液相色谱-串联质谱法测定人血浆中匹伐他汀

目的:建立灵敏、快速的液相色谱-串联质谱(LC-MS-MS)法测定人血浆中匹伐他汀,并用于药动学研究。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-5 mmol·L~(-1)醋酸铵溶液(90:10,V:V)为流动相,Zorbax XDB C_8柱分离。采用电喷雾电离源(ESI),以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为m/z 422→m/z 290(匹伐他汀)和m/z 515→m/z 276(内标,替米沙坦)。结果:测定血浆中匹伐他汀的线性范围为0.1～100μg·L~(-1),定量下限为0.1μg·L~(-1)。日内、日间精密度(RSD)均小于12.0%,准确度(RE)在±2.4%以内。结论:该方法选择性好、灵敏度高、操作简便,适用于匹伐他汀的临床药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血清中苯磺酸氨氯地平的浓度

目的:建立测定体内苯磺酸氨氯地平的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法。方法:血清样品中加入内标苯海拉明,直接沉淀蛋白法处理样品。色谱柱为Atlantis C_(18)(100 mm×2.1 mm,3μm),流动相为含0.1%甲酸的乙腈-0.1%甲酸水溶液(42:58,V:V),流速为0.25 mL·min~(-1)。MRM扫描分析,苯磺酸氨氯地平和内标苯海拉明的离子通道分别选择为m/z 409.1→238.1和256.3→167.0。结果:苯磺酸氨氯地平的线性范围为0.2～32μg·L~(-1),最低定量限为0.2μg·L~(-1),提取回收率均大于95%,日内、日间RSD均小于15%。结论:本方法灵敏、准确、专一、操作简便,适用于苯磺酸氨氯地平的体内药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中卡维地洛的浓度

目的建立测定血浆中卡维地洛的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法。方法血浆样品中加入内标氘3-卡维地洛,直接沉淀法处理样品。色谱柱为CAPCELL PACK C_(18)Ⅲ(100.0mm×2.0mm,5μm),流动相为含0.1%甲酸的水溶液-含0.1%甲酸的乙腈溶液(70:30,V/V),流速0.5mL·min~(-1),等度洗脱,进样体积8μL,正离子多离子反应监测(MRM)扫描分析,离子通道分别为m/z 407.3→100.1(卡维地洛),m/z 410.3→100.1(氘3-卡维地洛)。结果卡维地洛线性范围为0.2～200μg·L~(-1)(r>0.999),定量下限为0.2μg·L~(-1),提取回收率在92.27%～104.0%,日内、日间精密度RSD均小于8%。结论本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可适用于卡维地洛的药动学研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中熊去氧胆酸的浓度

目的：建立高效液相色谱-质谱联用的方法测定人血浆内的熊去氧胆酸浓度的方法。方法：采用Shimadzu VP-ODS(4．6 mm×150 mm,5μm)色谱柱；柱温25℃；流动相为(A)乙腈-水(含5 mmol·L~(-1)的乙酸铵)(35：65,V/V),(B)乙情；梯度程序为0～2min,A：B=94：6；2～4．5min,A：B= 80：20：4．5～7min,A：B=94：6；流速为1．0 mL·min~(-1)；通过液相串联质谱,电喷雾离子源(ESI),以选择反应监测(SRM)方式进行检测；离子极性监测负离子(-)；检测离子为熊去氧胆酸m/z 391．1 [M-H]~-→391．1[M-H]~-,盐酸西替利嗪(内标)m/z 387．1[M-H]~-→387．1[M-H]~-。结果：熊去氧胆酸的最低定量限为40．144μg·L~(-1),线性范围为40．14～12 043μg·L~(-1)(r=0．995)。结论：该方法简便、灵敏度高,可以用来进行熊去氧胆酸的人体药动学和生物等效性研究。     

液相色谱-串联质谱法测定老年人血浆中石杉碱甲的浓度

目的建立测定老年人血浆中石杉碱甲的液相色谱-串联质谱方法。方法在血浆中加入内标石杉碱乙,用乙腈直接沉淀蛋白法处理样品。采用SeQuant ZIC-HILIC(100mm×2.1mm I.D,3.5μm)色谱柱进行分离,柱温35℃;流动相为含5 mmol·L~(-1)甲酸铵0.1%甲酸水溶液-乙腈(35:65,V/V),流速0.3 mL·min~(-1),柱温35℃,梯度洗脱,进样体积5μL;正离子多反应检测(MRM),离子通道分别为m/z 243.2→210.2(石杉碱甲),m/z 257.2→198.6(石杉碱乙)。结果石杉碱甲线性范围0.05～10μg·L~(-1)(r>0.999),定量下限0.05μg·L~(-1),提取回收率在81.0%～95.4%,批内、批间精密度RSD均小于8%,内标校正基质因子在2.11～2.28。主要药动学参数t_(max)为(2.2±0.7)h,ρ_(max)为(0.9±0.2)μg·L~(-1),t_(1/2)为(14.1±2.0)h,AUC_(0-∞)为(15.3±4.5)μg·h·L~(-1)。结论本方法操作简便、特异性强、灵敏度高,适用于石杉碱甲在老年人中的药动学研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中纳美芬的浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱联用的方法测定人血浆中的纳美芬。方法血浆样品经乙酸乙酯-二氯甲烷(4:1,V:V)液液提取后,以Agilent Eclipse XDB-C_(18)(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.02 mol·L~(-1)醋酸铵(70:30,V:V),流速为0.8 mL·min~(-1),柱温为25℃,进样量为40μL,在Agilent 1100 LC/MSD XCT离子阱质谱仪上,大气压化学电离(APCI)源,正离子电离方式,以多离子反应监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z 340→322(纳美芬)和m/z 383→337(纳络酮,内标物)。结果纳美芬的定量下限为0.10μg·L~(-1),线性范围为0.1～10μg·L~(-1)(r= 0.9995),样品提取回收率为65%～84%,日内RSD和日间RSD均≤15%,且稳定性良好。结论该法操作简便、快速、灵敏度高,可用来进行纳美芬的临床血药浓度和药动学研究。     

液质联用法测定犬血浆中阿普唑仑及其代谢物α-羟基阿普唑仑的浓度

目的建立测定Beagle犬血浆中阿普唑仑及其代谢物α-羟基阿普唑仑浓度的液相色谱-质谱联用(LC-MS)法。方法血浆样品采用1 mol·L~(-1)硼酸盐缓冲液(pH 9.0)碱化、乙酸乙酯-正庚烷(85:15,V:V)萃取后LC-MS测定。色谱柱:Zorbax SB-C_(18)柱(150 mm×3 mm,3.5μm);流动相:乙腈-0.01 mol·L~(-1)乙酸胺缓冲液(含1%甲酸)(45:55,V:V);流速:0.3 mL·min~(-1);柱温:40℃。采用电喷雾正离子模式离子化,用于定量分析的离子分别为m/z 309.2(阿普唑仑)、m/z 325.2(α-羟基阿普唑仑)和m/z 343.2(三唑仑,内标)。结果阿普唑仑和α-羟基阿普唑仑的线性范围分别为0.5～50μg·L~(-1)和0.5～32μg·L~(-1),两者定量下限均为0.5μg·L~(-1),提取回收率均>80%,方法回收率为97.3%～102.5%,批内RSD≤10.4%,批间RSD≤12.2%。结论本方法灵敏、准确、重现性好,适用于阿普唑仑犬体内药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法快速测定兔血清及组织中痕量氟尿嘧啶

目的建立灵敏、快速的液相色谱-串联质谱法测定兔血清及组织中氟尿嘧啶的浓度。方法血清及组织样本经乙酸乙酯一步提取后,以乙腈-水(70:30,V/V)为流动相,Hypercarb C_(18)柱分离,采用电喷雾电离源,以多反应离子检测(MRM)方式进行负离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z128.9→m/z41.9(氟尿嘧啶)和m/z188.7→m/z41.9(内标,溴尿嘧啶)。结果测定血清中氟尿嘧啶的线性范围为0.25～50μg·L~(-1),定量下限为0.25μg·L~(-1)。日内、日间精密度(RSD)均小于11%。食管组织中氟尿嘧啶的线性范围为0.5～100μg·L~(-1),定量下限为0.50μg·L~(-1)。日内、日间精密度(RSD)均小于10%。结论该法选择性强、灵敏度很高、操作简便、分析时间短,且可同时测定血清及组织中药物浓度,适用于极低浓度氟尿嘧啶生物样本的大批量检测。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物的浓度

目的建立快速测定人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物SR26334含量的LC-MS/MS法。方法乙醚-正己烷(4:1,V:V)2次液-液提取法(中性和酸化条件下),采用Teknokroma C_(18)色谱柱,以那格列奈和吡格列酮为内标,同时测定血浆中氯吡格雷和SR26334的浓度。流动相:甲醇-0.1%甲酸(80:20,V:V);流速:0.2mL·min~(-1);以多反应离子监测方式检测:氯吡格雷[M+H]~+,m/z 322.1→212.1;那格列奈[M+H]~+,m/z 318.3→166.2;氯吡格雷羧酸代谢物SR26334[M+H]~+,m/z 308.1→q98.1;吡格列酮[M+H]~+,m/z 357.2→134.2。结果氯吡格雷和内标那格列奈的保留时间分别在4.4和3.7min,SR26334和内标吡格列酮的保留时间分别在1.3和1.7min,氯吡格雷的线性范围为5～5000ng·L~(-1);SR26334的线性范围为20～2500μg·L~(-1)。提取回收率大于75%,方法回收率大于90%,日内、日间RSD小于10%(n=5)。结论本方法简便快速,适用于氧吡格雷制剂的新药临床研究和临床长期治疗病人血药浓度的常规监测。     

液相色谱-串联质谱法测定健康人体血浆中米格列醇浓度及其药代动力学研究

目的建立测定血浆中米格列醇片(降血糖药)的液相色谱-串联质谱法,考察米格列醇在中国健康志愿者体内的药代动力学。方法血浆样品经液-液提取后,进行色谱分离,在三重四极杆串联质谱仪上,以多反应离子监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z 208．3→m／z 146．1 (米格列醇)和m/z 268．5→m/z 250．4(内标,伏格列波糖)。结果米格列醇的最低定量浓度为5．0 μg·L-1,线性范围为5～2 000 μg·L-1,精密度与准确度符合生物样品分析要求。结论该法操作简便、快速、灵敏度高,适于临床药代动力学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中靛玉红的含量及其药动学

目的建立灵敏、快速的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中靛玉红的浓度,并研究其在大鼠体内的药动学特点。方法血浆经乙腈沉淀蛋白后取上清进样分析,采用Agilent C_(18)柱,以乙腈:水(70:30,V/V)为流动相,ESI源,负离子检测,检测离子对为m/z 260.9→156.9(靛玉红)和m/z 253.0→225.0(大黄酚,内标)。大鼠禁食过夜后按20 mg·kg~(-1)剂量靛玉红混悬液灌胃,给药前及给药后0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、10、12、24和32 h采血。LC-MS/MS法测定血浆药物浓度,绘制血药浓度-时间曲线图,统计矩法计算主要药动学参数。结果靛玉红线性范围为0.1～10μg·L~(-1),定量下限为0.1μg·L-1。低、中、高浓度质控样品的批内和批间精密度均小于8%,低、中、高浓度质控样品和内标提取回收率在93.6%～96.3%,室温稳定性、冻融稳定性及30 d稳定性考察结果均符合要求。药动学参数为t_(max)(4.2±1.0)h,p)(max)(3.7±0.7)μg·L~(-1),t_(1/2z)(4.7±2.5)h,AUC_(0-t)(22.8±8.7)μg·h·L~(-1)。结论所建立的LC-MS/MS法简便快捷、重复性好、灵敏度高,适合于靛玉红的体内药动学研究。     

复方法莫替丁咀嚼片的人体药动学

目的：研究健康受试者单剂量口服复方法莫替丁咀嚼片的人体药动学。方法：12名健康受试者分别单剂量口服复方法莫替丁咀嚼片,以氨甲苯酸为内标,采用液相色谱-质谱-质谱(LC-MS/MS)正离子选择性反应检测法测定法莫替丁血浆及尿药浓度,用3P97软件计算药动学参数。结果：口服法莫替丁咀嚼片10 mg后,血浆药动学参数分别为c_(max)(53±s17)μg·L~(-1),t_(max)(2．7±0．8)h,t_(1/2)(3．2±0．5)h,AUC_(0-24)(309±91)h·μg·L~(-1),AUC_(0-∞)(312±91)h·μg·L~(-1),MRT(5．2±0．5)h；24 h尿药累积排泄量为(41±20)%。结论：建立的LC-MS/MS测定法专属准确,灵敏度适宜。可用于药动学参数的测定。     

液相色谱-串联质谱法测定辛伐他汀片的人体药动学和生物等效性

目的:建立人血浆中辛伐他汀浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS／MS)测定法,研究健康受试者单剂量口服辛伐他汀受试或参比制剂后的药动学和生物等效性。方法:20名健康男性受试者进行随机双交叉试验,分别单剂量口服20 mg辛伐他汀受试制剂和参比制剂,采用LC-MS／MS以洛伐他汀为内标正离子选择性反应检测测定辛伐他汀血浆浓度,计算两者的药动学参数及相对生物利用度。结果:受试制剂和参比制剂的血药浓度水平一致,主要药动学参数如下:c_(max)分别为(8．0±s 1．9)和(8．1±1．8)μg·L~(-1);t_(max)分别为(1．9±0．3)和(1．9±0．3)h;t_(1/2)分别为(3．7±1．4)和(4．1±2．2)h;AUC_(0～24)分别为(30±8)和(30±6)μg·h·L~(-1);AUC`(0～∞)分别为(30±8)和(31±7)μg·h·L~(-1)。由2种制剂的AUC_(0～24)计算,受试制剂的相对生物利用度为(101±20)%。结论:建立的LC-MS／MS测定法专属、准确、灵敏度适宜。测得辛伐他汀受试制剂和参比制剂生物等效。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中那格列奈及其药动学和生物等效性

目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中那格列奈的浓度,并研究其在健康男性受试者体内的药动学及生物等效性。方法血浆经液液萃取后,采用Agilent TC-C_(18)柱,流动相为乙腈-水-甲酸(70:30:0.3,V/V/V),质谱检测采用多反应监测(MRM)模式,ESI源,分别监测离子反应m/z 318.2→m/z 166.1(那格列奈)和m/z 371.8→m/z 121.0(内标氯诺昔康)。结果那格列奈线性范围为0.02～20mg·L~(-1),定量下限为0.02mg·L~(-1)。日内、日间精密度(RSD)均小于6.7%,准确度(RE)在93.8%～97.4%之间。应用本法测得20名健康男性受试者口服那格列奈片120mg后主要药动学参数为:t_(max)为(0.6±0.3)h,t_91/2)为(2.1±0.5)h,ρ_(max)为(12±4)mg·L~(-1),AUC_(0-t)为(19±5)mg·h·L~(-1),AUC_(0-∞)为(19±5)mg·h·L~(-1)。结论该法操作简便、快速、灵敏,适用于那格列奈的药动学及生物等效性研究。     

液相色谱-串联质谱法同时测定人血清与尿液中伏立诺他及其代谢物4-苯胺基-4-氧代丁酸的浓度

目的分别建立人血清和尿液中液相色谱-串联质谱法同时测定伏立诺他及其代谢物4-苯胺基-4-氧代丁酸(M2)的方法。方法血清样品经甲醇沉淀蛋白后取上清液进样分析,以Amethyst C_(18)-P(150mm×2.1mm,5μm)为分析柱,流动相为2%的甲酸(含5mmol·L~(-1)醋酸铵水溶液)-甲醇(55:45,V/V);尿液样品以流动相稀释后进样分析,以Hedera ODS-2(150mm×2.1mm,5μm)为分析柱,流动相为2%的甲酸(含30mmol·L~(-1)醋酸铵水溶液)-甲醇(55:45,V/V)。质谱采用气动辅助电喷雾离子化和正离子多反应监测,定量分析的反应离子对分别为m/z 265.2→232.2(伏立诺他)、m/z 194.1→176.1(M2)和m/z 180.1→110.1(内标非那西丁)。结果伏立诺他血药浓度在2.004～1503μg·L~(-1)范围内线性关系良好,平均回收率大于98.3%,M2血药浓度在5.015～5015μg·L~(-1)范围内线性关系良好,平均回收率大于96.8%;伏立诺他尿药浓度在0.03006～20.04mg·L~(-1)范围内线性关系良好,平均回收率大于96.8%,M2尿药浓度在1.003～300.9mg·L~(-1)范围内线性关系良好,平均回收率大于96.5%。尿样测定中,由伏立诺他的另一代谢物O-葡萄糖醛酸苷发生源内裂解而对伏立诺他的测定造成的干扰通过色谱分离得到解决。结论建立的两个方法快速、简便,可应用于人体样本测定。     

卢帕他定片在中国健康人体的药动学

目的研究卢帕他定片在中国健康人体的药动学特征。方法以卡马西平为内标,色谱柱为inspire C18(2)(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈:2 mmol·L-1乙酸铵溶液(65:35,V/V)为流动相,流速:0.8 mL·min~(-1);质谱检测卢帕他定和内标卡马西平离子对分别为m/z 416.1→282.1,237.2→194.1。36名健康受试者随机分为低、中、高3个剂量组,每组12人(男女各半),分别单次口服卢帕他定片10 mg、20 mg、40 mg,采用液相色谱-串联质谱法测定给药后不同时间点血浆中卢帕他定的浓度并计算药动学参数。结果人血浆中卢帕他定的最低定量限为0.05μg·L~(-1),在0.05～40μg·L~(-1)范围内线性关系良好,批内及批间精密度(RSD)均小于15%。主要药动学参数如下:ρ_(max)分别为(16.88±8.10)、(30.27±12.10)和(63.87±27.49)μg·L~(-1);t_(max)分别为(0.94±0.39)、(1.00±0.00)和(0.88±0.38)h;t_(1/2)分别为(11.46±3.01)、(8.42±1.65)和(9.06±2.30)h;AUC_(0-t)分别为(46.84±22.15)、(86.16±19.22)和(189.91±59.52)h·μg·L~(-1);AUC_(0-∞)分别为(50.00±23.83)、(88.53±19.49)和(196.13±60.87)h·μg·L~(-1)。结论低、中、高3个剂组中卢帕他定在人体内的AUC_(0-t),AUC_(0-∞)和ρ_(max)均与剂量呈线性关系。