5例样本在磁微粒化学发光平台的假阳性现象消失。结论磁微粒化学发光平台检测结果易受非特异性结合因素影响,特别是在间接法免疫分析中,人体内免疫球蛋白非特异性结合在反应杯上,导致检测结果偏高,在样本稀释过程中加入适当浓度的表面活性剂可以降低此现象的发生概率。     

深圳地区献血者戊型肝炎病毒感染流行病学调查

目的调查深圳地区无偿献血者戊型肝炎病毒(HEV)感染率与特征。方法对深圳市血液中心2013年3~4月期间4 046份无偿献血者样品留样,应用酶联免疫吸附法(ELISA)筛查HEV Ig G与Ig M抗体的阳性率,并分析HEV Ig G与Ig M抗体在献血者人群的分布特征。结果 4 046名献血者中,HEV Ig G与Ig M抗体的检出率分别是22.15%(896/4 046)、1.24%(50/4 046)。50例HEV Ig M阳性样中,有88.00%(44/50)合并HEV Ig G阳性。HEV Ig G与Ig M阳性率在不同性别、谷丙转氨酶阴阳性组和不同血型间差异均无统计意义(P0.05)。Ig G阳性率随着年龄增大而显著升高(P0.000 1)。重复献血者的HEV Ig G与Ig M阳性率均显著高于初次献血者(P0.000 1)。结论深圳地区献血人群存在一定比例的戊型肝炎病毒感染者,为戊肝的输血安全性评估提供基础数据。     

化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用价值

目的:探究化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用价值。方法:选取我院收治的72例疑似乙型肝炎患者,采集血液样本后分别应用化学发光酶免疫分析法及酶联免疫吸附试验检测其乙肝病毒、核心抗体并分析其检测结果。结果:化学发光酶免疫分析法检测乙型肝炎病毒阳性率与酶联免疫吸附试验对比,差异无统计学意义(P>0.05);化学发光酶免疫分析法检测抗IgM、IgG抗体阳性率均高于酶联免疫吸附实验,差异有统计学意义(P<0.05);化学发光酶免疫分析法检测灵敏度明显优于酶联免疫吸附试验。结论:化学发光酶免疫分析法在乙型肝炎病毒、核心抗体定性检测中,乙型肝炎病毒检出率较高,且对其核心抗体检测灵敏度颇高,在临床研究中具有重要价值。     

基于两种不同检测方法的降钙素原临床检测比对

目的通过对同一实验室具有不同检测原理的两个降钙素原(PCT)试剂盒进行方法学比对,分析其临床检测结果的相关性和一致性。方法参照EP9-A文件要求,以罗氏Roche e601全自动电化学发光免疫分析系统为参考方法,郑州安图磁微粒化学发光检测系统为对比方法,对临床收集到的患者以及体检健康者血清进行PCT定量检测,对检测结果进行统计分析。结果两个检测系统的PCT产品测定结果经配对t检验分析P0.05,差异不显著,相关系数大于0.98,一致性检验kappa值均大于0.90,一致性良好。结论郑州安图磁微粒化学发光检测系统与Roche e601全自动电化学发光免疫分析检测系统PCT检测结果具有可比性,能够满足临床检测要求。     

1例不同方法学对甲、戊型肝炎病毒抗体检测结果的差异分析

目的：分析1例不同方法学对甲、戊型肝炎病毒抗体检测结果的差异。方法：选取2021年9月广西中医药大学附属瑞康医院收治的1例初次检测及复查结果均显示为甲型肝炎病毒(HAV-IgM)弱阳性、戊型肝炎病毒(HEV-IgM)阳性的患者作为研究对象。患者初次采用酶联免疫吸附法检测，结果显示HAV-IgM弱阳性、HEV-IgM阳性，复查结果与初次检测结果保持一致；随后前往其他医院检测(化学发光法)，结果均为阴性。为探讨检测结果矛盾的原因，分别采用多家公司试剂盒及免疫印迹法进行验证。结果：该例患者HAV-IgM为阳性，初检及复查的安图结果与实验室罗氏验证的结果一致；HEV-IgM为阴性，安图结果与免疫印迹结果一致。结论：HAV-IgM、HEV-IgM具有多种不同方法学试剂，实验室应根据自身临床实验室的条件选择适合的方法学开展项目检测。针对异常结果应积极与临床沟通，结合临床症状判断，或采用准确度更高的方法学复查，并建议受检者定期复检。     

IV胶原检测试剂盒性能评价

目的建立IV胶原磁微粒化学发光免疫检测方法。方法采用夹心法,IV包被抗体包被于顺磁微粒上作为固相抗原,样本中的抗原和磁微粒上的抗体特异性结合,再加入酶标抗体形成夹心复合物。结果本试剂盒的线性范围为50-1000ng/mL;空白限(LOB)为0.671ng/mL,检出限(LOD)为2.49ng/mL,功能灵敏度(FS)为4.8ng/mL;分析内精密度4.6%,天间精密度5.8%;总不精密度7.1%;样品的回收率在94.10～103.40%之间。与25种临床治疗药物对检测结果无干扰。结论建立的IV胶原磁微粒化学发光定量免疫分析方法灵敏度高、测定速度快、准确度高及特异性强,利于临床研究的开展,应用和推广前景巨大。     

ELISA法检测抗戊型肝炎病毒IgM抗体研究

目的:探讨ELISA法检测抗戊型肝炎病毒IgM抗体。方法:对抗戊型肝炎病毒IgM抗体进行实验分析,总结出主意事项。结论:未发现风湿因子和高滴度的IgG会影响HEV IgM ELISA试剂盒的性能,用Ig G去除法需要稀释样品,有可能影响HEV IgM ELISA试剂盒的敏感性。     

总IgG和特异性IgG相关性初探

为探讨特异性ＩｇＧ和ＩｇＧ的相关性,用常规方法检测多份血清总ＩｇＧ,抗核抗体（ＡＮＡ）,抗双链ＤＮＡ抗体（ｄｓＤＮＡ）,抗盐水可提取核抗原（ＥＮＡ）抗体、巨细胞病毒（ＣＭＶ）特异性抗体、单纯疱疹病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－Ⅰ）特异性抗体及抗链球菌溶血素“０”抗体（ＡＳＯ）和抗“Ｈ”。结果显示：两种自身抗体（ＡＮＡ,抗ＥＮＡ抗体）及ＣＭＶ抗体各阳性组总ＩｇＧ水平明显高于各阴性组,有显著性差异;Ｓｍ和（或）ｄｓ     

IgG指数和IgG合成率在多发性硬化中的应用价值探讨

采用临床流行病学方法对ＩｇＧ指数和ＩｇＧ合成率的实用价值进行评价。结果发现：在对多发性硬化（ＭＳ）的诊断中，ＩｇＧ指数的敏感性、特异性和阳性结果似然比分别是６０％、６５％和１．８０，而ＩｇＧ合成率分别为５０％，６５％和１．４３。在排除皮质类固醇激素的影响后，ＩｇＧ指数的敏感性和阳性结果似然比分别是８４％和２．４，ＩｇＧ合成率则分别是７９％和２．２６。此外，ＩｇＧ指数和ＩｇＧ合成率对于判断是否存在中枢神经系统器质性损害有较大的意义     

血清IgG水平和IgG4相关性疾病反应指数在IgG4-RD活动性评估中的应用

目的 验证IgG4相关性疾病（IgG4-related disease,IgG4-RD）反应指数（responder index,RI）在IgG4-RD疾病活动性评估中的诊断效率,并进一步探索新的生物学标志物。方法 纳入117例符合2012年日本标准的IgG4-RD患者,由3名专科专家通过医师整体评估（physician global assessment,PGA）将患者分为活动组（n=78）和稳定组（n=39）。总结患者的一般情况、临床资料、实验室检查和IgG4-RD RI,分析两组患者一般情况和实验室检查的差异。进一步分析血清标志物及IgG4-RD RI评估IgG4-RD疾病活动性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和曲线下面积。结果 活动组IgG4-RD患者的外周血嗜酸性粒细胞百分比、血小板、血沉、C反应蛋白、IgG、IgG4、球蛋白、白介素6（interleukin-6,IL-6）和可溶性IL-2受体（soluble IL-2 receptor,sIL2R）较稳定组显著升高;血红蛋白、总胆固醇和甘油三酯显著降低。IgG、IgG4、球蛋白、血沉和sIL-2R水平均与IgG4-RD RI呈正相关（P<0.05）。IgG4-RD RI和血清IgG水平用于判断疾病活动性的曲线下面积达到0.940和0.916。以IgG4-RD RI ≥ 6为标准,敏感度和特异度分别可达到92.3%和86.5%;以IgG ≥ 11.6 g/L为标准,敏感度和特异度为89.1%和82.6%。结论 在IgG4-RD活动性评估中,IgG4-RD RI评分具有最高的诊断效率,血清IgG水平也可作为疾病活动性的标志物,敏感度和特异度较高,IgG4-RD RI评分和血清IgG水平是临床诊治中可靠、实用的评估方法。     

貉血清IgG纯化及抗血清的制备

目的制备高纯度貉血清IgG和兔抗貉IgG抗血清,作为建立多种动物抗体检测技术的储备。方法采用Hitrap Protein A亲和层析及盐析再沉淀法纯化貉血清IgG,通过PAGE电泳和Western-Blot免疫印迹法对IgG作纯度及免疫活性检测;常规免疫法制备兔抗貉IgG血清。结果貉血清IgG与Protein G虽有较强的结合力,但同时也结合血清中其他杂蛋白;用二步纯化法可从5 mL貉血清中纯化IgG约7 mg,电泳和免疫印迹测定显示,IgG纯度大于95%,常规免疫法制备抗血清免疫双扩散效价达1∶32。结论建立了可行的貉血清IgG的纯化方法和高效价的兔抗貉血清IgG抗血清,为貉血清IgG二级抗体酶联物的制备储备了资源。     

ELISA法检测脑囊虫病患者血清特异性IgG及IgG4的比较

目的：探讨IgG及IgG4在抗囊尾蚴感染中的作用。方法：用分子筛分离提纯猪囊尾蚴囊液粗抗原，用ELISA法检测未经治疗和经1－3，4－6和7－9疗程治疗的4组确诊脑囊虫病患血清中的总IgG和IgG4。结果：总IgG抗体在治疗前组和疗后组之间没有显性差异（P＞0．05），而IgG4在2组间有显性差异（P＜0．01）。总IgG在疗后3组之间没有明显差异（P＞0．05），IgG4抗体在疗后3组间则有显性差异（P＜0．01）。IgG4的特异性为98．4％，高于总IgG的94．0％。结论：IgG4不仅可用于囊虫病诊断，而且有望成为判定疗效的参考指标。     

Signaling transduction by IgG receptors

Objective To review and summarize literature regarding stimulatory and inhibitory signaling pathways from different types of Fc gamma receptors (FcγRs).Data source Articles were obtained from Medline from January 1991 to April 2002.Study selection Over 100 English language papers and reviews published over the last 11 years were selected.Results and Conclusions Stimulatory Fcγ receptors include FcγRⅠ, FcγRⅡA, FcγRⅡC, and FcγRⅢ A. They transduce signals through the immunoreceptor tyrosine-based activation motif (ITAM)in subunits or in the cytoplasmic domain. Inhibitory Fcγ receptors, such as FcγRⅡB, are single chain receptors, transducing signals through an immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif (ITIM) in cytoplasmic domains. Stimulatory signals include protein phosphorylation, increase in intracellular free calcium, the production of 1,4,5-triphosphate inositol (IP3) and diacylglycerol (DAG) mainly through the Src-family kinases, phosphoinositide 3-kinase (PI3-K) and phospholipase C (PLC). Inhibitory signaling has been implicated in the repression of the above activities as well as inhibition of B cell responses throuqh Src homoloqv 2-containinq inositol phosphatase (SHIP).     

IgG4相关性疾病(IgG4-RD)发病机制的研究进展

 IgG4 相关性疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)是以多发脏器肿大、血清IgG4升高为特点的一类自身免疫性疾病,发病机制仍不明确。病原体感染导致抗原呈递细胞表面模式识别受体激活,通过抗原呈递促进CD4+T细胞激活,分化为Th1、Th2、Treg和Tfh细胞,产生一系列T细胞因子,进一步促进B细胞活化并转化为浆细胞,产生IgG4。而巨噬细胞和Treg细胞产生的转化生长因子β (transforming growth factor β,TGF-β)和血小板源性生长因子等进一步促进了纤维化的发生。以上细胞因子和免疫细胞参与IgG4-RD发病,为今后的治疗策略提供了新的思路。     

猴EAE致敏前后脑脊液IgG指数和IgG合成率的变化

目的：研究体液免疫在多发性硬化（ＭＳ）病程不同阶段中的作用。方法：采用Ｂｅｋｍａｎｎ免疫仪和ＭｏｎａｒｃｈＰｌｕｓ生化仪，对１０只食蟹猴中ＩｇＧ指数和ＩｇＧ合成率，进行实验性变态反应性脑脊髓炎（ＥＡＥ）致敏前和致敏后不同阶段的自身对照检测。结果：致敏前正常食蟹猴脑脊液（ＣＳＦ）ＩｇＧ指数为０．３±０．１，ＩｇＧ合成率为－４．６±３．３；致敏后１、２、３、４、５周ＩｇＧ指数分别为０．４±０．２、０．７±０．５、０．７±０．４、０．７±０．３、０．６±０．２；而ＩｇＧ合成率分别为－１．３±４．１、２７．１±４０．０、２６．６±３９１、２６．２±３８．２、２４．５±４３．９。致敏后１周与致敏前的ＩｇＧ指数和ＩｇＧ合成率的差异无显著性意义，而致敏后２、３、４、５周与致敏前的差异均有显著性意义，但致敏后２、３、４、５周之间差异无显著性意义。结论：提示体液免疫在ＭＳ和ＥＡＥ中起重要作用，并且持续相当长的时间。     

心肌线粒体IgG和格林-巴利综合征关系探讨

目的　根据格林 -巴利综合征 (GBS)患儿以周围神经损伤为主 ,伴有中枢神经的免疫病理改变 ,并合并多脏器的功能紊乱及损害探讨格林 -巴利综合征患儿心脏是否存在自身免疫现象。方法　采用ELISA检测 32例格林 -巴利综合征患儿 ,112例病毒性心肌炎 (VM)患儿和 6 0例正常健康儿童血清心肌线粒体IgG (AMMIgG ) ,并检测了GBS的脑脊液 (CSF)中髓鞘碱性蛋白 (MBP)IgG和寡克隆IgG。结果　GBS组血清线粒体IgG阳性率6 8 75 % ,VM组 5 6 2 5 % ,两组与正常对照组间差异有显著性意义。对照组 6 0例全部阴性。表明GBS在周围神经和中枢神经受累的同时也有心脏的损害 ,且心肌受损率高于病毒性心肌炎组。GBS与VM组间血清AMMIgG阳性率差异无显著性意义 (χ2 =1 5 93,P >0 0 5 )。 8/2 2例阳性者有CSF中MBP -IgG出现 ,GBS患儿血清AMMIgG阳性者与阴性者间的CSF中寡克隆IgG阳性率差异有显著性意义 χ2 =6 4 ,P <0 0 2 0 。GBS患儿血清AMMIgG阳性者CSF中寡克隆IgG阳性率 6 2 5 %低于阴性者的 18 75 %。结论　提示部分GBS患儿存在心肌免疫性损伤。因此 ,必要的AMMIgG检测 ,有助于了解GBS患儿心脏功能和体内的免疫状态 ,并起到监测自身免疫反应的作用     

Binding of rheumatoid and lupus synovial fluids and sera-derived human IgG rheumatoid factor to degalactosylated IgG

BACKGROUND: Altered glycosylation of immunoglobulin G (IgG) has been demonstrated in patients with rheumatoid arthritis (RA). Specificity of IgG rheumatoid factor (RF) in recognizing degalactosylated IgG (Fab)(2) and Fc was analyzed in the present study. METHODS: (Fab)(2) and Fc fragments were prepared from IgG of normal healthy subjects. Enzymes, including peptide-N-glycosidase (PNGase), neuraminidase, and beta-1,4-galactosidase, were used to digest (Fab)(2) and Fc fragments. Binding capacity of IgG RF from patients with RA, systemic lupus erythematosus (SLE), and from healthy subjects to (Fab)(2) and Fc treated with glycosidase, was measured with immunoassay. RESULTS: Treating (Fab)(2) and Fc with PNGase significantly diminished their binding capacity to IgG RFs. Degalactosylated (Fab)(2) revealed higher affinity to IgG RF in all tested groups. Fc lacking terminal galactose on oligosaccharide chains showed elevated binding with synovial IgG RF of RA patients. However, lesser binding was observed in sera of patients with RA and SLE. CONCLUSIONS: Our data suggest that IgG molecules containing less terminal galactose on their oligosaccharide moieties are preferentially recognized by IgG RF. Furthermore, IgG RF display alternative binding specificity to degalactosylated (Fab)(2) and Fc in synovial fluids and sera of RA patients.