N-甲基-D-天门冬氨酸受体和Ca2+在1,2-二氯乙烷致急性中毒性脑病中的作用

目的 研究1，2-二氯乙烷（1，2-DCE）致大鼠中毒性脑病模型中N-甲基-D-天门冬氨酸受体（NMDAR）和Ca^2＋的相关作用机制。方法 体外培养新生SD大鼠脑皮层细胞，将细胞分为对照组及0．5、1．0、2．0mmol／L染毒组，同时研究染毒后分别用二者的拮抗剂氯胺酮、尼莫地平将二者拮抗后，观察细胞形态学和活力的变化。结果 染毒12h后，神经细胞形态发生明显改变，胞体肿胀崩解，胞核模糊不清，突触变短、变粗，细胞间连接减少，细胞膜不完整，随着染毒剂量的增高，神经细胞损伤的严重程度呈上升趋势；各染毒组与对照组和拮抗组的神经细胞活力比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论 NMDAR和Ca^2＋在1，2-DCE致神经细胞中毒性脑水肿机制中可能起重要作用。     

钙离子在1,2-二氯乙烷致急性中毒性脑病中的作用

目的探讨1,2-二氯乙烷(1,2-DCE)致大鼠急性中毒性脑病模型中细胞内钙离子的作用。方法离体培养新生SD大鼠脑皮质细胞,设对照组和1、2-DCE低、中、高剂量组,尼莫地平拮抗组。1,2-DCE终浓度分别为0.5、1.0、2.0 mmol/L,拮抗组尼莫地平终浓度为5.0 mmol/L。观察各组神经细胞超微结构、活力及细胞内钙离子浓度的变化。结果与对照组相比,高剂量组神经细胞超微结构有不同程度的损伤,各剂量组细胞活力下降(P0.01);染毒后24 h内,随着染毒剂量的增加各剂量组细胞内钙离子浓度呈上升趋势,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01);随着染毒时间的延长,低、中剂量组钙离子浓度呈单峰状,高剂量组呈双峰状;拮抗组神经细胞超微结构较高剂量组有明显改善,细胞活力高于高剂量组(P0.01)。染毒早期和后期细胞内钙离子浓度低于高剂量组(P0.01)。结论 1,2-DCE及其代谢产物可致神经细胞水肿坏死,随着染毒剂量的增加各染毒组细胞内钙离子浓度升高,神经细胞损伤严重程度呈上升趋势,而钙离子通道拮抗剂尼莫地平可缓解神经细胞受损程度,提示钙离子在1,2-DCE致神经细胞中毒性脑病中起到重要作用。     

乙醇对小鼠肝组织脂质过氧化和ATP酶活力的影响

目的探讨乙醇对小鼠肝组织脂质过氧化和ATP酶活力的影响及意义。方法将60只小鼠随机分为高、中、低3个染毒剂量组和1个对照组。3个染毒剂量组分别以不同剂量经口染毒3d后,对各组肝组织进行过氧化物歧化酶（SOD）活力、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）活力、丙二醛（MDA）含量以及Na^＋K^＋ -ATP酶活力、Ca^2＋ -Mg^2＋ -ATP酶活力的测定。结果与对照组比较,乙醇染毒组小鼠肝组织中SOD、GSH—Px活力明显下降、MDA浓度显著增高,差异均有统计学意义（P〈0．01）;与对照组比较,高、中剂量染毒组ATP酶活力呈显著下降趋势,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论乙醇所致对小鼠肝组织脂质过氧化增强和A11P酶活力的下降,可能是乙醇导致肝功能损伤的机制之一。     

混配农药对家兔诱发电位及脑组织ATP酶的影响

目的研究混配农药对家兔中枢神经系统功能的影响及其机制。方法将家兔随机分为混配农药染毒A组（丙溴磷与氰戊菊酯混配染毒组）、混配农药染毒B组（丙溴磷与灭多威？昆配染毒组）和1个对照组，每组6只。3个染毒组分别给予3种染毒剂量进行染毒，于染毒前后进行家兔体感染诱发电位（SEP）及染毒后大脑组织三磷酸腺苷（ATP）酶活力的测定。结果与对照组比较，2个混配农药染毒组的高剂量组染毒后SEP的N1、P1、N2波潜伏时均显著延长（P〈0．01），2个混配农药染毒组的高中剂量组染毒后的Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的活力明显下降（P〈0．05。P〈0．01）。结论一定剂量的混配农药可导致家兔中枢神经系统功能的的改变，这种改变可能与大脑组织中N^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2^＋-ATP酶活力的下降有关．     

Nec-1对铝作用下神经细胞活力及凋亡、自吞噬基因的影响

[目的]研究坏死性抑制剂Necrostatin-1（Nec-1）对铝（Al）作用下的神经细胞活力及凋亡、自吞噬基因的影响。[方法]体外原代培养小鼠神经细胞,通过2mmol／LAl3＋作用于神经细胞制造铝损伤模型,加入不同剂量的Nec-1,用细胞活力检测（CCK-8）和逆转录．聚合酶链反应（RT．PCR）的方法观察Nec-1对染铝神经细胞的作用。[结果]细胞活力检测：以2mmol／LAl3＋染毒组作为对照,30μmol／LNec-1组的细胞活力与对照组比较,差别有统计学意义（P〈0．05）,60、90μmol／LNec-1组与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）.RT-PCR结果：2mmol／LAl3＋染毒组caspase-3基因的表达为0．98±0．120,而Nec-160μmol／L组和Nec-190μmol／L组caspase-3的表达分别为0．50±0．077和0．44±0．050,同对照组相比,两组caspase-3的表达均下降（P〈0．01）。2mmol/LAl3＋染毒组的LC3-Ⅱ基因的表达为1,82±0．047,而60μmol／LNec-1组和90μmol／LNec-1组的LC3．口表达分别为1．00±0．022和0．97±0．035,同对照组相比,两组LC3-Ⅱ的表达均呈下降（P〈0．01）。[结论]Nec-1可使铝作用下的神经细胞活力上升,并使神经细胞的自吞噬和凋亡基因表达下降。     

二硫化碳对大鼠视网膜组织诱导型一氧化氮合酶及细胞凋亡的影响

目的探讨二硫化碳（CS2）对大鼠视网膜组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）及细胞凋亡的影响。方法将24只SD雄性大鼠随机分为对照组、低剂量CS2染毒组和高剂量CS2染毒组，染毒结束后取视网膜组织制成切片，测量内视网膜厚度比率，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶染色（NADPH-NDP）法检测iNOS活力，原位缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡。结果（1）染毒组的内视网膜（包括内核层、内丛状层、节细胞层、神经纤维层和内界膜）厚度减小，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；高剂量染毒组与低剂量染毒组之间差异亦有统计学意义（P〈0．05）。（2）染毒组视网膜iNOS表达增加，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；高剂量染毒组与低剂量染毒组之间差异亦有统计学意义（P〈0．05）。（3）染毒组视网膜出现细胞凋亡，凋亡指数与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；高剂量染毒组与低剂量染毒组之间差异亦有统计学意义（P〈0．05）。结论CS2能激活视网膜组织iNOS表达，由此产生的过量的NO可损伤视网膜细胞。同时，视网膜细胞凋亡也是CS2所致视网膜损害的机制之一。     

铝对大鼠大脑皮层和海马神经细胞钙浓度影响

目的探讨染铝大鼠中枢神经系统中大脑皮层和海马神经细胞内游离钙浓度([Ca^2 ]i)的动态变化及可恢复性。方法对wistar大鼠进行亚慢性染毒，分别在染毒第45，75，120d和染毒结束后30d，应用钙离子荧光指示剂Fura-2／AM测定大鼠大脑皮层和海马神经细胞[Ca^2 ]i。结果中剂量组(74．7mg／kg)在染毒的各个时期内均表现为[Ca^2 ]i高于对照组，而高剂量组(248．7mg/kg)在染毒的第120d才表现为[Ca^2 ]i明显增高，低剂量组(37．3mg／kg)在各个染毒时期与对照组相比均无显著性差异。在停止接触铝30d后，各实验组与对照组相比无显著性差异，并且高、中剂量组表现出[Ca^2 ]i有降低的趋势。结论铝可通过逐渐增加大脑皮层和海马神经细胞内游离钙浓度([Ca^2 ]i)而发挥神经毒性作用。     

Fe2O3纳米颗粒对人肝癌细胞游离钙的影响

[目的]探讨三氧化二铁（Fe2O3）纳米颗粒对人肝癌细胞（HepG2细胞）形态学和游离钙（[Ca^2＋]i）的影响,为研究Fe2O3纳米颗粒诱导细胞凋亡的机制提供依据。[方法]以不同浓度（0.173、0.347、0.694g／L）的Fe2O3纳米颗粒对HepG2细胞染毒1、12、24h,用激光扫描共聚焦显微镜检测HepG2细胞[Ca^2＋]i荧光强度的变化。[结果]与对照组相比,染毒不同时间各染毒组细胞内[Ca^2＋]i含量差异均有统计学意义（P〈0.05）;染毒不同浓度时,Fe2O3纳米颗粒均能不同程度地引起HepG2细胞的形态学改变及其细胞内[Ca^2＋]i的升高。0.347、0.694g／L组染毒不同时间点的平均荧光强度分别为127.33±20.13、108.88±19.15、144.00±13.86和119.67±1.15、122.35±11.47、186.40±17.34,均明显高于对照组54.33±6.43,差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]HepG2细胞凋亡可能与Fe2O3纳米颗粒引起的细胞[Ca^2＋]i升高有关。     

热休克蛋白70的表达在二氢二醇环氧苯并(a)芘致DNA损伤中的作用

目的研究热休克蛋白70（HSP70）的表达在二氢二醇环氧苯并（a）芘（BPDE）致DNA损伤中的作用。方法培养人肺腺癌A549细胞，作如下处理：BPDE染毒组：以不同剂量BPDE（0、2、4、8pmol／L）染毒2h；预热＋BPDE染毒组：细胞预热（42℃ 2h，37℃恢复1h）后，再按BPDE染毒组同样处理，各组均设溶剂对照。采用单细胞凝胶电泳技术和Western blot法分别检测DNA的损伤情况与HSP70的表达。结果（1）DNA损伤情况：BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒剂量增加而加强，明显高于溶剂对照，差异有统计学意义（P〈0．01），组间相互比较，差异亦有统计学意义（P〈0．01），且DNA损伤程度与BPDE染毒剂量呈正相关（r=0．96，P〈0．05）；预热＋BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒浓度递增，与预热溶剂对照相比，差异有统计学意义（P〈0．01），但在4、8μmol／L的BPDE组间，DNA损伤程度的差异无统计学意义（P〉0．05），与BPDE染毒组比较，各剂量下DNA损伤程度均明显增加。（2）HSP70表达情况：BPDE染毒组在2、4μmol／L的BPDE作用时HSP70表达逐渐升高，与溶剂对照相比，差异有统计学意义（P〈0．05），但在8μmol／L剂量时，表达下调，与溶剂对照组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）；预热＋BPDE染毒组HSP70的表达均比预热溶剂对照明增加，在4μmol／L的BPDE作用时HSP70表达水平最高，与2、8μmol／L剂量组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。与BPDE染毒组相比，各剂量下HSP70的表达水平均明显增加，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论HSP70对BPDE所致A549细胞DNA损伤的保护作用并不明显。     

铅对家兔脑组织血管内皮物质及ATP酶活力的影响

目的探讨铅对家兔脑组织一氧化氮含量及ATP酶活力的影响及其机制。方法将32只家兔随机分为1个对照组和高、中、低3个染铅剂量组。经不同剂量醋酸铅灌胃染毒5d后,测定各组脑组织中内皮素（ET）、一氧化氮（NO）的含量及Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的活力。结果高、中剂量染毒组ET浓度较对照组显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,3个剂量染毒组NO浓度均较对照组显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;高、中剂量染毒组Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活力均较对照组显著降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论铅可造成家兔脑组织血管内皮活力物质及ATP酶活力的异常,这种改变可能与铅所致中枢神经系统功能损害有关。     

1，2-二氯乙烷致中毒性脑病中神经细胞的变化

目的用体外实验方法研究1,2-二氯乙烷染毒后神经细胞形态学的变化。方法将体外培养的新生SD大鼠的脑皮质细胞,分为设对照组、低、中、高剂量组,观察各组细胞形态学、超微结构和细胞活力的变化。结果染毒后神经细胞形态和超微结构均发生明显变化：在荧光显微镜下随着染毒剂量的增高,细胞核由亮绿色变为桔红色,胞体胀大甚至消失;在透射电镜下染毒组神经细胞的细胞核核膜溶解消失,染色质聚集深染,线粒体和内质网等细胞器肿胀,崩解,且线粒体嵴排列紊乱甚至消失;各染毒组神经细胞活力比对照组有所下降,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论1,2-二氯乙烷可以导致神经细胞水肿坏死,并且有剂量依赖关系,随着染毒剂量的增加神经细胞破坏程度越大。     

低氧及跑台运动对大鼠心肌线粒体钙浓度的影响及机制探讨

目的探讨低氧及跑台运动对大鼠心肌线粒体钙及钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活力的影响。方法大鼠分为常氧对照组、常氧运动组、低氧对照组和低氧运动组。用MPA-心功能分析系统记录血压和心率,用荧光分光光度法测心肌线粒体钙浓度,用化学比色法测心肌线粒体Na^＋-K^＋-ATPase和Ca^2＋Mg^2＋ATPase活力。结果①与常氧对照组比较,常氧运动组和低氧运动组心肌线粒体ca“浓度升高（P〈0．01,P〈0．05）,低氧对照组降低（P〈0．05）;与低氧对照组比较,常氧运动组和低氧运动组也升高（P〈0．01）。②与常氧对照组比较,常氧运动组和低氧运动组心肌线粒体Na^＋．K^＋．ATPase活力升高（P〈0．05,P〈0．01）,低氧对照组活力降低（P〈0．05）。③与常氧对照组比较,常氧运动组和低氧运动组心肌线粒体Ca^2＋Mg^2＋ATPase活力升高（P〈0．05,P〈0．01）,低氧对照组活力降低（P〈0．05）。结论单纯低氧对大鼠心肌线粒体钙浓度的影响与运动的影响相反,Na^＋-K^＋-ATPase和Ca^2＋Mg^2＋．ATPase活力的改变是原因之一。     

微波预先辐照致γ射线对小鼠骨髓基质细胞毒性作用的改变

[目的]探讨微波预先辐照对γ射线致骨髓基质细胞凋亡、线粒体膜电位、胞内游离Ca^2＋浓度和Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性改变的影响。[方法]将原代培养的骨髓基质细胞随机分为正常对照组、单纯微波组、单纯γ射线组和联合组。12μW／cm。微波对单纯微波组和联合组连续辐照7d,每天1h,第8天对单纯丫射线组和联合组进行5Gy的γ射线照射。用钙离子依赖性磷脂结合蛋白．异硫氰酸荧光素及碘化丙啶（Annexin V-FITC及PI）双标记法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测线粒体膜电位和胞内游离Ca^2＋浓度,试剂盒检测Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性。[结果]与正常对照组相比,各处理组细胞的凋亡率和线粒体膜电位未见明显改变。γ射线照射后24h,单纯微波组、联合组和单纯γ射线组细胞内游离Ca^2＋浓度明显升高（P〈0．05）,Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性明显降低（P〈0．05）.与单纯γ射线组相比,联合组细胞内游离Ca^2＋浓度明显降低（P〈0．05）,Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性明显升高（尸〈0．05o[结论]本实验条件下,900MHz,12μW／cm。的微波辐射和5Gvl,射线均不能引起细胞凋亡率、线粒体膜电位的明显变化,但能导致胞内游离Ca^2＋浓度明显上升和Ca^2＋ ATP酶活性明显降低。预先微波辐照能够明显减弱γ射线引起的胞内游离Ca^2＋浓度和Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性改变。     

氯化铝致原代培养小鼠神经细胞毒性作用及对mGluR3表达的影响

[目的]探讨铝对原代培养神经细胞的毒性作用及对代谢型谷氨酸受体3（metabotropic glutamate receptors,mGluR3）基因表达的影响。[方法]采用结晶氯化铝（AlCl3·6H2O）分别对原代培养昆明小鼠的神经细胞染毒,使其终浓度分别为0mmol/L（对照组）、0．5mmol／L（低剂量组）、1．0mmol／L（中剂量组）和2．0mmol／L（高剂量组）,染毒48h后,采用CCK培试剂盒,使用酶联免疫仪检测细胞活力,采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）法测定mGluR3基因的表达。[结果]与对照组比较,高剂量组细胞活力明显下降（P〈0．05）;RT-PCR测定结果显示高剂量组相对于对照组mGluR3表达量明显降低（P〈0．05）。[结论]铝对原代培养的神经细胞产生细胞毒性可能与mGluR3基因表达降低有关。     

低强度微波对盐酸阿霉素致人早幼粒白血病细胞损伤的影响

[目的]探讨低强度微波辐射对盐酸阿霉素（DOX）致人早幼粒白血病HL-60细胞损伤的影响。[方法]将HL-60细胞随机分为对照组、单纯微波组、单纯DOX组和联合组（微波＋DOX）。单纯微波组和联合组都给予12μW／cm。微波照射,1h／d,连续辐照3d,对照组和单纯DOX组置于同一环境,但不给予电磁辐射。第4天分别给予单纯DOX组和联合组以浓度为0．125mg／L的DOX。用钙离子依赖性磷脂结合蛋白一异硫氰酸荧光素／碘化丙啶（Annexin V—FITC／PI）检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测线粒体膜电位和胞内游离Ca^2＋浓度。[结果]与对照组相比,单纯DOX组凋亡率明显增加（P〈0．05）;线粒体膜电位明显下降（P〈0．05）;胞内游离Ca^2＋浓度明显升高（P〈0．05）。与单纯DOX组相比,联合组凋亡率明显降低（P〈0．05）;线粒体膜电位明显升高（P〈0．05）;游离Ca^2＋浓度明显降低（P〈0．05）。[结论]预先900MHz、12μW／cm^2低强度微波照射能够明显减轻DOX引起的细胞损伤。     

后肢接振对新西兰兔脑组织某些酶活力的影响

目的探讨振动对新西兰兔脑组织超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合酶（NOS）、三磷酸腺苷酶（ATPase）酶的影响及意义。方法将新西兰兔随机分为A组（接振强度3．04m／s^2），B组（接振强度6．13m／s^2），C组（接振强度12．26m／s^2）和1个对照组，接振后测定各新西兰兔脑组织SOD、NOS、ATP酶的活力。结果与对照组比较，接振后C组SOD活力增强，差异有统计学意义（P〈0．01）；B和C组NOS活力降低，差异有统计学意义（P〈0．01）；B组和C组Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活力均降低，差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论振动可致新西兰兔脑组织SOD活力增强，ATP酶和NOS活力均降低，这可能与振动导致脑组织损伤有关。     

血管紧张素Ⅱ对缺氧血管内皮细胞内Ca^2＋浓度的影响及地尔硫卓的保护作用

目的观察缺氧条件下血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人大血管内皮细胞内Ca^2＋浓度变化的影响,以及地尔硫卓对其的保护作用,为进一步的临床研究提供药理学基础。方法将培养的血管内皮细胞分为4组：对照组、缺氧组、缺氧＋AngⅡ组和缺氧＋AngⅡ＋地尔硫卓组。应用激光共聚焦显微镜测量各组内皮细胞内Ca^2＋浓度。结果上述4组血管内皮细胞内Ca^2＋浓度（荧光值）分别为28.46±5.29、40.08±7.80、51.66±8.93、35.49±7.79。缺氧组、缺氧＋AngⅡ组细胞内Ca^2＋浓度明显高于对照组（P〈0.01）;缺氧＋AngⅡ＋地尔硫卓组细胞内Ca^2＋浓度明显低于缺氧组、缺氧＋AngⅡ组（P〈0.01）,接近于对照组（P〉0.05）。结论缺氧及AngⅡ可引起血管内皮细胞内Ca^2＋浓度增加。地尔硫卓能阻止缺氧及AngⅡ引起的内皮细胞内Ca^2＋浓度升高,对细胞内Ca^2＋超载具有保护作用。     

神经肽Y对大鼠心肌细胞肌浆网钙的影响

目的观察神经肽Y（NPY）刺激对大鼠心肌细胞肌浆网（Sarcoplasmic Reticulum,SR）内钙含量的影响。方法用100nmol·L^-1NPY刺激Sprague-Dawley乳鼠心肌细胞24h,用荧光染料Fluo-4AM负载胞浆钙,并用咖啡因诱导的胞浆钙瞬变（Caffeine-induced Ca2＋ transient,CCT）幅度来反映肌浆网内总钙负荷;用荧光染料Fluo-5NAM直接标记心肌细胞肌浆网内游离钙离子。所有钙影像均由LeicaSP2激光共聚焦显微镜记录。结果经100nmol·L^-1NPY刺激24h后,心肌细胞肌浆网内游离钙含量明显低于对照组（p〈0.01）;咖啡因诱导下钙瞬变幅度也低于对照组。结论长时间的NPY刺激可导致肌浆网内钙含量减少。     

泮托拉唑治疗急性胰腺炎疗效观察

目的探讨泮托拉唑治疗急性胰腺炎的临床应用价值。方法选择本院消化内科诊治的急性胰腺炎患者92例,随机分为观察组和对照组,在常规治疗的基础上,观察组患者静脉滴注泮托拉唑,对照组患者静脉滴注西咪替丁。比较治疗效果,检测并比较两组患者治疗前后血白细胞、Ca^2＋及ALT水平。结果观察组患者治疗总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。与治疗前相比,观察组患者血白细胞、Ca^2＋及ALT水平明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后,观察组患者血白细胞、Ca^2＋及ALT水平均低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论泮托拉唑用于治疗急性胰腺炎效果好,具有较高的临床应用价值。