动态检测乳腺癌患者外周血中CK19表达的临床研究

目的动态检测乳腺癌患者外周血细胞角蛋白19（cytokeratin 19,CK19）的表达并探讨其临床意义。方法应用流式细胞术（flow cytometry,FCM）动态检测32例乳腺癌、10例乳腺良性疾病及10例健康人外周血CK19的表达。结果32例乳腺癌患者外周血CK19阳性的总表达率为29.73%;外周血CK19的表达与TNM分期呈显著相关（P〈0.05）;与肿瘤大小、淋巴结有无转移、HER-2、ER、PR的表达均无相关性（P〉0.05）;IV期与I、II、III期之间有统计学意义。CK19表达预测远处转移敏感性高达100%,特异性为96.3%;10例良性患者及10例健康人外周血均无CK19表达。结论乳腺癌患者外周血CK19可以作为检测乳腺癌远处转移的敏感特异性指标。     

巢式PCR检测胃癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的：对外周血CK19 mRNA基因表达的检测,探讨对胃癌患者微转移的诊断价值。方法：采用巢式RT-PCR方法检测63例胃癌患者,20例健康志愿者外周血CK19 mRNA的表达情况。结果：胃癌患者外周血中CK19 mRNA的阳性检出率为36.5%,并与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度有关（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移无关（P〉0.05）,而健康志愿者外周血中CK19 mR-NA无1例阳性表达。结论：CK19 mRNA可以作为判断胃癌患者外周血微转移的肿瘤标志物。     

乳腺癌患者综合治疗的疗效及预后分析

目的：探讨可手术的乳腺癌患者综合治疗的疗效、预后及主要影响因素。方法：收集2002年1月~2005年12月236例可手术的乳腺癌患者的临床病理资料,探讨患者的年龄、绝经与否、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数量、TNM分期、激素受体表达情况、化疗、放疗及内分泌治疗的疗效与预后的相关性。结果：236例患者5年生存率为68.6%。肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目及TNM分期与患者生存率呈负相关（P〈0.05）。其中三阴性乳腺癌的生存率较非三阴乳腺癌明显降低（P=0.022）。术后进行化疗、放射治疗或内分泌治疗的患者5年生存率均高于未进行综合治疗的患者（P〈0.05）。年龄、绝经与否、激素受体表达与5年生存率无明显相关（P〉0.05）。结论：肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目、TNM分期、三阴性乳腺癌以及术后是否进行化疗、内分泌治疗、放射治疗均与预后有密切关系。其中肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目和TNM分期为影响乳腺癌患者预后的独立危险因素。     

CK19和CEA mRNA表达与乳腺癌浸润和微转移的关系

目的 探讨细胞角蛋白19(CK19)和癌胚抗原(CEA)mRNA表达与乳腺癌浸润和微转移的相关性.方法 收集乳腺癌手术前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)、术前外周血标本40例,应用免疫组化法检测CK19和CEA mRNA在乳腺癌中的表达.结果 CK19和CEA mRNA的表达与肿瘤细胞分化无关(P＞0.05),与淋巴结转移、TNM分期具有相关性.CK19和CEA mRNA表达存在相关性(P＜0.01).结论 CK19和CEA mRNA的阳性表达可作为预测乳腺癌微转移潜能的生物学指标,且CK19和CEA mRNA的表达存在相关性,协同表达预示乳腺癌具有较强的侵袭转移能力,联合检验有望成为预测乳腺癌淋巴结转移和浸润能力的有价值的手段.     

CK-19对乳腺癌新辅助化疗疗效的评估价值

目的探讨细胞角蛋白19（cytokeratin19,CK-19）检测对乳腺癌患者新辅助化疗疗效评估的价值。方法采用实时定量逆转录聚合酶链反应（qRT—PCR）技术检测114例乳腺癌患者新辅助化疗前后外周血CK-19mRNA表达水平的变化。结果化疗前乳腺癌患者的CK-19mRNA阳性率为36．8％（42／114）,与患者的年龄、肿瘤大小,TNM分期、绝经状态、雌激素受体（ER）及孕激素受体（PR）的表达无关（P〉0．05）,而与腋窝淋巴结转移及临床分期有关（P〈0．01）。化疗后CK-19mRNA表达水平较化疗前明显降低（P〈0．01）。结论CK-19可以作为乳腺癌患者新辅助化疗疗效的评价指标之一。     

乳腺癌组织中SKA2mRNA和蛋白的表达水平及其与临床病理特征的相关性

目的探讨乳腺癌组织中纺锤体和动粒相关蛋白2（SKA2）mRNA和蛋白的表达水平,并分析其与临床病理特征的相关性。方法收集新鲜乳腺癌及癌旁冷冻组织标本40对,采用实时荧光定量PCR法检测SKA2mRNA表达水平;选取乳腺癌石蜡包埋标本160例,采用免疫组化染色法检测SKA2蛋白表达水平,并分析SKA2蛋白表达水平与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学分级、病理分型、分子分型及淋巴结转移状况等临床病理特征的相关性。结果乳腺癌组织中SK2mRNA表达水平明显高于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）。SKA2mRNA在乳腺癌中的高表达率为70.0%。SKA2蛋白表达与患者TNM分期和淋巴结是否转移均有关（均P＜0.01）,而与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、病理分型、分子分型均无关（均P＞0.05）。结论SKA2蛋白在乳腺癌中的高表达与TNM分期和淋巴结转移密切相关;SKA2可作为反映乳腺癌转移的一个重要指标。     

乳腺癌患者P53、Ki-67及HER-2与临床病理特征的关系

目的:分析乳腺癌患者的临床病理特征,探讨与其手术标本中P53、Ki-67及HER-2表达情况的关系,并阐明其临床意义.方法:应用免疫组化SP方法,观察103例乳腺癌患者手术标本中的P53、Ki-67及HER-2的表达情况,对其临床病理特征作回顾性分析.结果:P53、Ki-67及HER-2的阳性率分别为51.5％(53/103)、76.7％(79/103)、29.1％(30/103).P53与组织学分级、腋窝淋巴结转移情况、TNM分期以及ER关系密切(P＜0.05),与肿瘤大小、PR无关(P＞0.05).Ki-67与组织学分级、腋窝淋巴结转移情况、肿瘤大小、TNM分期以及ER关系密切(P＜0.05),与PR无关(P＞0.05).HER-2与组织学分级、腋窝淋巴结转移情况以及ER关系密切,其差异有统计学意义(P＜0.05),与肿瘤大小、TNM分期及PR无关(P＞0.05).结论:P53、Ki-67及HER-2在乳腺癌组织中的表达情况对判断乳腺癌的恶性程度、肿瘤细胞的增殖情况及预后有重要的指导意义.     

肿瘤相关糖抗原sTn在乳腺肿瘤组织的表达

目的：研究乳腺肿瘤病理标本中肿瘤相关糖抗原sTn的表达及乳腺癌组织中sTn表达与肿瘤大小、患者年龄、绝经、腋窝淋巴结转移、临床分期、病理分级和雌激素受体的关系。方法：应用单克隆抗体TKH-2（McAb TKH-2）用免疫组化方法检测sTn在46例乳腺癌、4例乳腺腺瘤和2例男性乳腺增生中的表达。应用链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组化染色法（S-P法）检测46例乳腺癌雌激素受体（ER）水平。结果：乳腺腺瘤和男性乳腺增生患者sTn表达均呈阴性。46例乳腺癌患者中,28例sTn表达阳性（60.9%）。乳腺癌患者中sTn表达阳性频数有腋窝淋巴结转移者高于无腋窝淋巴结转移者（P<0.05 ）,临床分期较晚患者高于临床分期较早患者（P<0.05 ）,雌激素受体阳性者高于雌激素受体阴性者（P<0.05）。在病理分级、年龄、是否绝经、肿瘤直径大小患者中的sTn表达阳性频数分布差异无显著性（P>0.05 ）。46例乳腺癌患者中,25例雌激素受体阳性（54.3%）。结论：乳腺癌中sTn表达阳性患者易发生在腋窝淋巴结转移、临床分期较晚且雌激素受体阳性率升高患者,sTn可以作为判定乳腺癌预后的指标,sTn和雌激素受体联合检测对判断乳腺癌预后意义更大。     

CK19和CEA mRNA表达与乳腺癌外周血微转移的相关性研究

目的 检测乳腺癌患者外周血中细胞角蛋白19(CK19)和癌胚抗原(CEA)mRNA的表达,探讨其表达是否可作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标.方法 采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测45例术前乳腺癌患者及30例乳腺良性病变患者外周血中CK19和CEA mRNA的表达情况.结果 CK19和CEA mRNA在乳腺癌患者血清中阳性率分别为62.2%和53.3%,在30例乳腺良性患者血清中CK19 mRNA阳性率为3.3%,无CEA mRNA表达.乳腺癌患者和良性肿瘤患者血清中CK19、CEA mRNA表达阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.01).CK19和CEA mRNA阳性率与临床分期、淋巴结转移均有关,二者表达呈正相关(P＜0.01).结论 乳腺癌患者外周血中CK19和CEA mRNA表达与临床分期密切相关,提示两项指标有望预测乳腺癌外周血微转移和判断预后.     

环氧化酶-2在乳腺癌中的表达及其意义

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)在乳腺癌中的表达及其意义.方法 采用免疫组化法(SP法)检测45份乳腺癌组织中COX-2蛋白表达情况,分析其与患者年龄,肿瘤大小,雌、孕激素受体状况,临床分期,腋窝淋巴结转移的关系.结果 在45份乳腺癌组织中,COX-2蛋白表达阳性率为84.4%(38/45),在Ⅲ+Ⅳ期乳腺癌中表达阳性率明显高于Ⅰ+Ⅱ期,分别为93.3%、83.3%(P＜0.05) ;在腋窝淋巴结阳性组COX-2表达阳性率高于腋窝淋巴结阴性组,分别为92.9%、82.2%(P＜0.05).COX-2阳性表达与患者年龄,肿瘤大小,雌、孕激素受体状况等无明显相关性(P＞0.05).结论 乳腺癌组织中COX-2表达与肿瘤临床分期、腋窝淋巴结转移呈明显相关关系.     

乳腺癌患者外周血CK19基因表达的检测及临床价值分析

目的探索外周血CK19基因表达的检测及在乳腺癌诊断中的应用价值。方法应用逆转录结合荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乳腺癌MDA-MB453细胞株血液标本模型和280例临床标本的CK19表达,同时检测三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)表达作为PCR方法的监控指标。结果逆转录结合FQ-PCR检测MDA-MB453细胞株血液标本模型的灵敏度为107个血细胞中含1个乳腺癌细胞的水平。280例外周血临床标本的CK19表达,乳腺癌组(38/120)与非乳腺癌组(20/80)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌组(38/120)与正常对照组(2/80)比较,差异有统计学意义(P<0.01);乳腺癌淋巴结转移组(21/53)与未见淋巴结转移组(17/67)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌术后2年以上者,复发组(3/9)与未复发组(6/31)比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。GAPDH表达均阳性。结论CK19是上皮细胞性癌细胞的较特异指标,诊断乳腺癌的特异性不强,但可用作病理学检查的补充,或结合其他特异性指标共同诊断乳腺癌微转移和复发,具有一定的价值。     

基底细胞样乳腺癌患者乳腺癌和癌旁正常乳腺组织中MTDH与MMP-9蛋白表达的相关性

目的: 检测基底细胞样乳腺癌(BLBC)患者乳腺癌组织及配对癌旁正常乳腺组织中异黏蛋白基因(MTDH)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,探讨二者之间的关系。方法: 采用免疫组织化学SP法检测60例BLBC患者癌组织及配对癌旁正常乳腺组织中MTDH和MMP-9蛋白的表达情况;Spearman相关分析法分析二者阳性表达率的相关性。结果: BLBC组织中MTDH和MMP-9阳性表达率均明显高于癌旁配对正常乳腺组织中MTDH和MMP-9的阳性表达率(P<0.05),且其表达与BLBC患者的淋巴结转移、临床分期有关联(P<0.05);有淋巴结转移者癌组织中MTDH和MMP-9阳性表达率高于无淋巴结转移者(χ²=6.89,P<0.05;χ²=15.22,P<0.01);Ⅲ+Ⅳ期BLBC患者癌组织中MTDH和MMP-9蛋白阳性表达率高于Ⅰ+Ⅱ期者(χ²=6.431,P<0.05;χ²=8.014,P<0.05)。BLBC患者癌组织中MTDH和MMP-9的表达呈正相关关系(r=0.531,P<0.01)。结论: BLBC患者癌组织中MTDH与MMP-9蛋白表达有相关性,二者在BLBC形成和进展过程中可能起重要作用。     

乳腺癌患者外周血中角蛋白19 mRNA,乳腺小粘蛋白mRNA和泌乳素诱导蛋白mRNA的检测及其临床意义

目的:研究乳腺癌患者外周血中角蛋白(CK)19mRNA,乳腺小粘蛋白(SBEM)mRNA和泌乳素诱导蛋白(PIP)mRNA的表达,并探讨三者在微转移检测中的意义。方法:用RT-PCR检测乳腺癌患者50例、结直肠癌20例、乳腺良性肿瘤21例、健康者20例外周血中的CK19mRNA、SBEM mRNA、PIP mRNA。结果:CK19mRNA在乳腺癌组的阳性率(36.0%)明显高于乳腺良性肿瘤组(0.0%,P<0.05)与健康者(0.0%,P<0.05)。SBEM mRNA、PIP mRNA在乳腺癌组的阳性率(28.0%、18.0%)明显高于其它3组(0.0%,P<0.05)。联合检测3个基因,可将阳性率提高到62.0%。结论:乳腺癌患者外周血中的SBEM mRNA、PIP mRNA均可能作为微转移标志物;而CK19mRNA作为乳腺癌微转移标志物的特异性尚待探讨;联合检测三者可提高乳腺癌外周血微转移的检出率。     

巢式RT-PCR检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的临床价值

目的:联合采用细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及乳腺上皮黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)指标,探讨通过巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)的临床价值?方法:采用MCF-7 RNA与健康志愿者外周血单核细胞(peripheral mononuclear cell,PMNC)RNA进行梯度混合后的反转录产物,检测优化后巢式RT-PCR体系的敏感性,再选择10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血检测其特异性后,对56例乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA及SBEM mRNA表达情况进行检测? 结果:优化后的检测体系能够在3 ml外周血PMNCs中检测到1个MCF-7细胞,10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血中未检测到CK19 mRNA与SBEM mRNA的表达;两者的表达与原发肿瘤大小,腋窝淋巴结状况及TNM分期相关(P < 0.05),而与原发肿瘤病理类型,激素受体以及C-erbB-2的表达无明显相关性(P > 0.05)? 结论:经过优化的巢式RT-PCR体系联合检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA及SBEM mRNA的表达敏感性和特异性较高,能用于检测外周血CTC,对进一步精确评估预后及指导治疗可能有较高的临床价值?     

CLINICOPATHOLOGICAL SIGNIFICANCE OF PTEN AND CASPASE-3 EXPRESSIONS IN BREAST CANCER

Objective To investigate the expressions of PTEN and Caspase-3 proteins in human breast carcinoma, and to evaluate their clinicopathological implications during the tumorigenesis and progression of breast cancer. Methods The expressions of PTEN and Caspase-3 proteins in 95 cases of breast cancer and 15 cases of benign breast diseases were investigated immunohistochemically. Correlations between the expression of PTEN protein, Caspase-3 protein, and clinicopathological features of breast cancers were analyzed. Results The loss expression rate of PTEN protein in tumor tissues was significantly higher than that in benign breast diseases （33.7% vs. 0, P 〈 0.01 ）. Analysis of the clinicopathological features showed that PTEN expression level was negatively correlated with TNM stage, histological grade, axillary lymph node status, recurrence, and metas- tasis （ P 〈 0. 05 ）. The positive expression level of Caspase-3 was negatively correlated with TNM stage （ P 〈 0. 01 ）, but not related with histological grade, axillary lymph node status, recurrence, or metastasis （ P 〉 0.05 ）. In addition, the expression of PTEN protein had significantly positive correlation with the expression of Caspase-3 protein in breast cancer （P 〈 0. 01 ）. Conclusion The combination detection of PTEN and Caspase-3 may serve as an important index to estimate the pathobiological behavior and prognosis of breast cancer.     

子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA的表达及其临床意义

目的:检测子宫内膜癌患者外周血细胞中细胞角蛋白 20(CK20)基因 mRNA表达,探讨其表达对子宫内膜癌微转移的诊断价值。方法: 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测44例子宫内膜癌患者、34例子宫良性病变患者和 32名健康志愿者外周血细胞中CK20 mRNA表达水平,分析其表达与子宫内膜癌患者病理学参数之间的关系。结果: 44例子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA检测出阳性12例,阳性率为27.3％;子宫良性病变患者及健康女性外周血中均未见其表达,子宫内膜癌患者CK20 mRNA阳性表达率高于子宫良性病变患者及健康女性（χ2=20.204,P<0.05）;子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA 表达水平与临床分期（χ2=16.712,P<0.05）、淋巴结转移（χ2=6.381,P<0.05）和浸润深度（χ2=6.381,P<0.05）存在关联性,而与病理分级（χ2= 0.229,P>0.05）及是否绝经（χ2=0.004,P>0.05）无关联。结论:相对于子宫良性病变患者及健康女性,CK20 mRNA在子宫内膜癌患者中阳性表达率明显升高,且表达水平与临床分期、是否有淋巴结转移及浸润深度有关;CK20的特异性强,可作为判断子宫内膜癌血源性微转移的参考指标。     

凋亡抑制蛋白survivin在乳腺癌中的表达及意义

目的：检测凋亡抑制蛋白survivin在人乳腺癌中的表达,进一步探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。 方法：采用免疫组织化学和蛋白印迹技术,研究54例乳腺癌组织(其中有腋窝淋巴结转移的33例)及15例乳腺纤维腺瘤组织中survivin蛋白的表达。 结果：54例乳腺癌组织中survivin蛋白的阳性表达率为72.5%,明显高于癌旁正常组织及乳腺纤腺瘤组织,（P<0.05）;有腋窝淋巴结转移组的乳腺癌中其表达率明显高于无腋窝淋巴结转移组（P<0.05）;乳腺癌组织中survivin蛋白的表达与组织学分级、临床病理分期及淋巴结转移密切相关（P<0.05）。在癌旁组织及乳腺纤维腺瘤中未检测到survivin蛋白。 结论：乳腺癌组织中survivin表达上调,并参与乳腺癌的发生发展,是诊断乳腺癌和判断其预后的重要参考指标。     

腹腔镜胃癌根治术对肿瘤细胞血循环微转移影响的初步研究

目的通过检测腹腔镜胃癌根治术患者与开腹胃癌根治术患者的外周静脉血液微转移发生的情况,探讨腹腔镜胃癌根治术对胃癌细胞血循环微转移的影响。方法本研究采用FQ-PCR技术,以细胞角蛋白(CK19)mRNA为标志物,以51例胃癌患者为研究对象,分为腹腔镜组(14例)及开腹组(37例),分别行腹腔镜胃癌根治术及开腹胃癌根治术;在手术前后采取静脉血,提取RNA,检测其血液微转移发生情况。结果两组患者手术前后CK19差异均无统计学意义(均>0.05)。术前Ⅲ期CK19mRNA表达阳性率为53.85%,Ⅰ期+Ⅱ期阳性率为20.00%,差异有统计学意义(=0.0197);术后Ⅲ期CK19mRNA表达阳性率为60.71%,Ⅰ期+Ⅱ期阳性率为30.00%,差异有统计学意义(=0.0173)。结论腹腔镜胃癌根治术并不增加静脉血CK19mRNA的阳性率,不增加术后肿瘤血循微转移的危险性。     

乳腺癌的超声与X线钼靶对比及联合应用

目的:评价超声与X线钼靶检查及两者联合应用对乳腺癌的诊断价值.方法:分析159例(191个)乳腺肿块患者的术前超声与X线钼靶检查表现,观察其中47例乳腺癌伴患侧腋窝淋巴结转移情况,将2种检查方法及两者联合结果分别与手术病理结果进行对照分析,重点分析超声与X线钼靶及两者联合应用的误诊、漏诊病例.结果:超声和X线钼靶摄片检查诊断乳腺癌灵敏度、特异度、准确性差异无统计学意义(P＞0.05);两者联合应用的灵敏度与超声、X线钼靶比较有明显差异(P＜0.01),特异度无明显差异(P＞0.05),与单独X线钼靶比较准确性差异有统计学意义(P＜0.05);超声与X线钼靶比较诊断乳腺癌患侧腋窝淋巴结转移准确性差异有统计学意义(P＜0.01).结论:超声与X线钼靶摄片检查联合应用能提高乳腺癌的灵敏度和诊断准确性,降低乳腺癌的漏诊率,超声检出腋窝淋巴结转移的能力优于X线钼靶.