八肽缩胆囊素调节脂多糖诱导ECV-304细胞核转录因子-κB表达的受体机制研究

目的探讨八肽缩胆囊紊（CCK-8）调节脂多糖（LPS）诱导血管内皮细胞核转录因子-κB（NF—κB）表达的受体机制。方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304；用溶剂（生理盐水）、LPS、CCK-8、CCK受体（CCK—R）非特异性拮抗剂丙谷胺、CCK—A受体（CCK—AR）特异性拮抗剂CR-1409、CCKB受体（CCK—BR）特异性拮抗剂CR-2945分别或联合刺激ECV-304细胞1h。用蛋白质免疫印迹法（Western blot）榆测NF-κB p65蛋白表达；用免疫细胞化学技术榆测NF—κB p65蛋白核移位。结果与溶剂对照组比较，LPS可诱导ECV-304细胞NF-κB p65蛋白核移位，且其表达明显上调；CCK-8可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的核移位及表达上调；CCK受体拮抗剂可翻转CCK-8的上述抑制效应，其中CR-1409、CR-2945、丙谷胺作用依次增强。结论CCK-AR和CCKBR参与介导了CCK-8对LPS诱导ECV-304细胞NF—κB表达的抑制作用，其中CCK—BR的作用比CCK—AR稍强。     

己酮可可碱对大鼠内毒素性急性肺损伤iNOS和NO的影响

目的：探讨己酮可可碱（PTX）对大鼠内毒素急性肺损伤（ALI）iNOS和NO的影响。方法：采用大鼠内毒素ALI模型。24只SD大鼠随机分为生理盐水对照组（CON）、内毒素组（LPS）和PTX组，每组8只。观察PTX对氧合指数PaCO2/FiO2）、支气管肺泡灌洗液（BAL）中蛋白含量、肺组织iNOS、NO3^-/NO2^-、髓过氧化物酶（MPO）活性的影响，计算肺湿／干比值（W／D）并行肺组织病理学检查。结果：PTX线自2h起各时间点PaO2/FiO2均高于LPS组（P＜0．05），W／D、BAL中蛋白含量、肺组织iNOS、NO含量和MPO活性均较LPS组显著降低（P＜0．05）。病理学检查显示PTX组肺组织损伤程度较LPS组减轻。结论：PTX对内毒素性ALI的保护作用可能与其抑制肺组织iNOS活性和减少NO生成有关。     

碱性成纤维细胞生长因子对人晶体上皮细胞增殖及一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人晶体上皮细胞内一氧化氮（NO）含量和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性、基因及蛋白表达的影响。 方法：以含10％胎牛血清（FBS）与100mg／L青霉素和100mg／L链霉素的DMEM培养液培养及传代人晶体上皮细胞。用0．001，0．01，0．1，1，10和100μg/L浓度的bFGF作用于晶体上皮细胞，用MTT法检测晶体上皮细胞的增殖情况；用Griess法测定NO含量；分别用RT—PCR方法及western blot法检测iNOS基因及蛋白的表达。 结果：①bFGF对细胞增殖的影响：与对照组比较，除100μg/L以组外，其余浓度为0．001～10μg／L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应均大于对照组，其中0．01～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应差异显著（P〈0．05）。②bFGF对晶体细胞NO水平、NOS活性及iNOS的基因和蛋白表达的影响：对照组和0．001，0．01，0．1μg/L bFGF组NO水平较低，而在1μg/L以和10μg/L以的bFGF使人晶体上皮细胞的NO含量增高，0．1～10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NOS活性增高、使iNOS的基因和蛋白表达增强。 结论：可以促进人晶体上皮细胞的增殖，使NO含量和iNOS的活性和蛋白表达增高。     

CCK-8调节LPS诱导大鼠血管平滑肌细胞iNOS表达的分子机制

目的观察硫酸化八肽胆囊收缩素(CCK-8)对体外脂多糖(LPS)诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞(TASMCs) iNOS表达的影响,探讨CCK的受体介导效应,以揭示CCK-8抗休克作用的分子机制。方法采用贴块法培养大鼠TASMCs,经LPs、CCK-8、CR-1409、CR-2945、CCK LPS、CCK LPs CR-1409、CCK LPS CR-2945及溶剂孵育细胞16 h,RT-PCR技术检测细胞浆iNOs mRNA的表达；Western blot技术检测胞浆iNOS蛋白表达,以光密度值表示其相对含量。结果LPS(0．1mg/L)可诱导TASMCs iNOS mRNA及蛋白的表达上调(P＜0．01)；而CCK-8(10~(-8)mol/L)可抑制LPS的诱导作用(P＜0．01)；预先给子CCK-AR特异性拮抗药CR-1409(10~(-5)mol/L)、CCK-BR特异性拮抗药CR-2945(10~(-5) mol/L),均可部分拮抗CCK-8的这种抑制作用,其中CR-1409的拮抗作用略高于CR-2945：CCK-8、CR-1409、CR- 2945单独作用与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。结论CCK-8受体介导了其对LPS诱导的胸主动脉平滑肌细胞iNOs的表达的抑制,且CCK-AR的作用略高于CCK-BR,此为CCK-8抗内毒素休克作用的受体机制。     

异甘草酸镁上调血红素氧合酶-1对巨噬细胞过度分泌炎症因子的作用研究北大核心CSCD

目的探讨异甘草酸镁（MgIG）在脂多糖（LPS）刺激的RAW264．7巨噬细胞中是否能通过上调血红素氧合酶-1（HO-1）起到抑制高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和一氧化氮（NO）释放的作用。方法用LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264．7制作炎症细胞模型。①先用不同浓度的MgIG与LPS合并处理24h,分别为Control组、LPS组和LPS＋MglG不同剂量组（O．01mg／mL、0．10mg／mL、0．50mg／mL和1．00mg／mL）;②再将培养细胞随机分为不同处理组（每组n=5）：Control组、LPS组、LPS＋MdG（1．00mg／mL）和LPS＋MdG（1．00m∥mL）＋血红素氧化酶抑制剂[ZnPPIX（10μmol／L）]组。用ELISA方法测定上清HMGBl浓度,用Griess法测定上清液NO的浓度水平,用Western bolt检测细胞内HO-1和iNOS蛋白的表达。结果①与Control组比较,LPS能够明显增加上清液HMGB1和NO浓度（均P〈0．05）,并且在一定程度上增加细胞内HO-1的蛋白表达水平（P〈0．05）;与LPS组比较,LPS＋MgIG不同剂量组均减少了HMGB1和NO的释放（均P〈0．05）,并且随着剂量的增加,HMGB1和NO的上清液水平降低越明显,而HO-1的表达水平在LSP＋MgIG（0．10mg／mL、0．50mg／mL和1．00mg／mL）组均明显诱导增加（均P〈0．05）。②与Control比较,LPS同样明显增加上清液HMGB1和NO浓度（均P〈0．05）,以及明显增加细胞内HO-1和可诱导一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达水平（均P〈0．05）;与LPS组比较,LPS＋MgIG（1．00mg／mL）组上清液中HMGBl和NO浓度明显下降（均P〈0．05）,细胞内HO-1的蛋白水平明显增加（P〈0．05）,细胞内iNOS的蛋白水平则明显下降（P〈0．05）,而LPS＋MgIG（1．00mg／mL）＋ZnPPIX（10μmol／L）组上清液HMGB1和NO浓度、细胞内HO-1和iNOS的蛋白水平差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论MglG能抑制LPS刺激巨噬细胞过度释放HMGBl和NO,能明显抑制LPS诱导的iNOS表达,并且依赖于HO-1的上调。     

胰岛素样生长因子-1对内皮细胞活力及组织因子的影响

目的 研究胰岛素样生长因子-1（Insulin like growth factor-1，IGF-1）对血管紧张素Ⅱ（Angll）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）细胞活力及组织因子（TF）的影响和其作用机制。方法 分别用不同浓度1GF-1预处理HUVEC细胞株HUVEC-12细胞30min后加入AngⅡ10^-6moL／L孵育24h，观察细胞活力及AngⅡ 1型受体（AT1-R）mRNA变化的量效关系。选择一个作用最明显的IGF-1浓度预处理HUVEC-12细胞30min后加入AngⅡ10^-6mol／L孵育12～48h，观察细胞活力变化的时效关系。同时测定孵育24h的HUVEC裂解液TF含量、一氧化氮合酶（NOS）活性及一氧化氮（NO）浓度，并于NOS抑制剂（L-NAME）预处理细胞30min后，再加入IGF-1和Ang11，观察孵育24h细胞活力、TF、AT1-RmRNA、NOS及NO水平变化。结果 ①AngⅡ能降低HUVEC-12细胞活力，上调AT1-RmRNA表达及增加TF含量，抑制NOS活性、减少NO生成；②IGF．1能显著抑制Angll诱导的细胞活力降低和AT1-RmRNA表达增加，以0．5μg／ml浓度作用最明显，此浓度处理细胞12～48h内细胞活力恢复具有时间依赖性；③IGF-1能抑制AngⅡ诱导的TF增加及改善AngⅡ诱导的NOS活性降低，增加NO生成；④L-NAME可明显拮抗IGF-1对血管内皮的保护作用。结论 IGF-1可明显提高Ang11诱导的内皮细胞活力及抗血栓能力，其作用可能是通过激活NOS-NO通路从而抑制AT1-R实现的。     

血小板微颗粒对人脐静脉内皮细胞组织因子表达影响的初步探讨

目的探讨血小板微颗粒（PMPs）可刺激人脐静脉内皮细胞（ECV-304）表达组织因子（TF）。方法将一定数量分离于人富血小板血浆（PRP）的PMPs加到ECV-304细胞作用一定时间后,应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、流式细胞术检测细胞TF表达。结果一定数量PMPs可刺激ECV-304细胞表达TF,但与相同反应条件下一定浓度内毒素（LPS）作用于ECV-304细胞表达的TF量有所不同。结论PMPs可刺激ECV-304细胞表达TF。     

八肽缩胆囊素受体在血管内皮细胞中的表达及脂多糖的影响

目的 观察八肽缩胆囊素受体(CCK-R)mRNA在人脐静脉内皮细胞株ECV-304中的表达,并探讨内毒素脂多糖(LPS)对CCK-AR、CCK-BR mRNA表达的影响.方法 培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304,以LPS 0.01、0.1、1、10 mg/L孵育ECV-304 2 h或用1 mg/L LPS孵育ECV-304 0.5、2、6、12 h,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CCK-AR、CCK-BR的mRNA表达,并对扩增产物的特异性进行测序分析.结果 与空白对照组比较,0.01、0.1及1 mg/L LPS孵育细胞2 h可剂量依赖性引起CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达明显升高(P均<0.05),其中0.01 mg/L LPS诱导CCK-AR mRNA效应不明显,但可明显诱导CCK-BR mRNA表达;与1 mg/L LPS组比较,10 mg/L LPS孵育细胞2 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达未继续出现明显升高(P均>0.05).与空白对照组比较,1 mg/L LPS孵育细胞0.5～2 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达呈时间依赖性升高(P均<0.05);与LPS孵育2 h比较,1 mg/L LPS孵育细胞6 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达明显下降,但仍高于空白对照组(P均<0.05);与LPS孵育6 h比较,1 mg/L LPS孵育细胞12 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达进一步降低(P均<0.05),且与空白对照组比较已无显著差异(P均>0.05).结论 CCK-AR与CCK-BR的mRNA在ECV-304中均有表达;LPS可诱导CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达上调.     

碱性成纤维细胞生长因子对人晶体上皮细胞增殖及一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人晶体上皮细胞内一氧化氮(NO)含量和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性、基因及蛋白表达的影响。方法:以含10%胎牛血清(FBS)与100mg/L青霉素和100mg/L链霉素的DMEM培养液培养及传代人晶体上皮细胞。用0.001,0.01,0.1,1,10和100μg/L浓度的bFGF作用于晶体上皮细胞,用MTT法检测晶体上皮细胞的增殖情况;用Griess法测定NO含量;分别用RT-PCR方法及westernblot法检测iNOS基因及蛋白的表达。结果:①bFGF对细胞增殖的影响:与对照组比较,除100μg/L组外,其余浓度为0.001～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应均大于对照组,其中0.01～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应差异显著(P<0.05)。②bFGF对晶体细胞NO水平、NOS活性及iNOS的基因和蛋白表达的影响:对照组和0.001,0.01,0.1μg/LbFGF组NO水平较低,而在1μg/L和10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NO含量增高,0.1～10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NOS活性增高、使iNOS的基因和蛋白表达增强。结论:可以促进人晶体上皮细胞的增殖,使NO含量和iNOS的活性和蛋白表达增高。     

肾小球系膜细胞一氧化氮合成酶细胞外基质合成影响的研究

目的研究体外培养的系膜细胞诱生型一氧化氮合成酶(iNOS)表达水平对细胞外基质成分(IV型胶原、纤维连接蛋白)含量的影响。方法胎肾培养原代系膜细胞，取Ⅲ代细胞进行实验。采用TRLzolRNA一步法提取系膜细胞总RNA。半定量逆转录聚合酶链反应法(RT—PCR)测定iNOSmRNA表达，以β-action为内对照。酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养液中细胞外基质成分IV型胶原、纤维连接蛋白(FN)的含量。硝酸还原酶法检测培养液中NO的含量。对照组为RPMI1640 10％小牛血清(FGS) 1mM左旋精氮酸(L-arginine)，实验组为1脂多糖(LPS)10ug／ml，观察24h。结果系膜细胞中iNOSmRNA的表达；在未刺激的MC中无iNOSmRNA表达；刺激后4小时可检测到iNOSmRNA表达，6小时明显增加，24小时达到高峰；至48hr，iNOSmRNA表达仍继续增加。上清中的NO：(1)6小时LPS组与对照组无明显差别，24小时后LPS组NO含量增加：(2)LPS诱导的NO含量的增加可被L—NAME抑制。上清IV型胶原，FN含量：(1)4小时、6小时、24小时、48小时LPS组与对照组比较含量降低(P(O，05)(2)I。PS诱导的IV型胶原、FN的降低被L—NAME明显抑制。结论我们的研究发现肾小球MC确含有iNOS，且在生理状态下呈稳定状态，病理状态下iNOS表达上调；MC分泌的ECM与i—NOS表达有关；NO可降低ECM的含量，提示iNOS诱导的NO在肾小球硬化的发生和发展中起到了重要作用；各种因素对iNOS影响的最终结果是NO的变化．能够引起iNOS表达变化的各种因素均可引起NO含量的变化，从分子水平进一步证实肾小球MC-氧化氮合成酶的表达水平与细胞外基质密切相关。     

川芎嗪对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞分泌一氧化氮的影响

目的观察川芎嗪对缺氧损伤的人脐静脉上皮细胞分泌一氧化氮功能的影响。方法以连二亚硫酸钠作为耗氧剂,建立体外人脐静脉上皮细胞缺氧损伤模型,与不同浓度的川芎嗪共同孵育后测定细胞培养液中的一氧化氮和一氧化氮合酶的含量。结果在以终浓度为1μmol/L的川芎嗪的条件下,细胞培养液中的一氧化氮和一氧化氮合酶的含量显著高于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论川芎嗪能提高缺氧损伤造成的内皮细胞一氧化氮合酶的活性,增加分泌一氧化氮分泌。     

恒磁场对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶活性的影响

目的:观察恒磁场(staticmagneticfield,SMF)对培养的人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendotheliumcell,HUVEC)一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)活性表达的影响,以探讨SMF能否用于经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneoustransluminalcoronaryangioplasty,PTCA)及冠脉内支架植入术后冠脉再狭窄(restenosis,RS)的防治。方法:用含100g/L小牛血清的DMEM培养液体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),分别在给予SMF和无SMF条件下培养,行ABC免疫酶染色法,采用图像分析法分析SMF对HUVEC的NOS活性的影响。结果:实验组内皮细胞结构型NOS(endotheliumconstructiveNOS,ecNOS)表达较对照组增强,差异显著(P<0.01),实验组与对照组诱生型NOS(inducedNOS,iNOS)均无表达。结论:恒磁场增强了培养的HUVEC的ecNOS的表达;恒磁场对PTCA支架植入术后的冠脉再狭窄可能具有防治作用。     

低频电磁场对培养的人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶的影响

目的：观察不同磁场强度,不同作用时间的低频电磁场（LFEMF）对培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）一氧化氮合酶（NOS）活性表达的影响,以探讨LFEMF用于经皮冠脉腔内成形术（PTCA）及支架植入（IVS）术后冠脉再狭窄（RS）防治的意义。方法：分别用不同磁场强度,不同作用时间的LFEMF作用于体外培养人脐静脉内皮细胞系ECV304,行ABC免疫酶染色法,图像分析法分析LFEMF对HUVEC的NOS表达的影响。结果：除60mT20min组,60mT30min组外,其余各实验组内皮细胞结构型NOS（ecNOS)表达均较对照组增强,差异显著（P＜0．05）。所有实验组与对照组诱生型NOS（iNOS)均无表达。结论：LFEMF增强了培养的HUVEC的ecNOS的表达,可能适用于RS的防治。     

低频电磁场对培养的人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶的影响

背景目前认为经磁场作用的酶,大多有增强活性的倾向,而关于低频电磁场(1owfrequency electromagneticfield,LFEMF)对培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性表达的影响研究不多见.目的探讨不同磁场强度,不同作用时间的LFEMF对HUVEC的NOS活性表达的影响,以探讨LFEMF用于经皮冠脉腔内成形术(percutanuoustransluminal coronary angioplasty,PTCA)及支架植入术后冠脉再狭窄防治的意义.设计随机对照的实验研究.地点、材料和干预本研究在解放军第四军医大学西京医院心内科实验室完成.体外培养的人脐静脉内皮细胞系ECV304按LFEMF的不同磁场强度,不同作用时间分为9个实验组和1个对照组进行干预.进行ABC免疫酶染色后图像分析法观察HUVEC的NOS表达.主要观察指标非磁场干预与不同强度磁场干预的体外培养的人脐静脉内皮细胞NOS结果.结果除60mT 20min组,60mT 30min组外,其余各实验组内皮细胞结构型NOS(Endothelium Constructive nitric oxide synthase,ecNOS)表达均较对照组增强,差异有显著性意义(P＜0.05).所有实验组与对照组诱生型NOS(Induced nitric oxide synthase,iNOS)均无表达.结论LFEMF增强了培养的HUVEC的ecNOS的表达,可能适用于再狭窄的防治.     

Presence of nitrotyrosine with minimal inducible nitric oxide synthase induction in lipopolysaccharide-treated pigs

The production of large amounts of nitric oxide (NO) by the inducible form of nitric oxide synthase (iNOS) and the subsequent production of peroxynitrite (OONO-) are believed to be major factors in the hemodynamic abnormalities of sepsis. This finding is based on data from rats and mice but has not been established in other species. Therefore, we examined the role of iNOS in lipopolysaccharide (LPS)-treated pigs, which have a hemodynamic pattern with sepsis that is more similar to humans than rats. Pigs were anesthetized, ventilated, and given LPS (n = 12), 20 microg/kg over 2 h, or saline (n = 7). They were killed after 2 (n = 8 LPS, 7 control) or 4 h (4 LPS). We measured cardiac output (CO), mean arterial (Part), and pulmonary and central venous pressures. We evaluated NO production by measuring expired NO, and plasma nitrate/nitrite concentration, NOS activity (in lung tissue), and iNOS protein by Western analysis, and immunohistochemistry (lung and liver), as well as iNOS mRNA by Northern analysis (liver and lung). We also measured nitrotyrosine as evidence of OONO- production by slot blot, Western analysis, and immunohistochemistry. By 2 h, Part fell and CO did not change so that systemic vascular resistance decreased from 21.5+/-2.9 to 12.7+/-3.1 mmHg x L(-1) x min (P < 0.05) and remained at 11.3+/-1.7 mmHg x L(-1) x min in the animals observed for 4 h. Plasma nitrate/nitrite, expired NO, and NOS activity did not change. We found no iNOS in tissues by Western analysis with 5 different antibodies but detected a small amount of iNOS by immunohistochemistry in inflammatory cells and small vessels. There was a small increase in iNOS mRNA in liver and lung. Despite the minimal increase in iNOS, nitrotyrosine was increased in small vessels and in inflammatory cells. In conclusion, caution should be used when extrapolating the septic response in rodents to other species, for the pattern of iNOS induction is very different.     

雾化吸入氯胺酮对哮喘大鼠肺组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的通过建立大鼠支气管哮喘模型,观察不同浓度氯胺酮对哮喘大鼠肺组织iNOS活性及NO含量的影响。方法SD大鼠随机分成对照组(N组)、哮喘模型组(A组)、不同浓度氯胺酮预处理组(分别为K1组、K2组)和地塞米松组(D组),每组8只。A组大鼠用卵白蛋白辅以百日咳杆菌菌苗和氢氧化铝为佐剂注射致敏,2周后雾化吸入卵蛋白激发哮喘;氯胺酮处理组大鼠用同样方法致敏,但在激发前分别给予雾化吸入氯胺酮25 g/L(K1组)和50 g/L(K2组);D组在激发前给予雾化吸入0.01%地塞米松;N组用生理盐水替代卵蛋白进行注射和吸入。每组分别测定其肺组织NO2-/NO3-水平、肺组织诱导型NOS(iNOS)和原生型NOS(cNOS)活性水平,并用免疫组织化学法观察iNOS在大鼠哮喘模型肺组织中的分布。结果A组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS水平升高,iNOS和肺组织NO2-/NO3-水平呈高度正相关;K1、K2组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS水平低于A组(P<0.05);D组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS水平亦低于A组(P<0.05)。结论25 g/L或50 g/L的氯胺酮雾化吸入可抑制哮喘大鼠肺组织iNOS活性,降低NO含量,减轻大鼠肺部炎症。     

脂多糖诱导巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶的实验研究

目的观察脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(in-ducible nitric oxide synthase,iNOS)的诱导作用。方法常规方法获取小鼠腹腔巨噬细胞随机分成两组:空白对照组(培养基中不含LPS)及LPS组(分别含LPS0.01,0.1,1.0,10mg/L的培养基培养24h)。采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western Blotting方法测定诱导型一氧化氮合酶的基因及蛋白表达水平。结果RT-PCR和Western Blotting结果表明,经0.1mg/LLPS刺激后细胞iNOS mRNA及蛋白表达水平均明显升高,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05),并且在一定范围内呈剂量-效应关系。结论LPS可诱导小鼠巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶。     

Induced nitric oxide inhibits IL-6-induced stat3 activation and type II acute phase mRNA expression

Inducible nitric oxide synthase (iNOS) can be coexpressed with acute phase reactants in hepatocytes; however, it is unknown if NO can regulate the acute phase response. We tested the hypothesis that iNOS-derived nitric oxide (NO) attenuates the acute phase response by inhibiting IL-6-enhanced Stat3 DNA-binding activity and type II acute phase mRNA expression. iNOS was overexpressed in cultured rat hepatocytes via transduction with a replication defective adenovirus containing cDNA for human iNOS (AdiNOS), and Stat3 DNA-binding activity was determined by electrophoretic mobility shift assay (EMSA). EMSAs demonstrated that AdiNOS inhibits IL-6-induced Stat3 activation and that this inhibition is reversible in the presence of the NOS inhibitor N(G)-monomethyl-L-arginine (L-NMA). The induction of beta-fibrinogen mRNA by IL-6, a Stat3 dependent process, is attenuated in AdiNOS-transduced cells and partially reversed by L-NMA. Thus, iNOS overexpression suppresses IL-6-induced Stat3 activation and type II acute phase mRNA expression in cultured hepatocytes. This suppression may represent a mechanism by which NO down-regulates the acute phase response.