CDKN2基因的变异在人前列腺增生症中发病机制的研究

目的：研究抑癌基因ＣＤＫＮ２的突变、缺失在人前列腺增生症（ＢＰＨ）病因中的作用机制。方法：用ＰＣＲ－银染ＳＳＣＰ技术分析了２０例正常前列腺组织和４１例ＢＰＨ中ＣＤＫＮ２基因纯合性缺失和突变的情况。结果：１３例ＢＰＨ有ＣＤＫＮ２基因缺失，总缺的率为３１．６％；正常前列腺组织中有１例出现ＣＤＫＮ２基因缺失，缺失率为５％（Ｐ〈０．０５）；无ＣＤＫＮ２基因的突变。结论：ＣＤＮＫ２基因的与ＢＰＨ的发病机制有     

MTS1基因在人BPH中突变缺失的初步研究

目的探讨ＭＴＳ１基因在人前列腺增生症（ＢＰＨ）发病机制中的作用和变异情况。方法用ＰＣＲ银染ＳＳＣＰ技术检测１８例正常前列腺和３８例ＢＰＨ中抑癌基因ＭＴＳ１各外显子的纯合性缺失和突变。结果１２例ＢＰＨ出现ＭＴＳ１基因缺失,总缺失率为３２％;正常前列腺组织中有１例出现ＭＴＳ１基因缺失,缺失率为６％,两者之间差异有显著性（Ｐ＜００５）;无１例有ＭＴＳ１基因的突变。结论ＢＰＨ的发病机制可能与ＭＴＳ１的纯合性缺失有关,未见有突变发生。应对ＭＴＳ１基因在人ＢＰＨ中的作用作更深入的研究     

一氧化氮与前列腺增生膀胱颈梗阻关系的研究

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）与前列腺增生（ＢＰＨ）膀胱颈梗阻（ＢＰＯ）发病的关系。方法：应用双波长分光光度法,组织化学法检测２０例存在ＢＰＯ及１０例正常前列腺组织中的ＮＯ合酶（ＮＯＳ）活性及ＮＯＳ神经。结果：ＢＰＨ组织中的ＮＯＳ活性,ＮＯＳ神经的长度密度均较正常前列腺组织明显降低;ＮＯＳ活性,ＮＯＳ神经的Ｌｖ与ＢＰＨ患者的症状评分及反映ＢＰＯ客观指标的尿动力学参数相关。     

转移抑制基因Kai1在前列腺癌中的表达

目的了解转移抑制基因Ｋａｉ１蛋白在前列腺癌（ＰＣａ）中的表达。方法采用免疫组化ＬＳＡＢ法分别测定５例正常前列腺、１０例前列腺增生症（ＢＰＨ）和３４例ＰＣａ（均为腺癌,临床Ｃ期或Ｄ期）新鲜前列腺组织中Ｋａｉ１蛋白的表达。结果Ｋａｉ１蛋白分布在腺上皮细胞膜的细胞与细胞连接部,正常前列腺和ＢＰＨ的Ｋａｉ１蛋白染色连续均匀一致,而在ＰＣａ则染色分布不连续,并且染色强度较ＢＰＨ明显降低,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。癌细胞Ｋａｉ１蛋白染色强度与病理分级呈负相关（Ｐ＜０．０５）,与临床分期无相关（Ｐ＞０．０５）。结论Ｋａｉ１蛋白表达下降可能预示ＰＣａ转移,成为临床判断ＰＣａ预后的分子指标。     

原发性肝癌中CDKN2/P16基因突变的研究

目的 阐明ＣＤＫＮ２／Ｐ１６基因突变与原发性肝癌发生的关系。方法 采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＰＣＲ产物直接银染测序技术，对３０例原发性肝癌组织中ＣＤＫＮ２／Ｐ１６基因第二外显子进行突变检测。结果 检出２例（２／３０）ＣＤＫＮ２基因突变，均是位于第１２４位密码子的错义突变。结论 ＣＤＫＮ２基因的突变虽不频发，但在原发性肝癌的发生中起了一定作用。     

良性前列腺增生组织中一氧化氮合酶活性的变化

为探讨一氧化氮（ＮＯ）与良性前列腺增生（ＢＰＨ）发病的关系，应用双波长分光光度法测定１５例正常前列腺及２５例ＢＰＨ组织中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性，并比较不同年龄组的正常前列腺及ＢＰＨ组织中ＮＯＳ活性水平。结果：ＢＰＨ组织中ＮＯＳ活性（９６．７７±２８．０２ｐｍｏｌ．ｍｇ－１．ｍｉｎ－１）明显低于正常前列腺者（２９０．９９±１３０．６８ｐｍｏｌ．ｍｇ－１．ｍｉｎ－１），Ｐ＜０．００１。不同年龄组的正常前列腺组织中ＮＯＳ活性水平与年龄无相关关系。而在５０岁、６０岁和≥７０岁三个年龄组之间的ＢＰＨ组织中ＮＯＳ活性水平有显著性差异，Ｐ＜０．０１，ＢＰＨ组织中ＮＯＳ活性水平随年龄增大呈下降趋势。结果提示前列腺组织中ＮＯＳ活性水平与ＢＰＨ有相关关系，ＮＯＳ活性降低可能是ＢＰＨ的年龄依赖性发病原因之一。     

细胞凋亡和性激素环境与前列腺增生的关系

目的探讨雄雌激素、细胞凋亡在前列腺增长和前列腺增生（ＢＰＨ）发病中的作用。方法应用ＤＮＡ末端原位标记的方法对正常前列腺移行带（１０例）和周围带（１０例）以及ＢＰＨ组织（２０例）标本进行了细胞凋亡率的研究,并应用放射免疫学技术检测了相应组织的双氢睾酮（ＤＨＴ）和雌二醇（Ｅ２）含量。结果正常前列腺移行带,周围带ＤＨＴ和Ｅ２的差异无显著性,ＢＰＨ组织中的Ｅ２含量（平均６．６３ｎｇ／ｇ蛋白）虽高于正常前列腺的移行带含量３．１５ｎｇ／ｇ蛋白,但差异无显著性（Ｐ＝０．１）。正常前列腺周围带细胞凋亡率（４１．２±３．９）％显著高于移行带（２９．７±４．０）％,Ｐ＜０．０５,后者又非常显著地高于ＢＰＨ组织（３９±１．１）％,Ｐ＜０．００１。正常与增生前列腺组织内的ＤＨＴ及Ｅ２含量与细胞凋亡率之间无明显相关性。正常前列腺组织中,前列腺增生的起始部位移行带的细胞凋亡率已明显下降,随着年龄的增长,凋亡率进一步下降,导致ＢＰＨ。细胞凋亡率与其组织的ＤＨＴ、Ｅ２无明显相关性。结论前列腺导管系统的远、近端（周围带、移行带）上皮细胞结构形态不同,其周围的间质亦有差异,因此即使在接受相同量的雄、雌激素情况下,这些细胞的反应并不相同。     

前列腺增生组织中NOS神经的定量分析及意义

为探讨一氧化氮合酶（ＮＯＳ）与前列腺增生（ＢＰＨ）及膀胱出口梗阻（ＢＯＯ）发病的关系，应用ＮＡＤＰＨ组化染色结合形态学定量分析方法检测ＢＰＨ及正常前列腺组织中ＮＯＳ神经，同时分析ＮＯＳ神经与ＢＰＨ临床表现的关系。结果：ＢＰＨ及正常前列腺组织中均存在ＮＯＳ神经，它们主要分布于间质平滑肌细胞周围，ＢＰＨ组织中的ＮＯＳ神经明显减少（Ｐ＜０．０１），前列腺组织中ＮＯＳ神经的长度密度与ＢＰＨ的临床表现相关。结果认为：ＢＰＨ及ＢＯＯ的发病与前列腺组织中的ＮＯＳ神经减少有关     

前列腺癌MDR—PGP170与突变P53表达

应用单克隆抗体（ＭＤＲ－Ｃ２１９，ＰＡｂ－ＤＯ－１）免疫组化技术对３８例石蜡包埋的前列腺癌与１５例良性前列腺增生（ＢＰＨ）组织切片中的ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３的表达进行了比较研究。结果显示：在３８例前列腺癌切片中ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３蛋白的阳性表达率７１．０％和６０．５％，１５例ＢＰＨ组织中仅３例（２０．０％）显示ＭＤＲ－ＰＧＰ阳性染色，突变Ｐ５３在所有ＢＰＨ中未见阳性染色。在高分化，中等分     

前列腺癌MDR－PGP170与突变P53表达

应用单克隆抗体（ＭＤＲ－Ｃ２１９、ＰＡｂ－ＤＯ－１）免疫组化技术对３８例石蜡包埋的前列腺癌与１５例良性前列腺增生（ＢＰＨ）组织切片中的ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３的表达进行了比较研究。结果显示：在３８例前列腺癌切片中ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３蛋白的阳性表达率为７１．０％和６０．５％，１５例ＢＰＨ组织中仅３例（２０．０％）显示ＭＤＲ－ＰＧＰ阳性染色，突变Ｐ５３在所有ＢＰＨ中未见阳性染色。在高分化、中等分化和低分化前列腺癌中ＭＤＲ－ＰＧＰ的阳性表达率为５３．８％、７８．５％和８１．１％。突变Ｐ５３的阳性表达率为３０．８％、７１．４％和７２．７％。结果提示：（１）ＭＤＲ－ＰＧＰ的过度表达是前列腺癌产生抗药的主要机制；（２）ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３的过度表达可能是前列腺癌细胞适存、转化、增殖与进展的重要方式；（３）突变Ｐ５３的过度表达对ＭＤＲ－１基因可能具有调节与增强效应。     

进展期贲门癌病人脾脏免疫状态的研究

为了探讨进展期贲门癌病人脾脏的免疫状态，分别检测了２０例病人的外周血、脾静脉血与脾脏的ＮＫ细胞活性、Ｔ淋巴细胞亚群（ＣＤ）。结果示（１）与正常人相比，进展期贲门癌病人的外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）、脾静脉血淋巴细胞（ＳＶＬ）及脾细胞（ＳＣ）的ＮＫ细胞活性、ＣＤ、ＣＤ细胞抑低，ＣＤ细胞增多，致ＣＤ／ＣＤ细胞比值明显下降；（２）从进展期贲门癌病人ＰＢＬ、ＳＶＬ与ＳＣ三者之间比较结果可见，后二者的ＮＫ细胞活性、ＣＤ／ＣＤ细胞比值均明显低于ＰＢＬ。我们认为，进展期贲门癌能削弱病人的整体免疫功能；随着肿瘤的进展，脾脏逐步转向负性免疫状态。     

良性前列腺增生组织NO合酶表达的免疫组化研究

为探讨一氧化氮合酶（ＮＯＳ）在良性前列腺增生（ＢＰＨ）组织中的表达及其意义，采用免疫组化法对２４例ＢＰＨ组织中ＮＯＳ表达进行检测。结果显示：ＮＯＳ在ＢＰＨ组织神经纤维和神经节均有表达，血管内皮细胞和腺体上皮细胞亦可见ＮＯＳ表达。２４例ＢＰＨ中，外周区强阳性１７例，弱阳性７例；移行区强阳性１０例，弱阳性１４例，两者比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。提示ＢＰＨ组织中存在一氧化氮（ＮＯ）神经传导通路，ＮＯ可影响前列腺平滑肌张力。     

前列腺良恶性组织中Fas及其配体FasL表达的意义

应用免疫组化方法检测正常、增生和癌变前列腺组织中Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达及应用ＴＵＮＥＬ方法检测细胞凋亡,探讨其意义。材料与方法　６２例前列腺增生（ＢＰＨ）,平均６４岁。３３例前列腺癌（ＰＣ）,平均６６岁。ＰＣ按Ｍｏｓｔｏｆｉ分级：高分化１０例、中分化１４例、低分化９例。按ＪｅｗｅｔｔＷｈｉｔｍｏｒｅＰｒｏｕｔ分期：Ａ期１５例、Ｂ期１４例、Ｃ期和Ｄ期各２例。１８例正常前列腺（ＮＰ）作为对照。石蜡包埋,切片厚４μｍ。免疫组化采用ＳＰ方法,Ｆａｓ（１∶１００）和ＦａｓＬ（１∶５０,抗原修复）均为兔…     

糖尿病患者骨代谢研究

本文测定７４例糖尿病住院患者的血Ｃａ、Ｐ、ＡＫＰ、ＢＧＰ、２４小时尿ＨＯＰ及腰椎２～４正位骨密度（ＢＭＤ）。结果（１）糖尿病患者血Ｃａ、Ｐ、ＡＫＰ与正常对照无显著差异，并且胰岛素依赖型糖尿病组（ＩＤＤＭ）与非胰岛素依赖型糖尿病组（ＮＩＤＤＭ）之间也无显著差异。（２）血ＢＧＰ变化，在ＩＤＤＭ组，２０～３９岁的女性和４０～５９岁的男性ＢＧＰ低于正常对照；ＮＩＤＤＭ组６０岁以上的女性患者ＢＧＰ也明显低于正常对照，而在２０～３９岁的男女患者ＢＧＰ却高于正常对照。（３）糖尿病患者尿ＨＯＰ高于正常对照，并且ＩＤＤＭ组与ＮＩＤＤＭ组比较也有显著差异。（４）骨质疏松发生率ＩＤＤＭ组高于ＮＩＤＤＭ组，而骨量减低发生率ＮＩＤＤＭ组高于ＩＤＤＭ组。初步探讨了糖尿病性骨质疏松的发病机制。     

体外循环手术前后病人血清sIL-2R水平和T淋巴细胞亚群、NK细胞的变化及临床意义

目的：通过检测心脏体外循环（ＣＰＢ）手术前后病人血清中可溶性白介素２－受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、Ｔ细胞亚群、自然杀伤细胞（ＮＫ），观察分析心脏ＣＰＢ手术病人细胞免疫的影响及其临床意义。方法：选择２４例风心病择期换瓣病人，术前、ＣＰＢ１０分钟、ＣＰＢ２小时、术后第１天、３天、５天检测血清ｓＩＬ－２Ｒ水平、Ｔ细胞亚群及ＮＫ细胞活性。术后第１天血清ｓＩＬ－２Ｒ水平升高，ＣＯ４（辅助细胞）活性明显降低，ＣＤ４／ＣＤ８（辅助细胞／抑制细胞）比值下降，ＮＫ活性降低；并且ｓＩＬ－２Ｒ与ＣＤ４、ＮＫ活性呈负相关。结论：低温心脏ＣＰＢ手术对病人免疫机能有不良影响，临床应采取相应措施，改善术后病人的免疫机能。     

前列腺增生和前列腺癌组织细胞调亡及Bc1—2,Bax基因表达？…

目的 探讨良性前列腺增生（ＢＰＨ）和前列腺癌（Ｐｃａ）组织细胞增殖和调亡及Ｂｃ１－２、Ｂａｘ蛋白表达的临床意义。方法 用核酸末端原位标记方法检测ＢＰＨ和Ｐｃａ标本各２３例及５例正常前列腺（ＮＰ）标本,观察细胞调亡情况。用ＡＢＣ免疫组化法研究三种组织中ＰＣＮＡ、Ｂｃ１－２、Ｂａｘ表达及特征。结果 ＢＰＨ和Ｐｃａ的增殖细胞指数（ＰＩ）及调亡细胞指数（ＡＩ）较ＮＰ明显增高（Ｐ〈０．０１）,但ＡＩ／ＰＩ却     

色素沉着息肉综合征患者肿瘤LKB1基因杂合性缺失及其对肿瘤易感性的研究

目的 研究色素沉着息肉综合征（Ｐｅｕｔｚ－Ｊｅｇｈｅｒｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＰＪＳ）患者肿瘤的ＬＫＢ１基因杂合性缺失，探讨其肿瘤易感性机制。方法 以微分离技术分离６例与ＬＫＢ１连锁的色素沉着息肉综合征患者１４个肿瘤和相应正常组织的石蜡切片，提取ＤＮＡ，选择与ＬＫＢ１紧密连锁的Ｄ１９Ｓ８８６和Ｄ１９Ｓ５６５微卫星标志，经聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增，以测序仪检测和分析其杂合性缺失。结果 ５７％的易感肿     

前列腺癌中P53基因突变及蛋白表达的研究

运用免疫组织化学ＬＳＡＢ法（链菌素－生物素标记法），结合ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（ＰＣＲ限制性片段长度多态）、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（ＰＣＲ单链结构多态）技术，探讨了３４例前列腺癌穿刺标本中Ｐ５３蛋白表达及基因（５～８外显子）突变情况，发现３４例前列腺场中７例有Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率为２０．６％。２０例前列腺良性增生及１０例正常前列腺组织中Ｐ５３蛋白表达均为阴性（Ｐ＜０．０５），在前列腺癌高、中分化组及前列腺癌低、未分化组Ｐ５３蛋白表达阳性率分别为５．３％及４０％（Ｐ＜０．０５），在ＰＣＲ－ＲＦＬＰ中提示１例前列腺癌中有Ｐ５３突变，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ中提示３例Ｐ５３基因突变（５～６外显子），一例无Ｐ５３基因扩增产物，高度怀疑为Ｐ５３基因的缺失，３４例前列腺癌中，ＣＴ及骨扫描提示有转移者为１０例，其中５例为Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率５０％，与非转移组阳性率比较Ｐ＜０．０５。本研究表明Ｐ５３基因突变参与前列腺癌的发生发展过程，与其转移的生物学行为关系密切。分析了以上不同方法在检测Ｐ５３基因突变中的价值。     

细针抽吸活组织检查与多聚合酶链反应：———顺序特异性引物？…

目的：探索细针抽吸活组织检查（ＦＮＡＢ）和ＰＣＲ－ＳＳＰ协同检测对胰腺良恶性肿块鉴别及对胰腺部的诊断价值。方法：对３５例胰腺癌、１２例正常胰腺组织、２６例胰腺良性疾病、８例壶腹癌及７例胆管癌行ＦＮＡＢ，并对ＦＮＡＢ吸出物行ＰＣＲ－ＳＳＰ检测Ｋ－ｒａｓ基因有无突变。结果：ＦＮＡＢ对胰腺癌的确诊率为５７．１％（２０／３５），对壶腹癌及胆管癌的确诊率分别为４／８（５０％）和４／７（５７．１％）；ＰＣＲ－     

大肠癌患者粪便中C-erbB-2扩增和p53突变的检测及临床意义

目的　建立大肠癌患者粪便 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变的检测方法,探讨大肠癌的基因诊断的临床意义。 方法　以差异聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 、 Ｐ Ｃ Ｒ单链构象多态性分析（ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ） 银染技术,分别检测大肠癌患者粪便 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变。 结果　１４ 例中查出 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增７ 例（５０ ％ ） ,ｐ５３ 突变８ 例（５７ ％ ） ,二基因联合检出１１ 例（７９ ％ ） 。２ 例粪便潜血试验（ Ｆ Ｏ Ｂ Ｔ） 阴性中,１ 例 Ｃｅｒｂ Ｂ２扩增及ｐ５３ 突变均阳性,另１ 例ｐ５３ 突变阳性。 结论　联合多基因检测能对大肠癌的基因诊断提供更多的帮助,粪便 Ｄ Ｎ Ａ 标本的 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变分析可为筛查尚无出血或 Ｆ Ｏ Ｂ Ｔ 假阴性的大肠癌及大肠癌高危个体的一种新的有效手段。