TNF-α、IL-1在Ⅰ期压疮中的作用及表达

目的 探讨促炎细胞因子TNF-α、IL-1在Ⅰ期压疮中的作用及表达,为临床早期预防提供依据.方法 将40只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组和实验A、B、C、D组各8只.对照组不予压力,实验结束时施行安乐死;实验A、B、C、D组于大鼠双后肢建立压疮模型,均施加22.47 kPa压力,形成缺血再灌注循环(施压2h后移开施压柱,让局部血流恢复0.5h后再施压,即为1个I/R),分别予以2个、3个、4个、5个I/R后再施行安乐死.光镜下观察皮肤肌肉组织病理变化,测定肌肉组织中TNF-α及IL-1含量、髓过氧化物酶(MPO).结果 实验A、B、C、D组皮肤、肌肉光镜下观察均出现炎性细胞浸润、水肿,且随着循环数的增加损伤逐渐加重;各实验组与对照组比较,差异有统计学意义(均P＜0.01);实验组间TNF-α、ILV-1、MPO含量比较,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论 压疮形成过程中缺血再灌注损伤引起的炎性反应可加重组织细胞损伤,促炎细胞因子起着重要作用.     

压疮早期动物模型的制备及评价

目的为压疮动物模型的制备及实验方法提供实证依据。方法将48只SD雄性大鼠随机均分成六组各8只,均行10%水合氯醛麻醉后,对照组不予以压力,7.5 h后安乐死;实验A~E组采用特制压力装置对大鼠股薄肌处施压,A组给予13.73 kPa压强,B组给予19.97 kPa压强,C组给予22.47 kPa压强,D组给予28.71 kPa压强,E组给予34.96 kPa压强;五组均予3个缺血-再灌注循环后安乐死。肉眼观察大鼠受压部位皮肤颜色和形态,光镜下观察皮肤肌肉组织病理变化,测定肌肉组织中髓过氧化物酶(MPO)含量。结果 A组与对照组比较,皮肤肉眼观察无差别,光镜下皮肤层次欠清晰,皮下结缔组织和肌肉组织有轻度炎性反应;B组皮肤肉眼观察略有发红,光镜下皮下结缔组织和肌肉组织炎性反应较A组加重;C组肉眼观察出现持续性非苍白性发红,光镜下皮下结缔组织和肌肉组织炎性反应较B组加重,与临床典型的I期压疮相似;D、E两组肉眼观察充血反应和光镜下观察炎性反应呈逐渐加重趋势。各组MPO含量比较,差异有统计学意义(P0.01);各实验组与对照组比较,差异有统计学意义(均P0.01);实验组两两比较,除B、C组外,差异有统计学意义(均P0.01)。结论大鼠肌肉组织在13.73 kPa压强下即发生轻度损伤,随着压力增大,损伤呈加重趋势;压力为19.97~22.47 kPa时损伤程度差异不大。可依据此动物模型进行压疮相关实验研究。     

压疮早期动物模型的制备及评价

目的为压疮动物模型的制备及实验方法提供实证依据。方法将48只SD雄性大鼠随机均分成六组各8只,均行10%水合氯醛麻醉后,对照组不予以压力,7.5 h后安乐死;实验A~E组采用特制压力装置对大鼠股薄肌处施压,A组给予13.73 kPa压强,B组给予19.97 kPa压强,C组给予22.47 kPa压强,D组给予28.71 kPa压强,E组给予34.96 kPa压强;五组均予3个缺血-再灌注循环后安乐死。肉眼观察大鼠受压部位皮肤颜色和形态,光镜下观察皮肤肌肉组织病理变化,测定肌肉组织中髓过氧化物酶（MPO）含量。结果 A组与对照组比较,皮肤肉眼观察无差别,光镜下皮肤层次欠清晰,皮下结缔组织和肌肉组织有轻度炎性反应;B组皮肤肉眼观察略有发红,光镜下皮下结缔组织和肌肉组织炎性反应较A组加重;C组肉眼观察出现持续性非苍白性发红,光镜下皮下结缔组织和肌肉组织炎性反应较B组加重,与临床典型的I期压疮相似;D、E两组肉眼观察充血反应和光镜下观察炎性反应呈逐渐加重趋势。各组MPO含量比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;各实验组与对照组比较,差异有统计学意义（均P〈0.01）;实验组两两比较,除B、C组外,差异有统计学意义（均P〈0.01）。结论大鼠肌肉组织在13.73 kPa压强下即发生轻度损伤,随着压力增大,损伤呈加重趋势;压力为19.97~22.47 kPa时损伤程度差异不大。可依据此动物模型进行压疮相关实验研究。     

肢体缺血预处理对兔肺组织缺血再灌注后氧自由基及细胞因子分泌的影响

目的 研究肢体缺血预处理对兔肺组织缺血再灌注后氧自由基及细胞因子分泌的影响.方法 将18只日本大耳白兔随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)及肢体缺血预处理组(L组),每组6只.实验结束时,取肺组织测定湿/干重比(W/D)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)和肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6、IL-8及IL-10的含量;检测支气管肺泡灌洗液和血清中蛋白含量,计算肺通透性指数;观察肺组织病理学变化.结果 与I/R组比较,L组W/D、肺通透性指数、MPO活性、MDA和TNF-α、IL-6、IL-8的含量均降低(P<0.05),SOD活性(P<0.05)和IL-10含量升高(P<0.01).C、L两组间上述指标的差异无统计学意义(P>0.05).光镜榆查结果发现L组肺组织病理学改变较I/R组明显减轻.结论 肢体缺血预处理可以抑制缺血再灌注肺组织中氧自由基产生和促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8的释放,上调抗炎细胞因子IL-10的合成,从而减轻肺缺血再灌注损伤.     

肠道缺血再灌注损伤时肠淋巴干结扎对系统炎性反应的影响

目的比较大鼠肠道缺血再灌注损伤时肠淋巴干结扎与不结扎对循环中炎性介质和细菌内毒素的影响。方法采用肠道缺血再灌注模型进行肠系膜淋巴管结扎。大鼠随机分4组，每组10只：空白组（A组）；假手术组（B组）；肠道缺血再灌注组（C组）；肠道缺血再灌注加淋巴干结扎组（D组）。缺血再灌注后，作肠系膜淋巴结培养计算细菌易位率；检测循环中内毒素、D-乳酸、二胺氧化酶、TNF—α、IL-1β、IL-6和sICAM-1水平。结果细菌易位率A、B两组为0；C组40％，D组20％。与A、B组比较，C、D两组内毒素、D-乳酸和二胺氧化酶水平显著增高（P〈0．05），且D组显著低于C组；血循环中各细胞因子除sICAM-1在D组与C组之间没有显著差异外，C组的IL-1β、IL-6和TNF-α浓度均明显高于D组（P〈0．05）。结论肠道缺血再灌注损伤时，肠淋巴干结扎可减少细菌在肠系膜淋巴结的定植，并减轻肠道缺血再灌注的损伤及增加通透性，从而减轻全身炎性反应。     

缺血预处理对大鼠缺血再灌注肝组织NF-κB表达、炎症及氧化应激反应的影响

目的：探讨缺血预处理（IP）减轻大鼠肝缺血再灌注（I/R）损伤的作用及机制。
　　方法：将15只雄性SD大鼠随机均分为假手术组、I/R组、IP+I/R组,采用Pringle法制作肝I/R模型（缺血30min+再灌注3h）,IP采用I/R前肝缺血10min+再灌注10min诱导。各组大鼠于再灌注3h后处死取材,行肝组织病理学、血请谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）检测,同时检测肝组织NF-κB蛋白的表达,以及炎性细胞因子IL-1β、TNF-α与氧化应激指标丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）水平。
　　结果：除假手术组外,I/R组与IP+I/R组大鼠肝组织均出现肝损伤是病理学改变,IP+I/R组的损伤程度明显轻于I/R组;与假手术组比较,I/R组与IP+I/R组大鼠血清AST、ALT水平明显升高,肝组织NF-κB蛋白表达、IL-1β与TNF-α水平、MDA与MPO浓度均明显升高（均P<0.05）,但IP+I/R组的各指标的升高幅度均明显小于I/R组（均P<0.05）。
　　结论：IP减轻大鼠肝I/R损伤的作用与抑制NF-κB活性,从而减轻炎症与氧化应激反应有关。     

丙泊酚对大鼠脑缺血-再灌注时TNF-α、IL-1β和IL-6水平的影响

目的探讨脑缺血-再灌注损伤中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)水平的变化及丙泊酚对它们的影响。方法72只成年Wistar大鼠随机分为三组:A组为假手术组(n=8);B组为对照组(n=32),于缺血前10min腹腔注射生理盐水10 ml/kg,据实验要求再均分为4个亚组,均缺血2 h,再分别灌注1、6、12、24 h;C组为丙泊酚组,于缺血前10 min腹腔注射丙泊酚100 mg/kg,亚组分组同B组。观察血中TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度变化和血中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化以及光镜下缺血大脑组织病理改变。结果 丙泊酚组的TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量明显低于对照组(P<0.05),而SOD活性高于对照组。光镜结果提示,丙泊酚组局灶性脑缺血-再灌注损伤轻于对照组。结论丙泊酚抑制脑缺血-再灌注时炎性细胞因子的表达,从而减轻该类细胞因子介导的炎性损伤,具有一定的脑保护作用。     

常温肝缺血再灌注损伤的实验研究

目的：探讨肝缺血再灌注损伤的作用机制。方法：采用大鼠部分肝缺血再灌注模型，将健康雄性SD大鼠24只随机分为三组：A组（手术对照），B组（肝缺血90min），C组（肝缺血90min再灌注120min）。观察每一动物肝组织病理切片；分别检测血浆谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子（TNF－α）、白介素1β（IL-1β）浓度；测定肝组织中髓过氧化物酶（MPO）含量。结果：肝缺血再灌注后，光镜下大鼠肝组织有明显的肝血窦和中央静脉瘀血，内皮细胞及肝细胞普遍水肿变性；C组肝细胞坏死较B组明显；血浆中肝功能酶学指标显著升高，（B、C组与A组比及C组比B组P均＜0．01）；肝组织中MPO活性升高，以再灌注120min组为著（C组比A组P＜0．01）；与血浆中TNF－α、IL-1β的变化趋势相同（TNF－α：C组比A组P＜0．05，IL－1β：B、C组比A组P均＜0．01）。结论：肝脏微循环障碍是肝缺血再灌注损伤的病理基础；TNF－α、IL-1β介导中性粒细胞参与的肝缺血再灌注损伤过程。     

白细胞介素12在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价白细胞介素12(IL-12)在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠24只,8-10周龄,体重250-280 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=8):假手术组(S组),肺缺血再灌注损伤组([/R组),IL-12单克隆抗体组(IL-12组).S组只分离肺门不夹闭；I/R组夹闭肺门60 min后,恢复灌注2 h；IL-12组于夹闭肺门前1h尾静脉注射IL-12单克隆抗体200μg/kg.于再灌注结束时采集血样和肺绀织,测定血浆TNF-α浓度、辅助性T细胞(Th)1和Th2水平、肺组织湿干重(W/D)比、髓过氧化物酶(MPO)活性、MDA含量及动脉血氧分压(PaO2)及二氧化碳分压(PaCO2).光镜下观察肺组织病理学改变.结果 与S组比较,I/R组和IL-12组肺组织W/D比、MDA含量、MPO活性、血浆TNF-α浓度升高,I/R组PaO2降低,PaCO2、Th1水平和Th1/Th2升高(P＜0.01),Th2水平差异无统计学意义(P＞0.05),IL-12组PaO2、PaCO2、Th1、Th2水平及Th1/Th2差异无统计学意义(P＞0.05)；与I/R组比较,IL-12组PaCO2、肺组织W/D比、MDA含量、MPO活性、血浆TNF-α浓度、Th1水平和Th1/Th2降低,Th2水平和PaO2升高(P＜0.01).I/R组肺组织损伤明显,IL-12组肺组织损伤程度明显减轻.结论IL-12通过使Tn1/Th2失衡而参与肺缺血再灌注损伤.     

缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤中MPO、TNF-α、ET、NO的影响

目的：探讨缺血预处理（IPC）对肝脏缺血再灌注（I/R）损伤中的中性粒细胞和某些细胞因子的影响。方法：采用大鼠部分肝脏原位缺血再灌注损伤模型,30只Wistar大鼠随机分成：①正常对照组;②缺血再灌注对照组;③预处理组。②、③组均在60min再灌注完成后取血及肝组织标本,检测血清AST、ALT、LDH、NO、ET-1、TNF-α、及肝组织中髓过氧化酶（MPO）活性和肝细胞病理改变。结果：预处理组与再灌注对照组比较,肝功明显改善,NO含量升高,ET-1、TNF-α浓度和MPO活性明显降低,两组比较差异具有显著性。结论：缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤有明显保护作用,可能与提高内源性NO水平、减轻中性粒细胞在肝脏中的渗出和聚集、抑制ET-1、TNF-α的合成有关。     

缺血后处理和预处理对大鼠骨骼肌缺血-再灌注损伤的作用

目的 探讨缺血后处理( IPost)和缺血预处理(IPC)对大鼠骨骼肌缺血再灌注(IR)损伤的影响.方法 将40只大鼠随机分成缺血再灌注组(A组)、缺血后处理组(B组)、缺血预处理组(C组)、缺血预处理加缺血后处理组(D组)以及对照组(E组),采用切断患肢全部皮肤、肌肉和神经,保留患肢股动、静脉的动物模型,通过夹闭和开放股动、静脉造成骨骼肌缺血再灌注损伤,通过测定骨骼肌缺血4h、再灌注1h后血清丙二醛(MDA)和骨骼肌髓过氧化物酶(MPO),以及再灌注6h后骨骼肌的坏死程度来观察缺血后处理.缺血预处理及缺血预处理加缺血后处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的影响.结果 B组、C组和D组再灌注1 h MDA和MPO水平以及再灌注6h骨骼肌坏死程度均低于A组(P＜ 0.05),但是高于E组(P＜0.05);B组和D组再灌注1 h MDA和MPO水平以及再灌注6h骨骼肌坏死程度基本相同(P＞0.05);B组和D组再灌注1 h MDA和MPO水平低于C组(P＜0.05),但再灌注6h骨骼肌坏死程度基本相同(P＞0.05).结论 应用缺血后处理和缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤有一定的保护效果,联合应用缺血后处理和缺血预处理,对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用并没有明显增强.     

rhGH在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中保护和修复的作用

目的 探讨重组人生长激素（rhGH）在肝脏缺血再灌注损伤中的保护和修复作用及其机理。方法 Pringles法建立180只肝脏缺血再灌注损伤模型，随机分为：A、B、C、D四组。A组：rhGH预处理组（n=50），B组：作为A组的对照组（n=50）；A组：建模前连续7d给予重组人生长激素（rhGH）针剂皮下注射0．2IU／100g（体重）／d，B组分别给予等量的生理盐水。观察ALT、TNF-α、1L-α、丙二醛（MDA）肝脏能荷（Energycharge，EC）的变化，电镜观察肝脏超微结构变化。C组：rhGH治疗组（n=40），D组：作为C组的对照组（n=40）实验组建立模型后7d每天给予rhGH针剂皮下注射（0．2IU／100g），对照组分别给予等量的生理盐水；检测ALT、TNF-α、IL-1αEC、电镜观察肝脏超微结构的变化。结果 A、B两组：A组ALT、TNF—a、、IL-1α和MDA在各个时间点的水平明显低于B组（P〈0．05）。A组EC水平明显高于B组（P〈0．05）；B组电镜下可见肝窦内皮细胞破坏，肝细胞线粒体结构改变，A组肝细胞超微结构明显改善。C、D两组：ALT、TNF-α、明显降低，在7d（和）或14dC组与D组有显著性差异；C组EC7d、14d明显高于D组（P〈0．05）；C组肝细胞超微结构较D组亦有明显改善。结论 rhGH可能通过抑制了细胞因子（TNF-α、IL-1α，进一步减少MDA的生成，从而减轻了这些因子对肝脏损伤，rhGH对肝脏缺血再灌注损伤具有保护和修复作用；可以在肝脏缺血再灌注损伤后促进线粒体功能恢复，改善肝细胞能量代谢状态；rhGH在肝脏缺血再灌注损伤过程中，具有促进肝脏再生的作用。     

核因子κB抑制剂对缺血再灌注皮瓣TNF-α和ICAM-1表达的影响

目的观察缺血再灌注（I／R）期间，皮瓣肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（1CAM-1）表达及核因子κB（NF—κB）活性抑制剂的影响。方法雄性Wistar大鼠27只，随机分为对照组（A组）、I／R组（B组）及吡咯烷二硫氨基甲酸酯（PDTC）处理组（C组）。制备右下腹岛状皮瓣I／R模型。C组于再灌注前及早期，各静脉注射PDTC 300mg／kg。逆转录-聚合酶链式反应法检测皮瓣再灌注2、6h TNFα、ICAM-1 mRNA表达。测定再灌注12h皮瓣髓过氧化物酶活性（MPO）并行组织学观察。结果B组再灌注2、6h TNF—α、ICAM-1表达较A组明显增加（P〈0．01）。C组再灌注2、6hTNF—α、ICAM-1表达明显低于B组（P〈0．01，P〈0．05）；再灌注12h，组织MPO活性及中性粒细胞浸润、水肿情况明显减轻。结论再灌注早期炎症介质表达增加在皮瓣I／R损伤中起重要作用。NF—κB抑制剂可下调TNF—α和ICAM-1转录表达，明显减轻皮瓣I／R损伤。     

丙泊酚对大鼠肢体缺血-再灌注损伤脑组织TNF-α、NF-κB表达的影响

目的 研究丙泊酚对大鼠肢体缺血-再灌注损伤脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和核因子-κ B(NF-κB)表达的影响.方法 24只SD雄性大鼠随机均分为肢体缺血-再灌注组(A组),丙泊酚组(B组)和对照组(C组).制备A组和B组的大鼠模型,采用免疫组织化学方法检测TNF-α和NF-κB的表达,并行图像分析予以半定量.结果 A、B组大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的表达明显增高,A组明显高于B组(P＜0.01).结论 丙泊酚对肢体缺血-再灌注引起的脑损伤有一定程度的保护作用,其机制可能与下调大鼠肢体缺血-再灌注损伤脑组织TNF-α、NF-κB的过度表达有关.     

缺血后处理对小肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察缺血后处理减轻肠缺血再灌注引起的小肠及远隔脏器损伤的效果,并探讨其机制。方法将家兔48只随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组,每组16只。再灌注2 h 后采集各组动脉血、静脉血及部分肠道组织、肝、肺组织,测动脉血中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10水平,测静脉血中 ALT、AST、BUN,Cr、LDH、CK-MB 活性,测内毒素水平,测定血清及小肠、肝、肺组织 MDA、MPO、CAT、SOD 水平,HE 染色,观察肠黏膜损伤情况,细菌培养观察细菌易位率。结果与缺血再灌注组比较,缺血后处理组血清及小肠、肝、肺组织中 MDA、MPO 水平明显降低, SOD、CAT 水平明显升高,静脉血 ALT、AST、LDH、CK-MB、BUN 下降;动脉血中 TNF-α、IL-1β、IL-6、内毒素降低,IL-10水平升高,肠黏膜损伤评分明显降低。结论缺血后处理可以减轻肠黏膜损伤,减少内毒素易位,促进抗炎因子的激活,抑制炎性介质的过度释放,提升小肠组织及远隔脏器的氧自由基的抗氧化能力,减轻小肠及远隔脏器组织损伤。     

黄芪对梗阻性黄疸肝缺血再灌注大鼠肾损伤的影响

目的:探讨黄芪对梗阻性黄疸术后肝缺血再灌注肾脏功能损伤的影响。方法:选取60只大鼠,分为梗阻性黄疸组(A组)、梗阻性黄疸肝脏缺血再灌注组(B组)、梗阻性黄疸肝脏缺血再灌注+黄芪注射液组(C组)3组,每组20只,组内依据灌注时间点0、1、3、6、12 h分为5个亚组,每组4只。按时间点检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平及肾脏组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)含量。结果:与A组相同时间点比,其余两组BUN、Cr和TNF-α水平升高(P0.05);MDA、MPO含量升高,SOD含量减少(P0.05);C组血清和肾脏组织中各项指标的改变程度均明显低于B组(P0.05)。结论:黄芪能够保护梗阻性黄疸术后肝脏缺血再灌注引起的远端肾脏功能损伤,其与提高机体抗氧化能力,减少中性粒细胞聚集率、降低脂质过氧化及炎症反应相关。     

缺血预处理对大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制

目的 观察心肌细胞凋亡及其机制在大鼠心肌缺血再灌注损伤和缺血预处理中的作用.方法 将40只大鼠随机分成4组:对照组(A组)、60min缺血再灌注组(B组)、120min缺血再灌注组(C组)、缺血预适应组(D组);应用TUNEL法检测心肌组织的凋亡;心脏病理改变用光学和电子显微镜观察;检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、bcl-2和bax因子.结果 D组心肌细胞凋亡指数(11.36±4.23)%明显优于B组(18.14±7.69)%和C组(15.59±6.31)%,D组TNF-α、bel-2和bax的表达也明显优于B、C二组.结论 缺血预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞的凋亡;TNF-α、bcl-2和bax表达的抑制与缺血预处理保护机制有关.     

丙泊酚对大鼠缺血再灌注肾NF-κB、TNF-α表达的影响

目的 研究丙泊酚对大鼠肢体缺血再灌注损伤后肾组织中肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α，TNF-α）、核因子-κB（nuclear factor-κxB，NF-κB）表达的影响。方法 24只SD雄性大鼠，随机分为假手术对照组（A组），肢体缺血再灌注组（B组）和丙泊酚干预组（C组），每组8只。采用免疫组织化学方法检测TNF-α、NF-κB的表达，行图像分析半定量。结果 B组大鼠肾组织中TNF-α、NF-κB的表达明显高于A组（P〈0．05），C组明显低于B组（P〈0．05）。结论 肢体缺血再灌注后有明显肾损伤，丙泊酚对肢体缺血再灌注肾损伤有一定程度的保护作用，其机制可能与下调大鼠肢体缺血再灌注损伤肾组织中TNF-α、NF-κB的过度表达有关。     

抑肽酶在肠缺血-再灌注中对肝脏的保护作用

目的应用肠系膜上动脉阻断(SMAO)模型,观察抑肽酶在肠缺血-再灌注损伤过程中对肝脏的保护作用。方法24只日本大耳白兔随机平均分为:假手术组(A组),肠系膜上动脉(SMA)不作阻断;缺血-再灌注组(B组);抑肽酶治疗组(C组)。B、C两组采用家兔SMAO模型,阻断时间为45min。C组阻断前5min静注抑肽酶30000kIU/kg,随后以10000kIU·kg-1·h-1维持至实验结束。B、C两组在阻断前(I0)、阻断45min(I1)、再灌注1h(R1)、再灌注2h(R2)时观察血清丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、磷脂酶A2(PLA2)及肝脏组织形态学变化。A组在相应时点取样检测上述指标。结果(1)C组MDA、TNF-α、PLA2在R2时均明显低于B组(P<0·05),而B组明显高于A组(P<0·05)。(2)C组SOD在R2时明显高于B组(P<0·05)。结论抑肽酶减轻脂质过氧化反应,对肠缺血-再灌注损伤有一定保护作用。血清PLA2和TNF-α的产生和释放减少,可能减轻肠缺血-再灌注过程中对远隔离器官的损害,对肝脏有一定的保护作用。     

缺氧诱导因子-1α及基质金属蛋白酶-9在早期压疮中的表达及作用

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在早期压疮形成中的表达及其作用机制,以期寻找早期压疮干预靶点。方法将36只雄性SD大鼠随机分为3组,每组12只,10%水合氯醛麻醉。实验A、B两组采用特制压力装置在大鼠股簿肌处施压,两组压强相同但压力循环不同,A、B组分别给予3、5个缺血-再灌注循环(缺血2.0h,再灌注0.5h);对照组不予压力。实验终点,取受压中心(对照组取相同解剖部位)肌肉组织标本后实施安乐死。用实时荧光定量RT-PCR法测定HIF-1αmRNA表达水平,ELISA法检测MMP-9和丙二醛(MDA)含量,免疫组织化学染色法检测抗凋亡蛋白Bcl-2,TUNEL标记凋亡肌细胞。结果对照组、实验A组、实验B组HIF-1αmRNA表达水平分别为2.69±1.83、2.55±1.08、3.62±1.99,实验B组高于其他两组。三组MMP-9与MDA含量比较,差异有统计学意义(均P<0.01);实验A、B组显著高于对照组,实验B组显著高于实验A组(均P<0.01)。实验A组Bcl-2蛋白表达最高、对照组次之、实验B组最低;实验A组、B组、对照组凋亡指数(AI)分别为3.53%、7.00%、0.25%。MMP-9含量与AI、MDA呈显著正相关(均P<0.01),HIF-1αmRNA表达与Bcl-2表达呈显著负相关(P<0.01)。结论 HIF-1α在一定缺氧时间和程度范围内介导低氧反应,可对受压组织产生细胞保护作用,而在严重或持续缺氧时则可诱导受压组织细胞凋亡。MMP-9在压疮形成早期大量表达导致细胞外基质过度降解,可能促进受压组织不可逆损伤。