槲皮素对放射性肺损伤小鼠影响研究

目的：建立放射性肺损伤小鼠模型,研究槲皮素防治小鼠放射性肺损伤的疗效及机制。方法：80只雌性BALB／C小鼠随机分为6组,1）正常对照组8只,虚拟照射前小鼠尾静脉注射100μL生理盐水,30min后虚拟照射,照射后按每周2次经小鼠尾静脉注射生理盐水,每次100μL;2）单纯给药组8只,虚拟照射（加速器不出射束）前小鼠尾静脉注射100μL槲皮素溶液,30min后虚拟照射,照射后按每周（6周内）2次经小鼠尾静脉注射槲皮素溶液,每次100μL;3）单纯照射组16只,单次全胸部照射10Gy;4）照射＋高剂量给药组16只,单次全胸部照射10Gy＋小鼠尾静脉注射槲皮素溶液（4mg／mL）,给药体积为100μL;5）照射＋低剂量给药组16只,单次全胸部照射10Gy＋小鼠尾静脉注射槲皮素溶液（2mg／mL）,给药体积为100ML;6）阿米福汀对照组16只,单次全胸部照射10Gy＋小鼠尾静脉注射阿米福汀（4mg／mL）,给药体积为100μL。分别于照射后1～8周每周取各实验组小鼠双侧肺组织,HE染色观察实验小鼠肺组织炎性病理变化,确定肺泡炎程度。采用免疫组织化学法和蛋白质印迹法观察槲皮素对NF-xB表达的影响。结果：HE染色结果显示,单纯照射组小鼠肺组织出现明显炎症反应,表现为肺出血和充血,大量的慢性炎细胞浸润。小鼠肺泡炎分级,与单纯照射组相比,照射＋高剂量给药组和照射＋低剂量给药组肺泡炎程度明显减轻,P〈0．05;而高低剂量给药组之间,肺泡炎程度差异无统计学意义,P〉0．05,且与阳性对照组（阿米福汀）相比,差异无统计学意义,P〉0．05。免疫组化检测肺组织发现,照射＋高剂量给药组和照射＋低剂量给药组的小鼠肺组织胞核NFxB蛋白表达降低,分别为1．38±0．8和1．32±0．74;胞质Ixb—a蛋白表达升高,分别为1．6±0．14和2．06±0．12,较单纯照射组差异有统计学意义,P〈0．05。蛋白质印迹法检测发现,照射＋高剂量给药组和照射＋低剂量给药组的小鼠肺组织NFxB蛋白水平降低,分别为2．04±0．16和1．89±0．13;Ikb-a蛋白水平升高,分别为0．80±0．15和0．81±0．13,较单纯照射组差异有统计学意义,P〈0．05。结论：槲皮素能够明显改善小鼠放射性肺损伤肺组织的炎性渗出,对放射性肺损伤具有一定的防治作用。这一作用可能与槲皮素抑制了NF—kB蛋白的表达有关。     

茜草醇提物对辐射损伤小鼠造血系统保护作用的研究

目的 研究茜草醇提物对辐射损伤小鼠造血系统的保护作用。方法 建立辐射损伤小鼠模型,将50只小鼠随机分为5组,每组10只。给药组小鼠予以不同剂量［低剂量0.25 g/（kg·d）、中剂量0.49 g/（kg·d）、高剂量0.99 g/（kg·d）］茜草醇提物灌胃,空白对照组和单纯照射组分别予1 mL生理盐水灌胃,各组持续灌胃13 d,正常饲养7 d后处死小鼠。于灌胃第7天,不同剂量给药组和单纯照射组小鼠均接受60Co γ射线6 Gy一次性全身照射。观察茜草醇提物对辐射损伤小鼠体重以及外周血白细胞、红细胞、血小板和骨髓有核细胞含量的影响。结果 与单纯照射组比较,高剂量茜草醇提物给药+照射组小鼠外周血白细胞、红细胞、骨髓有核细胞计数均升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）,但体重和血小板计数差异无统计学意义（P＞0.05）;而低剂量、中剂量茜草醇提物给药+照射组与单纯照射组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 高剂量茜草提取物对辐射损伤小鼠造血系统有促进恢复作用。     

当归对小鼠放射性肺损伤过程中TNF-α水平的影响

目的阐明当归对放射性肺损伤过程中TNFα水平的动态影响,寻求预防或治疗放射性肺损伤的有效途径。方法成年雌性C57BL/6小鼠72只,随机分为4个组⑴空白对照组(9只)腹腔注射生理盐水20ml/(kg·d);⑵单纯当归组(9只)腹腔注射25%当归注射液20ml/(kg·d);⑶单纯照射组(27只)全肺单次照射12Gy+腹腔注射生理盐水20ml/(kg·d);⑷照射+当归组(27只)全肺单次照射12Gy+腹腔注射25%当归注射液20ml/(kg·d)。生理盐水和25%当归注射液于照前1周开始注射,直至照射后2周结束。左肺做组织学与免疫组化分析,右肺做总RNA提取及实时定量RTPCR分析。结果空白对照组和单纯当归组免疫组化阳性细胞数相对较低,仅波动在8～17个之间。单纯照射组阳性细胞数较上述两组明显增高(P<0.01),尤以1周后为甚。照射+当归组阳性细胞数则介于两者之间,但仍然显著低于单纯照射组(P<0.01)。单纯照射组TNFαmRNA相对含量与单纯当归组和空白对照组差异均有统计学意义(P<0.01)。照射+当归组TNFαmRNA相对含量较单纯照射组差异无统计学意义(P=0.078),可能与样本数较少有关。结论TNFα在放射性肺损伤发生、发展过程中起重要作用,当归能明显降低该过程中TNFα表达水平,其可能通过调控该细胞因子起辐射防护作用。     

常山酮防治放射性肺损伤及其机制的研究*

目的:研究常山酮对放射性肺损伤的防治作用,并探索其可能机制。方法:健康雌性C 57BL/6J 小鼠72只,随机分为对照组、照射组、常山酮组及照射联合常山酮组,每组18只。对照组不做处理;常山酮组每只小鼠予常山酮灌胃1 次/d ,连续1 个月或至处死;联合组灌胃方法同常山酮组,并于灌胃至15d 时予全肺6MV-X 线单次照射12Gy;照射组予全肺照射,照射时间及剂量同联合组;照射后24h 、1 、2 、4 、12、20周各组随机处死3 只,留取肺组织,H&E染色观察肺组织形态、羟脯氨酸碱水解法测定羟脯氨酸含量、免疫组织化学法及RT-PCR 法测定TGF-β 1 的表达水平。结果:H&E染色结果示联合组小鼠各时间点肺泡炎症及（或）肺纤维化程度较照射组均明显减轻。联合组肺组织羟脯氨酸含量低于照射组,至照射后20周达统计学差异（P =0.037）。 免疫组织化学及RT-PCR 结果示照射后各时间点照射组及联合组肺组织中TGF-β 1 表达水平均高于对照组及常山酮组（均P < 0.05）;联合组TGF-β 1 蛋白表达水平于照射后2、4、12、20周显著低于照射组（均P < 0.05）,TGF-β 1 mRNA 水平于照射后4、12周显著低于照射组（均P < 0.05）。 结论:常山酮可抑制胸部照射后小鼠肺组织炎性及纤维化改变,这可能是通过抑制放射导致的肺组织中TGF-β 1 表达升高引起的,有望将常山酮开发为防治放射性肺损伤的新型药物。      

双氢青蒿素对早期放射性肺损伤大鼠TNF-α表达的影响

目的:探讨双氢青篙素对早期放射性肺损伤大鼠肺组织及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的动态影响.方法:采用γ射线单次全肺照射15 Gy,建立SD大鼠放射性肺损伤模型.108只同体质量雄性SD大鼠,随机分为1)正常对照组:灌服等体积溶媒;2)单纯照射组:灌服等体积溶媒+全肺单次照射15 Gy;3)照射用药组:灌服双氢青蒿素+全肺单次照射15 Gy.双氢青蒿素和溶媒皆于照前3 d开始灌服持续至照射后15 d.ELSIA法及免疫组化方法检测照射后60 d内血清及肺组织TNF-α表达情况.结果:单纯照射组肺组织炎症渗出及纤维化征象严重.照射15 d,单纯照射组、照射用药组肺组织及血清TNF-α表达依次递增,单纯照射组肺组织TNF-α表达最强,照射用药组介于正常对照组和单纯照射组之间(P＜0.05),照射后30 d,两组差异无统计学意义(P＞0.05).血清TNF-α两组表现为从照射后3 d开始增加,到15 d达到高峰,30 d与正常对照组无差别,照射用药组较单纯照射组明显减少(P＜0.05).结论:双氢青蒿素具有降低早期放射性肺损伤大鼠血清、肺组织TNF-α表达的作用.     

参芎注射液防治胸部肿瘤放疗导致放射性肺损伤的实验研究

  目的   本文利用慢病毒介导的RNA干扰，在结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型中研究信号素4D（Sema4D）对血管新生的影响。   方法   选取体重200±14g成年雄性大鼠105只，分为7组，即正常对照组（N），单独给药组（D），单独照射组（Z），照射10 Gy+给药组（Z10），照射15 Gy+给药组（Z15），照射20 Gy+晚期给药组（照射后4周给药，Z20a），照射20 Gy+早期给药组（照射同时给药，Z20b）。所有药物均经腹腔注射。分别于照射后2、4、6、8、10 W处死大鼠，取血清，应用ELISA法检测TNF-α和TGF-β1，取肺组织制成石蜡切片，HE染色观察病理变化。   结果   单纯照射组血清TNF-α和TGF-β1值明显高于其他各组（P＜0.01），照射加给药组血浆TNF-α和TGF-β1值高于对照组及单独给药组（P>0.05）；各照射加给药组之间TNF-α和TGF-β 1值差异无统计学意义（P>0.05）；大鼠单独照射组，照射2 W后，可见肺脏体积增大，充血水肿，照射后4周，肉眼见肺表面较多点状出血；而给药组肺表面出血点明显减少；参芎组肺组织炎症变化明显好于单独照射组；照射20 Gy大鼠4周后开始给药略好于单独照射组，但差异无统计学意义（P>0.05）；照射4~6周时单纯照射组有大鼠死亡；照射8~10周部分大鼠出现胸腔积液。   结论   参芎注射液能预防放射性肺损伤的发生，机理可能与该药物能降低血浆TNF-α和TGF-β1值有关；发生放射性肺炎后给药能减缓症状，但不能逆转放射性肺炎的病理变化。      

卡托普利对小鼠在肺部照射后TGF-β1、TNF-α水平的影响

目的：探讨卡托普利在小鼠放射性肺损伤中对血清转化生长因子-β1（TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的干预影响。方法：雄性C57／BL小鼠，设对照组、右肺单次照射10Gy组、右肺单次照射10Gy＋卡托普利组，于照射后36h、7d、15d、30d采集血液标本，ELISA法测血清中TGF-β1及TNF-α；同期取右肺组织以HE染色制成病理学标本。结果：10Gy照射组在照射后不同时段血清中TGF-β1水平及TNF-α水平均较对照组升高；而单次照射10Gy＋卡托普利组则表现为在不同时段均较对照组水平降低。析因分析结果为时间因素间、处理因素间、交互作用间均有统计学差异（P〈0．05）。病理结果显示10Gy照射组出现进行性加重的炎症改变，而单次照射10Gy＋卡托普利组则与对照组比较无明显区别。结论：卡托普利可以减低小鼠肺照射时TGF-β1、TNF-α等细胞因子浓度，并抑制放射性肺损伤的发生。     

单次大剂量照射大鼠头颈部后组织的病理改变

[目的]观察电子线单次照：射大鼠头颈部后正常组织的病理改变。[方法]48只大鼠被随机分为5组（每组8只）及对照组（8只）。大鼠呈俯卧位，用12MeV电子线照射头颈部，照射野为3．5cm×3．5cm，照射剂量分别为5、10、15、20和25Gy，每个剂量点在照射后第3、28d分别取4只大鼠处死后取材。常规切片HE染色后在光镜下观察。[结果]单次大剂量照射后第3、28d头颈部不同组织的病理改变随照射剂量的增加而加重。[结论]电子线一次大剂量术中放疗头颈部肿瘤，剂量应有所控制，以减轻正常组织损伤。     

肌肽对C57小鼠放射性肺损伤保护作用的机理研究

[目的]观察肌肽（carnosine）对C57BL小鼠放射性肺损伤（RILI）的防护效果,并探讨其机制。[方法]将120只C57BL雌性小鼠随机分为对照组、给药组、辐照组和辐照＋给药组,治疗后检测血清转化生长因子β1（TGF-β1）、丙二醛（MDA）,以及部分肺组织羟脯氨酸（HYP）水平。[结果]除辐照后第7d血清中MDA水平各处理组间无明显差异（P〉0.05）,其余不同组间各时间段TGF-β1、MDA以及肺组织HYP水平差别均具有统计学意义（P〈0.05或〈0.01）。给药组较对照组未出现明显副作用。[结论]肌肽能降低血清、肺组织中TGF-β1、MDA、HYP含量,并具有减轻放射性肺损伤的作用,且几乎无副作用,在防治放射性肺损伤中显示出良好前景。     

胶质瘤模型单剂量全脑放疗后血脑屏障开放的时间阈及紧密连接变化的研究

目的观察C6脑胶质瘤15 Gy单次全脑放射线照射后血-脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的动态变化及紧密连接蛋白claudin-5的表达变化,观察大鼠血-脑屏障(BBB)开放的时间阈。方法荷瘤鼠（建模后17天）60只,行15 Gy全脑放射线单次照射,并于照射后24 h、3 d、7 d、14 d、21 d、28 d各处死10只,各5只分别行硝酸镧（La+）透射电子显微镜示踪法观察肿瘤邻近处（brain adjacent to tumor,BAT）即距肿瘤边界2 mm以内BBB通透性及免疫组织化学法测定紧密连接蛋白claudin -5的变化研究。结果（1）照射后24 h、3 d硝酸镧渗出广泛,基底膜、血管腔外、脑组织间隙内及细胞内均可见;第7 d为La3+渗出减弱,基底膜及脑组织间隙内见细小的镧颗粒;第14 d为La3+渗出至局部基底膜,较前减少;第21 d、28 d均为La3+ 无渗出。统计学分析硝酸镧渗出程度显示：24 h和3 d>7 d>14 d>21 d和28 d（P<0.05）。（2）照射后24 h、3 d紧密连接蛋白claudin-5呈轻度表达,呈碎片状表达;照射后第7 d为轻中度表达,血管扭曲、变形;照射后第14 d为中度表达,血管扭曲、变形,但仍呈连续状态;照射后第21 d、28 d为中强度表达,出现连续与碎片表达并存。统计学分析claudin-5表达程度显示：24 h和3 d<7 d<14d<21 d和28 d（P<0.05）。结论荷瘤鼠单次15 Gy照射后BBB开放,且2周后BBB通透性逐渐消失,表现出时间依赖性。