异紫堇碱对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用

目的 探讨异紫堇碱对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法 将A549细胞分为对照组，异紫堇碱低、中、高剂量组，miR-NC组，miR-1296-5p组，anti-miR-NC组，anti-miR-1296-5p组，异紫堇碱+anti-miR-NC组，异紫堇碱+anti-miR-1296-5p组。MTT法检测细胞增殖抑制率，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，RT-qPCR法检测miR-1296-5p和花斑抑制因子同源物1(SUV39H1)mRNA表达，Western blot法检测相关蛋白表达，双荧光素酶报告实验验证miR-1296-5p和SUV39H1的靶向关系。结果 不同剂量异紫堇碱处理A549细胞后，细胞增殖抑制率升高，迁移、侵袭细胞数降低，miR-1296-5p表达升高，SUV39H1 mRNA和蛋白表达降低，并呈剂量依赖性(P<0.05)。miR-1296-5p靶向调控SUV39H1,过表达miR-1296-5p可抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论 异紫堇碱可能通过调控miR-1296-5p/SUV39H1抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

五味子乙素调控miR-22-3p/RUNX3分子轴对重症急性胰腺炎腺泡细胞损伤影响的研究

目的：探讨五味子乙素（Sch B） 调控miR-22-3p/runt 相关转录因子3（RUNX3） 分子轴对重症急性胰腺炎（SAP）腺泡细胞损伤的影响。方法：将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J 分为Con 组、SAP 组、SAP+Sch-L 组、SAP+Sch-M 组、SAP+Sch-H组、SAP+anti-miR-NC 组、SAP+anti-miR-22-3p 组、SAP+Sch+miR-NC 组、SAP+Sch+miR-22-3p 组。除Con 组外，其余各组采用10 nmol/L 雨蛙素联合10 mg/L 脂多糖刺激AR42J 细胞24 h 构建SAP 细胞模型。SAP+Sch-L 组、SAP+Sch-M 组、SAP+Sch-H 组采用浓度为10、20、40 μmol/L 的Sch B 处理细胞；SAP+anti-miR-NC 组、SAP+anti-miR-22-3p 组为分别转染antimiR-NC、anti-miR-22-3p；SAP+Sch+miR-NC 组、SAP+Sch+miR-22-3p 组为分别转染miR-NC、miR-22-3p mimics 并用40 μmol/L的Sch B 干预。酶联免疫吸附法测定细胞培养液上清中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α） 表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡率；实时荧光定量PCR 检测miR-22-3p 和RUNX3 mRNA 表达水平；BCA 法检测RUNX3、B 细胞淋巴瘤-2 基因（Bcl-2）、Bcl-2 相关X 蛋白（Bax）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved-caspase3） 表达水平；双荧光素酶报告基因实验检测miR-22-3p 与RUNX3 的靶向结合关系。结果：与Con 组比较，SAP 组AR42J 细胞IL-6、TNF-α、miR-22-3p、Bax、cleaved-caspase3 的表达及细胞凋亡率升高（P＜0.05），RUNX3、Bcl-2 的表达降低（P＜0.05）。与SAP 组比较，SAP+Sch-L组、SAP+Sch-M 组、SAP+Sch-H 组IL-L、TNF-α、miR-22-3P、Bcl-2 表达降低（P＜0.05），Bax、cleaved-caspase3、RUNX3 表达及细胞凋亡率升高（P＜0.05），且呈剂量依赖性（P＜0.05）。与SAP+anti-miR-NC 组比较，SAP+anti-miR-22-3p 组细胞IL-6、TNF-α、Bcl-2 的表达降低（P＜0.05），细胞凋亡率及Bax、cleaved-caspase3、RUNX3 的表达升高（P＜0.05）。与SAP+Sch+miR-NC 组比较，SAP+Sch+miR-22-3p 组细胞IL-6、TNF-α、Bcl-2 的表达升高（P＜0.05），细胞凋亡率及Bax、cleavedcaspase3、RUNX3 的表达降低（P＜0.05）。结论：Sch B 可通过下调miR-22-3p/RUNX3 分子轴减轻SAP 腺泡细胞损伤。     

核桃青皮提取物对CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 研究核桃青皮提取物对CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 将miR-564组、miR-NC组、anti-miR-564组(转染anti-miR-564后用核桃青皮提取物处理)、anti-miR-NC组(转染miR-NC后用核桃青皮提取物处理)用脂质体法转染至CNE-2细胞,部分组用核桃青皮提取物40μg/m...     

知母皂苷AⅢ调控miR-494对原发性皮肤黑色素瘤生物学行为的影响

目的:探讨知母皂苷AⅢ调控miR-494对原发性皮肤黑色素瘤增殖、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养人黑色素瘤A375细胞,分别用0、4、8、16 μmol/L的知母皂苷AⅢ处理A375细胞24 h。将miR-NC、miR-494转染至A375细胞,作为miR-NC、miR-494组; 将anti-miR-NC、anti-miR-494转染至A375细胞,再用知母皂苷AⅢ(16 μmol/L)干预,作为anti-miR-NC+16 μmol/L组、anti-miR-494+16 μmol/L组。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖情况; 蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达; Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况; 实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测细胞miR-494表达水平。结果:与对照组比较,8、16 μmol/L中、高剂量组的知母皂苷AⅢ明显下调组细胞A值、迁移数量和侵袭数量以及Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05)。与对照组比较,8 μmol/L中剂量组、16 μmol/L高剂量组的知母皂苷AⅢ明显上调细胞miR-494表达水平(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-494组细胞A值、迁移数量和侵袭数量以及Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低(P<0.05)。与anti-miR-NC+16 μmol/L组比较,anti-miR-494+16 μmol/L组细胞miR-494表达水平显著降低; 细胞A值、迁移数量和侵袭数量以及Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:知母皂苷AⅢ上调miR-494抑制原发性皮肤黑色素瘤增殖、迁移和侵袭。     

槐定碱上调miR-345-5p 对乳腺癌细胞BT549 增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨槐定碱对乳腺癌细胞BT549增殖、迁移、侵袭的影响和分子机制。方法:运用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验分别检测不同浓度(1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL)的槐定碱对乳腺癌细胞BT549增殖、迁移、侵袭的影响,筛选槐定碱最佳使用浓度。将细胞BT549分为对照(NC)组、槐定碱组、anti-miR-NC组、anti-miR-345-5p组、槐定碱+anti-miR-NC组、槐定碱+anti-miR-345-5p组。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-345-5p表达,检测细胞活力、迁移和侵袭能力变化。免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化的核转录因子(NF-κB) p65 (p-p65)和磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)表达。结果:不同浓度槐定碱干预后细胞BT549活力、迁移和侵袭细胞数均显著降低,选择4.0 mg/mL槐定碱浓度进行后续实验。与NC组比较,槐定碱组细胞中miR-345-5p表达显著升高,p-p65和p-IκBα表达降低(P<0.05)。与anti-miR-NC组比较,anti-miR-3...     

姜黄素调控Yes 相关蛋白1对子宫内膜癌Warburg 效应及生物学行为的影响

目的：观察姜黄素调控Yes 相关蛋白1（YAP1） 对子宫内膜癌糖酵解Warburg 效应及生物学行为 的影响。方法：将HEC-1B 细胞分为对照组、NC-YAP1 组、si-YAP1 组及低、中、高剂量组。对照组不做任 何处理,NC-YAP1 组转染NC-YAP1 质粒,si-YAP1 组转染si-YAP1 质粒,低、中、高剂量组细胞分别用 20、40、80 μmol/L 的姜黄素处理。试剂盒检测各组细胞葡萄糖消耗量及乳酸含量;CCK-8 法检测各组细胞增 殖能力;流式细胞术检测各组细胞周期与凋亡;划痕法检测各组细胞迁移能力;Transwell 法检测各组细胞侵 袭能力。蛋白质印迹（Western blot） 法检测YAP1、乳酸脱氢酶-A（LDH-A）、己糖激酶2（HK2）、丙酮酸激 酶2（PKM2） 蛋白表达。结果：与对照组比较,NC-YAP1 组YAP1 蛋白相对表达水平、乳酸含量及葡萄糖消 耗量、LDH-A、HK2、PKM2 蛋白水平、细胞增殖抑制率、G0/G1 期比例及S 期比例、细胞凋亡率、划痕愈合 率、细胞侵袭抑制率差异均无统计学意义（P＞0.05）,si-YAP1 组及低、中、高剂量组YAP1 蛋白相对表达水 平、葡萄糖消耗量及乳酸含量、LDH-A、HK2、PKM2 蛋白水平、S 期比例、划痕愈合率均降低（P＜0.05）, 细胞增殖抑制率、G0/G1 期比例、细胞凋亡率、细胞侵袭抑制率均升高（P＜0.05）。与NC-YAP1 组比较,si- YAP1 组及低、中、高剂量组细胞YAP1 蛋白相对表达水平、葡萄糖消耗量及乳酸含量、LDH-A、HK2、 PKM2 蛋白水平、S 期比例、划痕愈合率均降低（P＜0.05）,细胞增殖抑制率、G0/G1 期比例、细胞凋亡率细 胞侵袭抑制率均升高（P＜0.05）,且低、中、高剂量组上述指标均呈剂量依赖性（P＜0.05）。与si-YAP1 组比 较,低、中剂量组细胞中YAP1 蛋白相对表达水平均增加（P＜0.05）,而高剂量组差异无统计学意义（P＞ 0.05）;低剂量组葡萄糖消耗量及乳酸分泌量、LDH-A、HK2、PKM2 蛋白水平、S 期比例、划痕愈合率均增 加（P＜0.05）,细胞增殖抑制率、G0/G1 期比例、细胞凋亡率、细胞侵袭抑制率均降低（P＜0.05）,高剂量组 葡萄糖消耗量及乳酸分泌量、LDH-A、HK2、PKM2 蛋白水平、S 期比例、划痕愈合率均降低（P＜0.05）,细 胞增殖抑制率、G0/G1 期比例、细胞凋亡率、细胞侵袭抑制率增加（P＜0.05）,而中剂量组乳酸含量及葡萄糖 消耗量、LDH-A、HK2、PKM2 蛋白水平、细胞增殖抑制率、G0/G1 期比例及S 期比例、细胞凋亡率、划痕愈 合率、细胞侵袭抑制率差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：姜黄素可能通过抑制YAP1 表达抑制子宫内膜 癌细胞的Warburg 效应、增殖、迁移及侵袭等恶性行为。     

隐丹参酮调控Wnt/β-catenin 信号通路对胃癌细胞抑制作用的研究

目的：探究隐丹参酮调控Wnt/β-连环蛋白（β-catenin） 信号通路对胃癌细胞的抑制作用。方法：将人胃癌BGC-823 细胞株分为对照组，隐丹参酮低、中、高剂量组（以下简称低、中、高剂量组），高剂量+SKL2001 组，高剂量+XAV939 组。低、中、高剂量组在培养过程中加入20、40、80 μmol/L 的隐丹参酮；高剂量+SKL2001 组中加入80 μmol/L 隐丹参酮与20 μmol/L SKL2001；高剂量+XAV939 组中加入80 μmol/L 的隐丹参酮与1 μmol/L 的XAV939。采用MTT 法、Transwell 小室法、细胞划痕实验分别检测细胞的增殖能力及迁移侵袭能力。采用RT-PCR 与蛋白免疫印迹法检测细胞中蓬乱蛋白DSH 同源物2（Dvl2）、糖原合成酶激酶-3（GSK-3β）、β-catenin 和G1/S-特异性周期蛋白-D1（Cyclin D1） 表达水平。结果：与对照组比较，低、中、高剂量组处理24 h、48 h、72 h 后细胞增殖抑制率、GSK-3β 蛋白及mRNA 表达上升（P＜0.05），Dvl2、β-catenin、Cyclin D1 蛋白及mRNA 表达降低（P＜0.05），且呈剂量依赖性（P＜0.05）。细胞划痕48 h 后，低、中、高剂量组细胞迁移能力、过膜细胞数及划痕愈合率均降低（P＜0.05），且随着剂量增加而降低（P＜0.05）；与高剂量组比较，高剂量+SKL2001 组迁移能力、过膜细胞数及划痕愈合率均增高（P＜0.05）；与高剂量+SKL2001 组比较，高剂量+XAV939 组迁移能力、过膜细胞数及划痕愈合率均降低（P＜0.05）。结论：隐丹参酮能通过抑制Wnt/β-catenin 信号通路的活性对胃癌细胞起抑制作用。     

红凉伞提取物调控MNX1-AS1对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨红凉伞提取物对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法：将乳腺癌细胞 MDA-MB-453 分为对照组、红凉伞提取物低、中、高剂量组、红凉伞提取物+pcDNA3.1 组和红凉伞提取物+pcDNA3.1-MNX1-AS1 组。四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖抑制率；克隆形成实验检测细胞克隆形成能力；流式细胞术检测细胞凋亡；Transwell 检测细胞迁移和侵袭；实时荧光定量 PCR 检测 MNX1-AS1 表达水平；蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 1A （P21）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 （Caspase-3）、上皮钙黏蛋白 （E-cadherin）、基质金属蛋白酶-2 （MMP-2） 表达水平。结果：与对照组比较，红凉伞提取物低、中、高剂量组细胞增殖抑制率、凋亡率及 P21、Caspase-3、E-cadherin 表达水平均升高（P＜0.05），细胞克隆形成数、迁移、侵袭细胞数及 MNX1-AS1、MMP-2 表达水平均降低 （P＜0.05）。与红凉伞提取物+pcDNA3.1 组比较，红凉伞提取物+pcDNA3.1-MNX1-AS1 组细胞增殖抑制率、凋亡率及 P21、Caspase-3、E-cadherin 表达水平均降低 （P＜0.05），细胞克隆形成数、迁移、侵袭细胞数及 MNX1-AS1、MMP-2 表达水平均升高 （P＜0.05）。结论：红凉伞提取物可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-453 增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡，其机制可能与 MNX1-AS1 有关。     

甘草甜素调控多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡机制研究

目的:探讨甘草甜素调控miR-4651表达对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖、凋亡的影响机制。方法:将多发性骨髓瘤RPMI8226细胞随机分为对照组、甘草甜素低、中、高浓度组、miR-4651组、miR-NC组、甘草甜素+anti-miR-4651组、甘草甜素+anti-miR-NC组；用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡，实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-4651表达水平。结果:与对照组比较，甘草甜素低、中、高浓度组骨髓瘤RPMI8226细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和miR-4651表达水平均逐渐升高(P<0.05),呈剂量依赖性。上调miR-4651表达后，骨髓瘤RPMI8226细胞增殖抑制率和细胞凋亡率均升高(P<0.05),而抑制miR-4651的表达则逆转了甘草甜素对骨髓瘤RPMI8226细胞增殖和凋亡的作用。结论:甘草甜素通过上调miR-4651表达可抑制多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖，促进细胞凋亡。     

黄芩素上调miR-625-5p表达干预支气管哮喘小鼠的机制研究

目的:探讨黄芩素调控miR-625-5p表达对支气管哮喘小鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、迁移及炎性因子的影响。方法:培养小鼠原代ASMCs细胞,作为对照组,重组小鼠血小板衍生生长因子(PDGF)诱导ASMCs增殖,作为PDGF组; 分别采用10、20、40 μmol/L的黄芩素处理PDGF诱导ASMCs细胞。将miR-NC、miR-625-5p转染至PDGF诱导的ASMCs细胞,作为PDGF+miR-NC、PDGF+miR-625-5p组; 将anti-miR-NC、anti-miR-625-5p转染至PDGF诱导ASMCs细胞,以40 μmol/L的黄芩素处理,作为PDGF+anti-miR-NC+40 μmol/L组、PDGF+anti-miR-625-5p+40 μmol/L组。CCK-8法检测细胞增殖; Transwell实验检测细胞迁移; 酶联免疫吸附实验检测细胞IL-4、IL-6、IL-8水平; 实时荧光定量PCR检测细胞miR-625-5p表达水平。结果:与对照组比较,PDGF组细胞增殖率、迁移率以及IL-4、IL-6、IL-8水平显著升高(均P<0.05); 与PDGF组比较,黄芩素低、中、高剂量组细胞增殖率、迁移率以及IL-4、IL-6、IL-8水平显著降低(均P<0.05)。与对照组比较,PDGF组细胞miR-625-5p表达显著降低(P<0.05); 与PDGF组比较,黄芩素低、中、高剂量组细胞miR-625-5p表达显著升高(均P<0.05)。与PDGF+miR-NC组比较,PDGF+miR-625-5p组细胞增殖率、迁移率以及IL-4、IL-6、IL-8水平显著降低(均P<0.05)。与PDGF+anti-miR-NC+40 μmol/L组比较,PDGF+anti-miR-625-5p+40 μmol/L组细胞miR-625-5p表达水平显著降低,细胞增殖率、迁移率以及IL-4、IL-6、IL-8水平显著升高(均P<0.05)。结论:黄芩素通过上调miR-625-5p表达抑制支气管哮喘小鼠的细胞增殖率、迁移率以及炎性因子水平。     

木棉花提取物通过调控miR-30b-3p/PDCD5的表达对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及其机制研究

目的:研究木棉花提取物对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及潜在的作用机制。方法:用浓度分别为15、30、60 mg/L的木棉花提取物处理骨关节炎软骨细胞作为木棉花提取物组,以无木棉花提取物处理的细胞作为对照组;将miR-NC、miR-30b-3p、anti-miR-NC、anti-miR-30b-3p、si-NC、si-PDCD5质粒转染至骨关节炎软骨细胞中,分别记为miR-NC组、miR-30b-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-30b-3p组、si-NC组、si-PDCD5组;将anti-miR-NC、anti-miR-30b-3p质粒转染至骨关节炎软骨细胞后再用60 mg/L的木棉花提取物处理48 h,记为木棉花提取物+anti-miR-NC组和木棉花提取物+anti-miR-30b-3p组;转染均采用脂质体法。qRT-PCR检测骨关节炎软骨细胞中miR-30b-3p、PDCD5 mRNA表达;Western blot检测Bcl-2、Bax、PDCD5蛋白表达;ELISA法检测上清液中IL-6、IL-1β含量;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测荧光活性。结果:与对照组比较,随着木棉花提取物浓度的升高,培养上清中IL-6、IL-1β含量及骨关节炎软骨细胞的凋亡率逐渐降低;miR-30b-3p、Bcl-2表达水平逐渐升高,PDCD5、Bax表达水平逐渐降低(P0.05)。miR-30b-3p过表达和抑制PDCD5表达可显著降低培养上清中IL-6、IL-1β含量,降低骨关节炎软骨细胞的凋亡率(P0.05)。miR-30b-3p靶向调控PDCD5的表达,抑制miR-30b-3p表达逆转了木棉花提取物对骨关节炎软骨细胞的凋亡抑制作用。结论:木棉花提取物可抑制骨关节炎软骨细胞IL-6、IL-1β的分泌及其凋亡,其机制可能与调控miR-30b-3p/PDCD5的表达有关。     

白芍提取物调控miR-564 表达对白血病细胞增殖及凋亡影响的研究

目的:探讨白芍提取物对白血病细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:选用白血病细胞K652为研究对象,分为对照组、白芍提取物不同浓度(20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL)组、miR-NC组、miR-564组、白芍提取物30μg/mL+anti-miR-NC组及白芍提取物30μg/mL+anti-miR-564组。采用MTT法检测各组细胞活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR检测细胞中miR-564表达,蛋白质印迹法检测各组细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)的表达。结果:与对照组比较,白芍提取物不同浓度组K652细胞活性、Cyclin D1均降低(P0.05),P21表达水平升高(P0.05);白芍提取物30μg/mL组Bcl-2蛋白表达水平降低(P0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白及miR-564表达水平升高(P0.05)。与miR-NC组比较,miR-564组K652细胞活性、Cyclin D1及Bcl-2蛋白表达水平均降低(P0.05),细胞凋亡率、P21、Bax蛋白及miR-564表达水平均升高(P0.05)。与白芍提取物30μg/mL+anti-miR-NC组比较,白芍提取物30μg/mL+anti-miR-564组K652细胞活性、Cyclin D1及Bcl-2蛋白表达水平均升高(P0.05),细胞凋亡率、P21、Bax蛋白及miR-564表达水平均降低(P0.05)。白芍提取物30μg/mL+anti-miR-NC组各检测指标与白芍提取物组30μg/mL组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:白芍提取物可能通过上调miR-564表达抑制白血病细胞增殖,并诱导细胞凋亡。     

桑枝提取物抑制miR-369对SK-N-SH细胞损伤的影响

目的：探讨桑枝提取物对 1-甲基-4-苯基吡啶离子 （MPP+） 处理的 SK-N-SH 细胞损伤的影响及分子机制。方法： 将 SK-N-SH 细胞随机分为对照组（未作任何处理）、模型组（2.5 mmol/L MPP+）、低、中、高剂量药物组（20 μmol/L、40 μmol/L、60 μmol/L 桑枝提取物+2.5 mmol/L MPP+）、阳性对照给药组 （50 μmol/L 司来吉兰+2.5 mmol/L MPP+）、anti-miR-NC 组 （转染miR-369 抑制阴性对照剂+2.5 mmol/L MPP+）、anti-miR-369 组 （转染 miR-369 抑制剂+2.5 mmol/L MPP+）、高剂量药物+antimiR-NC 组 （转染 miR-369 抑制剂阴性对照剂+60 μmol/L 桑枝提取物+2.5 mmol/L MPP+）、高剂量药物+anti-miR-369 组 （转染miR-369 抑制剂+60 μmol/L 桑枝提取物+2.5 mmol/L MPP+）。细胞计数试剂盒 8（CCK-8）检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡，蛋白质印迹（Western blot）法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase3）蛋白表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白细胞介素-1β （IL-1β） 水平，试剂盒检测细胞中丙二醛 （MDA） 含量和超氧化物歧化酶 （SOD） 活性，实时荧光定量 PCR（RT-qPCR） 检测 miR-369 和蛋白激酶 B1 （AKT1） mRNA 的表达水平；将 AKT1 野生型和突变型荧光素酶表达载体分别与miR-NC 和 miR-369 共转染至细胞 SK-N-SH 中，用荧光素酶报告实验检测 miR-369 和 AKT1 的靶向关系。结果：MPP+处理的SK-N-SH 细胞中细胞存活率降低，细胞凋亡率升高，Caspase3 表达水平升高，IL-1β 水平升高，MDA 含量升高，SOD 活性降低，miR-369 表达水平升高，AKT1 mRNA 表达水平降低（P＜0.05）。低、中、高剂量桑枝提取物处理后，细胞存活率升高，细胞凋亡率降低，Caspase3 表达水平降低，IL-1β 水平降低，MDA 含量降低，SOD 活性升高，miR-369 表达水平降低，AKT1 mRNA 表达水平升高 （P＜0.05）。抑制 miR-369 表达可促进细胞存活，抑制细胞凋亡、炎症因子 IL-1β 的释放，降低 MDA 含 量，提高 SOD 活性。且抑制 miR-369 表达能增强桑枝提取物对 MPP+处理 SK-N-SH 细胞损伤的保护作用。miR-369 靶向调控AKT1。结论：桑枝提取物可抑制 MPP+诱导的 SK-N-SH 细胞凋亡、炎症反应及氧化应激，可能通过调控 miR-369/AKT1 对 MPP+诱导的 SK-N-SH 细胞损伤起保护作用。     

甘草素对非小细胞肺癌细胞放疗敏感性的影响

【目的】 探讨甘草素对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞放疗敏感性的作用及机制。【方法】 体外培养NSCLC细胞株A549。使用不同浓度甘草素处理,筛选20%抑制浓度（IC20）的甘草素浓度。经甘草素处理后,克隆形成实验观察细胞放疗敏感性,选择半数细胞存活分数（SF）对应的放射线剂量进行后续实验。A549细胞随机分为对照组、甘草素组、miR-21 mimics-NC组、miR-21 mimics组、甘草素+miR-21 mimics组。miR-21 mimics-NC组转染miR-21模拟物阴性对照,miR-21 mimics组、甘草素+miR-21 mimics组转染miR-21模拟物,24 h后观察转染效果,甘草素组、甘草素+miR-21 mimics组加入0.2 mmol/L 甘草素作用24 h、4 Gy 6 MV-X射线照射3 h进行后续实验。细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;定量聚合酶链反应（qPCR）检测miR-21、蛋白络氨酸磷酸酶MEG2 mRNA相对表达量;双荧光素酶报告基因实验验证 miR-21 与 MEG2 的靶向关系;蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测 MEG2 蛋白相对表达量。【结果】 选取甘草素浓度为0.2 mmol/L,甘草素处理后,A549细胞SF降低（P＜0.05）,放射增敏比＞1。与对照组比较,甘草素组细胞相对活力、miR-21相对表达量降低,细胞凋亡率、MEG2 mRNA和蛋白相对表达量升高（P＜0.05）,miR-21 mimics组细胞相对活力、miR-21相对表达量升高,细胞凋亡率、MEG2 mRNA和蛋白相对表达量降低（P＜0.05）;与甘草素组比较,miR-21 mimics 组、甘草素+miR-21 mimics 组细胞相对活力、miR-21 相对表达量升高,细胞凋亡率、MEG2 mRNA 和蛋白相对表达量降低（P＜ 0.05）;与miR-21 mimics-NC组比较,miR-21 mimics组细胞相对活力、miR-21相对表达量升高,细胞凋亡率、MEG2 mRNA和蛋白相对表达量降低（P＜0.05）;与miR-21 mimics组比较,甘草素+miR-21 mimics组细胞相对活力、miR-21相对表达量降低,细胞凋亡率、MEG2 mRNA和蛋白相对表达量升高（P＜0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-21直接靶向MEG2。【结论】 甘草素可以抑制NSCLC细胞增殖,促进细胞凋亡及增强放疗敏感性,其机制可能与调控miR-21对MEG2转录和翻译的抑制有关。     

芪连扶正胶囊含药血清对肺癌A549细胞生物学行为的影响

目的:观察芪连扶正胶囊含药血清对肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:体外培养肺癌A549细胞,按实验分组干预,采用MTT法检测细胞增殖、划痕试验观察细胞迁移,Transwell实验观察细胞侵袭情况。结果:芪连扶正胶囊含药血清对肺癌A549细胞的增殖抑制且呈时间、浓度依赖性,且与化疗联合有协同作用;各药组细胞迁移值均小于对照组,与之比较除芪连扶正胶囊低剂量组外均有显著性差异(P0.05);与顺铂组相比,芪连扶正胶囊各组迁移值均大于顺铂组(P0.01),而联合组迁移值小于顺铂组(P0.01);芪连扶正胶囊低、中、高剂量组、顺铂组及联合组的侵袭抑制率分别为8.87%、19.11%、24.57%、37.88%、47.10%。结论:芪连扶正胶囊含药血清可抑制肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭,具有抗肿瘤转移作用。     

葛根芩连汤调控微RNA-542-3p对溃疡性结肠炎的保护机制

目的:探讨葛根芩连汤上调微RNA-542-3p(miR-542-3p)表达保护溃疡性结肠炎(UC)大鼠的机制研究。方法:选取8~10周龄SD大鼠经UC造模及鉴定后分成模型组、美沙拉嗪组、葛根芩连汤低剂量、中剂量、高剂量组,同批次等体质量健康大鼠作为空白对照组,每组16只。UC结肠细胞进入对数生长期后消化传代至24孔板培养,每孔加入2×105个细胞,用Lipofectamine 3000转染miR-NC、miR-542-3p、anti-miR-NC、anti-miR-542-3p质粒至UC大鼠结肠上皮细胞并分组,miR-NC、miR-542-3p组细胞经含10%生理盐水处理24 h,而anti-miR-NC、anti-miR-542-3p组用含10%葛根芩连汤处理24 h,处理结束后分析细胞上清液炎症介质和氧化应激相关指标的变化。酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测大鼠结肠组织和细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)含量;化学比色法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-542-3p表达水平。结果:与模型组比较,葛根芩连汤中剂量、高剂量组TNF-α、IL-6、IL-8含量显著降低(P<0.05)。与模型组比较,葛根芩连汤中剂量、高剂量组MDA水平显著降低,SOD、GSH-PX水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,葛根芩连汤中、高剂量组miR-542-3p表达水平显著升高(P<0.05)。与UC+miR-NC组比较,UC+miR-542-3p组细胞miR-542-3p表达水平显著升高;TNF-α、IL-6、IL-8含量显著降低;MDA水平显著降低以及SOD、GSH-Px水平显著升高(P<0.05)。与UC+anti-miR-NC+葛根芩连汤组比较,UC+anti-miR-542-3p+葛根芩连汤组细胞miR-542-3p表达水平显著降低;TNF-α、IL-6、IL-8含量显著升高;MDA水平显著升高以及SOD、GSH-Px水平显著降低(P<0.05)。结论:葛根芩连汤上调miR-542-3p表达保护UC大鼠,消除肠道炎症。     

醉茄素A通过circOSBPL10/miR-128-3p通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解、增殖、迁移及侵袭的机制研究

目的 探讨醉茄素A对乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解、增殖、迁移、侵袭的影响及其对环状RNAOSBPL10（circOSBPL10）/微小RNA-128-3p（miR-128-3p）通路的调控作用。方法 采用不同浓度（10、20、40 μg/mL）的醉茄素A处理乳腺癌细胞MDA-MB-231（醉茄素A低剂量组、醉茄素A中剂量组、醉茄素A高剂量组）;si-NC、si-circOSBPL10分别转染入MDA-MB-231细胞（si-NC组、si-circOSBPL10组）;pcDNA、pcDNA-circOSBPL10分别转染入MDA-MB-231细胞后加入40 μg/mL的醉茄素A处理细胞（醉茄素A+pcDNA组、醉茄素A+pcDNA-circOSBPL10组）;根据试剂盒检测葡萄糖消耗与乳酸产生量,以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平;采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖抑制率;采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测circOSBPL10与miR-128-3p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测circOSBPL10与miR-128-3p的靶向关系;Western blot法检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67（Ki-67）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达量。结果 与对照组比较,醉茄素A低剂量组、醉茄素A中剂量组、醉茄素A高剂量组葡萄糖消耗与乳酸生成量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平均明显降低（P＜0.05）,迁移及侵袭细胞数减少（P＜0.05）,细胞增殖抑制率升高（P＜0.05）,Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低（P＜0.05）,circOSBPL10的表达水平降低（P＜0.05）,miR-128-3p的表达水平升高（P＜0.05）;双荧光素酶报告基因实验证实circOSBPL10可靶向结合miR-128-3p;与si-NC组比较,si-circOSBPL10组葡萄糖消耗与乳酸生成量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平均明显降低（P＜0.05）,细胞增殖抑制率升高（P＜0.05）,迁移及侵袭细胞数减少（P＜0.05）,Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低（P＜0.05）;与醉茄素A+pcDNA组比较,醉茄素A+pcDNA-circOSBPL10组葡萄糖消耗与乳酸生成量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平均明显升高（P＜0.05）,细胞增殖抑制率降低（P＜0.05）,迁移及侵袭细胞数增多（P＜0.05）,Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高（P＜0.05）。结论 醉茄素A可通过调控circOSBPL10/miR-128-3p通路而抑制乳腺癌细胞糖酵解、增殖、迁移及侵袭。     

肺岩宁方介导Atg5对肺癌A549细胞自噬调控抗肺癌侵袭转移的实验研究

目的 探讨肺岩宁方（Feiyan Ning Decoction,FYN）通过介导Atg5（自噬相关靶向基因5,Autophagy-related gene 5）自噬相关基因调控人肺腺癌A549细胞自噬,及其对A549肺癌细胞增殖、迁移、侵袭等作用的影响。方法 肺岩宁方干预培养肺癌A549细胞,通过运用CCK-8(Cell Counting kit-8)细胞增殖实验检测肺岩宁方对细胞增殖抑制率的影响,显微镜下观察肺岩宁方作用后的细胞形态学改变;采用划痕实验检测肺岩宁方及自噬抑制剂氯喹（Chloroquine diphosphate salt,CQ）对肺癌A549细胞迁移能力;运用Transwell细胞侵袭实验检测肺岩宁方及氯喹对肺癌A549细胞侵袭能力;运用Western Blot检测自噬相关蛋白Atg5、LC3表达情况;运用透射电子显微镜观察肺癌A549细胞在肺岩宁方干预下的自噬结构形态改变情况。结果 CCK8检测试验结果：肺岩宁方能有效抑制A549细胞增值活力（P <0.01）,其优化浓度为200μg mL-1;划痕实验结果：与对照组比,肺岩宁方干预A549细胞迁移能力减弱（P...     

二冬膏含药血清对人肺癌A549细胞的抑制效应初探

目的探讨二冬膏含药血清对人肺癌A549细胞的抑制效应。方法采用中药血清药理学方法,选择高、中、低剂量的二冬膏水溶液以灌胃方式给药,获取二冬膏含药血清,以空白血清为对照,干预A549细胞,应用MTT法、划痕实验法及Transwell侵袭实验法检测二冬膏含药血清对A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果二冬膏高、中、低剂量组干预A549细胞24 h后均可不同程度抑制肺腺癌A549细胞增殖,差异有统计学意义(P0.05),并呈时间、剂量依赖性,以二冬膏中剂量组抑制作用最明显;二冬膏高、中、低剂量组A549细胞的迁移距离较空白组缩短,差异有统计学意义(P0.05),中剂量组细胞迁移距离最短;二冬膏高、中、低剂量组均能降低A549细胞的侵袭能力,差异有统计学意义(P0.05),中剂量组侵袭过膜的细胞数最少。结论二冬膏含药血清能抑制肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力,中剂量抑制作用最明显。     

丁香茄生物碱对人非小细胞肺癌体外作用及其机制研究

目的研究丁香茄生物碱对人非小细胞肺癌A549抗肿瘤转移作用及其机制。方法采用MTT法检测丁香茄生物碱对非小细胞肺癌A549细胞毒活性;划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测药物对肿瘤细胞体外迁移和侵袭作用的影响;ELISA法检测药物对细胞金属基质蛋白酶2(MMP-2)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)表达的变化。结果丁香茄生物碱可显著抑制肿瘤细胞的增殖(P0.05);抑制A549细胞的迁移和侵袭,高剂量抑制率为63.4%;与对照组比较,丁香茄生物碱组MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(P0.05,P0.01)。结论丁香茄生物碱可对人非小细胞肺癌A549增殖,抑制肿瘤细胞侵袭,其作用机制可能与抑制MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。