PI3K/Akt抑制剂对肺癌裸鼠移植瘤MMP9、VEGF表达的影响

目的探讨PI3K抑制剂LY294002对肺癌裸鼠移植瘤的基质金属蛋白酶9(MMP9)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及意义。方法人肺癌A549细胞接种于裸鼠皮下,建立肺癌裸鼠移植瘤模型并予LY294002治疗,计算LY294002的抑瘤率,western b lot法测定裸鼠移植瘤组织MMP9、VEGF蛋白的表达。结果 LY294002可有效抑制裸鼠移植瘤的生长,其抑瘤率为40.30%。LY294002治疗组裸鼠移植瘤组织MMP9及VEGF蛋白水平均显著低于对照组(P均<0.01)。结论 PI3K抑制剂LY294002通过下调MMP9及VEGF蛋白的表达,从而抑制肿瘤的侵润转移。     

3种选择性环氧合酶-2抑制剂对胰腺癌生长的影响

目的 比较3种不同选择性的环氧合酶-2(COX-2)抑制剂--美格昔康、塞来昔布、罗非昔布对人胰腺癌细胞生长及凋亡的影响，观察罗非昔布对人裸鼠胰腺癌移植瘤生长的抑制作用。方法采用3H-胞腺嘧啶核苷掺入，了解细胞DNA合成；用免疫组化检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)及细胞COX-2的表达；用TUNEL染色法检测细胞凋亡。建立裸鼠胰腺癌移植瘤模型，给予罗非昔布8周，观察肿瘤大小、肿瘤组织的COX-2及PXNA的表达情况。结果 3种COX-2抑制剂均能抑制体外培养的胰腺癌细胞株BxPC-3的3H-胸腺嘧啶核苷掺入，其抑制效应与药物浓度呈显著正相关。COX-2抑制剂的选择性越高，对胰腺癌细胞生长的抑制作用越强。COX-2抑制剂均能诱导胰腺癌细胞的凋亡、降低胰腺癌细胞的COX-2、PCNA的表达。罗非昔布对裸鼠胰腺癌移植瘤的抑瘤率为87．7％；肿瘤组织的COX-2、PCNA表达均较对照组明显下降。结论 3种选择性COX-2抑制剂均能抑制人胰腺癌细胞的生长，并诱导其凋亡，对COX-2的选择性越高，对胰腺癌的抑制作用越强。罗非昔布可显著抑制裸鼠胰腺癌移植瘤的生长。     

尼美舒利抑制肝癌Hep3B细胞增殖及β-连环蛋白的转录活性的研究

目的:观察环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利对体外培养的人肝细胞癌Hep3B细胞增殖和细胞内β-连环蛋白(β-catenin)转录活性的影响,以探讨尼美舒利抗增殖作用的分子机制。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Hep3B细胞内COX-2mRNA的表达水平;将细胞分别加入10、25、50、100、200μmol·L-1尼美舒利及尼美舒利(100μmol·L-1)+前列腺素E(2PGE2,10μmol·L-1)处理,CCK-8细胞计数法测定细胞增殖活性,双荧光素酶报告系统检测β-catenin的转录活性。同时各试验均设空白对照组进行比较。结果:Hep3B细胞高表达COX-2mRNA。与空白对照组比较,尼美舒利可浓度依赖性地抑制细胞的增殖(P<0.01),作用72h的半数抑制浓度(IC50)为76.33μmol·L-1;尼美舒利显著抑制Hep3B细胞内β-catenin的转录活性(P<0.05),加入PGE2后可显著减弱尼美舒利的作用(P<0.05)。结论:尼美舒利可能通过抑制COX-2活性和PGE2的生成,从而抑制β-catenin的转录活性发挥抗肝癌细胞增殖的作用。     

尼美舒利对人食管癌细胞Eca-109 COX-2表达及生长的抑制作用

目的研究环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞株COX-2表达和细胞增殖及凋亡的影响。方法MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;流式细胞仪检测COX-2蛋白表达、细胞周期时相分布及凋亡率的变化;光镜和琼脂糖电泳法进一步观察细胞凋亡。结果尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和浓度依赖性;呈浓度依赖性下调Eca-109细胞COX-2 mRNA及蛋白表达;可使Eca-109细胞G0/G1期比例增高,S期细胞减少,增殖指数降低,凋亡细胞增多。结论尼美舒利可能通过对COX-2表达的下调而诱导凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制人食管癌Eca-109细胞生长。     

尼美舒利抑制肺腺癌细胞增殖机制研究

目的探讨尼美舒利对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法用噻唑蓝比色法（MTT）法观察尼美舒利对肺腺癌细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,RT-PCR测定suvivin mRNA的表达变化,Western blot检测suvivin和caspase-3蛋白的表达变化。结果各浓度尼美舒利可抑制A549细胞的生长,其半数抑制量（IC50）为162.25μmol/L。尼美舒利可诱导肺腺癌细胞凋亡,最高凋亡率为（21.4±3.1）%。细胞周期分析表明,尼美舒利能使肺腺癌细胞G0/G1期比例增高,S期比例降低。尼美舒利作用后,环氧合酶2（COX-2）和survivin mRNA及蛋白的表达较对照组降低（P〈0.05）,而caspase-3蛋白的表达则较对照组明显增高（P〈0.05）。结论选择性COX-2抑制剂尼美舒利通过抑制COX-2和survivin的表达,导致caspase-3上调,抑制肺腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤组织p53 mRNA表达的影响

目的探讨黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法建立人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠移植性肿瘤模型,随机分为3组,分别给予生理盐水、顺铂30 mg.m-2、黄芪注射液10.40 mg.(g.d)-1,经腹腔注射给药4 wk后处死CNE2荷瘤裸鼠,测量瘤体积,取瘤体称重,计算抑瘤率和相对肿瘤增值率;采用实时荧光定量PCR法的相对定量法检测黄芪注射液对各组裸鼠移植瘤组织中p53 mRNA表达的影响。结果生理盐水组、顺铂组、黄芪注射液组的移植瘤瘤体积分别为(1.51±0.25)cm3、(0.91±0.35)cm3、(1.04±0.51)cm3,与生理盐水组相比,顺铂组和黄芪注射液组的瘤体积小(P<0.01,P<0.05);顺铂组、黄芪注射液组对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠的抑瘤率分别为72.12%、39.90%;相对肿瘤增殖率分别为50%、60%。经实时荧光定量PCR法测定,与生理盐水组相比,各组裸鼠移植瘤组织中p53 mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠移植瘤具有抑制作用,但尚不能认为黄芪注射液可影响移植瘤组织中p53 mRNA的表达。     

戊地昔布对裸鼠食管癌移植瘤凋亡的影响及其可能机制

目的探讨戊地昔布对裸鼠食管癌移植瘤凋亡的影响及其可能机制。方法建立食管癌裸鼠原位移植瘤模型,给予戊地昔布4 wk。剥离瘤结节,计算瘤体体积和肿瘤生长抑制率;FCM法检测移植瘤中的细胞凋亡率;免疫组织化学和FCM法检测COX-2、c-jun和c-fos蛋白的表达变化;RT-PCR检测移植瘤中COX-2 mRNA表达变化。结果①用戊地昔布的裸鼠组,裸鼠体重明显增加,且随用药时间延长,其体重也随之增加。②戊地昔布可明显降低肿瘤重量,肿瘤生长抑制率为45.80%。③戊地昔布可增加肿瘤细胞的凋亡率。④戊地昔布可下调COX-2 mRNA和蛋白的表达;同时凋亡基因c-jun和c-fos蛋白表达升高。⑤肿瘤组织的凋亡率与COX-2蛋白表达呈负相关(r=-0.726,P=0.008),与c-jum、c-fos蛋白表达呈正相关。⑥给予戊地昔布后,裸鼠胃肠上皮细胞形态没有明显异常。结论戊地昔布能够抑制裸鼠移植瘤的生长和诱导凋亡,其机制部分与抑制COX-2表达及上调凋亡基因c-jun,c-fos有关。     

雷公藤红素抑制可移植性人脑胶质瘤生长相关分子

目的 研究雷公藤红素在裸鼠胶质瘤动物模型治疗人脑胶质瘤的可行性.探讨雷公藤红素抑制SHG-44胶质瘤裸鼠移植瘤生长的作用机制.方法 建立BALB/c裸小鼠SHG-44胶质瘤移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为5组,采用腹腔内注射给药方法.雷公藤红素按4mg/kg、2mg/kg、1mg/kg三种浓度分组给药;阳性对照顺铂组按2mg/kg给药.定期观察肿瘤生长情况测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率.全部SHG-44裸鼠移植瘤石蜡标本用SP法免疫组化染色,检测移植瘤组织中的微血管计数(MVD)、以及bFGF、周期蛋白D1和PCNA的蛋白表达.结果 与溶媒对照组相比,雷公藤红素4mg/kg组、2mg/kg组均能抑制肿瘤生长(P＜0.05),其体积抑瘤率分别为35%和26.9%.雷公藤红素高剂量组能下调移植瘤组织中bFGF的蛋白表达(P＜0.05);MVD也随之降低(P＜0.05),呈剂量依赖关系.PCNA、周期蛋白D1在雷公藤红素高、中剂量组及阳性对照组移植瘤中的蛋白表达明显低于溶媒对照组(P＜0.05),呈剂量依赖关系.结论 雷公藤红素能明显抑制SHG-44裸鼠移植瘤生长,并存在剂量依赖性.其机制可能是下调bFGF的蛋白表达,抑制肿瘤血管生成,下调周期蛋白D1、PCNA的蛋白表达,对肿瘤细胞周期进行调控.     

醋酸丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的探讨不同剂量醋酸丙氨瑞林(alarelin acetate)对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及作用机制。方法建立裸鼠移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为4组:实验对照组,醋酸丙氨瑞林低、中、高剂量组(0、20、40、80μg/kg)。治疗期间定期测量肿瘤大小,观察裸鼠全身状况。治疗4周后,将移植瘤完整取出,称取瘤质量,计算抑瘤率。利用免疫组织化学法检测移植瘤组织中livin蛋白的表达。结果醋酸丙氨瑞林低、中、高剂量组的抑瘤率分别为17.8%、26.5%和43.6%,与对照组比较,醋酸丙氨瑞林各治疗组肿瘤生长缓慢,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果:与对照组相比,醋酸丙氨瑞林各治疗组livin蛋白的表达水平明显降低,且各治疗组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同剂量的醋酸丙氨瑞林均能抑制人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长,且呈剂量依赖关系,其作用机制可能与下调livin蛋白表达有关。     

尼美舒利抑制小鼠荷瘤肝癌的生长:提高Bax/Bc 1-2表达的比值(英文)

目的:观察尼美舒利对小鼠荷瘤抑制和凋亡诱导作用并探讨其可能的分子机制。方法:雄性小鼠给予尼美舒利10mg/kg,20mg/kg和40mg/kg各灌胃21天,用电镜,流式细胞术,琼脂糖电泳观察尼美舒利诱导肿瘤细胞凋亡的作用,放射免疫法测定瘤组织PGE_2含量,Western blot观察COX-2,c-myc,Bax和Bcl-2的表达.结果:尼美舒利能抑制小鼠荷瘤生长,且具有剂量依赖性(14％到62％),高剂量时,尼美舒利诱导的细胞凋亡率是(51.3±1.5)％,DNA“梯形”变化更加明显,PGE_2含量明显降低,Westernblot显示COX-2和Bcl-2表达降低,Bax表达增加,c-myc无变化。结论:尼美舒利对荷瘤肝癌的抑制作用可能与抑制COX-2而降低PGE_2含量和上调Bax/Bcl-2比值诱导瘤细胞凋亡有关。     

环氧化酶-2和β-连环蛋白及 Survivin 在舌癌中的表达及相关性研究

目的研究人舌癌组织中环氧化酶-2(Cox-2)、β-连环蛋白(β-catenin)及Survivin在基因水平的表达及相互关系,为舌癌的诊断、治疗及预后提供参考依据。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)方法检测Cox-2 mRNA、β-catenin mRNA及Survivin mRNA在60例舌癌和30例正常口腔黏膜中的表达情况,分析它们在舌癌组织中表达的差异性和相关性。结果 Cox-2 mRNA和Survivin mRNA在舌癌组织中呈强阳性表达,而在正常口腔黏膜均为阴性表达,差异有统计学意义(P<0.01);β-catenin mRNA在舌癌和正常黏膜中均有表达,但表达量差异有统计学意义(P<0.05)。低分化舌癌中Cox-2 mRNA、β-catenin mRNA及Survivin mRNA的表达量高于高中分化舌癌中的表达量(P<0.05)。Cox-2、β-catenin及Survivin在舌癌中的表达相互呈正相关(P<0.01)。结论 Cox-2、β-catenin及Survivin在舌癌的发生发展过程中起重要作用,Cox-2、β-catenin及Survivin之间可能存在相互协同作用。     

Effects of nimesulide,a cyclooxygenase-2 selective inhibitor,on colitis induced tumors

Cyclooxygenase-2 (COX-2) is known to suppress sporadic colorectal cancer, but effect of selective COX-2 inhibitor in UC-associated neoplasia is still unknown. This study investigated effect of a selective COX-2 inhibitor on colorectal carcinogenesis in experimental murine UC. Chronic colitis was induced in mice by four cycles of administration of dextran sulfate sodium (DSS) (i. e., 5 % DSS for 7 days and distilled water for the following 14 days), and the mice were sacrificed 120 days after the end of the fourth cycle. The mice were divided into the following five groups: Group A, served as a disease control; Group B, received a diet mixed with 400 ppm of nimesulide (NIM), a selective COX-2 inhibitor, during the whole period; Group C, received NIM during the four cycles of DSS administration; Group D, received NIM for 120 days from the end of the fourth cycle; Group E, served as a normal control. In Group D, NIM significantly suppressed the occurrence of dysplasia and/or cancer. The results show that NIM inhibited both dysplasia and cancer in DSS-treated mice, thus showing that NIM has preventive effects on the remission phase of carcinogenesis. Received 20 July 2006; revised 21 August 2006; accepted 4 September 2006     

反应停对人癌裸鼠肿瘤及新血管形成的影响

目的:观察反应停对人卵巢癌细胞(OVCAR-3)及人结肠癌细胞(HCT-8)生长及肿瘤组织内新血管形成的影响。方法:建立人癌裸鼠异种移植的模型,将接种肿瘤后的裸鼠分别灌胃给予不同剂量的反应停,并与正常对照组进行比较,观察肿瘤生长的情况;采用免疫组化检验方法检测肿瘤组织中微血管密度(MVD)。结果:对人癌裸鼠OVCAR-3肿瘤,反应停中、高剂量组均可显著抑制肿瘤生长(P<0.05、P<0.01),对HCT-8的生长却无明显影响,但反应停均呈剂量依赖性降低上述肿瘤组织MVD。结论:反应停的抗肿瘤作用可能与抗新血管形成作用无关。     

PITX2 shRNA对卵巢癌细胞H08910裸鼠移植瘤凋亡的影响

目的探讨PITX2基因沉默对人卵巢癌细胞株H08910裸鼠移植瘤凋亡的影响。方法将重组PITX2 shRNA plasmid转染人卵巢癌细胞株H08910细胞,通过裸鼠移植瘤实验观察PITX2基因沉默对裸鼠移植瘤的生长抑制作用,同时,利用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法检测PITX2基因沉默对caspase-3、cytochrome-c和caspase-9表达的影响。结果与对照组(空载体组和未转染组)相比,PITX2 shRNA plasmid转染组人卵巢癌细胞株H08910细胞生长速度减慢,肿瘤体积缩小(P<0.05),而且caspase-3、cytochrome-c和caspase-9的表达明显升高(P<0.05)。结论 PITX2基因沉默可通过促进肿瘤细胞的凋亡而抑制裸鼠移植瘤生长。     

靶向抑制HIF-1α基因对舌癌细胞增殖活性的影响

【摘要】目的 研究靶向抑制乏氧诱导因子（HIF）-1α基因对Tca8113及Tscca舌癌细胞株增殖的影响。方法 将HIF-1α基因的短发夹干扰RNA（shRNA）的表达载体与空载质粒分别转染人舌癌细胞中作为siHIF-1α组和空载组,半定量RT-PCR及Western blot法检测HIF-1α的mRNA及蛋白表达。软琼脂克隆形成实验观察细胞的增殖;细胞计数法检测活细胞的数量;流式细胞分析术检测细胞周期的分布;同时将舌癌细胞接种至裸鼠皮下,观察体内的成瘤情况。结果 HIF-1αshRNA质粒转染舌癌细胞株后,HIF-1α的mRNA及蛋白表达明显下降。siHIF-1α组细胞在软琼脂中形成克隆的能力显著下降。细胞计数表明siHIF-1α组活细胞数量减少。转染后乏氧培养48h si?HIF-1α组细胞周期阻滞于G0/G1期。舌癌细胞移植到裸鼠体内数天后siHIF-1α组成瘤体积明显小于空载组（P＜0.05）。结论 HIF-1α基因能够促进舌癌细胞增殖活性,有可能成为未来治疗舌癌的一个潜在作用靶点。     

复方丹皮酚纳米乳对裸鼠体内人源肺癌A549的影响

目的研究复方丹皮酚纳米乳对裸鼠体内人源肺癌A549的影响及部分机制研究。方法建立裸鼠人源肺癌A₅₄₉移植瘤模型,灌胃给予不同剂量的复方丹皮酚纳米乳(48、96和192 mg·kg^-1),观察其对A₅₄₉移植瘤的治疗作用,每5 d使用游标卡尺测量裸鼠移植瘤的最长径和最短径,动态观察裸鼠移植瘤的生长情况,并计算其体积,以此绘出裸鼠移植瘤生长曲线。通过酶联免疫吸附法测定血清中白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平,初步探讨其作用机制。结果所有治疗组均对裸鼠A549移植瘤肿瘤体积、肿瘤体积增长率有一定的抑制作用,且随剂量的增加,抑制作用更强;与荷瘤对照组比较,复方丹皮酚纳米乳高剂量组和康莱特注射液组血清白细胞介素2表达明显升高(P<0.01、P<0.01),复方丹皮酚纳米乳中、高剂量组和康莱特注射液组肿瘤坏死因子α表达水平明显升高(P<0.05、P<0.01、P<0.01)。结论复方丹皮酚纳米乳对人源肺癌A₅₄₉裸鼠移植瘤具有一定的抑制作用,其作用机制可能与促进细胞因子白细胞介素2和肿瘤坏死因子α的表达有关。     

艾瑞昔布联合5-氟尿嘧啶对裸鼠结肠癌移植瘤侵袭和转移的影响

目的探讨艾瑞昔布联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对结肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤侵袭和转移的影响以及与环氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系。方法 40只裸鼠构建人结肠癌HT-29细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组,每组10只,对照组(0.9%NaCl);艾瑞昔布组[100 mg/(kg·d)];5-Fu组(20 mg/kg);联合用药组[艾瑞昔布100 mg/(kg·d),5-FU 20 mg/kg],艾瑞昔布ig给药,1次/d,5-Fu ip给药,每3天1次,连续给药14 d。实验结束时测量各组裸鼠瘤体大小,并计算抑瘤率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测COX-2、VEGF-C、MMP-9血清浓度,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测COX-2、VEGF-C、MMP-9的m RNA表达,免疫组化法检测瘤体微血管密度(MVD),Westernblotting法检测COX-2、VEGF-C、MMP-9蛋白表达。结果艾瑞昔布组、5-Fu组、联合用药组与对照组比较,抑瘤效果显著,其中以联合用药组抑瘤效果最佳(P<0.05)。艾瑞昔布组、5-Fu组、联合用药组较对照组裸鼠血清COX-2、VEGF-C、MMP-9浓度、瘤体COX-2、VEGF-C、MMP-9的m RNA和其蛋白表达、瘤体MVD均显著降低(P<0.05),其中以联合用药组降低最显著(P<0.05)。结论艾瑞昔布联合5-Fu可协同抑制结肠癌裸鼠移植瘤侵袭和转移,增强5-Fu的抗肿瘤效果,其作用机制可能与下调COX-2、VEGF-C、MMP-9表达有关。     

氯化两面针碱的抗肝癌活性及对DNA拓扑异构酶的影响

目的研究氯化两面针碱对肝癌HepG2裸小鼠移植瘤的抗肿瘤作用及对DNA拓扑异构酶(TOPO)活性的影响。方法建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,观察氯化两面针碱的肿瘤抑制作用。以pBR322DNA为底物,采用琼脂糖凝胶电泳检测氯化两面针碱对TOPO介导的pBR322 DNA解旋反应的影响,以及对pBR322 DNA是否具有直接断裂作用。结果氯化两面针碱2.5、5和10mg·kg-1剂量对肝癌HepG2的抑制率分别为12.06%、35.63%和60.91%,氯化两面针碱在6.25μmol·L-1时可完全抑制TopoI的催化活性,在25μmol·L-1时完全抑制TopoⅡ的催化活性。结论氯化两面针碱具有较为明显的抗肝癌活性,对DNA TOPO活性的抑制可能是其作用机制之一。     

奥曲肽抑制人卵巢癌细胞增殖

目的 探讨生长抑素类似物奥曲肽在体内外对人卵巢癌细胞株SKOV3生长的影响.方法 Mtt比色法观察体外奥曲肽对人卵巢癌细胞株SKOV3的生长抑制作用.建立人卵巢癌细胞株SKOV3裸鼠移植瘤模型,随机分成四组,分别给予生理盐水(A组)、奥曲肽(B组)、顺铂(C组)及两药联用(D组)处理,处死裸鼠后采用免疫组织化学法检测肿瘤标本血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 奥曲肽可抑制体外SKOV3细胞生长,且其作用呈时间、浓度依赖性.各用药组瘤重、瘤体积、VEGF的表达均低于A组(P<0.05).结论 奥曲肽能抑制体内外人卵巢癌细胞株SKOV3生长,对肿瘤VEGF表达的抑制可能为其抑瘤机制之一.