N-乙酰半胱氨酸对大鼠肝星状细胞中的瘦素与Ⅰ型胶原水平的影响

目的:研究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcys-teine,NAC)影响大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)增殖,及其对瘦素与Ⅰ型胶原蛋白分泌的变化。方法:HSC以1×105/mL浓度接种于96孔培养板,每孔100μL,进行以下实验分组:NACⅠ、Ⅱ、Ⅲ组,加入NAC使得各组培养液中NAC浓度分别是10、20、40mmol/L;加生理盐水为对照组。培养48h终止后吸取上清液-20℃冰冻保存,ELISA法检测细胞培养上清液瘦素与Ⅰ型胶原蛋白水平;MTT法观察细胞增殖情况。结果:NACⅢ组平均吸光度低于NACⅠ组和对照组(P<0.05);NACⅡ、Ⅲ组其HSC培养上清液瘦素水平均显著低于对照组(P<0.01);NAC各组Ⅰ型胶原蛋白水平均显著低于对照组(P<0.01)。结论:HSC在NAC作用下增殖减少;瘦素与Ⅰ型胶原蛋白分泌受到抑制,这可能是NAC抗纤维化的机理之一。     

姜黄素衍生物对原代大鼠肝星状细胞作用的体外研究

目的：观察姜黄素衍生物（Curc-OEG）抑制原代肝星状细胞（HSC）增殖、活化以及诱导其凋亡的作用,探讨其可能的作用机制。方法：采用IV型胶原酶、DNA酶消化SD雄性大鼠肝脏,percoll梯度离心得到纯化的肝星状细胞。细胞分离后1d分别加入0、6.25、12.5μg/mL的姜黄素衍生物,作用7d后用RT-PCR及Western blot检测细胞α-SMA、TGF-β1、Smad2的mRNA水平和蛋白表达量。活化的肝星状细胞在第14天分别加入0、6.25、12.5、25、50、75μg/mL的姜黄素衍生物,作用24h后RT-PCR检测凋亡基因Bax、Bcl-2的mRNA水平和纤维化相关基因TGF-β1、collagen I、NF-κB及TIMP-1的mRNA水平。结果：药物作用7d后,6.25μg/mL和12.5μg/mL浓度药物处理组与对照组相比,细胞数目分别减少了56%和86%。在12.5μg/mL浓度药物作用下,原代肝星状细胞α-SMA、TGF-β1及Smad2的mRNA表达水平分别下调83%、85%及75%,蛋白表达水平分别下调94%、92%及73%（P〈0.05）。25μg/mL浓度药物作用24h后,细胞凋亡明显。在50μg/mL浓度药物作用下,活化的肝星状细胞Bax的mRNA表达水平上调约2.3倍,Bcl-2的mRNA表达水平下调约5.6倍;TGF-β1、collagen I、NF-κB及TIMP-1的mRNA表达水平分别下调90%、83%、74%、65%（P〈0.05）。结论：姜黄素衍生物可以明显抑制原代肝星状细胞的增殖和活化,促进活化的肝星状细胞凋亡及减少细胞外基质的沉积。     

高迁移率族蛋白B1与晚期糖基化终末产物受体结合对激活肝星状细胞的作用

目的探讨晚期糖基化终末产物受体(RAGE)在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)激活肝星状细胞(HSC)中的作用。方法大鼠HSC-T6细胞系培养至对数生长期,分为5组,对照组加DMEM培养液1ml;HMGB1组加0.1μg/ml的HMGB11ml;抗RAGE组将20μg/mlRAGE抗体加入培养板2h后,再加0.1μg/mlHMGB1;sRAGE组将20μg/mlsRAGE加入培养板2h后,再加0.1μg/mlHMGB1;AGE组:将160μg/mlAGE加入培养板2h后,再加0.1μg/mlHMGB1。刺激24h后,收集各组上清培养液酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测透明质酸(HA)、Ⅲ型胶原(PⅢP)和Ⅳ型胶原(CⅣ)的含量;小心取出六孔板内载玻片,免疫组织化学法检测α-SMA、转化生长因子(TGF)-β1的表达。结果抗RAGE组、sRAGE组与HMGB1组相比,HSC细胞质中的α-SMA和TGF-β1表达水平和培养液中HA、PⅢP和CⅣ的含量均显著下降(P<0.05);AGE组与对照组相比,HSC细胞质中的α-SMA和TGF-β1表达水平和培养液中的HA、PIIIP和CⅣ含量均明显增高(P<0.05)。结论 HMGB1与RAGE结合,使HSC活化,合成释放细胞外基质增加。     

粉防己碱上调Smad7表达抑制大鼠肝星状细胞活化

目的观察低浓度粉防己碱(Tetrandrine,Tet)对培养的大鼠肝星状细胞(HSC)活化和转化生长因子β1(TGFβ1)促活化作用的影响,并探讨该作用与TGFβ1受体后信号通路的关系。方法HSC原代培养,给予Tet(0.4、0.8、1.6和3.2μmol·L-1)处理,免疫细胞化学法检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)表达,或给予TGFβ1(质量浓度5μg·L-1)和(或)Tet(1.6μmol·L-1)干预,分别以RTPCR和Westernblot法检测TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体、Smad3、Smad7以及αSMAmRNA和(或)蛋白表达。结果Tet(0.4～3.2μmol·L-1)能抑制培养HSC表达αSMA。Tet(1.6μmol·L-1)抑制TGFβ1诱导的HSCαSMA表达,伴有Smad7表达上调及TGFβ1表达下降,但不影响TGFβⅠ、Ⅱ型受体和Smad3表达。结论低浓度Tet抑制培养HSC的活化和TGFβ1促活化作用,该作用与上调Smad7表达并抑制TGFβ1有关而不影响TGFβ受体表达。     

IL-0抑制转化生长因子β1诱导的大鼠肝星状细胞工型胶原合成作用观察

的探讨IL-10抗纤维化的可能机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞系rHSC-99，分别用不同浓度的IL-10、TGFβ1干预和两者共同干预，用ELISA法检测肝星状细胞（HSC）的Ⅰ型胶原合成的影响。结果TGFp1显著增强HSC的Ⅰ型胶原的合成。IL-10单独干预对HSC的Ⅰ型胶原的合成无明显影响，但IL-10可显著抑制TGFβ1促进HSC的Ⅰ型胶原的合成。结论TGFβ1显著促进HSC的Ⅰ型胶原的合成，IL-10对TGFβ1的促HSC Ⅰ型胶原合成有抑制作用，这可能是IL-10发挥抗肝纤维化作用的途径之一。     

转化生长因子β1对人脐静脉血管内皮细胞活性的影响

目的观察转化生长因子β1（TGF—β1）刺激增生性瘢痕成纤维细胞上清液对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖和趋化能力的影响。方法以增生性瘢痕成纤维细胞为实验组,正常皮肤为对照组,添加TGF—β1（10μg/L）为TGF—β1组,向TGF—β1组内添加丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（Akt）阻断剂Tricirlbine（5Ixmol／L）为Akt阻断剂组,二者皆未添加的瘢痕成纤维细胞为非干扰组,利用各组细胞上清液（条件培养基）培养HUVEC,使用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察各条件培养基对HUVEC增殖的影响,并利用细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验对HUVEC的趋化情况进行评估。结果对照组吸光度值为0．91±0．34,非干扰组1．75±0．15,TGF—B,组3．26±0．58,Akt阻断剂组1．14±0．81。非干扰组吸光度值与对照组和TGF-β1组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．01）;而Akt阻断剂组成纤维细胞增殖吸光度值明显低于TGF—β1组（P〈0．01）。细胞划痕24h后,TGF—β1组促使HUVEC划痕的闭合率较非干扰组高（P〈0．01）;而Akt阻断剂组则明显减弱HUVEC划痕闭合的速度（P〈0．01）。Transwell细胞迁移实验中,TGF—β1组迁移的细胞较非干扰组多[TGF—β1组细胞迁移数目：（1718±15）个,非干扰组：（829±2）个,P〈0．01];而Akt阻断剂组阳性细胞迁移率又明显降低[Akt阻断剂组：（935±11）个,P〈0．01]。对照组血管内皮生长因子（VEGF）（65．2±0．3）ng／L,非干扰组（87．0±0．5）ng／L,TGF—β1组（132．7±0．4）ng／L,Akt阻断剂组（70．5±0．6）ng／L。非干扰组与对照组、TGF-β1组与非干扰组、Akt阻断剂组与TGF—β1组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论TGF—β1可以通过刺激增生性瘢痕成纤维细胞旁分泌VEGF等细胞因子对血管内皮细胞增殖、趋化等能力产生影响。     

反复自然流产与血清瘦素水平的相关性探讨

目的观察孕早期反复自然流产患者血清瘦素水平,探讨瘦素与妊娠关系。方法选择孕早期反复自然流产患者46例为观察组．正常妊娠妇女40例为对照组,应用ELISA法检测血清瘦素含量,免疫化学发光法检测血清β-HCG。结果血清瘦素：反复流产患者（609．6±311．1）μg／L,正常妊娠妇女（996．3．2±398．6）μg／L;血清β-HCG：反复流产患者（3678．3±2314．2）μg／L,正常妊娠妇女（6645．2±2315．2）μg／L;组间比较P〈0.Ol。结论反复自然流产患者血清瘦素水平明显降低,低瘦素水平可能是反复自然流产的原因之一。     

川芎嗪对人肝星状细胞TGF-β1信号传导的影响

目的：探讨中药单体川芎嗪（TMP）对肝星状细胞（HSC）转化生长因子-β1（TGF-β1）信号传导的影响。通过检测TGF-β1及其Ⅰ型和Ⅱ型受体、Smad 3及Smad 7 mRNA表达的变化,探讨川芎嗪抗肝纤维化作用的相关机制。方法：体外培养人肝星状细胞,RT-PCR法检测HSC中TGF-β1及其Ⅰ型和Ⅱ型受体、Smad 3及Smad 7 mRNA表达。结果：与阴性对照组相比,TMP A、B、C各组均可显著降低TGF-β1 mRNA（P〈0.01）;TMP B、C组TβRⅠmRNA相对表达量降低,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;TMP B、C浓度组的TβRⅡmRNA、Smad 3 mRNA表达量显著降低（P〈0.01）;TMP B、C组可显著升高Smad 7 mRNA表达量（P〈0.01）。结论：川芎嗪可降低HSC中TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体及Smad 3 mRNA表达,同时促进Smad7 mRNA表达,表明川芎嗪可抑制肝星状细胞的活化、增殖,这可能与阻断TGF-β/Smad通路的信号传导有关。     

支原体肺炎患儿急性期外周血辅助性T淋巴细胞亚群的功能变化

目的 观察支原体肺炎（MPP）患儿急性期外周血辅助性T淋巴细胞（Th）亚群的功能变化，以探讨其在MPP发病机制中的意义。方法 对40例MPP患儿外周血单个核细胞（PBMC）经佛波酯＋Ca^2＋导入剂体外诱导48h，ELISA法检测上清液中IL-4、IFN-γ、转化生长因子-β1（TGF—β1）水平。结果 MPP患儿急性期IFN-γ水平、IFN-γ／IL-4比值显著低于对照组（P〈0．01），IL-4、TGF-β1水平显著高于对照组（P〈0．01）；PBMC培养上清液的TGF-β1水平与IFN-γ、IL-4的水平呈正相关（P〈0．01），而与IFN-γ／IL-4比值呈负相关（P〈0．05）；MPP患儿急性期并发肺外损害组PBMC培养上清液中TGF-β1、IL-4、IFN-γ水平及IFN-γ／IL-4比值与无肺外损害组差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 MPP患儿急性期Th1／Th2失衡，呈现Th2相对优势状态；体内出现保护性或调节性Th3功能增强，但TGF-β1保护性调节不足，使Th1／Th2失衡不能纠正；MPP患儿急性期Th细胞亚群功能变化与其急性期有无肺外损害无关。     

肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对佐剂性关节炎大鼠滑膜中TNF-α、TGF-β1 和 VEGF 表达的影响

目的探讨肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对佐剂性关节炎大鼠滑膜中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF—β1）血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法将成年雄性Wistar大鼠随机分为5组,Ⅱ-Ⅴ组建立佐剂性关节炎大鼠（AA）模型,于造模后第12天开始Ⅲ组给予甲氨喋呤灌胃治疗,Ⅳ-V组给予益赛普皮下注射治疗。第28天取膝关节滑膜,常规HE染色,计算滑膜病理积分,免疫组织化学染色检测TNF-α、TGF-β1和VEGF在膝关节滑膜的表达。结果正常对照组大鼠滑膜组织均有少量TNF-α、TGF-β1和VEGF的表达,Ⅱ～Ⅴ组较Ⅰ组均明显增高（P〈0．05）。Ⅳ、Ⅴ组滑膜组织TNF—α表达较Ⅱ组明显减低（P〈0．05）,而Ⅲ组与Ⅱ组无统计学意义（P〉0．05）。Ⅲ～Ⅴ组滑膜组织TGF—β1、VEGF的表达均明显低于Ⅱ组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论可溶性重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白可明显降低AA大鼠滑膜组织TNF-α、TGF—β1和VEGF表达,对AA大鼠的关节炎症有明显的治疗作用,可能抑制局部组织血管新生。     

不同程度肝硬化患者血浆TGF-β1测定及其意义

肝硬化是肝脏慢性反复损伤后肝脏细胞外基质（ECM）合成与降解之间平衡失调、细胞外基质过度沉积的结果，其中肝星状细胞（HSC）的激活是肝纤维化发生发展的中心环节。激活的HSC可直接产生多种细胞外基质，是肝纤维化细胞外基质的最主要来源。激活的HSC也可自身分泌多种细胞因子，其中转化生长因子β1（TGF—β1）是最关键的致纤维化因子。血透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）可以反映肝纤维化、肝硬化程度。我们测定不同程度肝硬化患者血浆TGF—β1变化，分析TGF-β1与HA、PCⅢ的相关关系，旨在为肝硬化诊断追踪观察提供一有意义指标。     

蛹虫草提取物对高糖诱导内皮细胞衰老的影响

目的：探讨蛹虫草乙酸乙酯提取物（CME）对高糖诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）衰老的影响。方法：用高糖（40mmol／L）诱导建立HUVECs衰老体外模型,以冬虫夏草提取物（CSE）（50μg／mL）为阳性对照,观察CME（12．5～100μg／mL）对内皮细胞衰老的干预作用。四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖;SA—β-半乳糖酐酶（SA—β—gal）染色法检测细胞衰老特异性的SA—β—gal活性;流式细胞术检测细胞周期分布和细胞内活性氧（ROS）含量。结果：经高糖干预24、48、72h后,HUVECs增殖活性OD值明显低于对照组;而且在高糖孵育96h后,SA—β-gal染色阳性细胞率明显增加;孵育48h后,处于G0／G1期细胞的百分率和ROS相对水平明显增加（P〈0．01）。与高糖组相比,CME（25～50μg／mL）孵育48和72h后细胞OD值显著提高（P〈0．05）;CME（12．5～100μg／mL）孵育96h后SA-β-gal染色阳性细胞率显著降低（P〈0．01）;孵育48h后Go／G1期的细胞百分率（P〈0．01）、细胞内ROS水平显著降低（P〈0．05）;CME25、50／μg／mL效果优于CME12．5、100〉g／mL（P〈0．05）,且与CSE50ptg／mL作用相近（P〉0．05）。结论：蛹虫草乙酸乙酯提取物可促进内皮细胞生长增殖,可能与其降低细胞内ROS水平,减轻细胞氧化应激损伤有关,从而减轻内皮细胞衰老。     

6种黄酮化合物对大鼠肝星状细胞胶原合成的抑制作用

目的：研究黄颜木素、槲皮素、芹菜素、根皮素、橙皮素和查尔酮对血清、巨噬细胞培养上清液和转化生长因子β1刺激的大鼠肝星状细胞HSC—T6胶原合成的影响。方法：^3H-脯氨酸掺入法测定细胞胶原合成。结果：黄颜木素、槲皮素、芹菜素、根皮素、橙皮素和查尔酮（12．5～50μmol／L）以浓度依赖方式抑制血清、巨噬细胞上清和转化生长因子β1诱导的胶原合成。结论：黄颜木素、槲皮素、芹菜素、根皮素、橙皮素和查尔酮具有抑制肝星状细胞胶原合成的作用，可能具有潜在的肝纤维化治疗作用。     

高血压合并微量白蛋白尿患者血清转化生长因子β1及肾动脉阻力指数的变化

目的观察原发性高血压合并微量白蛋白尿患者血清转化生长因子p1（TGF—p1）及肾动脉阻力指数（RRI）的变化及相关性。方法选取原发性高血压病患者92例,根据尿白蛋白肌酐比值（UACR）分为正常白蛋白尿组（UACR〈30mg／g）、微量白蛋白尿组（30mg／g≤UACR〈300mg／g）和临床蛋白尿组（UACR〉300mg／g）,并设立健康对照组。采用ELISA方法测定血清TGF—B1,彩色多谱勒超声测定肾动脉阻力指数,同时测定相关临床指标。结果正常白蛋白尿组TGF—B1为（8．9±2．9）μg／L,RRI为（0．59±O．06）,微量白蛋白尿组和临床蛋白尿组血清TGF—B1水平分别为（11．±4-4．9）μg／L、（15．5±5．6）μg／L,RRl分别为（0．64±0．06）、（0．70±0．05）,均明显高于正常白蛋白尿组（P〈0．01）。血清TGF—B1水平和RRI呈正相关（r=-0．416,P〈0．05）,微量白蛋白尿水平、TGFp1、RRI均与eGFR呈负相关（r值分别为-0．352、-0．394、-0．419,P〈0．05）。结论高血压合并微量白蛋白尿的患者血清TGF—B1水平和肾动脉阻力指数均升高,两者均与eGFR呈负相关。     

地塞米松对哮喘模型大鼠肺组织病理变化和TGF-β表达的影响

目的：探讨哮喘时肺组织炎症、中性粒细胞（PMN）、肺泡Ⅱ型（AT-Ⅱ）细胞等的病理改变和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达及地塞米松对其的影响。方法：建立哮喘大鼠模型，支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞计数，光镜、电镜观察肺组织病理改变，免疫组化法检测肺组织TGF—β1的表达。结果：BALF中A组细胞总数、EOS计数显著性高于C组（P〈0．01），D组显著性高于C组但低于A组（均P〈0．01）。肺组织中A组PMN计数显著性高于C组（P〈0.01），D组显著性高于A组（P〈0．01）。A组AT-Ⅱ细胞变性、坏死、崩解、板层体空泡化现象。TGF．B1的表达水平在A组显著性高于C组（P〈0.01），D组显著性高于C组但低于A组（分另为P〈0．01，0．05）。结论：哮喘大鼠肺组织炎症细胞浸润、气道黏膜损伤、AT-Ⅱ细胞损伤、表达水平增加；地塞米松可减少上述病理改变，但对肺组织中PMN数目有增加作用，可能会加重对肺组织的损伤。     

五灵胶囊有效成分对TGF-β1诱导HSC—T6表达Ras／ERK、TGF-β／Smad信号通路蛋白的影响

目的：研究五灵胶囊有效成分对转化生长因子（TGF—B1）诱导HSC—T6细胞表达Ras／ERK、TGF-β／Smad信号通路蛋白的作用,探寻产生药效的主要化学成分。方法：HSC-T6细胞分组：对照组、TGF-β1（10ng·ml^-1）组、PD98059组、PT组、五味子醇甲、五味子乙素、柴胡皂苷、柴胡多糖、丹参新醌乙、X1、二氢丹参酮I（各100μg·ml^-1）、丹参酚酸B（10ng·ml^-1）组,培养24h（10ng·ml^-1TGF-β1于最后12h加入）;ELISA检测培养上清中COL—I,Western Blot检测COL—I、α-SMA、Ras、ERK、p—ERK、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad2／3蛋白表达。结果：与TGF—β1组相比,各有效成分组能明显降低COL-Ⅰ分泌,其中以X1、丹参新醌乙、二氢丹参酮Ⅰ、五味子醇甲、丹参酚酸B为显著（P〈0．05）,同时各药物组能显著下调COL—I、α—SMA、ERK、p-ERK、T8RI、TβRII蛋白表达（P〈0．05）;五味子醇甲、X1、二氢丹参酮I能显著下调表达Ras蛋白（P〈0．01）;柴胡皂苷对TβRI表达无作用;X1、醇甲、乙素、二氢丹参酮I、柴胡多糖能显著下调Smad2／3蛋白表达（P〈0．01）。结论：五灵胶囊有效成分对Ras／ERK和TGF—β1／Smad信号通路蛋白的作用不尽相同,强度也不尽一致。抗纤维化作用的最强的成分是X1、二氢丹参酮 I、柴胡多糖、五味子醇甲,丹参新醌乙的作用较弱。     

茶多酚对高脂-高盐-果糖诱致大鼠左心室肥厚的防治作用及其机制

目的大鼠给予富含高脂-高盐饲料和果糖饲养，建立左心室肥厚的动物模型，探讨茶多酚（teapolyphenols，TP）抑制左心室肥厚的作用机制。方法取50只SD大鼠，分为正常组和模型组。模型组大鼠给予富含高脂和高盐的饲料喂养，交替饮用果糖水（6％）和糖盐水（糖4％、盐1％）8周，测定血压。根据血压（〉130mmHg）将动物随机分为模型对照组、卡托普利组（25mg·kg-1）、TP高剂量组（200mg·kg-1）和低剂量组（50mg·kg-1）.继续给予富含高脂-高盐的饲料饲养和交替饮用果糖水和糖盐水，并灌胃给予上述药物处理动物4周。间隔2周测定1次血压，采用小动物超声成像仪检查大鼠心脏功能状态，放射免疫法测定血清TNF-α水平，酶联免疫法测定AngⅡ和TGF—β水平，并测算肥胖指数（OI）、心肌增殖系数（MPI）和心脏系数（CWI）.结果与正常大鼠比较，模型大鼠血压、OI和MPI明显增加（P〈0．05或（P〈0．01），血清TNF-α、AngⅡ和TGF—β水平明显升高（P〈0．01）；超声可见大鼠心脏射血分数（EF）增加，左室内膜短轴缩短率（FS）降低，左室后壁厚度（LVPW）增加（P〈0．01），部分大鼠出现E／A值〈1。TP（200mg·kg、50mg·kg-1）和卡托普利处理后，明显降低模型大鼠血压，降低OI和MPI（P〈0．01），降低EF和LVPW厚度，提高FS（P〈0．05或P〈0．01），未出现E／A值〈1现象；明显降低血清AngⅡ、TNF-α和TGF—β水平（P〈0．01）。结论TP对高脂-高盐-果糖诱致的左室肥厚模型大鼠，具有降低血压和抑制心室肥厚的作用，可能与降低AngⅡ、TNF-α和TGF—β水平有关。     

化浊解毒方含药血清对HSC-T6增殖、凋亡及PPARγmRNA表达的影响

目的:研究化浊解毒方含药血清对体外培养的大鼠肝星状细胞增殖、凋亡及细胞外基质和PPARγmRNA表达的影响,以探讨化浊解毒方治疗肝纤维化的机制。方法:选择健康SD大鼠,每天灌服不同剂量(每L分别含有生药30,60,120 g)的化浊解毒方以及α干扰素(1 000 U.mL-1),按1 mL.(100 g)-1大鼠体质量给药,以制备含药血清;常规培养活化的肝星状细胞(HSC-T6),用不同浓度的含药血清进行干预,用MTT法检测HSC增殖、流式细胞术测HSC凋亡,ELISA法及RT-PCR法分别测细胞上清液中I型及Ⅲ型胶原的含量以及细胞中PPARγmRNA基因的表达。结果:与正常血清组比较,化浊解毒方药含药血清各浓度组均呈现出抑制HSC增殖的作用(P<0.05),以作用48 h最为明显,且呈剂量和时间依赖性。与正常血清对照组比较,化浊解毒方药含药血清各个浓度组在作用48 h后,细胞上清液中的I型及Ⅲ型胶原的含量均降低(P<0.05),并上调PPARγmRNA的表达(P<0.05)。结论:化浊解毒方药能有效治疗肝纤维化可能通过上调PPARγ的表达起到抑制肝星状细胞增殖,促进肝星状细胞凋亡,降低肝星状细胞活性有关。     

血液透析对慢性肾衰竭患者血清瘦素的影响

目的探讨慢性肾功能衰竭（CRF）患者血清瘦素水平与营养不良的关系并观察高通量血液透析（HPD）的临床意义。方法80例CRF患者分为三组：未血液透析组26例（Ⅰ组），常规血液透析组（CHD组）30例（Ⅱ组），高通量血液透析组（HPD组）24例（Ⅲ组）。26例健康志愿者作为对照组。测定各组血清生化指标，ELISA法测定其血清瘦素水平。同时对患者进行营养状况评估。结果三组CRF患者血清瘦素水平均较对照组显著增高（P〈0．05），Ⅰ、Ⅱ组分别较Ⅲ组血清瘦素水平显著增高（P〈0．01）。三组CRF患者的体脂百分比均与其血清瘦素水平显著正相关（P〈0．01，〈0．05和〈0．05）。三组客观营养指标之间差异无显著意义，Ⅱ组和Ⅲ组血清瘦素水平分别与其血清白蛋白显著负相关（P〈0．05）。SGA评估表明CRF患者存在明显的营养不良，其营养状况越差，血清瘦素水平越高（P〈0．01）。Ⅲ组SGA积分明显高于其他两组（P〈0．01和P〈0．05）。结论CRF患者存在高瘦素血症，其增高与CRF患者的营养不良有关。高通量血液透析治疗有助于CRF患者血清瘦素的清除，从而进一步改善CRF患者的营养不良状况。     

白屈菜碱对活化后大鼠肝星状细胞CFSC-8B的增殖、胶原合成及TGF-β_1受体的影响

目的:考察白屈菜碱对活化后大鼠肝星状细胞CFSC-8B的增殖、胶原合成及转化生长因子β_1(TGF-β_1)受体的影响。方法:取对数生长期的CFSC-8B细胞,分为正常对照组、模型组、溶剂组(乙醇)、阳性对照组(1μg/mL秋水仙碱乙醇溶液)和白屈菜碱低、中、高浓度组(2.1、4.2、8.4μg/mL白屈菜碱乙醇溶液)。除正常对照组外,其余各组细胞利用20μg/L的TGF-β_1作用24 h进行活化,后5组细胞给予相应药物干预24 h。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,酶消化法检测细胞上清液中羟脯氨酸(Hyp)含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)水平,Western blot法检测细胞中TGF-β1Ⅰ型受体(TβR-Ⅰ)和TβR-Ⅱ蛋白的表达,实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TβR-Ⅰ和TβR-ⅡmRNA的表达。结果:与正常对照组比较,模型组细胞增殖率、Hyp含量、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ水平、TβR-Ⅰ和TβR-Ⅱ的蛋白表达水平以及α-SMA、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ的mRNA表达水平均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,溶剂组细胞的上述指标均无明显差异(P>0.05);白屈菜碱低浓度组细胞增殖率无明显差异(P>0.05);阳性对照组和白屈菜碱高浓度组细胞的上述指标均显著降低(P<0.05);白屈菜碱中浓度组细胞除Hyp和Col-Ⅲ水平降低不显著外,上述其余指标均显著降低(P<0.05)。与白屈菜碱中浓度组比较,白屈菜碱高浓度组细胞增殖率、Col-Ⅰ水平、TβR-Ⅰ和TβR-Ⅱ的蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:白屈菜碱能抑制活化后CFSC-8B细胞的增殖、胶原合成以及TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ蛋白和mRNA的表达。