单侧输尿管梗阻肾间质纤维化大鼠肾组织PHB1和 PHB2的表达及意义

目的：观察单侧输尿管梗阻（ UUO）肾间质纤维化（ RIF）大鼠肾组织PHB1和PHB2的表达,并探讨其意义。方法80只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为模型组和假手术组各40只。模型组大鼠分离左侧输尿管后行双重结扎,假手术组只探查到肾包膜。于造模后第2周末和第4周末,每组各处死20只大鼠,取左侧肾组织进行肾脏病理学检查,并计算RIF指数;应用实时荧光定量PCR检测大鼠肾组织PHB1、PHB2、TGF-β1 mRNA;Western blot检测肾组织PHB1、PHB2、TGF-β1、Ⅳ型胶原（ Col-Ⅳ）和纤维连接蛋白（ FN）。结果与假手术组比较,模型组大鼠各时间点RIF指数增高,梗阻时间越长RIF指数越高,P均＜0．01;肾组织PHB1、PHB2 mRNA及蛋白表达均降低,梗阻时间越长表达水平越低,P均＜0．01;TGF-β1 mRNA及蛋白、Col-Ⅳ和FN蛋白表达均增高,P均＜0．01。肾组织PHB1蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ、FN呈负相关（ r分别为－0．86、－0．87、－0．70、－0．73,P均＜0．05）;PHB2蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ、FN呈负相关（r分别为－0．73、－0．81、－0．91、－0．84, P均＜0．05）;PHB1蛋白表达与PHB2蛋白表达呈正相关（ r＝0．78,P＜0．05）。结论在UUO所致RIF大鼠肾组织中,PHB1和PHB2表达显著降低,参与RIF的发生发展。     

氯沙坦对肾间质纤维化大鼠肾组织ACE2 mRNA、TGF-β1 mRNA表达的影响

目的研究氯沙坦对肾间质纤维化大鼠肾组织ACE2 mRNA、TGF-β1 mRNA表达的影响。方法复制腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠模型,随机分成氯沙坦组和模型对照组,氯沙坦治疗组大鼠予氯沙坦(10 mg·kg-1.d-1)混悬液灌胃30 d,模型组予等量蒸馏水灌胃,另设正常对照组予等量蒸馏水灌胃。在实验结束时留取血、尿、肾组织标本,检测Scr、BUN、24 h MTP等生化指标,采用Real Time PCR测定肾组织ACE2 mRNA、TGF-β1 mRNA表达水平。结果氯沙坦组较模型组Scr、BUN、24 h MTP均显著下降(P<0.01)。Real Time PCR结果显示模型组较正常组ACE2 mRNA表达水平下降(P<0.01),而TGF-β1 mRNA的表达水平反而增加(P<0.01);经治疗后氯沙坦组较模型组ACE2 mRNA表达水平明显增加(P<0.01),TGF-β1 mRNA的表达水平明显减少(P<0.01)。结论氯沙坦具有肾功能保护作用,其作用机制除了拮抗AT1R外,还可能与上调ACE2 mRNA表达水平,抑制TGF-β1 mRNA的表达水平而发挥抗肾间质纤维化作用有关。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织细胞外基质基因表达影响的研究

目的 探讨氯沙坦对糖尿病(DM)大鼠肾组织细胞外基质转化生长因子β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)mRNA表达的影响.方法 48只大鼠分为对照组;DM组:链脲佐菌素(STZ)70 mg/kg腹腔注射;氯沙坦干预组(氯沙坦组):氯沙坦30 mg·kg-1·d-1灌胃,检测各组在2、4、8 w的尿白蛋白及肾脏肥大指数;采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测TGF-β1、FN、Col-Ⅳ mRNA表达.结果 DM组和氯沙坦组中TGF-β1,Col-Ⅳ和FN mRNA的表达显著高于对照组(均P＜0.01);氯沙坦组TGF-β1 mRNA在4、8 w均低于DM组(P＜0.05或P＜0.01);氯沙坦组Col-Ⅳ在4、8 w时均低于DM组(均P＜0.05);氯沙坦组UAER在4、8 w时均低于DM组(均P＜0.05);氯沙坦组肾肥大指数在各时间段均略低于DM组(均P＞0.05).结论 氯沙坦具有抑制DM大鼠肾组织细胞外基质基因表达的作用.     

大黄酸对慢性移植肾肾病大鼠转化生长因子β1、结缔组织生长因子和纤维连接蛋白的影响

目的:探讨中药大黄酸对大鼠慢性移植肾肾病(CAN)模型肾功能、组织学、转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响.方法:F344近交系大鼠为供体、Lewis近交系大鼠为受体,左肾原位肾移植,建立30只CAN大鼠模型.将30只移植大鼠分成模型组(16只)和大黄酸治疗组(14只);在移植后1月、2月及4月分别收集大鼠的血、尿标本,检测肾功能及尿蛋白定量.移植后2月及4月分别宰杀大鼠,观察各组大鼠移植肾组织学变化及大黄酸对模型动物TGF-β1、CTGF和FN表达的影响.另取5只Lewis大鼠作对照组,行右肾切除,术后4月末行相应指标检测.结果:与模型组比较(1)大黄酸治疗组大鼠肾功能改善;肾组织学示肾间质纤维化及间质炎症明显改善;(2)大黄酸治疗组大鼠肾组织CTGF表达降低,细胞外基质FN明显降低.结论:大黄酸能改善CAN大鼠肾功能及肾组织慢性病变,降低CTGF表达,减轻肾脏纤维化.     

尿毒清颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化中氧化应激变化的影响

目的 观察尿毒清颗粒对单侧输尿管结扎模型大鼠肾小管间质的转化生长因子β1及肾组织氧化应激指标的改变,探讨氧化应激在肾间质纤维化中的作用.方法 将24只大鼠分为正常对照组(n=6)；假手术组(n=6)；手术组[单侧输尿管梗阻(UUO)n=6]；尿毒清组(n =6),14d后处死,检测各组大鼠的肾功能及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、丙二醛(MDA)含量.采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1mRNA表达水平.观察肾脏病理变化.结果 与假手术组比较,UUO组尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)升高,肾组织匀浆中MDA含量增加,T-SOD活性降低,TGF-β1 mRNA的表达明显上调,肾脏病理改变加重,尿毒清治疗后以上指标明显好转(均P＜0.05).结论 UUO可以诱导大鼠肾间质纤维化,氧化应激参与肾间质纤维化的形成,尿毒清治疗可明显改善.     

谊肾颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠的抗纤维化作用

建立腺嘌呤致慢性肾功能衰竭（CRF）大鼠模型,将60只Wistar大鼠随机分成模型对照组、正常对照组、洛汀新组、谊肾颗粒A组（10g／kg）、谊肾颗粒B组（5g／kg）,灌胃给药,连用6周。测定血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、纤维联接蛋白（FN）、层粘蛋白（LN）和尿蛋白水平,观察病理组织学变化,通过免疫组化法观察FN在肾组织中的表达。结果显示：①模型对照组血SCr、BUN及尿蛋白比正常对照组明显升高,模型成功;谊肾颗粒组血SCr、BUN及尿蛋白较模型对照组明显下降。②与模型对照组比较．谊肾颗粒组血LN降低,FN升高。③与模型对照组比较,谊肾颗粒组肾组织变性坏死及间质纤维化程度减轻,肾小管中的结晶性沉积物明显减少;细胞外基质FN积聚减少,肾小球硬化指数降低。认为谊肾颗粒能减轻肾小管变性坏死和肾小球硬化,通过抗肾脏纤维化作用延缓CRF进展。     

人参皂甙Rg1对TGF-β_1诱导的肾小管上皮细胞增殖及细胞外基质的影响

目的为人参皂甙Rg1（G-Rg1）治疗肾纤维化提供依据。方法取对数生长期NRK52E细胞分为五组。对照组仅加入含血清的DMEM培养基;TGF-β1组及G-Rg1低、中、高剂量组均加入TGF-β1使终质量浓度为5ng/ml;G-Rg1低、中、高剂量组再分别加入G-Rg1使终质量浓度分别为10、20、40ng/ml。干预1、3、5天时MTT法测定各组细胞增殖率;干预5天时ELISA法测定细胞培养上清液中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN水平。结果与对照组比较,细胞培养上清液Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN水平明显升高（P〈0.05）;细胞增殖率明显降低（P〈0.05）;与TGF-β1组比较,各G-Rg1干预组Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN水平均明显降低（P〈0.05）;细胞增殖率明显升高（P〈0.05）。结论 G-Rg1可抑制TGF-β1诱导肾小管上皮细胞增殖能力降低的作用,从而促进肾小管上皮细胞增殖,其机制可能与抑制Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN水平有关;G-Rg1可用于肾纤维化的治疗。     

丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的：探讨丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化的作用及机制。方法：30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丹参酮ⅡA组。结扎大鼠单侧输尿管建立肾间质纤维化动物模型。丹参酮ⅡA经腹腔注射，剂量为1．5mg／（kg·d）。术后第10天取梗阻侧肾组织作HE、Masson染色，观察肾间质病理改变。免疫组化法检测肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及Ⅰ型胶原的蛋白表达与定位。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测三者的mRNA水平。结果：模型组术后第10天梗阻侧出现明显的肾间质纤维化，肾组织TGF-β1、α—SMA和Ⅰ型胶原的蛋白及mRNA表达显著增加（P〈0．01）。丹参酮ⅡA组肾间质纤维化程度减轻，肾组织TGF-β1、α—sMA及Ⅰ型胶原表达下调（P〈0．05）。结论：丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化有明显的抑制作用，其机制可能与下调TGF-β1表达，抑制成纤维细胞增殖和表型转化，减少胶原沉积有关。     

肾络通对系膜增生性肾炎大鼠肾小球Col-Ⅳ、FN表达的影响

目的 观察化瘀通络中药肾络通对系膜增生性肾炎(MsPGN)大鼠肾小球系膜基质中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)表达的影响.方法 40只健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、苯那普利组、肾络通组.按文献报道方法复制MsPGN大鼠模型,采用免疫组织化学方法对Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)进行检测.结果 模型组与空白组比较,Col-Ⅳ和FN表达明显增强(P＜0.01);肾络通组、苯那普利组与空白组比较,Col-Ⅳ和FN表达明显降低(P＜0.01;P＜0.05).两治疗组相比,Col-Ⅳ的表达肾络通组低于苯那普利组(P＜0.05,P＜0.01),FN的表达苯那普利组低于肾络通组(P＜0.05).结论 化瘀通络中药肾络通能抑制Col-Ⅳ、FN的表达,延缓肾小球硬化的进一步发展.     

冬虫夏草对糖尿病肾病鼠肾组织转化生长因子β/C-myc表达的影响

目的:①研究糖尿病肾病(DN)模型鼠肾组织转化生长因子β(TGF-β)与C-myc的表达状况及C-myc基因在DN发病中的作用和意义;②研究冬虫夏草对TGF-β与C-myc基因表达的影响。方法:45只Wistar大鼠随机分为正常对照组N组,DN模型组D组,冬虫夏草干预组C组[冬虫夏草5·0g/(kg·d),灌胃]。第2、4、6周各组处死5只并收集标本,检测24h尿蛋白定量、血肌酐、血胆固醇、血三酰甘油、血TGF-β、血Col-Ⅳ及肾脏病理改变,应用免疫组化法检测肾组织TGF-β与C-myc基因的表达,并分析TGF-β与C-myc之间的相关关系。结果:C组24h尿蛋白定量低于D组(P<0·01),血肌酐、血胆固醇、血TGF-β、血Col-Ⅳ均低于D组(P<0·05),肾脏病变减轻,免疫组化显示D组TGF-β与C-myc基因的表达高于N组(P<0·05),C组TGF-β与C-myc基因的表达低于D组(P<0·05)。结论:冬虫夏草抑制肾组织TGF-β与C-myc基因表达,对早期DN可能具有保护作用。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对TGF-β1诱导肾成纤维细胞细胞外基质表达的影响水

目的：研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂对转化生长因子β1（TGF-β1）致肾间质纤维化作用的影响，探讨其抗肾间质纤维化的潜在作用。方法：体外培养大鼠肾成纤维细胞株（NRK／49F），利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）观察PPARγ配体15d-PGJ2及其激动剂曲格列酮和齐格列酮对TGF-β1诱导的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结缔组织生长因子（CTGF）、纤维连结蛋白（FN）和Ⅲ型胶原（ColⅢ）mRNA表达的影响，利用Western Blot方法观察PPARγ激动剂对TGF-β1诱导的FN蛋白表达的影响。结果：TGF-β1能显著增加NRK／49F细胞CTGF、FN和ColⅢmRNA表达，并呈剂量依赖和时间依赖效应。与TGF-β1刺激组相比，10μM 15d-PGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组叶SMA、CTGF、FN和ColⅢmRNA表达量显著减少，FN蛋白表达量显著下降。结论：PPA脚激动剂可抑制TGF-β1，诱导的肾间质成纤维细胞CTGF表达和细胞外基质（ECM）合成。     

罗格列酮对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2及Col-Ⅳ的影响

目的研究罗格列酮早期干预对STZ诱导的糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、MMP-2及Col-Ⅳ表达影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、糖尿病组(DM组,链脲佐菌素60mg/kg腹腔注射)、糖尿病罗格列酮治疗组(DR组,4mg·kg-1·d-1罗格列酮无菌水混悬液灌胃),10w后观察大鼠HbA1c,肾功能、肾指数、尿微量白蛋白及肾病理学变化,透射电镜观察肾超微结构改变,免疫组化法观察肾皮质TGF-β1、MMP-2及Col-Ⅳ表达变化。结果DM组尿素氮、肾指数、尿微量白蛋白及肾皮质TGF-β1、Col-Ⅳ表达显著高于C组(P<0·01),DR组较DM组明显减低(P<0·01);同时观察到DM组、DR组MMP-2较C组减低(P<0·01),而DR组较DM组显著升高(P<0·01);透射电镜观察DM组肾小球基底膜增厚、肾小球系膜细胞增生,经罗格列酮治疗后的DR组上述改变明显减轻。结论罗格列酮对糖尿病大鼠具有肾脏保护作用,其部分机制是通过下调肾皮质中TGF-β1、Col-Ⅳ蛋白表达,上调MMP-2表达。     

雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子β1、骨形成蛋白7及Gremlin表达的影响

目的:观察雷公藤多苷(TW)对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾组织转化生长因子β1( TGF-β1)、骨形成蛋白7(BMP-7)、Gremlin表达的干预,阐明TW延缓肾间质纤维化的机制. 方法:40只雄性SD大鼠随机分为实验组及对照组.实验组行高糖高脂饮食,并以链脲佐菌素腹腔注射建立DN大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为DN组和TW治疗组.治疗组经(日)灌胃TW(50 mg/Kg·d),第2、4、8、16周称鼠重并查24h尿蛋白定量及尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),第16周处死大鼠抽取血液,观察血清生化指标,摘除肾脏行组织切片,观察肾间质纤维化程度,免疫组化检测肾组织内TGF-β1、BMP-7、Gremlin的表达,借助RT-PCR和Western blotting方法检测肾组织内TGF-β1、BMP-7、Gremlin核酸及蛋白的表达. 结果:TW能减轻模型鼠蛋白尿,改善血清白蛋白,降低血清肌酐、尿素氮.下调模型鼠肾组织内TGF-β1、Gremlin的核酸及蛋白表达,上调BMP-7的核酸及蛋白表达.结论:TW可延缓肾组织纤维化,其机制可能与TW抑制促纤维化TGF-β1及下游细胞因子Gremlin的表达,上调抗纤维化因子BMP-7的表达相关.     

Suramin对环孢素A诱导的大鼠肾毒性的影响

目的 探讨Suramin对环孢素A（CsA）所致肾毒性的拮抗作用及其相关机制。方法 将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、CsA组、CsA+小剂量Suramin组和CsA+大剂量Suramin组,每组10只。分别给药5周后检测4组大鼠24h尿蛋白、尿α_1-微球蛋白（MG）、β₂-MG和N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）、血肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）、血尿酸（UA）和胱抑素C（Cys C）,并计算内生肌酐清除率（Ccr）。通过Masson三色染色法对大鼠肾脏组织进行染色并计算其肾间质纤维化指数。采用免疫组化法检测4组大鼠转化生长因子（TGF）-β₁、胶原（collagen）-Ⅰ和纤维连接蛋白（fibronectin）在肾组织中的表达并计算上述指标的平均光密度值（AOD）。结果 CsA组大鼠的尿α₁-MG、β_2-MG、NAG、BUN、UA和Cys C水平均明显高于对照组,Ccr水平明显低于对照组（P<0.05）。CsA+小剂量Suramin组和CsA+大剂量Suramin组大鼠的尿α₁-MG、β₂-MG、NAG、BUN、UA和Cys C水平均明显低于CsA组,Ccr水平均明显高于CsA组（P<0.05）。CsA组大鼠肾间质纤维化指数和TGF-β₁、collagen-Ⅰ、fibronectin的AOD值均明显高于对照组,CsA+小剂量Suramin组和CsA+大剂量Suramin组大鼠的上述指标均明显低于CsA组（P<0.05）。结论 Suramin能拮抗CsA诱导的大鼠肾毒性,TGF-β₁表达下调可能参与了Suramin抑制肾间质纤维化的病理生理过程。     

贵州苗药刺梨调控SIRT1-TGFβ/Smads信号途径延缓肾纤维化的机制

目的 探讨苗药刺梨延缓单侧输尿管、结扎术(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的作用机制.方法 将50只SPF级雄性SD大鼠,适应性喂养1 w后,随机分为假手术组和手术组;手术组行UUO,假手术组只行输尿管分离,但不结扎.术后第2天,手术组随机分为模型组、SIRT1激动剂组、刺梨中剂量组、氯沙坦钾组,每组10只.各组于分组当天参照马氏定理设定干预剂量.氯沙坦组给予氯沙坦10 mg/(kg·d),浓度为20%;刺梨中剂量给予刺梨冻干粉3 g/(kg·d),浓度为3%;SIRT1激动剂组给予白藜芦醇25 mg/d.模型组和假手术组均同时给予同等容积无菌生理盐水灌胃.实验大鼠均每天干预1次,连续干预14 d后处死大鼠.取大鼠肾组织做苏木素-伊红(HE)、Masson染色以观察其病理变化;免疫组织化学法测定Western印迹检测肾组织转化生长因子(TGF)-β1、TGF-βⅠ型受体(TGF-βRⅠ)、Smad2、Smad3、Smad7的表达;用RT-PCR技术检测TGF-β1 mRNA、TGF-βRⅠmRNA、Smads2、Smad3、Smad7 mRNA的表达.结果 与假手术组比较,模型组病理损伤程度显著增加,丙二醛(MDA)含量增加、超氧化物歧化酶(SOD)含量降低(P<0.01),TGF-β1、TGF-βRⅠ的表达水平明显增加(P<0.05).与模型组比较各治疗组病理损伤减轻,TGF-β1、TGF-βRⅠ表达减少,Smda2、Smad3的表达降低,Smda7表达增加(均P<0.05).刺梨中剂量组与SIRT1激动剂组比较差异无显著性(P>0.05).结论 刺梨冻干粉与SIRT1激动剂(白藜芦醇)均可减轻单侧输尿管结扎肾间质纤维化大鼠的肾组织脂质过氧化物的产生,同时能增加抗氧化酶的含量,保护受损肾小管上皮细胞,有效改善肾脏纤维化病变.其机制可能与其富含维生素C、SOD、刺梨黄酮等多种抗氧化成分,激活体内SIRT1,从而活化Smda7以下调TGF-β1、TGF-βRⅠ及Smda2、Smad3的表达有关.     

当归芍药散含药血清及其有效成分对肾间质纤维化大鼠的作用及机制

目的 探讨当归芍药散（DSS）含药血清及其有效成分阿魏酸（FA）、芍药苷（PF）对肾间质纤维化（RIF）大鼠的作用及机制。方法 制备当归芍药散药液,以低剂量（0.05 mL DSS药液/10 g体质量）、中剂量（0.1 mL DSS药液/10 g体质量）、高剂量（0.2 mL DSS药液/10 g体质量）每日同一时间灌胃雄性Sprague Dawley大鼠,持续7 d,腹主动脉取血获得相应低、中、高剂量DSS血清（DSSS）。将大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）分成对照组、模型组（TGF-β处理）、siRNA转染组（TGF-β+siRNA处理）、FA组（TGF-β+FA处理）、PF组（TGF-β+PF处理）及DSSS低、中、高剂量组（TGF-β+DSSS-L、TGF-β+DSSS-M、TGF-β+DSSS-H分别处理）。筛选并确定DSSS、FA、PF、TGF-β对NRK-52E细胞的干预浓度,对以上各组NRK-52E细胞进行干预。采用Western blotting法检测各组NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(CASP-1)、Gasdermin D(GSDMD)、白细胞介素-18(IL-1...     

UUO大鼠肾间质损伤及柳氮磺吡啶对其的影响

目的观察单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾间质损害的病理改变及核因子-κB p65（NF—κB p65）和转化生长因子β1（TGF-β1）在肾间质表达变化,探讨柳氮磺吡啶对肾间质损害的影响。方法60只SD大鼠随机分为3组,假手术组（SOR组）、模型组（UUO组）、柳氮磺吡啶干预治疗组（SASP组）。各组手术后第7、14天分别取梗阻侧肾组织行HE染色及免疫组化染色,观察肾脏组织病理变化及NF—κB p65和TGF-β1在肾间质的表达。结果HE染色图像分析显示,UUO组大鼠术后梗阻侧肾脏呈现肾间质损害及纤维化病变,SASP组肾小管损伤指数较UUO组明显减轻;SASP组肾组织间质NF—κB p65及TGF-β1表达较UUO组显著下降。结论UUO大鼠肾间质损害随梗阻时间延长逐渐加重,柳氮磺吡啶干预后在一定程度上能抑制NF—κB p65及TGF-β1表达,从而减轻肾间质炎性损害,可能对早期肾间质纤维化有防治作用。     

百令(冬虫夏草)对糖尿病大鼠转化生长因子β及其受体表达的影响

目的:探讨百令(冬虫夏草)对STZ糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β(TGF-β)及其Ⅰ型(TβRI)、Ⅱ型受体(TβRⅡ)的影响及其可能作用机制。方法:采用STZ腹腔注射法建立糖尿病动物模型。96只3月龄雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组,糖尿病模型对照组,百令提取液低剂量治疗组[5g/(kg.d)]、中剂量治疗组[10g/(kg.d)]和高剂量治疗组[20g/(kg.d)]。第4、8、12周各组处死6只大鼠并收集标本,记录体重、左肾重,检测血糖、血肌酐、24h尿蛋白排泄量,ELISA法检测24h尿TGF-β水平。RT-PCR法、Westernblot法及免疫组化法检测肾组织TGF-β、TβRⅠ、TβRⅡ及纤维连接蛋白(FN)mRNA及蛋白质表达水平。结果:糖尿病模型大鼠血糖及24h尿蛋白排泄量明显增高,肾组织TGF-βmRNA和蛋白质表达以及TβRⅠ、TβRⅡ和FNmRNA表达均在8周时达到高峰值,12周时表现下降;TβRⅠ、TβRⅡ及FN蛋白质表达在12周内表现进行性升高。百令治疗可时间-剂量依赖性降低糖尿病大鼠血肌酐水平,肾重指数下降。百令治疗可下调糖尿病大鼠肾组织TGF-β、TβRⅠ、TβRⅡ及FNmRNA及蛋白质的表达水平。结论:百令可减少TGF-β的产生,下调TβRⅠ、TβRⅡ表达,降低肾内TGF-β系统活性,延缓糖尿病肾病的发展。     

冬虫夏草对糖尿病肾病模型鼠肾组织转化生长因子β1、结缔组织生长因子表达的影响

目的观察冬虫夏草制剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨冬虫夏草制剂抗肾纤维化的作用机制.方法45只Wistar大鼠随机分为正常组、DN模型组、冬虫夏草组.虫草组予人工冬虫夏草粉5.0g/(kg·d)进行干预.第2、4、6周处死大鼠(每组5只).检测24h尿蛋白定量、血肌酐(SCr)水平和肾组织病理变化;用免疫组化法检测肾组织CTGF、Ⅳ胶原(ColⅣ)的表达;用RT-PCR法检测肾组织TGF-β1、CTGF、ColⅣmRNA的表达.结果DN模型组尿蛋白排泄明显增加(P＜0.01),SCr水平上升(P＜0.05)同时肾组织内细胞基质增多,TGF-β1、ColⅣ和CTGF出现高表达.冬虫夏草制剂干预,与DN模型组比较,虫草干预组尿蛋白排泄明显减少,SCr水平降低,肾组织病理改变减轻,并且肾组织中TGF-β1、CTGF、ColⅣ表达均有下调(P＜0.05或P＜0.01).结论冬虫夏草制剂对DN具有一定肾保护作用及抗肾小球纤维化的作用,其作用机制可能是通过使TGF-β1、CTGF的表达下调而实现的.     

螺内酯抑制大鼠单侧输尿管梗阻后肾间质纤维化

目的探讨螺内酯对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法2004-12～2005-03对UUO大鼠给予螺内酯20mg·kg-1·d-1及50mg·kg-1·d-1灌胃,观察第14天血清钾、钠、肌酐、血压的变化及肾间质纤维化程度、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),纤维连接蛋白(FN)的表达。结果与UUO组相比,两治疗组血清钾、钠、肌酐、血压差异均无显著性(P>0.05),肾小管间质纤维化程度,TGF-β1、α-SMA、FN的表达与UUO组差异有显著性(P<0.05),两治疗组之间差异无显著性(P>0.05)。结论螺内酯可通过抑制细胞因子释放和肾小管-间质细胞的表型转化等非血压依赖机制延缓肾间质纤维化。