大胚龄人神经干细胞长期冻存后的复苏培养

目的探讨长期冻存后的大胚龄人胚神经干细胞（neural stem cells,NSCs）的生长及其生物学特性。方法分别于冻存后6、12及24个月,快速解冻复苏胚龄为16～20周的胎脑细胞,采用无血清培养液悬浮培养,观察培养细胞的活性及成球时间,采用免疫细胞化学方法鉴定这些细胞球及其分化成熟后的细胞表面标志。结果培养传代的细胞透亮﹑成球时间短,与取自新鲜胎脑的神经干细胞无明显区别。细胞球Nestin染色阳性,成熟分化后神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及2＇,3＇-环腺苷酸-3＇-磷酸二酯酶（CNPase）抗原呈阳性。结论长期冻存后的人大胚龄神经干细胞仍具有较强增殖能力及多分化潜能。     

小鼠胚胎干细胞在胎肾微环境中共培养后表达肾标志物

胚胎干（ES）细胞是一种多潜能细胞具有分化成为来自三个胚层各种细胞甚至包括生殖细胞的能力。最新的研究表明，胚胎于细胞在与胚胎脏器细胞共培养后可以定向分化为多种特定细胞表型，他们包括肝细胞、心肌细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞．并在某些情况下甚至可能形成成熟的器官组织结构。已有研究报道说明ES细胞通过在体外环境中直接形成拟胚体（EBs）可以分化成为肾细胞．并且最新的研究成果表明分离自这些EBs的细胞移植入体内后可以形成肾近端小管样结构并且未在其周同发现畸胎瘤形成。但是ES细胞是否可以通过和胎肾细胞相互作用继而获得定向分化并未见诸报道。在实验中我们发现．在与小鼠胎肾细胞共培养后．ES细胞分化成为了肾系细胞。处理后的ES细胞可以检测到与肾发育相关的特征基因．如WT-1、exm-2和Wnt-4基因的表达．我们也发现了终末分化的肾细胞标志物．如podocalyxin、Nephl和RSOR基因的表达。在实验前后，我们同样探寻了ES细胞多分化潜能标记分子的基因表达情况，结果显示共培养后分化的ES细胞Oct-4、Nanog和Klf-4基因表达明显减弱。综上，胎肾细胞微环境可能促使ES细胞定向分化为肾系细胞，提示胚胎器官细胞微环境在ES细胞转分化过程中可能扮演了重要作用。     

不同浓度离子作用于颈动脉小体对血压的影响

背景:颈动脉窦存在压力感受器,是离子对血压调节最敏感的部位,在血压的调节中起到重要的作用,但不同离子通过颈动脉窦对血压的调节作用还不十分清楚。目的:观察用不同浓度、不同离子浸泡颈动脉窦后血压的变化。设计:自身对照实验。单位:解放军第四军医大学基础部教学实验中心。材料:实验于2000-12/2001-06在解放军第四军医大学基础部教学实验中心机能实验室完成。选取纯种新西兰兔18只,实验动物标准为二级,雌雄不限,体质量(2.0±0.2)kg,由解放军第四军医大学动物实验中心提供。方法:采用随机数字表法将白兔分为Na 组、K 组和Ca2 组,每组6只。将家兔麻醉后,气管插管,分离两侧颈动脉,一侧分离出颈动脉窦,另一侧进行血管插管并记录血压,用加液枪于颈动脉窦外分别由低浓度到高浓度滴加Na 、K 和Ca2 溶液,将颈动脉窦完全浸泡;记录每次加液前血压的基础值和加液后血压变化的峰值。主要观察指标:家兔颈动脉血压的基础值和加液后血压变化的峰值。结果:0.15,1.5mol/L的高浓度Na 加液后血压为(97±12),(83±17)mmHg,与基础值(106±14),(105±12)mmHg比较有显著的降血压作用(t=2.946,P<0.05);0.4mol/L的高浓度K 有显著的降血压作用[(106±12),(64±13)mmHg,(t=13.496,P<0.01)],其他浓度的K 降血压作用不明显(P>0.05);0.07mol/L的低浓度Ca2 加液后血压为(113±16)mmHg,与基础值(103±12)mmHg比较有显著的升血压作用(t=-3.627,P<0.01)。结论:Na 、K 和Ca2 可以通过直接作用于颈动脉窦调节血压。高浓度的Na 、K 具有降压作用,低浓度的Ca2 具有升压作用,这可能是血压调节的一种重要机制。     

急性心肌缺血时频域心电图和超声心动图的对比研究

<正> 频域心电图（FCG）是一种新的无创检查技术。FCG在心肌梗塞病人的临床应用价值已有报告。然而FCG检测急性心肌缺血的敏感性和特异性还不清楚。本实验以不同程度心肌缺血的杂种犬,比较在不同程度心肌缺血时FCG和二维超声心动图（2DE）变化的敏感性和特异性。并且讨论FCG变化与室壁运动异常（WMA）的关     

实验性颅内压增高对频域心电图的影响

本文观察颅内压（ICP）升高对频域心电图（FCG）的影响。8只猫戊巴比妥麻醉后,右颞部硬膜外放置球囊,左边侧脑室穿刺置管测脑脊液压,向球囊内注盐水使ICP阶梯性升高,分别升至4.0,5.3,8.0,10.6,13.3,17.3KPa,ICP升高稳定5分钟后,同时观察瞳孔、血压、ECG和FCG等的变化。FCG的指标有Px,Py,Fmin,Rx,Ry和Rxy。     

不同类型肝脏血管周上皮样细胞肿瘤的影像特点

  目的  探讨不同类型肝脏血管周上皮样细胞分化的肿瘤（PEComa）的CT及MRI影像学特征。  方法  回顾性分析我院2014年7月~2018年7月经手术病理证实的12例肝脏PEComa患者的影像学资料，分析病灶在CT及MRI图像上的位置、密度及信号特点、强化形式。  结果  含脂肪型病灶肉眼可见的脂肪成分无明显强化，而软组织成分强化明显，动态增强扫描病灶动脉期显著强化并见到瘤内血管，门脉期及延时期出现中轻度强化，并可见环形强化的假包膜。无脂肪型呈实质性软组织肿块，肉眼不可见脂肪成分，动态增强扫描病灶动脉期呈明显均质强化，可见粗大扭曲的畸形血管和动脉瘤样结节状强化，门脉期及平衡期呈延时强化改变。由于病灶缺少正常肝细胞，肝胆特异期病灶对比剂摄取呈低信号改变。其中含脂肪型需与血管平滑肌脂肪瘤鉴别，但影像学缺乏特异性，无脂肪型几乎全部误诊为肝细胞癌。  结论  肝脏PEComa具有独特的免疫组化特征，如果依据病灶内是否含有脂肪成分来分型，影像学表现具有一定的特性，但是病变在表观扩散系数图及肝胆特异期没有特异性，不能作为单独的诊断依据。乏脂肪型PEComa临床术前误诊概率较大，因此放射科医生加强对此病的认识具有重要的意义。      

脂多糖诱导巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶的实验研究

目的 观察脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(in-ducible nitric oxide svnthase,iNOS)的诱导作用.方法 常规方法获取小鼠腹腔巨噬细胞随机分成两组:空白对照组(培养基中不含LPS)及LPS组(分别含LPS 0.01,0.1.1.0,10mg/L的培养基培养24h).采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western Blotting方法测定诱导型一氧化氮合酶的基因及蛋白表达水平.结果 RT-PCR和Westem Blotting结果表明,经0.1mg/L LPS刺激后细胞iNOS mRNA及蛋白表达水平均明显升高,与空白对照组比较有显著性差异(P&lt;0.05),并且在一定范围内呈剂量--效应关系.结论 LPS可诱导小鼠巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶.     

肝尾状叶CT矢状面测量与肝硬化之间的关系探讨

目的 探讨正常人肝尾状叶大小变化的规律及其与肝硬化患者之间的关系.资料与方法 经临床资料、CT及B超证实的30例肝硬化患者和30例正常人肝脏分别行正中矢状面、斜矢状面、垂直斜矢状面CT重组,计算重组后各矢状面的有效层数及肝尾状叶长径及短径的值,比较正常人与肝硬化患者肝尾状叶的关系.结果 肝尾状叶正常组与肝硬化组各矢状面有效层数差异均有统计学意义(P值＜0.001);正常组与肝硬化组各有效层面上尾状叶长径与短径比较均有显著统计学差异,且以正中矢状面短径之间(P=0.001)和斜矢状面短径之间最可靠(P＜0.001),灵敏度分别为73.33%(22/30)、76.67%(23/30),特异度分别为73.33%(22/30)、80.00%(24/30).结论 对肝尾状叶正中矢状面、斜矢状面和垂直斜矢状面有效层数、长径与短径的测量能为临床诊断肝硬化提供有利证据.     

人诱导性多能干细胞的培养及鉴定

目的 建立稳定的人诱导性多能干细胞(iPS细胞)培养体系.方法 取第3～5代的小鼠胚胎成纤维细胞,丝裂霉素C处理后用作饲养层.人iPS细胞接种于饲养层上生长,胶原酶消化或机械法传代.倒置显微镜下观察iPS细胞生长状态;观察拟胚体形成能力;RT-PCR检测iPS细胞多能性基因的表达情况.结果 (1)小鼠胚胎成纤维细胞(MEn为贴壁生长细胞,呈梭形或多角形.细胞增殖旺盛.(2)生长在饲养层上的人iPS细胞呈典型的克隆状生长.克隆呈圆形或椭圆形,边界清晰.克隆内细胞排列紧密,细胞体积小,核大,细胞核,质比高.RT-PCR结果 显示人iPS细胞强表达多能性基因Oct4,Nanog,Sox2;去除饲养层后悬浮培养能形成拟胚体(EB).结论 本实验的培养体系适合人iPS细胞的培养,人iPS细胞能稳定增殖,保持自我更新及分化潜能.